本发明涉及农药技术领域，具体是一种球孢白僵菌微生物农药及其制备方法。
背景技术：
目前，农业养护以高毒、中毒农药及其它影响人体健康与生态环境安全的农药为主，来进行园林养护中的日常病虫防治。杀虫主要以有机磷类、氨基甲酸酷类、拟除虫菊酝类等农药为主，杀菌多以有机硫类、有机磷类、取代笨类、苯并咪哩类等农药为主。
此类药物既污染环境破坏生态，同品种或相近防治机理的农药连续使用，又易使病虫害产生抗药性，而且极易对人身健康造成持续的潜在威胁，特别是对于与地产园林环境长期近距离接触的小区业主，健康危害更为直接。
微生物农药(microbialpesticide)包括农用抗生素和活体微生物农药。为利用微生物或其代谢产物来防治危害农作物的病、虫、草、鼠害及促进作物生长。它包括以菌治虫、以菌治菌、以菌除草等。生物农药是一种利用生物活体或其代谢产物对害虫、病菌、杂草、线虫、鼠类等有害生物进行防治的一类农药制剂，生物农药包括微生物源农药、植物源农药、动物源农药和转基因生物农药等四类，生物农药与化学农药相比有以下优点：1)选择性强，对人畜及各种有益生物比较安全；2)对生态环境影响小。这些微生物农药包括细菌、真菌、病毒或其代谢物，例如苏云金杆菌、白僵菌、核多角体病毒、井冈霉素、c型肉毒梭菌外毒素等。随着人们对环境保护越来越高的要求，微生物农药无疑是今后农药的发展方向之一。
在公知技术中，含有微生物的病虫害防治剂，所选用的微生物单一或者较少。防治病虫害的范围较窄，质量不太稳定，防治病虫害的效果不尽人意。同时，也存在使用次数多，总投入费用多，以及生产工艺繁杂，操作不便等不足之处。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种低毒广谱、抗药性低的球孢白僵菌微生物农药及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种球孢白僵菌微生物农药，由以下重量份的原料组成：球孢白僵菌600-800份、烟碱1-3份、硅藻土50-70份、金龟子绿僵菌6-8份、黄芩素15-25份、噬菌蛭弧菌6-8份、滑石粉6-8份、芽孢杆菌8-12份、蛭石5-10份、羧甲基纤维素钠1-3份、植物生长调节剂3-5份、氧化铝5-10份、黄芩素4-6份、大蒜油0.5-2份、苦参碱2-6份，淀粉1-5份、圆葱20-30份、氧霉素2-4份、链霉素1-3份、及己10-20份、黄花高15-20份、商陆8-12份、乌头10-20份、黄连20-25份、鱼腥草10-20份、樟脑3-5份、艾叶3-5份、紫花地丁1-3份、微量元素化合物5-10份。
作为本发明进一步的方案：所述球孢白僵菌微生物农药，由以下重量份的原料组成：球孢白僵菌650-750份、烟碱1.5-2.5份、硅藻土55-65份、金龟子绿僵菌6.5-7.5份、黄芩素18-22份、噬菌蛭弧菌6.5-7.5份、滑石粉6.5-7.5份、芽孢杆菌9-11份、蛭石6-9份、羧甲基纤维素钠1.5-2.5份、植物生长调节剂3.5-4.5份、氧化铝6-9份、黄芩素4.5-5.5份、大蒜油1-1.5份、苦参碱3-5份，淀粉2-4份、圆葱22-28份、氧霉素2.5-3.5份、链霉素1.5-2.5份、及己12-18份、黄花高16-19份、商陆9-11份、乌头12-18份、黄连21-24份、鱼腥草12-18份、樟脑3.5-4.5份、艾叶3.5-4.5份、紫花地丁1.5-2.5份、微量元素化合物6-9份。
作为本发明进一步的方案：所述球孢白僵菌微生物农药，由以下重量份的原料组成：球孢白僵菌700份、烟碱2份、硅藻土60份、金龟子绿僵菌7份、黄芩素20份、噬菌蛭弧菌7份、滑石粉7份、芽孢杆菌10份、蛭石8份、羧甲基纤维素钠2份、植物生长调节剂4份、氧化铝8份、黄芩素5份、大蒜油1.2份、苦参碱4份，淀粉3份、圆葱25份、氧霉素3份、链霉素2份、及己15份、黄花高18份、商陆10份、乌头15份、黄连22份、鱼腥草15份、樟脑4份、艾叶4份、紫花地丁2份、微量元素化合物8份。
作为本发明进一步的方案：所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌或腊状芽孢杆菌。
作为本发明进一步的方案：所述植物生长调节剂为吲哚乙酸、2，4-d、增产素、萘乙酸、西维因、赤霉素、玉米素、激动素、联二苯脲、三十烷醇、芸苔素内酯、矮壮素、腐殖酸钠、比久或多效唑中的至少一种植物生长调节剂。
