具有免疫调节作用的饲料添加剂、饲料及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了具有免疫调节作用的饲料添加剂、饲料及其制备方法和应用，饲料添加剂由桑黄胞外多糖和桑黄菌丝体组成，将饲料添加剂按重量比为0.1-2%添加入饲料中，饲喂动物后能够提高动物的体重，降低肉料比，并且能够促进免疫功能，提高免疫指标，是一种能够替代抗生素的绿色饲料添加剂，可广泛用于养殖业。
【专利说明】具有免疫调节作用的饲料添加剂、饲料及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明属于动物饲料领域，具体涉及具有免疫调节作用的饲料添加剂和含有该饲料添加剂的饲料，还涉及饲料添加剂的制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]在动物养殖领域，养殖方式从散养向集中化养殖方式转变，抗菌、抗病毒、提高动物机体免疫功能一直是困扰养殖行业的主要问题，但抗菌素滥用、药物残留问题已引起了我国及世界各国政府的高度重视，在发达国家已禁用抗生素作为动物饲料添加剂，寻求开发能够替代抗生素无毒、无残留、无污染的新型绿色饲料添加剂已成为生物饲料开发的热点。
[0003]桑黄(Phellinus igniarius)又称火木层孔菌,是一种珍稀的食药用真菌,桑黄主要活性成分为桑黄多糖、黄酮类、萜类等，同时含有丰富的蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸以及动物机体不可缺少的钙、铁、锌等8种矿物质元素等。其中桑黄多糖能够提高人体的免疫力，具有显著的抗肿瘤、抗病毒及抗氧化等活性功能，但未见桑黄或桑黄多糖作为饲料添加齐U的报道。
【发明内容】
[0004]有鉴于此，本发明的目的之一在于提供具有免疫调节作用的饲料添加剂；本发明的目的之二在于提供含有饲料添加剂的饲料；本发明的目的之三在于提供饲料添加剂的制备方法；本发明的目的在于提供饲料添加剂的应用。
[0005]为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案:
[0006]1.具有免疫调节作用的饲料添加剂，所述饲料添加剂由桑黄胞外多糖和桑黄菌丝体组成。
[0007]本发明中桑黄胞外多糖和桑黄菌丝体优选为液体深层发酵生产的桑黄菌丝体及其桑黄胞外多糖，也可以采用人工栽培方式，但是由于桑黄菌生理生态的复杂性、特殊性，桑黄子实体数量稀少，采用人工栽培的方式具有生产周期长、产量低等缺点，而采用液体深层发酵能够克服上述问题。
[0008]2.含有所述的饲料添加剂的饲料，所述饲料中饲料添加剂的重量百分比为
0.1-2%。
[0009]优选的，所述饲料中饲料添加剂的重量百分比为0.5-1%。
[0010]3.所述饲料添加剂的制备方法，将桑黄菌发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，发酵液用乙醇沉淀，得桑黄胞外多糖，然后将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，干燥，粉碎，得饲料添加剂。
[0011]优选的，桑黄菌发酵产物由以下方法制备:取对数生长期的桑黄菌按体积比为5?15%接种至含培养基的发酵罐中，在温度为24?28 °C，通气比1:0.8-1:1.8，转速为300-800rpm条件下发酵90-144小时。
[0012]优选的，桑黄菌发酵产物由以下方法制备:取对数生长期的桑黄菌按体积比为10%接种至含培养基的发酵罐中，在温度为25°C，通气比1:1.2，转速为300rpm条件下发酵96小时。
[0013]更优选的，所述培养基中各组分的质量分数如下:葡萄糖4-10%，酵母粉
0.1-0.6%，黄豆粉 0.5-3%，菜籽油 0.1-2%, MgSO40.05-0.5%, KH2PO40.05-0.5%。
[0014]最优选的，所述培养基中各组分的质量分数如下:葡萄糖6%，酵母粉0.3%，黄豆粉2%，菜籽油 0.5%, MgSO40.1%，KH2PO40.1%。
