乌龟三倍体纯系高效育成的方法与流程

文档序号:11880271阅读:来源:国知局

技术特征:

1.乌龟三倍体纯系高效育成的方法,包括如下步骤:

(1)他莫昔芬喂养料的配备:取纯度为95%以上的他莫昔芬粉剂,加入到乌龟常规饲养饲料中,制成喂养料,其中他莫昔芬含量为10~16g/500g喂养料,待用;

(2)投喂:在母龟产蛋前5~10天,按常规饲料投喂方法对母本进行投喂他莫昔芬喂养料,每天两次,早上8:00每100g乌龟投喂20~30g,下午6:00每100g乌龟投喂10~15g,直至产蛋;

(3)冷休克处理:在一次卵裂时,采用冷休克的方法,把步骤(2)中的受精蛋放入温度为-1~1℃的冷箱中,持续时间为3~5min;

(4)雌激素抑制剂溶液的配制:将氯米芬和睾酮一起溶于80%~90%的乙醇中,再加蒸馏水配制成雌激素抑制剂溶液,其中雌激素抑制剂溶液中氯米芬的浓度为180~250mg/l,睾酮的浓度为100~150mg/l;

(5)用步骤(4)所制备的雌激素抑制剂溶液,放入喷雾器中,对步骤(3)处理后的受精蛋进行均匀喷雾,用量每100只受精蛋为10~20ml,保持孵化器的温度29~33℃、湿度50~90%,进行孵化;从而获得乌龟雄性四倍体纯系。

(6)取步骤(5)的雄性四倍体作为父本,取普通二倍体作为母本,采用回交的方式,获得100%三倍体。

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