本发明属于植物繁殖技术领域，具体涉及一种杜鹃花扦插繁殖方法。
背景技术：
杜鹃花泛指杜鹃花科杜鹃花属(Rhododendron L.)植物，是世界三大高山花卉和中国传统十大名花之一。中国是世界杜鹃花的起源和地理分布中心，有原生种571种，其中有鳞大花亚组(subsect.Maddenia)杜鹃分布有34种；该亚组杜鹃株形优美、花大色艳、四季常绿，具有极高的观赏价值和广阔的园林应用前景。
扦插是小叶落叶及半常绿类杜鹃(Azalea)主要繁殖方法，并广为应用，但原产中高山山地的大叶常绿类杜鹃扦插生根困难，目前大多采用播种繁殖。播种育苗虽然繁殖系数大，但幼苗生长慢、开花周期长，且杜鹃自然杂交机率大，难于确保基因纯度。针对大叶常绿类杜鹃苗木需求量大而扦插生根难等问题，近年国内外学者对部分种开展了扦插育苗试验，发现：扦插生根受插穗内源激素、生根辅助因子、营养物质水平及抗氧化酶活性等内源因子的影响，而外源生长素可调节插穗生理活动，诱导酶活性及辅助因子变化，从而促进细胞伸长、分裂和根原基分化与不定根形成；扦插时间与插穗木质化程度、生理特征密切相关，是影响植物扦插生根的又一关键因子，目前大多数研究认为大叶常绿类杜鹃应该在秋季扦插。由于大叶常绿类杜鹃扦插生根困难，目前国内外相关报道较少，生根率低，技术远不成熟。
百合花杜鹃(R.liliiflorum)、江西杜鹃(R.kiangsiense)隶属杜鹃花属有鳞大花亚组，为大叶常绿类灌木；两种杜鹃植株分枝较多、株型紧凑饱满、耐修剪，嫩枝、叶背及花冠外侧被鳞片，花白色、具芳香，为制作盆花、盆景及园林绿化的极佳材料。其中，百合花杜鹃广布于广西、贵州、湖南及云南海拔800-1800m山坡疏林、灌丛中，资源较为丰富；江西杜鹃为江西特有种，零星分布于武功山、井冈山、武夷山海拔900-1500m山坡疏林下，资源量稀少，为省级珍稀保护种。该两种杜鹃虽然观赏价值高、市场前景广阔，但迄今未见扦插繁殖的报道，严重制约了其资源的保育与产业化利用。
技术实现要素：
杜鹃花研究是江西省、中国科学院庐山植物园在中科院植物园系统中的学科定位与传统优势，肩负着引领我国杜鹃花保育与利用的使命。鉴于上述问题，我们近年系统的开展了数十种杜鹃花的扦插繁殖试验。本发明目的是解决常绿类杜鹃扦插生根困难的关键技术，提供一种操作简便、实用、成本低，生根率高、苗木根系好，可规模化培育杜鹃花(特别是有鳞大花亚组杜鹃)的扦插繁殖方法，以满足越来越大的市场需求。
本发明的技术方案为：一种杜鹃花扦插繁殖方法，所述杜鹃花为杜鹃亚属有鳞大花亚组杜鹃，包括如下步骤：(1)苗床铺设：苗床底层由上而下依次添加石块、鹅卵石及粗沙，粗沙上铺设地热线，然后铺设厚8-10cm的泥炭、珍珠岩和蛭石混合基质，浇透水；苗床上搭建弧形塑料棚，棚内配备自动喷雾设施，棚外设置可移动的遮阳网；最后喷洒500倍多菌灵水溶液对基质及周边环境进行消毒；(2)插穗采集与制作：选择树龄20-25年、生长旺盛的成年株作为采穗母株，秋季或早春采集植株冠层带芽苞的顶枝，剪成长7-9cm的插穗；去除基部叶片，保留顶芽和顶部叶片3-4片，再依据叶片大小剪去1/2-2/3；然后对插穗基部进行单面愈伤处理；(3)生根剂处理：用100mg·L-1的吲哚丁酸水溶液浸泡插穗，自然风干；(4)扦插与管理：插穗处理后立即扦插到步骤(1)所述的苗床中，株行距8×8cm，扦插深度为插穗长度的2/3，喷透水；试验期间采用自动间歇喷雾系统补水增湿；秋季扦插苗床使用地热线加温，春季扦插不加温，棚内气温控制在15.0-20.0℃、相对湿度85.0-95.0％；及时清除苗床落叶及腐烂插穗，并每隔14d喷洒杀菌剂1次。
步骤(1)中所述的混合基质体积比为泥炭+珍珠岩+蛭石＝3:1:1。
步骤(2)中所述的插穗采集：10月中下旬采集当年生的半木质化至木质化过渡枝，或4月上中旬新梢萌动前采集上年度的木质化硬枝。