作为本发明进一步的方案：所述微量元素化合物为硼砂、硫酸锌、硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸锰、钼酸铵、氧化钴、氧化钛、氧化硒或碘化钾中的至少一种化合物。
所述球孢白僵菌微生物农药的制备方法，具体步骤如下：
（1）配制菌种的固体培养基，灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度30℃下培养1-3d；将长好的平板分别挑取球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、噬菌蛭弧菌、芽孢杆菌的单菌落转接至装有液体培养基的50ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养15-25h；将培养好的菌种接种于盛有液体培养基的500ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养15-25h；将上述四种菌种按所述菌种的重量份混合，将混合后的菌液接种于盛有发酵培养基的发酵罐中，ph6.0-8.0，接种量为1-5%，30℃下培养4-7d，使发酵液中菌数达到8-10×108个/ml，得到混合菌液；
（2）将圆葱、及己、黄花高、商陆、乌头、黄连、鱼腥草、樟脑、艾叶、紫花地丁放入容器中，加入4-6倍的水煎煮3-5h，煎煮完毕后过滤得滤液；
（3）将蛭石、硅藻土、滑石粉混合后，加入3-5倍的水继续混合均匀，进行超3-7min后再进行过滤和干，所述超声的频率为80-100khz，干燥的温度为100-200℃，时间为1-3h，得到第一固体；其中，所述蛭石、硅藻土、滑石粉、拟薄水铝石以干基重量计；
（4）将所述第一固体在380-420℃下进行焙烧2-4h，得到第二固体；
（5）将所述第二固体进行粉碎后过20-100目筛，得到第一粉末；将所述第一粉末与烟碱、黄芩素、羧甲基纤维素钠、植物生长调节剂、氧化铝、黄芩素、大蒜油、苦参碱、淀粉、氧霉素、链霉素、微量元素化合物、以及上述步骤（1）-（2）得到的混合菌液、滤液混合均匀，得到球孢白僵菌微生物农药。
作为本发明再进一步的方案：所述发酵培养基的组成为葡萄糖60-80g/l、蔗糖20-40g/l、乳酪蛋白胨2-4g/l、玉米浆1-3g/l、磷酸氢二钾0.3-0.7g/l、硫酸铵0.01-0.05g/l、硫酸镁0.05-0.1g/l、碳酸钙0.08-0.12g/l、红糖0.3-0.7g/l、豆芽汁2-4g/l，其余为蒸馏水。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明所述的农药所用原料配比简单，绿色环保，成本低廉；能够提高植物的免疫能力，不会在农产品上残留和积累，不会对人类生存空间和健康造成破坏，对生态环境不会带来污染，且有效成分复杂多样，尤其是使用两种以上植物的复方制剂时，成分更是多种多样，使得害虫无法对其中的一种或几种成分产生抗药性，从而收到较好的防治效果，制作工艺简单、方便。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种球孢白僵菌微生物农药，由以下重量份的原料组成：球孢白僵菌600份、烟碱1份、硅藻土50份、金龟子绿僵菌6份、黄芩素15份、噬菌蛭弧菌6份、滑石粉6份、芽孢杆菌8份、蛭石5份、羧甲基纤维素钠1份、植物生长调节剂3份、氧化铝5份、黄芩素4份、大蒜油0.5份、苦参碱2份，淀粉1份、圆葱20份、氧霉素2份、链霉素1份、及己10份、黄花高15份、商陆8份、乌头10份、黄连20份、鱼腥草10份、樟脑3份、艾叶3份、紫花地丁1份、微量元素化合物5份。
所述球孢白僵菌微生物农药的制备方法，具体步骤如下：
（1）配制菌种的固体培养基，灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度30℃下培养1d；将长好的平板分别挑取球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、噬菌蛭弧菌、芽孢杆菌的单菌落转接至装有液体培养基的50ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养15h；将培养好的菌种接种于盛有液体培养基的500ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养15h；将上述四种菌种按所述菌种的重量份混合，将混合后的菌液接种于盛有发酵培养基的发酵罐中，ph6.0，接种量为1%，30℃下培养4d，使发酵液中菌数达到8×108个/ml，得到混合菌液；所述发酵培养基的组成为葡萄糖60g/l、蔗糖20g/l、乳酪蛋白胨2g/l、玉米浆1g/l、磷酸氢二钾0.3g/l、硫酸铵0.01g/l、硫酸镁0.05g/l、碳酸钙0.08g/l、红糖0.3g/l、豆芽汁2g/l，其余为蒸馏水；
