一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法
【专利摘要】一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法，该方法以紫山药嫩茎尖1.0cm为外植体，在对外植体用75％酒精和0.1％氯化汞溶液进行消毒灭菌后，接种于初始培养基MS0，待茎尖成活后，取再生芽茎尖（0.5-1.0mm）处理，根据不同时期需要采用不同的培养基配方分别进行茎尖诱导培养、茎尖继代增殖培养和生根培养获得紫山药瓶苗；待苗高2cm左右时再将瓶苗移栽营养钵基质炼苗，培育50－60天苗生长10cm即为紫山药种苗。所述茎尖诱导增殖培养基为MS+6BA0.5mg·L-1NAA0.1mg·L-1，生根培养基为1/2MS＋NAA0.2mg·L-1＋Ac0.2g·L-1；以上所述培养基含45g·L-1食用糖，琼脂6g·L-1，pH5.7。本发明催芽方式简便，萌芽速度快；本发明脱毒方试简捷，脱毒率高；品种优纯；本发明方法可实现紫山药组培苗工厂化生产和品种改良的推广。
【专利说明】一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法
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【技术领域】 本发明涉及一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法，属植物无性繁殖【技术领域】。
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【背景技术】 紫山药（Purple yam)别名薯截或脚板薯，长芋。为薯截科(iT/oscoreaceae)薯截属 (ZVoscorm)的一个地方品种，为多年生蔓性植物，块根呈块状或圆柱状表皮和肉质呈紫红 色而得名。紫山药因肥大的块根肉质细腻滑爽，口感极佳，富含粘性蛋白，紫色花青素， 维生素和胆碱等，并富含薯蓣皂（天然的DHEA)，内含各种荷尔蒙基本物质，常吃有促进内 分泌荷尔蒙的合成作用等多种独特的食疗价值也称〃紫人参"，据本草纲目药书的记载， 经常食用紫山药，不仅可以增加人体的抵抗力，降低血压、血糖、抗衰益寿等功效，，而且还 有固肾、润肺益精、软化血管等药用滋补功能。故又被称做〃蔬菜之王〃之美誉。
[0003] 紫山药是无性繁殖的植物。由于长期的块茎繁殖，导致种性退化，品质下降，产量 降低。随着农药化肥的大量施用，病毒病不但得不到控制，而且更加严重至蔓延，危及到整 个产业以致某些优良品种濒临灭绝。在山药生长初期，病毒病症状并不明显。在生长的中 后期，症状逐渐明显，发病初期叶上出现明显的褪绿斑，随后绿色花斑逐渐隆起，叶片斑 驳花叶、凸凹卷曲畸形、黄化或坏死，感病叶片明显小于健壮叶片，严重时整株矮化，生长 缓慢，地下块茎明显小于健壮的植株，并且畸形，产量下降。不但满足不了市场的供求， 还严重影响和制约了地方产业的发展和种植极积性。据资料表明并且证实了病毒病是造成 山药产量下降，品质退化的重要因素。由于病毒在寄主植物体内随维管系统转移，而在细胞 与细胞之间，病毒可通过胞间连丝扩散转移，因此，一旦感染植物病毒往往蔓延全株，对寄 主植物可造成灭性危害。导致大幅度减产，甚至全株死亡，病毒侵入植物体内，改变了细胞 的代谢途径，使正常的生理机能受到于扰和破坏，造成种性退化，抗性降低，生长受阻或出 现变色、坏死、畸形，产量降低，品种变劣，甚至完全丧失商品价值。
[0004] 为保证该物种遗传物质的稳定性，只有通过植物组织培养技术，采用植物营养体 进行快速繁殖，才可保持原品种全部的遗传性，实现该品种种质的一致性。据资料显示通过 人工脱毒无性繁殖的惠楼山药要比一般山药增产30%以上。因此选育良种，改良品质，增加 产量已是当前生产上必需亟待解决的主要问题。
[0005] 目前尚无有效的药物可防治愈病毒病的发生或蔓延，而采用现代生物技术选取优 良无病株种苗进行离体脱毒培养，繁殖无毒或少毒苗，以组培苗更替传统的营养繁殖才能 从根本上解决病毒病的问题。
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【发明内容】
本发明的目的是，根据紫山药块茎繁殖存在的问题，本发明公开一种地方紫色山药 (薯）的茎尖组织培养快繁种苗的方法。
[0007] 本发明的技术方案是，本发明方法以紫山药嫩茎尖（lcm)为外植体，在对外植体 用75%酒精和0. 1 %氯化汞溶液进行消毒灭菌后，接种于初始培养基MS0,待茎尖成活后， 取再生芽茎尖（0. 5 - 1. 0mm)接种，根据不同时期需要采用不同的培养基配方分别进行茎 尖诱导培养、茎尖继代增殖培养和生根培养获得紫山药瓶苗。其中茎尖诱导增殖培养基
【权利要求】
1. 一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法，其特征在于，所述方法以紫山药嫩顶芽为 外植体，在对外植体用75%酒精和0. 1%氯化汞溶液进行消毒灭菌后，接种于初始培养基 MS0,待茎尖成活后，取再生芽茎尖接种，根据不同时期需要采用不同的培养基配方分别进 行茎尖诱导培养、茎尖继代增殖培养和生根培养获得紫山药瓶苗；待苗高2cm左右时再将 瓶苗移栽营养钵基质炼苗，培育50 - 60天苗生长10cm以上即为紫山药种苗。
2. 根据权利要求1所述的一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法，其特征在于，所 述茎尖诱导增殖培养基为MS+6BA0. 5mg · L-1 ΝΑΑ0. 1 mg · L-1，生根培养基为1/2MS + NAAO. 2mg · L-1 + AcO. 2g · L-1 ;以上所述培养基含 45g · L-1 食用糖，琼脂 6g · L-1，PH5. 7。
3. 根据权利要求1所述的一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法，其特征在于，所述营 养钵基质炼苗，基质为黄土和珍珠岩，或泥碳和珍珠岩；黄土与珍珠岩石的体积比为2 :3 ; 泥碳与珍珠岩的体积比为3 :2 ;炼苗50 - 60天，苗高10cm以上即为紫山药种苗。
4. 根据权利要求1所述的一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法，其特征在于，所述紫 山药初始培养嫩顶芽长度为lcm ;所述再生芽茎尖培养0. 5 - 1. 0mm。
【文档编号】A01H4/00GK104115753SQ201410389906
【公开日】2014年10月29日 申请日期:2014年8月11日 优先权日:2014年8月11日
【发明者】王碧琴, 余发新, 刘腾云, 肖亮 申请人:江西省科学院生物资源研究所