本发明涉及常青白蜡人工繁育技术领域，尤其涉及一种常青白蜡组培无性繁殖方法。
背景技术：
常青白蜡为暖温带喜光树种。常青白蜡木材坚韧，供制家具、农具、车辆、胶合板等；枝条可编筐；树皮称“春皮”，中医学上用为清热药。常青白蜡在园林绿化上可谓是多功能树种，耐寒耐旱，抗盐碱，耐瘠薄，是北方地区不可多得的常绿阔叶树种，市场反映强烈。它的推广和应用前景将十分可观。依据它的耐修剪整形等生物学特性和景点配置要求，可修建成球形、独干形球、灌木状高篱、柱形高篱、行道树等。特别适合诸如京津唐地区、胶东半岛地区、山陕地区、上海地区、江浙沿海地区栽培。
春季播种放在立春后3月下旬至4月中旬，也可采用嫁接的方法，在东北地区采用常见的水曲柳做砧木，在华中、华东地区可采用普通白蜡或绒毛白蜡做砧木，时间选择春季4－5月份，采用劈接、枝接、靠接或芽接均可。接后管理十分重要，注意剪砧抹芽松绑，立支撑，保证嫁接苗的枝干笔直健壮。
目前，常青白蜡扦插繁殖易受扦插基质、温湿度和植物生长调节剂的影响，扦插苗根系为不定根，吸收能力差，形成的树体直立性差，顶端优势不明显，生长缓慢；嫁接繁殖是现在常青白蜡常用的繁殖方法，但嫁接方法易受季节和地域限制，操作复杂，繁殖系数低，小苗生长速度不一，管理繁杂，不适宜批量、规模化繁殖。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种常青白蜡组培无性繁殖方法，以解决上述技术问题。
本发明所要解决的技术问题采用以下技术方案来实现：
一种常青白蜡组培无性繁殖方法，其特征在于，步骤如下：
(1)取常青白蜡的根尖3cm作为组培对象，在42.5℃的温水中浸泡35min，再用清水冲洗10min，沥干表面水份，再浸入消毒液A中浸泡25s，所用消毒液A中含有质量分数为65％的乙醇、5％的乙酸二氢香芹酯，余量为水；组培对象从消毒液A中取出后用无菌水连续冲洗15-30s，再沥干组培对象表面的水份，浸入消毒液B中浸泡6s，然后从消毒液B中取出，用无菌水连续冲洗20s，所用消毒液B中含有质量分数1.6％的高锰酸钾、0.05％的去甲麻黄碱，余量为水；
(2)将步骤(1)消毒后的组培对象均匀分切成5-6段，接种至培养基中进行丛生芽诱导培养，光照强度2100Lx，光照8h/d，温度28℃，空气相对湿度83％；
(3)将步骤(2)获得的丛生芽切下，取其基部2～3cm，接种至生根培养瓶中，密封进行诱导生根，光照强度2400Lx，光照8h/d，温度28℃，空气相对湿度83％；
(4)在生根培养瓶中生长至苗高6～8cm，然后打开瓶盖，光照强度2800Lx，光照9.5h/d，温度32℃，空气相对湿度79％，通风良好的环境下，炼苗4天，然后取出组培苗，移栽至苗床培养基中，苗床培养基由泥炭土、草炭土、水苔、香桧烯按质量比3：1.2：1.6：0.01混合而成。
作为优选，步骤(2)所述的培养基组成为：GD+1.2～1.6mg/L、2，4-D+0.5～0.8mg/L、NAA+4.0～7.0mg/L、6-BA+20～25g/L、蔗糖+1.0～1.5g/L、AC+5.5～7.0g/L、琼脂，pH为6.2～6.5。
作为优选，所述生根培养瓶中，所用的培养基组成为：GD+0.8～1.0mg/L、NAA+1.0～3.0mg/L、IBA+20～25g/L、蔗糖+1.0～1.5g/L、AC+5.5～7.0g/L、琼脂，pH为6.2～6.5。
作为优选，所述生根培养瓶中，密封状态下瓶体中充入的混合气由以下体积比的气体混合而成：二氧化碳0.05、氮气78、氧气21.2、氡气0.003、乙稀1.2、乙酸0.03。
本发明的有益效果是：
本发明以常青白蜡的根尖为外植体，可得到完整的再生植株。采用本方法得到的再生植株，植物学性状稳定，增殖系数达到4～6，生根率达78％，移栽成活率达97％，快繁方法稳定性好，可用来快速、批量繁殖常青白蜡种苗。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明，但下述实施例仅仅为本发明的优选实施例，并非全部。基于实施方式中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例，都属于本发明的保护范围。
一种常青白蜡组培无性繁殖方法，其特征在于，步骤如下：
(1)取常青白蜡的根尖3cm作为组培对象，在42.5℃的温水中浸泡35min，再用清水冲洗10min，沥干表面水份，再浸入消毒液A中浸泡25s，所用消毒液A中含有质量分数为65％的乙醇、5％的乙酸二氢香芹酯，余量为水；组培对象从消毒液A中取出后用无菌水连续冲洗15-30s，再沥干组培对象表面的水份，浸入消毒液B中浸泡6s，然后从消毒液B中取出，用无菌水连续冲洗20s，所用消毒液B中含有质量分数1.6％的高锰酸钾、0.05％的去甲麻黄碱，余量为水；
(2)将步骤(1)消毒后的组培对象均匀分切成5-6段，接种至培养基中进行丛生芽诱导培养，光照强度2100Lx，光照8h/d，温度28℃，空气相对湿度83％；
(3)将步骤(2)获得的丛生芽切下，取其基部2～3cm，接种至生根培养瓶中，密封进行诱导生根，光照强度2400Lx，光照8h/d，温度28℃，空气相对湿度83％；
(4)在生根培养瓶中生长至苗高6～8cm，然后打开瓶盖，光照强度2800Lx，光照9.5h/d，温度32℃，空气相对湿度79％，通风良好的环境下，炼苗4天，然后取出组培苗，移栽至苗床培养基中，苗床培养基由泥炭土、草炭土、水苔、香桧烯按质量比3：1.2：1.6：0.01混合而成。
步骤(2)中的培养基组成为：GD+1.2～1.6mg/L、2，4-D+0.5～0.8mg/L、NAA+4.0～7.0mg/L、6-BA+20～25g/L、蔗糖+1.0～1.5g/L、AC+5.5～7.0g/L、琼脂，pH为6.2～6.5。
生根培养瓶中，所用的培养基组成为：GD+0.8～1.0mg/L、NAA+1.0～3.0mg/L、IBA+20～25g/L、蔗糖+1.0～1.5g/L、AC+5.5～7.0g/L、琼脂，pH为6.2～6.5。
生根培养瓶中，密封状态下瓶体中充入的混合气由以下体积比的气体混合而成：二氧化碳0.05、氮气78、氧气21.2、氡气0.003、乙稀1.2、乙酸0.03。
采用上述实施例的方法繁育常青白蜡，得到的再生植株，植物学性状稳定，增殖系数达到4～6，生根率达78％，移栽成活率达97％，快繁方法稳定性好，可用来快速、批量繁殖常青白蜡种苗。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的仅为本发明的优选例，并不用来限制本发明，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。