（2）将圆葱、及己、黄花高、商陆、乌头、黄连、鱼腥草、樟脑、艾叶、紫花地丁放入容器中，加入4倍的水煎煮3h，煎煮完毕后过滤得滤液；
（3）将蛭石、硅藻土、滑石粉混合后，加入3倍的水继续混合均匀，进行超3min后再进行过滤和干，所述超声的频率为80khz，干燥的温度为100℃，时间为1h，得到第一固体；其中，所述蛭石、硅藻土、滑石粉、拟薄水铝石以干基重量计；
（4）将所述第一固体在380℃下进行焙烧2h，得到第二固体；
（5）将所述第二固体进行粉碎后过20目筛，得到第一粉末；将所述第一粉末与烟碱、黄芩素、羧甲基纤维素钠、植物生长调节剂、氧化铝、黄芩素、大蒜油、苦参碱、淀粉、氧霉素、链霉素、微量元素化合物、以及上述步骤（1）-（2）得到的混合菌液、滤液混合均匀，得到球孢白僵菌微生物农药。
实施例2
一种球孢白僵菌微生物农药，由以下重量份的原料组成：球孢白僵菌650份、烟碱1.5份、硅藻土55份、金龟子绿僵菌6.5份、黄芩素18份、噬菌蛭弧菌6.5份、滑石粉6.5份、芽孢杆菌9份、蛭石6份、羧甲基纤维素钠1.5份、植物生长调节剂3.5份、氧化铝6份、黄芩素4.5份、大蒜油1份、苦参碱3份，淀粉2份、圆葱22份、氧霉素2.5份、链霉素1.5份、及己12份、黄花高16份、商陆9份、乌头12份、黄连21份、鱼腥草12份、樟脑3.5份、艾叶3.5份、紫花地丁1.5份、微量元素化合物6份。
所述球孢白僵菌微生物农药的制备方法，具体步骤如下：
（1）配制菌种的固体培养基，灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度30℃下培养1.5d；将长好的平板分别挑取球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、噬菌蛭弧菌、芽孢杆菌的单菌落转接至装有液体培养基的50ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养18h；将培养好的菌种接种于盛有液体培养基的500ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养18h；将上述四种菌种按所述菌种的重量份混合，将混合后的菌液接种于盛有发酵培养基的发酵罐中，ph6.5，接种量为2%，30℃下培养5d，使发酵液中菌数达到8.5×108个/ml，得到混合菌液；所述发酵培养基的组成为葡萄糖65g/l、蔗糖25g/l、乳酪蛋白胨2.5g/l、玉米浆1.5g/l、磷酸氢二钾0.4g/l、硫酸铵0.02g/l、硫酸镁0.06g/l、碳酸钙0.09g/l、红糖0.4g/l、豆芽汁2.5g/l，其余为蒸馏水；
（2）将圆葱、及己、黄花高、商陆、乌头、黄连、鱼腥草、樟脑、艾叶、紫花地丁放入容器中，加入4.5倍的水煎煮3.5h，煎煮完毕后过滤得滤液；
（3）将蛭石、硅藻土、滑石粉混合后，加入3.5倍的水继续混合均匀，进行超4min后再进行过滤和干，所述超声的频率为85khz，干燥的温度为120℃，时间为1.5h，得到第一固体；其中，所述蛭石、硅藻土、滑石粉、拟薄水铝石以干基重量计；
（4）将所述第一固体在390℃下进行焙烧2.5h，得到第二固体；
（5）将所述第二固体进行粉碎后过40目筛，得到第一粉末；将所述第一粉末与烟碱、黄芩素、羧甲基纤维素钠、植物生长调节剂、氧化铝、黄芩素、大蒜油、苦参碱、淀粉、氧霉素、链霉素、微量元素化合物、以及上述步骤（1）-（2）得到的混合菌液、滤液混合均匀，得到球孢白僵菌微生物农药。
实施例3
一种球孢白僵菌微生物农药，由以下重量份的原料组成：球孢白僵菌700份、烟碱2份、硅藻土60份、金龟子绿僵菌7份、黄芩素20份、噬菌蛭弧菌7份、滑石粉7份、芽孢杆菌10份、蛭石8份、羧甲基纤维素钠2份、植物生长调节剂4份、氧化铝8份、黄芩素5份、大蒜油1.2份、苦参碱4份，淀粉3份、圆葱25份、氧霉素3份、链霉素2份、及己15份、黄花高18份、商陆10份、乌头15份、黄连22份、鱼腥草15份、樟脑4份、艾叶4份、紫花地丁2份、微量元素化合物8份。