步骤(2)中所述的插穗单面愈伤指用嫁接刀削去插穗基部一侧长1.0-1.2cm的皮层和形成层。
步骤(3)中所述的生根剂处理指插穗基部2.0cm在吲哚丁酸水溶液中浸泡16h。
步骤(4)中所述的自动间歇喷雾设置为：白天2min/2h，晚上2min/4h；秋季扦插苗床地温设置为20℃；遮阳设置为晴天遮阳75％，阴天遮阳50％，雨天不遮阳。
步骤(4)中所述的杀菌剂为每隔14d分别用500倍的多菌灵或1000倍的甲基托布津水溶液交替喷雾1次。
本发明的优点在于：1、本发明解决了有鳞大花亚组杜鹃扦插不易生根、繁殖率低等难题，有效提高了生根率和生根质量；2、本发明在扦插时间上打破了传统观念(认为大叶常绿类杜鹃应该在秋季扦插)，于4月上中旬新梢萌动前采用上年度木质化硬枝扦插，显著提高了生根率(百合花杜鹃生根率高达96.67％)，且不需要地热处理，简化了操作程序、降低了成本。3、本发明无需特殊处理，操作简单易行，是杜鹃花规模化快速繁殖的有效方法，特别适合有鳞大花亚组杜鹃的产业化育苗。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但并不用于限定本发明。
生根剂种类及浓度的筛选：为了筛选出杜鹃花扦插生根的最佳生根剂种类与浓度，前期开展了大量的试验研究。发现，在生根剂种类上：IBA(吲哚丁酸)诱导杜鹃花生根效果显著优于IAA、NAA，而6-BA效果最差；在IBA浓度上，不同的物种间其最佳浓度存在差异，百合花杜鹃、江西杜鹃的最佳生根浓度为100mg·L-1水溶液浸泡插穗基部16h，不仅生根率高，且生根数量多、根系好。为此，本发明采用100mg·L-1的IBA水溶液处理插穗。
实施例1：百合花杜鹃扦插繁殖的方法，其特征在于包括以下步骤：
1.苗床铺设：苗床设置于玻璃温室内，采用砖混结构。苗床底部每隔80cm预留排水孔1个，然后由下而上依次添加石块、鹅卵石、粗沙，以增加苗床的排水和通气性；粗沙上面铺设厚8-10cm的泥炭+珍珠岩+蛭石＝3:1:1体积比的混合基质，耙平轻压使苗床平整，浇透水；为控制苗床环境的温、湿度与光照，苗床上搭建弧形塑料棚，棚内配备自动喷雾设施，棚外设置可移动的遮阳网；苗床制作完成后，用500倍多菌灵水溶液对基质及周边环境进行消毒。
2.插穗采集与制作：选择树龄20-25年左右、生长旺盛的百合花杜鹃(R.liliiflorum)成年株作为采穗母株，早春(庐山为4月中旬)新梢萌动前采集植株冠层上年度、生长健壮的木质化硬枝，喷水保湿及时运回室内；选取枝条粗壮直立、无病虫害、无花苞(带芽苞)的小枝，剪成长8-9cm的插穗；去除插穗基部叶片，保留顶芽和顶部叶片3-4片，再依据叶片大小剪去1/2-2/3，以减少水分蒸发；插穗基部一侧用嫁接刀削去长1.0-1.2cm的皮层和形成层，以利于生根剂的吸收及愈伤组织的形成。
3.生根剂处理：用100mg·L-1的IBA(吲哚丁酸)水溶液浸泡插穗基部(2.0cm)16h，自然风干。
4.扦插与管理：插穗处理后立即扦插。扦插时先用小竹签引一小孔，以减轻基质对插穗组织的机械损伤；插穗间的株行距为8×8cm，扦插深度为插穗长度的2/3，扦插后喷透水。试验期间采用自动间歇喷雾系统补水增湿：白天2min/2h，晚上2min/4h，1个月后逐渐减少喷水次数；棚内温度、光照强度根据天气情况，分别通过塑料棚两侧通风及遮阳网调节(棚内气温控制在15.0-20.0℃，相对湿度82.0-95.0％)；为减少污染，及时清除苗床落叶及腐烂插穗，并每14d用500倍的多菌灵或1000倍的甲基托布津水溶液交替喷雾1次。
采用本发明方法扦插繁殖百合花杜鹃，愈伤组织形成率高达100.00％、生根率达96.67％，根幅3.10cm。见表1。
实施例2：江西杜鹃扦插繁殖的方法