[0015]本发明中使用的菌种为桑黄菌(Phellinus igniarius CGMCC 5.00095),购于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)。也可以使用中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC),美国典型培养物保藏中心(ATCC)等机构保藏分离的Phellinus属菌种,或自然分离的Phellinus属菌种均可实现发明目的。
[0016]4.所述饲料添加剂在提高动物产量中的应用。
[0017]优选的，所述动物为家禽或家畜。
[0018]本发明的有益效果在于:本发明公开了具有免疫调节作用的饲料添加剂，克服了现行生物饲料的不足，将具有免疫调节作用的桑黄多糖及其含高蛋白的桑黄菌丝体复合利用，开发具有调节免疫、促生长、抗病等综合作用的饲料添加剂；本发明将饲料添加剂进行畜禽(包括肉鸡、蛋鸡、仔猪、猪、鸭、肉牛等)饲喂实验表明，适量使用本发明可以促进畜禽动物生长，提高机体免疫力和抗病能力，降低料肉比，可作为一种饲料添加剂取代抗生素在畜禽养殖中的使用。
【具体实施方式】
[0019]下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
[0020]本发明具体实施例使用的菌种为桑黄菌(Phellinus igniarius CGMCC
5.00095)，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)。
[0021]实施例1
[0022]桑黄菌发酵的方法，具体步骤如下:取生长至对数生长期的桑黄菌按体积比为10%接种至含发酵培养基的发酵罐中，在温度为25°C，通气比1:1.2，转速为300rpm条件下发酵96小时。本实施例中发酵罐体积为2m3，发酵培养基的各组分的质量分数如下:葡萄糖6%，酵母粉 0.3%，黄豆粉 2%，菜籽油 0.5%, MgSO40.1%，KH2PO40.1%，pH 为 6.5。
[0023]将发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，向发酵液中加入相当于发酵液2倍体积的乙醇，在4°C条件下沉淀24小时，然后再4000rpm条件下离心20分钟，得桑黄胞外多糖；将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，在70°C条件下干燥，粉碎，得桑黄复合菌丝粉。本实施例桑黄胞外多糖的产量达到2.22g/L ;桑黄菌丝体产量达到40g/L。
[0024]将上述粉碎后的复合菌丝粉与普通鸡饲料混合，添加比例为每IOOkg饲料添加质量分数为0.5%的复合菌丝粉，得到鸡混合饲料。
[0025]应用:
[0026]选取I日龄、平均体重48.56±0.93g的AA肉公鸡，按单因素试验设计2个处理，每个处理6个重复，每个重复16羽鸡，组间肉公鸡初始体重差异不显著(P>0.05)，实验组饲喂鸡混合饲料4.03kg，对照组饲喂相同量的普通鸡饲料，饲养试验时间42d。饲喂结束后试验组鸡存活率达到95.32%，与对照组持平，但实验组42日龄肉鸡体重比对照组增加4.94% ；料肉比为2.15，试验组比对照组低(2.20)。测定42日龄实验组和对照组鸡的免疫指标，结果显示试验组胸腺指数、脾脏指数及法氏囊指数与比对照组相比分别提高了 32.6%,8.4%和 19.8%ο
[0027]实施例2
[0028]桑黄菌发酵的方法，具体步骤如下:取生长至对数生长期的桑黄菌按体积比为10%接种至含发酵培养基的发酵罐中，在温度为25°C，通气比1:1.2，转速控制为300rpm条件下发酵90小时。本实施例中发酵罐体积为2m3，发酵培养基各组分的质量分数如下:葡萄糖 8%,酵母粉 0.3%,黄豆粉 2%,菜籽油 0.5%, MgSO40.1%，KH2PO40.1%，pH 为 6.5。
