一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法
【专利摘要】本发明公开的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，是以杉木优良无性系当年生嫩枝为外植体，通过灭菌消毒组培获取繁殖芽，将繁殖芽接种于包括1/2MS，6-BA1.0mg/L和IBA0.5mg/L的增殖培养基内诱导丛生芽发生，选择繁殖芽基部萌发、生长健壮的继代芽扦插于常用的生根培养基上，炼苗，移栽，杉木苗高15～30cm时出圃造林。使用本方法，杉木继代芽增殖系数高，达4～6，繁殖速度快、育苗量大、可以在短期内批量生产遗传稳定性高、组培苗正冠率100%，生根率高达96%以上的组培继代芽，能适应我国杉木储备基地建设发展对良种种苗的需要，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。
【专利说明】一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物无性快繁【技术领域】，尤其是涉及一种杉木正冠组培苗继代芽培育 方法。
【背景技术】
[0002] 杉木（CunninghamiaLanceolata)属杉科（Taxodiaceae)，杉木属 (Cunninghamia)。是我国特有的速生商品材树种，生长快,材质好。木材纹理通直,结构均 匀，不翘不裂。材质轻韧，强度适中，质量系数高。具香味，材中含有"杉脑"，能抗虫耐腐， 加工容易。广泛用于建筑、家具、器具、造船等各方面。
[0003] 我国既是一个木材生产大国，又是一个木材消费大国。天然林保护工程实施以后， 木材供需矛盾进一步加剧，木材供需缺口逐年增加。预计到2015年，我国生产建设用木材 需求量约为4.8亿m3,缺口将达1.9亿m 3。如果按照近10年我国木材消费平均年增长率 3. 71 %计算，到2020年我国木材消费总量将达到6. 78亿m3,供需矛盾有增无减。
[0004] 无性系林业生产力高，在国内外许多研究和造林实践广泛证实。1990年开始，广西 林科院和区林业技术推广总站等单位，分别在融安县西山林场等十多单位推广杉木优良无 性系造林，以杉木良种（融水白云康杉）实生苗作对照。1997年测定分析，在初选参试的 927个无性系中有230个无性系表现较为优良，其木材总平均比对照增益45. 1 %;最优的无 性系89个，材积总平均比对照增益53. 5% ;较优的无性系141个，材积总平均比对照增益 39. 9%。而杉木优良无性系比杉木家系的增益还高12. 5%?37. 5%。筛选出的优良无性 系增产效果显著，应用前景广阔。南京林业大学、福建省林业科学研究院和广西林科院已成 功地将杉木优良无性系以组培工厂化育苗方式扩繁，推进了杉木良种的应用进程，因此，杉 木良种繁育，特别是组培快繁前景看好。
[0005] 中国专利201110195928. 6的一种杉木组织培养方法。本发明所述培养方法采用 开放式组织培养，采用的抑制剂菌杀果、代森锰锌和次氯酸钠中的一种或几种。该方法，在 不影响组培效果的同时，能够将污染率降低到可接受的范围，在抑菌剂的作用下，使杉木组 织培养脱离严格无菌的操作环境，在自然、开放的有菌环境中进行植物的组织培养，从根本 上简化组培环节，降低组培成本。
[0006] 中国专利200810070456. X-种杉木组织培养生根方法。本发明提供了一种杉木 组织培养生根方法，切去杉木增殖继代小苗，接种于杉木生根培养基进行组织培养生根，杉 木生根培养基由改良MS培养基、ABT1#0. 4?0. 8mg/L、IBA0. 1?0. 5mg/L和根太阳稀释液 2?6ml/L组成。采用上述杉木生根培养基后，杉木的生根时间缩短至16?22天，经22天 培养后，杉木的生根率达到96%，苗木生长速度快，使得育苗成本降低，实现杉木产业化生 产。
[0007] 杉木具有一定的遗传保守性，主干上的不定芽有明显的形态极性（这就是顶端优 势），长出的枝条能形成直立的主干。一旦断顶截干后，顶芽与侧芽之间失去了平衡，相应地 受活跃的顶端分生组织抑制的侧芽就大量的萌发。自然状态下，断稍后萌芽位置效应效果 见表1。
[0008] 表1杉木断稍后萌芽情况表
[0009]
【权利要求】