所述球孢白僵菌微生物农药的制备方法，具体步骤如下：
（1）配制菌种的固体培养基，灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度30℃下培养2d；将长好的平板分别挑取球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、噬菌蛭弧菌、芽孢杆菌的单菌落转接至装有液体培养基的50ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养20h；将培养好的菌种接种于盛有液体培养基的500ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养20h；将上述四种菌种按所述菌种的重量份混合，将混合后的菌液接种于盛有发酵培养基的发酵罐中，ph7.0，接种量为3%，30℃下培养6d，使发酵液中菌数达到9×108个/ml，得到混合菌液；所述发酵培养基的组成为葡萄糖70g/l、蔗糖30g/l、乳酪蛋白胨3g/l、玉米浆2g/l、磷酸氢二钾0.5g/l、硫酸铵0.03g/l、硫酸镁0.08g/l、碳酸钙0.1g/l、红糖0.5g/l、豆芽汁3g/l，其余为蒸馏水；
（2）将圆葱、及己、黄花高、商陆、乌头、黄连、鱼腥草、樟脑、艾叶、紫花地丁放入容器中，加入5倍的水煎煮4h，煎煮完毕后过滤得滤液；
（3）将蛭石、硅藻土、滑石粉混合后，加入4倍的水继续混合均匀，进行超5min后再进行过滤和干，所述超声的频率为90khz，干燥的温度为150℃，时间为2h，得到第一固体；其中，所述蛭石、硅藻土、滑石粉、拟薄水铝石以干基重量计；
（4）将所述第一固体在400℃下进行焙烧3h，得到第二固体；
（5）将所述第二固体进行粉碎后过60目筛，得到第一粉末；将所述第一粉末与烟碱、黄芩素、羧甲基纤维素钠、植物生长调节剂、氧化铝、黄芩素、大蒜油、苦参碱、淀粉、氧霉素、链霉素、微量元素化合物、以及上述步骤（1）-（2）得到的混合菌液、滤液混合均匀，得到球孢白僵菌微生物农药。
实施例4
一种球孢白僵菌微生物农药，由以下重量份的原料组成：球孢白僵菌750份、烟碱2.5份、硅藻土65份、金龟子绿僵菌7.5份、黄芩素22份、噬菌蛭弧菌7.5份、滑石粉7.5份、芽孢杆菌11份、蛭石9份、羧甲基纤维素钠2.5份、植物生长调节剂4.5份、氧化铝9份、黄芩素5.5份、大蒜油1.5份、苦参碱5份，淀粉4份、圆葱28份、氧霉素3.5份、链霉素2.5份、及己18份、黄花高19份、商陆11份、乌头18份、黄连24份、鱼腥草18份、樟脑4.5份、艾叶4.5份、紫花地丁2.5份、微量元素化合物9份。
所述球孢白僵菌微生物农药的制备方法，具体步骤如下：
（1）配制菌种的固体培养基，灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度30℃下培养2.5d；将长好的平板分别挑取球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、噬菌蛭弧菌、芽孢杆菌的单菌落转接至装有液体培养基的50ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养22h；将培养好的菌种接种于盛有液体培养基的500ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养22h；将上述四种菌种按所述菌种的重量份混合，将混合后的菌液接种于盛有发酵培养基的发酵罐中，ph7.5，接种量为4%，30℃下培养6d，使发酵液中菌数达到9.5×108个/ml，得到混合菌液；所述发酵培养基的组成为葡萄糖75g/l、蔗糖35g/l、乳酪蛋白胨3.5g/l、玉米浆2.5g/l、磷酸氢二钾0.6g/l、硫酸铵0.04g/l、硫酸镁0.09g/l、碳酸钙0.11g/l、红糖0.6g/l、豆芽汁3.5g/l，其余为蒸馏水；
（2）将圆葱、及己、黄花高、商陆、乌头、黄连、鱼腥草、樟脑、艾叶、紫花地丁放入容器中，加入5.5倍的水煎煮4.5h，煎煮完毕后过滤得滤液；