[0029]将发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，向发酵液中加入相当于发酵液3倍体积的乙醇，在4°C条件下沉淀24小时，然后在4000rpm条件下离心20分钟，得桑黄胞外多糖；将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，在70°C条件下干燥，粉碎，得桑黄复合菌丝粉。本实施例桑黄胞外多糖的产量达到2.78g/L ;桑黄菌丝体产量达到54.5g/L。
[0030]将上述粉碎后的复合菌丝粉与鸡普通饲料混合，添加比例为每IOOkg饲料添加质量分数为0.25%的复合菌丝粉，得到鸡混合饲料。
[0031]应用:
[0032]选取I日龄、平均体重48.56±0.93g的AA肉公鸡，按单因素试验设计2个处理，每个处理6个重复，每个重复16羽鸡，组间肉公鸡初始体重差异不显著(P>0.05)，实验组饲喂鸡混合饲料4.03kg，对照组饲喂相同量的普通鸡饲料，饲养试验时间42d。饲喂结束后试验组鸡存活率达到96.88%，与对照组持平，但实验组42日龄肉鸡体重比对照组增加了 3% ；料肉比为2.14，比对照组低(2.20)。测定42日龄实验组和对照组鸡的免疫指标，结果显示试验组胸腺指数、脾脏指数及法氏囊指数与比对照组相比分别提高了 9.2%，6%和18.9%。
[0033]实施例3
[0034]桑黄菌发酵的方法，具体步骤如下:取生长至对数生长期的桑黄菌按体积比为15%接种至含发酵培养基的发酵罐中，在温度为24°C，通气比1:0.8，转速控制为500rpm条件下发酵96小时。本实施例中发酵罐体积为300L，发酵培养基各组分的质量分数如下:葡萄糖 4%,酵母粉 0.1%，黄豆粉 0.5%,菜籽油 0.1%，MgSO40.5%, KH2PO40.5%, pH 为 6.5。
[0035]将发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，向发酵液中加入相当于发酵液2倍体积的乙醇，在4°C条件下沉淀24小时，然后在4000rpm条件下离心20分钟，得桑黄胞外多糖；将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，在70°C条件下干燥，粉碎，得桑黄复合菌丝粉。本实施例桑黄胞外多糖的产量达到2.46g/L ;桑黄菌丝体产量达到48.9g/L。
[0036]将上述粉碎后的复合菌丝粉与鸡普通饲料混合，添加比例为每IOOkg饲料添加质量分数为1%的复合菌丝粉，得到鸡混合饲料。
[0037]应用:
[0038]选取I日龄、平均体重48.56±0.93g的AA肉公鸡，按单因素试验设计2个处理，每个处理6个重复，每个重复16羽鸡，组间肉公鸡初始体重差异不显著(P>0.05)，实验组饲喂鸡混合饲料4.03kg,对照组饲喂相同量的普通鸡饲料，饲养试验时间42d。饲喂结束后试验组鸡存活率达到95.32%，与对照组持平，但实验组42日龄肉鸡体重比对照组增加了
4.45% ;料肉比为2.18，比对照组低(2.20)。测定42日龄实验组和对照组鸡的免疫指标，结果显示试验组胸腺指数、脾脏指数及法氏囊指数与比对照组相比分别提高了 25.5%,0.6%和 19.8%ο
[0039]实施例4
[0040]桑黄菌发酵的方法，具体步骤如下:取生长至对数生长期的桑黄菌按体积比为5%接种至含发酵培养基的发酵罐中，在温度为28°C，通气比1: 1.8，转速控制为300rpm条件下发酵120小时。本实施例中发酵罐体积为300L，发酵培养基各组分的质量分数如下:葡萄糖 10%，酵母粉 0.3%，黄豆粉 1.5%，菜籽油 1%，MgSO40.1%，KH2PO40.1%，pH 为 6.5。
[0041]将发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，向发酵液中加入相当于发酵液4倍体积的乙醇，在4°C条件下沉淀24小时，然后再4000rpm条件下离心20分钟，得桑黄胞外多糖；将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，在70°C条件下干燥，粉碎，得桑黄复合菌丝粉。本实施例桑黄胞外多糖的产量达到2.62g/L ;桑黄菌丝体产量达到56.7g/L。