1. 一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，其特征在于：包括获取外植体、正冠组培苗 继代芽培养、生根苗培养、生根苗移栽和出圃工序，通过获取消毒灭菌后的外植体，依次接 种于初始培养基和增殖培养基后获得正冠组培苗，对正冠组培苗进行不定根诱导生根后移 栽，出圃，具体操作步骤如下： (1) 获取外植体：选择优良的无性系嫁接杉木幼树当年生的嫩枝为外植体；将消毒灭 菌后的外植体接种到初始培养基内，获取繁殖芽； (2) 继代芽增殖培养：将长1. 5?3cm的繁殖芽接种到增殖培养基内，诱导继代芽；待 繁殖芽基部萌发出2?3个长0. 3?0. 5cm的继代芽时进行转接；每次转接，将繁殖芽逐渐 剪短至0. 3?0. 5cm ;取剪短后的繁殖芽基部萌发扦插生根用的继代芽，获得正冠组培苗； (3) 生根苗培养：在正冠组培苗中选择繁殖芽基部萌发、生长健壮的继代芽扦插于常用 的生根培养基上，在温度25?30°C，2000?7000Lx光照条件下进行不定根诱导，培养10? 15d后开始生根，25?30d根长0. 4?0. 6cm时，获得生根苗，将生根苗转到炼苗室炼苗； (4) 生根苗移栽：炼苗20?30d，待根系由白色转变成灰白色时，将生根苗进行移栽， 移栽时先将生根苗置于清水中漂洗，洗净根部的培养基，晾干根系的表面水分，将生根苗栽 入装有红心土与椰糠的混合基质容器中培养； (5) 出圃：在容器中的生根苗进行培养8?10月，杉木苗高15?30cm时出圃造林。
2. 根据权利要求1所述的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，其特征在于：步骤（1) 所述的外植体消毒灭菌的方法为：剪除外植体上的叶片，在洗洁精溶液中用毛刷轻轻刷洗， 放入质量浓度为〇. 1%的新吉尔灭中浸泡40?50min，再用纯净水冲洗3?5遍，将外植体剪 切成1?2cm的长茎段；在超净工作台用体积浓度75%的乙醇对剪切后的外植体消毒10s， 然后将外植体置于10?30mg/L的抗坏血酸中浸泡5?12min ;最后用无菌水冲洗3?4 遍。
3. 根据权利要求2所述的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，其特征在于：步骤（1) 中对外植体进行消毒灭菌，当外植体属于幼嫩茎尖处时，置于l〇mg/L的抗坏血酸中浸泡 5min ;当外植体属于半木质化莖段时，置于30mg/L的抗坏血酸中浸泡8min ;当外植体属于 木质化莖段时，置于30mg/L的抗坏血酸中浸泡12min。
4. 根据权利要求1所述的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，其特征在于：步骤（1) 所述的初始培养基是以2/3MS为基本培养基，还包括6-BA1. 0mg/L、IBA0. 5mg/L和ΖΤ0. 2mg/ L ;其中2/3MS基本培养基中的Ca(N03)2含量为150mg/L，Na2S0 4含量为50mg/L。
5. 根据权利要求1所述的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，其特征在于：步骤 (2)中所述的增殖培养基是以1/2MS为基本培养基，还包括6-BAO. 8mg/L、IBAO. 4mg/L和 ΖΤ0. lmg/L ;其中1/2MS基本培养基中的Ca(N03)2含量为150mg/L。
6. 根据权利要求1或5任一所述的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，所述的增 殖培养基用500ml的三角瓶分装，每瓶70ml，用棉球封口，再用牛皮纸包扎棉球和瓶口，在 120°C和1. lkg. cm2条件下，用高压蒸汽灭菌锅灭菌15min。
7. 根据权利要求1所述的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，其特征在于：步骤（2) 中所述的继代增殖培养控制光照2000?7000Lx，温度25?30°C。
8. 根据权利要求1所述的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，其特征在于：步骤（4) 中所述的混合基质是按红心土与椰糠的体积比为3:1的比例混合。
【文档编号】A01H4/00GK104145824SQ201410439694
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2014年9月1日 优先权日:2014年9月1日
【发明者】吴幼媚, 蔡玲, 戴春香, 黄金使, 韦颖文, 王以红 申请人:广西壮族自治区林业科学研究院