一种灌木柳花粉保存方法
【专利摘要】本发明公开了一种灌木柳花粉保存的条件，包括以下步骤：（1）干燥；（2）低温保存。本发明所述的灌木柳花粉保存方法能有效阻止花粉衰老，降低花粉呼吸强度和酶活性，保证花粉生活力，克服灌木柳花粉因雌雄异株花期不遇而造成的杂交困难，灌木柳花粉在低温中保存至180d时，生活力仍可高达49%。本发明所述的灌木柳花粉保存方法简单易操作，成本低，能有效保证灌木柳花粉进行杂交的生活力，在灌木柳繁殖生产上具有重要的实践与推广意义。
【专利说明】一种灌木柳花粉保存方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种植物花粉保存方法，具体是涉及一种灌木花粉低温保存的方法。【背景技术】
[0002] 柳属（SalixL.)是杨柳科最大的属，约550种，我国柳属植物255种，约占全世界 总数的46%，是全世界柳属植物最多、最丰富的地区，在全国各省、区广泛分布。而柳属绝大 部分为灌木柳，许多种类与人们生产生活戚戚相关。随着全球经济的发展，人们对灌木柳作 用的逐步认识，特别是2008年多哈会议后，热爱自然、崇尚环保，倡导低碳经济已成为全世 界各国政府和人民的共识，对灌木柳的开发利用尤为迫切和重要。
[0003] 花粉作为灌木柳种质的形式之一，包含了柳树的所有基因类型，具有丰富的遗传 多样性，是柳树种质保存以及杂交育种的重要材料。但柳树雌雄异株，花期不遇，且柳树花 粉自然条件下寿命短，这给柳树种质研究及其杂交育种工作带来极大的不便，同时也不利 于柳树的遗传改良研究。因此，有必要对柳树花粉保存开展相关研究。虽然柳树花粉采集 和贮藏在欧洲柳树繁殖中已有应用，但对其提取和贮藏得方法没有具体描述。花粉保存研 究的目的在于在不破坏种质资源的前提下保持花粉生活力，延长其受精能力，并以此来克 服杂交育种中的时间和空间的限制，提高育种效率，为地区间乃至国际间的种质交换提供 方便；同时可以避免病虫害的传播。例如柳树雌雄异株，且雌雄开花时间不相同，自然育种 造成花期不遇，为了克服这一难题，其花粉的保存便具有现实的必要性。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于确定灌木柳花粉最佳干燥方法、干燥时间和低温保存温度。
[0005] 本发明是通过以下技术方案来实现的：
[0006] 步骤（1)将灌木柳花粉采用自然风干、灯光干燥、干燥剂干燥三种方式中的任意 一种或任意两种或三种方式干燥。
[0007] 步骤⑵灌木柳花粉经步骤⑴处理后，置于-70?4摄氏度中保存。
[0008] 进一步，步骤（1)收集灌木柳新鲜花粉，自然风干为室内自然晾干，灯光干燥具体 操作为将花粉置于30W白炽灯下5?8cm处照射，干燥剂干燥是将500g变色硅胶放于干燥 器中，离变色硅胶2cm处放一隔板，再将花粉置于隔板上。
[0009] 步骤⑴所述自然风干2?24h，灯光干燥0. 5?6h，干燥剂干燥1?16h;
[0010] 步骤（2)中，所述将经干燥处理的灌木柳花粉混匀，均匀分装在5mL离心管中，先 于4摄氏度冷藏Ih后，再转入-25摄氏度冷冻2h后，置于-70摄氏度中保存。
[0011] 本发明的有益效果是：
[0012] 1、采用本发明所述的灌木柳花粉保存方法能有效阻止花粉衰老，降低花粉呼吸强 度和酶活性，保证花粉生活力，克服灌木柳花粉因雌雄异株花期不遇而造成的杂交困难，灌 木柳花粉在低温中保存至180d时，生活力仍可高达49%。
[0013] 2、采用本发明所述的灌木柳花粉保存方法与超低温保存相比，操作简单，成本低， 且低温保存也能降低超低温产生的遗传变异。
[0014] 3、采用本发明所述的灌木柳花粉保存方法，干燥方法为快速干燥法，而干燥时间 短，也保证了花粉不至于完全失活，有利于保存。且干燥投入成本也较低。综上所述：本发 明所述的灌木柳花粉保存方法简单易操作，成本低，能有效保证灌木柳花粉进行杂交的生 活力，在灌木柳繁殖生产上具有重要的实践与推广意义。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1为保存温度与灌木柳花粉生活力；
[0016] 图2为预冻处理对灌木柳花粉保存的影响。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合附图和具体的实施例对本发明作进一步的详细说明。
[0018] 实施例：灌木柳花粉低温保存方法，包括如下步骤：
[0019] (1)选择干燥方式及干燥时间：收集新鲜灌木柳花粉，混匀，分成若干份，分别用 三种干燥方式干燥。
[0020] 表1柳树花粉的干燥方法及干燥时间
[0021]
【权利要求】
1. 一种灌木柳花粉低温保存方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 将灌木柳花粉分别采用自然风干、灯光干燥、干燥剂干燥三种方式干燥； (2) 灌木柳花粉经步骤（1)处理后，置于-70?4摄氏度中保存。
2. 根据权利要求1所述灌木柳花粉低温保存方法，其特征在于：所述步骤（1)筛选出最 佳干燥方式。
3. 根据权利要求1或2所述灌木柳花粉低温保存方法，其特征在于：所述灯光干燥采 用30w的白炽灯，花粉置于灯下5?8cm处。
4. 根据权利要求3所述灌木柳花粉低温保存方法，其特征在于：所述的灯光干燥的时 间为0. 5?6h。
5. 根据权利要求1所述灌木柳花粉低温保存方法，其特征在于：所述干燥剂干燥的方 法为：使用变色硅胶作为干燥剂，将花粉置于干燥器中干燥。
6. 根据权利要求5所述灌木柳花粉低温保存方法，其特征在于：所述的干燥剂干燥的 时间为1?16h。
7. 根据权利要求1所述灌木柳花粉低温保存方法，其特征在于：步骤（1)所述的自然风 干干燥时间为2?24h。
8. 根据权利要求1所述灌木柳花粉低温保存方法，其特征在于：步骤（2)中，先将经步 骤（1)干燥处理的灌木柳花粉先于4摄氏度冷藏lh后，再转入-25摄氏度冷冻2h后，置 于-70摄氏度中保存。
【文档编号】A01N3/00GK104351170SQ201410491983
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年9月23日 优先权日:2014年9月23日
【发明者】何旭东, 姚伶, 李霞, 何开跃, 王保松, 施士争 申请人:江苏省林业科学研究院