[0042]将上述粉碎后的复合菌丝粉与普通猪饲料混合，添加比例为每IOOkg饲料添加质量分数为0.5%的复合菌丝粉，得到猪混合饲料。
[0043]应用:
[0044]选取20日龄断奶仔猪，平均重量10kg，按单因素试验设计2个处理，每组30头，组间仔猪初始体重差异不显著(P>0.05)，实验组饲喂猪混合饲料562kg，对照组饲喂相同量的普通猪饲料，饲养试验时间25d，饲喂结束后试验组仔猪拉稀得到有效控制，腹泻率明显低于对照组，降低了 45%，体重比对照组增加了 6.56% ;料重比为1.44，实验组比对照组低
1.70。
[0045]实施例5
[0046]桑黄菌发酵的方法，具体步骤如下:取生长至对数生长期的桑黄菌按体积比为10%接种至含发酵培养基的发酵罐中，在温度为25°C，通气比1:1.2，转速控制为800rpm条件下发酵144小时。本实施例中发酵罐体积为50L，发酵培养基各组分的质量分数如下:葡萄糖 8%，酵母粉 0.3%，黄豆粉 1.5%，菜籽油 1%，MgSO40.1%，KH2PO40.1%，pH 为 6.5。
[0047]将发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，向发酵液中加入相当于发酵液2倍体积的乙醇沉淀，4°C条件下沉淀24小时，4000rpm离心20分钟，得桑黄胞外多糖；将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，在60°C条件下干燥，粉碎，得桑黄复合菌丝粉。本实施例桑黄胞外多糖的产量达到2.84g/L ;桑黄菌丝体产量达到60g/L。
[0048]将上述粉碎后的复合菌丝粉与普通猪饲料混合，添加比例为每IOOkg饲料添加质量分数为0.3%的复合菌丝粉，得到猪混合饲料。
[0049]应用:
[0050]选取中猪，平均重量35kg，按单因素试验设计2个处理，每组20头，组间中猪初始体重差异不显著(P>0.05)，实验组饲喂猪混合饲料340kg，对照组饲喂相同量的普通猪饲料，饲养试验时间25d，饲喂结束后实验组采食量比对照组增加了 5%，体重比对照组增加了7% ;料重比为2.5，低于对照组2.3。
[0051]实施例6
[0052]桑黄菌发酵的方法，具体步骤如下:取生长至对数生长期的桑黄菌按体积比为10%接种至含发酵培养基的发酵罐中，在温度为25°C，通气比1:1.2，转速控制为300rpm条件下发酵120小时。本实施例中发酵罐体积为50L，发酵培养基各组分的质量分数如下:葡萄糖 8%，酵母粉 0.3%，黄豆粉 1.5%，菜籽油 1%，MgSO40.1%，KH2PO40.1%，pH 为 6.5。
[0053]将发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，向发酵液中加入相当于发酵液2倍体积的乙醇，在4°C条件下沉淀24小时，然后在4000rpm条件下离心20分钟，得桑黄胞外多糖；将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，在60°C条件下干燥，粉碎，得桑黄复合菌丝粉。本实施例桑黄胞外多糖的产量达到2.56g/L ;桑黄菌丝体产量达到58.8g/L。
[0054]将上述粉碎后的复合菌丝粉与肉牛普通饲料混合，添加比例为每IOOkg饲料添加质量分数为1%的复合菌丝粉，得到肉牛混合饲料。
[0055]应用:
[0056]选取肉牛，平均重量380kg，按单因素试验设计2个处理，每组20头，组间肉牛初始体重差异不显著(P>0.05)，实验组饲喂肉牛混合饲料1.2吨，对照组饲喂相同量的普通肉牛饲料，饲养试验时间60d，饲喂结束后实验组体重比对照组增加了 8.2% ;料重比为2.5，干物质词料报酬提闻了 19.24%ο
[0057]实施例7
[0058]桑黄菌发酵的方法，具体步骤如下:取生长至对数生长期的桑黄菌按体积比为10%接种至含发酵培养基的发酵罐中，在温度为25°C，通气比1:1.2，转速为300rpm条件下发酵96小时。本实施例中发酵罐体积为2m3，发酵培养基的各组分的质量分数如下:葡萄糖6%，酵母粉 0.3%，黄豆粉 2%，菜籽油 0.5%, MgSO40.1%，KH2PO40.1%，pH 为 6.5。