与实施例1相比，区别仅在于，“步骤2”所述的试验材料为江西杜鹃(R.kiangsiense)。
采用本发明方法扦插繁殖江西杜鹃，愈伤组织形成率高达100.00％、生根率达76.67％，根幅1.82cm。见表1。
实施例3：百合花杜鹃扦插繁殖的方法，其特征在于包括以下步骤：
1.苗床铺设：苗床设置于玻璃温室内，采用砖混结构。苗床底部每隔80cm预留排水孔1个，底层由下而上依次铺设石块、鹅卵石、粗沙，以增加苗床的排水和通气性；粗砂上面安装地热线，以增加地温；然后铺设厚8-10cm的泥炭+珍珠岩+蛭石＝3:1:1体积比的混合基质，耙平轻压使苗床平整，浇透水；为控制苗床环境的温、湿度与光照，苗床上搭建弧形塑料棚，棚内配备自动喷雾设施，棚外设置可移动的遮阳网；苗床制作完成后，用500倍多菌灵水溶液对基质及周边环境进行消毒。
2.插穗采集与制作：选择树龄20-25年左右、生长旺盛的成年株作为采穗母株，秋季(庐山为10月中下旬)采集当年生半木质化至木质化过渡枝，喷水保湿及时运回室内；选取枝条粗壮直立、无病虫害、无花苞(带芽苞)的小枝，剪成长8-9cm的插穗；去除插穗基部叶片，保留顶芽和顶部叶片3-4片，再依据叶片大小剪去1/2-2/3，以减少水分蒸发；插穗基部一侧用嫁接刀削去长1.0-1.2cm的皮层和形成层，以利于生根剂的吸收及愈伤组织的形成。
3.生根剂处理：用100mg·L-1的IBA(吲哚丁酸)水溶液浸泡插穗基部(2.0cm)16h，自然风干。
4.扦插与管理：插穗处理后立即扦插。扦插时先用小竹签引一小孔，以减轻基质对插穗组织的机械损伤；插穗间的株行距为8×8cm，扦插深度为插穗长度的2/3，扦插后喷透水。由于秋季扦插其生根期正逢寒冷的冬季，地温较低，不利于插穗生理活动和愈伤组织的形成、生根，故采用地热线进行苗床加温，地温设置为20℃。试验期间采用自动间歇喷雾系统补水增湿：白天2min/2h，晚上2min/4h，1个月后逐渐减少喷水次数；棚内气温、光照强度根据天气情况，分别通过塑料棚两侧通风及遮阳网调节(棚内气温控制在15.0-20.0℃，相对湿度82.0-95.0％)；为减少污染，及时清除苗床落叶及腐烂插穗，并每14d用500倍的多菌灵或1000倍的甲基托布津水溶液交替喷雾1次。
采用本发明方法扦插繁殖百合花杜鹃，愈伤组织形成率80.00％、生根率高达86.67％，根幅2.48cm。见表1。
实施例4：江西杜鹃扦插繁殖的方法
与实施例3相比，区别仅在于，“步骤2”所述的试验材料为江西杜鹃(R.kiangsiense)。
采用本发明方法扦插繁殖江西杜鹃，愈伤组织形成率仅40.00％、生根率56.67％，根幅仅0.77cm。见表1。
表1扦插时间对两种杜鹃扦插生根指标影响的多重比较
Table 1Multiple comparison of the effects cutting times on cutting rooting parameters of two Rhododendron species
续表Continued
注：SP1＝百合花杜鹃，SP2＝江西杜鹃。不同小写字母表示不同扦插时间与物种组合间有显著差异(P<0.05)。
Note:SP1＝Rh.liliiflorum，SP2＝Rh.kiangsiense.Different small letters indicate significant differences between different combinations of cutting times and species(P<0.05).
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其过程，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。