（3）将蛭石、硅藻土、滑石粉混合后，加入4.5倍的水继续混合均匀，进行超6min后再进行过滤和干，所述超声的频率为95khz，干燥的温度为180℃，时间为2.5h，得到第一固体；其中，所述蛭石、硅藻土、滑石粉、拟薄水铝石以干基重量计；
（4）将所述第一固体在410℃下进行焙烧3.5h，得到第二固体；
（5）将所述第二固体进行粉碎后过80目筛，得到第一粉末；将所述第一粉末与烟碱、黄芩素、羧甲基纤维素钠、植物生长调节剂、氧化铝、黄芩素、大蒜油、苦参碱、淀粉、氧霉素、链霉素、微量元素化合物、以及上述步骤（1）-（2）得到的混合菌液、滤液混合均匀，得到球孢白僵菌微生物农药。
实施例5
一种球孢白僵菌微生物农药，由以下重量份的原料组成：球孢白僵菌800份、烟碱3份、硅藻土70份、金龟子绿僵菌8份、黄芩素25份、噬菌蛭弧菌8份、滑石粉8份、芽孢杆菌12份、蛭石10份、羧甲基纤维素钠3份、植物生长调节剂5份、氧化铝10份、黄芩素6份、大蒜油2份、苦参碱6份，淀粉5份、圆葱30份、氧霉素4份、链霉素3份、及己20份、黄花高20份、商陆12份、乌头20份、黄连25份、鱼腥草20份、樟脑5份、艾叶5份、紫花地丁3份、微量元素化合物10份。
所述球孢白僵菌微生物农药的制备方法，具体步骤如下：
（1）配制菌种的固体培养基，灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度30℃下培养3d；将长好的平板分别挑取球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、噬菌蛭弧菌、芽孢杆菌的单菌落转接至装有液体培养基的50ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养25h；将培养好的菌种接种于盛有液体培养基的500ml锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养25h；将上述四种菌种按所述菌种的重量份混合，将混合后的菌液接种于盛有发酵培养基的发酵罐中，ph8.0，接种量为5%，30℃下培养7d，使发酵液中菌数达到10×108个/ml，得到混合菌液；所述发酵培养基的组成为葡萄糖80g/l、蔗糖40g/l、乳酪蛋白胨4g/l、玉米浆3g/l、磷酸氢二钾0.7g/l、硫酸铵0.05g/l、硫酸镁0.1g/l、碳酸钙0.12g/l、红糖0.7g/l、豆芽汁4g/l，其余为蒸馏水；
（2）将圆葱、及己、黄花高、商陆、乌头、黄连、鱼腥草、樟脑、艾叶、紫花地丁放入容器中，加入6倍的水煎煮5h，煎煮完毕后过滤得滤液；
（3）将蛭石、硅藻土、滑石粉混合后，加入5倍的水继续混合均匀，进行超7min后再进行过滤和干，所述超声的频率为100khz，干燥的温度为200℃，时间为3h，得到第一固体；其中，所述蛭石、硅藻土、滑石粉、拟薄水铝石以干基重量计；
（4）将所述第一固体在420℃下进行焙烧4h，得到第二固体；
（5）将所述第二固体进行粉碎后过100目筛，得到第一粉末；将所述第一粉末与烟碱、黄芩素、羧甲基纤维素钠、植物生长调节剂、氧化铝、黄芩素、大蒜油、苦参碱、淀粉、氧霉素、链霉素、微量元素化合物、以及上述步骤（1）-（2）得到的混合菌液、滤液混合均匀，得到球孢白僵菌微生物农药。
所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌或腊状芽孢杆菌。所述植物生长调节剂为吲哚乙酸、2，4-d、增产素、萘乙酸、西维因、赤霉素、玉米素、激动素、联二苯脲、三十烷醇、芸苔素内酯、矮壮素、腐殖酸钠、比久或多效唑中的至少一种植物生长调节剂。所述微量元素化合物为硼砂、硫酸锌、硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸锰、钼酸铵、氧化钴、氧化钛、氧化硒或碘化钾中的至少一种化合物。
本发明所述的农药所用原料配比简单，绿色环保，成本低廉；能够提高植物的免疫能力，不会在农产品上残留和积累，不会对人类生存空间和健康造成破坏，对生态环境不会带来污染，且有效成分复杂多样，尤其是使用两种以上植物的复方制剂时，成分更是多种多样，使得害虫无法对其中的一种或几种成分产生抗药性，从而收到较好的防治效果，制作工艺简单、方便。
上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下作出各种变化。