[0059]将发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，向发酵液中加入相当于发酵液2倍体积的乙醇，在4°C条件下沉淀24小时，然后在4000rpm条件下离心20分钟，得桑黄胞外多糖；将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，在70°C条件下干燥，粉碎，得桑黄复合菌丝粉。本实施例桑黄胞外多糖的产量达到2.22g/L ;桑黄菌丝体产量达到40g/L。
[0060]将上述粉碎后的复合菌丝粉与普通鸡饲料混合，添加比例为每IOOkg饲料添加质量分数为2.5%的复合菌丝粉，得到鸡混合饲料。
[0061]应用:
[0062]选取I日龄、平均体重48.56±0.93g的AA肉公鸡，按单因素试验设计2个处理，每个处理6个重复，每个重复16羽鸡，组间肉公鸡初始体重差异不显著(P>0.05)，实验组饲喂鸡混合饲料4.03kg,对照组饲喂相同量的普通鸡饲料，饲养试验时间42d。饲喂结束后试验组鸡存活率达到95.24%，与对照组持平，但实验组42日龄肉鸡体重比对照组降低了
5.65% ;料肉比为2.25，试验组比对照组高(2.20)。测定42日龄实验组和对照组鸡的免疫指标，结果显示试验组胸腺指数、脾脏指数及法氏囊指数与比对照组相比分别提高了 9.2%，18.7% 和 3.6%ο
[0063]最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。
【权利要求】
1.具有免疫调节作用的饲料添加剂，其特征在于:所述饲料添加剂由桑黄胞外多糖和桑黄菌丝体组成。
2.含有权利要求1所述的饲料添加剂的饲料，其特征在于:所述饲料中饲料添加剂的重量百分比为0.1-2%。
3.根据权利要求2所述的饲料，其特征在于:所述饲料中饲料添加剂的重量百分比为0.5-1%。
4.权利要求1所述饲料添加剂的制备方法，其特征在于:将桑黄菌发酵产物进行固液分离，分别得发酵液和桑黄菌丝体，发酵液用乙醇沉淀，得桑黄胞外多糖，然后将桑黄胞外多糖与桑黄菌丝体混合，干燥，粉碎，得饲料添加剂。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述桑黄菌发酵产物由以下方法制备:取对数生长期的桑黄菌按体积比为5?15%接种至含培养基的发酵罐中，在温度为24?28°C，通气比1:0.8-1:1.8，转速为300-800rpm条件下发酵90-144小时。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于:所述桑黄菌发酵产物由以下方法制备:取对数生长期的桑黄菌按体积比为10%接种至含培养基的发酵罐中，在温度为25°C，通气比1:1.2，转速为300rpm条件下发酵96小时。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于:所述培养基中各组分的质量分数如下:葡萄糖4-10%，酵母粉0.1-0.6%，黄豆粉0.5-3%，菜籽油0.1-2%, MgSO40.05-0.5%，KH2PO40.05-0.5%。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于:所述培养基中各组分的质量分数如下:葡萄糖6%，酵母粉0.3%，黄豆粉2%，菜籽油0.5%，MgSO40.1%，KH2PO40.1%。
9.权利要求1所述饲料添加剂在提高动物产量中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于:所述动物为家禽或家畜。
【文档编号】A23K1/18GK103750029SQ201310751675
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2013年12月31日 优先权日:2013年12月31日
【发明者】邹祥, 陈力, 王永康, 涂光伟 申请人:西南大学