本发明属于农业生产
技术领域：
，特别涉及一种利用海藻酸寡糖喷洒水稻幼苗提高水稻对稻瘟病抗病能力的新方法。
背景技术：
水稻是我国重要的粮食作物，在全国广泛种植。而稻瘟病是我国稻区危害最严重的水稻病害之一，每年都有不同程度的发生，会造成水稻产量下降、品质降低。目前对稻瘟病的防治主要是化学药剂防治。然而近些年来，化学农药频繁而不加区分地随意施用已经引发了严重的生态环境污染和药物残留等问题，急需开发无污染可降解的生物农药。寡糖具有对人类和生态环境无害、不易产生抗药性、可生物降解等优点，已成为生物农药的发展方向。与化学农药不同，寡糖不仅可以作为抗菌剂直接杀死病原微生物，还可以通过诱导植物防卫响应以抵御植物病害。因此，生物活性寡糖能够激发植物的免疫能力以抵御微生物病害的侵染，达到预防农作物微生物病害的发生的目的。海藻酸是由β-d-甘露糖醛酸和α-l-古罗糖醛酸通过β-1,4糖苷键连接形成的线性阴离子多糖，也被称为褐藻胶，可以通过一定的方法将其制成水溶性良好的的海藻酸寡糖。海藻酸来源丰富，寡糖生产成本低，无毒，无公害，完全满足节能环保的健康理念，符合社会的发展需求。同时，海藻酸寡糖具有多种生物学活性，如抗肿瘤、神经保护、促进植物生长、抑菌等，在新药开发、保健食品等许多领域上具有巨大的应用价值。本发明在水稻幼苗期添加海藻酸寡糖来诱导水稻防御酶的产生，提高水稻对稻瘟病的抗病能力，促进水稻生长，其应用符合食品安全和环保要求。技术实现要素：为解决现有技术问题，本发明主要目的在于提供一种利用海藻酸寡糖提高水稻对稻瘟病抗病能力的方法，该方法是在水稻幼苗期喷洒海藻酸寡糖来提高水稻叶片中防御酶活力和抗病能力。本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种利用海藻酸寡糖提高水稻对稻瘟病抗病能力的方法，具体操作方法如下：本发明所述海藻酸寡糖优选为海藻酸钠寡糖；(1)海藻酸寡糖制备：取1千克海藻酸钠，用100升的水溶解，加入3％过氧化氢，80℃，反应90分钟，冷冻干燥48小时，研磨成粉。(2)海藻酸寡糖溶液配制：取1克制备好的海藻酸寡糖，溶于一定体积的水中，制成溶液。(3)喷施：本发明所述海藻酸寡糖溶液在水稻幼苗长到四叶一心，约15-20cm高时喷施效果最佳，喷施用量为海藻酸寡糖溶液的体积(ml)：水稻面积(m2)＝100:1～1000:1。根据上文技术方案，优选的情况下，所述海藻酸寡糖的浓度为0.01％～0.03％。本发明的有益效果：本发明采用绿色无毒的海藻酸寡糖作为提高水稻抗病能力的激发子，经过喷洒处理，获得的水稻幼苗中包括苯丙氨酸解氨酶、过氧化氢酶、过氧化物酶在内的防御酶活性明显高于普通水稻幼苗，同时通过水稻生长后期对叶瘟病和穗颈瘟病的调查发现，病情指数明显下降，对叶瘟和颈穗瘟都有一定防治效果。本发明的创新点在于水稻幼苗期喷洒海藻酸寡糖，利用其激发子生物活性，诱导水稻产生防御响应，从而提高水稻叶片中的防御酶活力和对稻瘟病的抗病能力，促进了水稻的生长。同时，这种方法简单易行，利于农业推广应用。具体实施方式下述非限定性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。本发明下述实施例中涉及的测试如下：1.水稻叶片中酶的提取：喷洒海藻酸钠寡糖溶液3天后，取水稻叶片，剪碎后置于预冷的研钵中，加适量的提取介质，在冰浴上研磨匀浆，离心后上清液为待测酶液。2.苯丙氨酸解氨酶活性测定：以l-苯丙氨酸为底物，采用比色法测定反式肉桂酸的含量，以每小时在290nm处吸光度增加0.01所需酶量为一个酶活单位。3.过氧化氢酶活性测定：以过氧化氢为底物，采用比色法测定过氧化氢含量，以每分钟在240nm处吸光度减少0.1所需酶量为一个酶活单位。4.过氧化物酶活性测定：愈创木酚比色法，以每分钟在470nm处吸光度变化0.01所需酶量为一个酶活单位。5.叶瘟病的调查：水稻抽穗期之后，每小区五点取样，每点取50株，进行病情分级调查。6.穗颈瘟病的调查：水稻抽穗期之后，每小区平行跳跃式调查50株，分级调查总穗数和病穗数。7.病情指数和防治效果计算：实施例1(1)海藻酸钠寡糖制备：取1千克海藻酸钠，用100升的水溶解，加入10升30％浓度的过氧化氢，80℃，反应90分钟，冷冻干燥48小时，研磨成粉。(2)海藻酸钠寡糖溶液配制：取100克制备好的海藻酸钠寡糖，溶于400升的水中，制成溶液。(3)喷施：海藻酸钠寡糖溶液在辽宁大连试验田水稻幼苗长到四叶一心，约15-20cm高时进行喷施，喷施用量为海藻酸钠寡糖溶液的体积(ml)：水稻面积(m2)＝100:1。由表1可知，经过海藻酸钠寡糖溶液喷洒处理，水稻幼苗中包括苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、过氧化氢酶在内的防御酶活性明显高于对照，由表2可知，此方法处理后的水稻，在生长后期叶瘟和颈穗瘟的病情指数明显低于对照，海藻酸钠寡糖对叶瘟和穗颈瘟的防治效果明显。实施例2(1)海藻酸钠寡糖制备：取1千克海藻酸钠，用100升的水溶解，加入10升30％浓度的过氧化氢，80℃，反应90分钟，冷冻干燥48小时，研磨成粉。(2)海藻酸钠寡糖溶液配制：取100克制备好的海藻酸钠寡糖，溶于1000升的水中，制成溶液。(3)喷施：海藻酸钠寡糖溶液在辽宁大连试验田水稻幼苗长到四叶一心，约15-20cm高时进行喷施，喷施用量为海藻酸钠寡糖溶液的体积(ml)：水稻面积(m2)＝1000:1。由表1可知，经过海藻酸钠寡糖溶液喷洒处理，水稻幼苗中包括苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、过氧化氢酶在内的防御酶活性明显高于对照，由表2可知，此方法处理后的水稻，在生长后期叶瘟和颈穗瘟的病情指数明显低于对照，海藻酸钠寡糖对叶瘟和穗颈瘟的防治效果明显。实施例3(空白样)喷水：在辽宁大连试验田水稻幼苗长到四叶一心，约15-20cm高时进行常规喷水处理。表1海藻酸钠寡糖对水稻幼苗叶片防御酶的影响表2海藻酸钠寡糖对水稻稻瘟病的防治效果检测指标实施例3实施例1实施例2叶瘟病情指数4.682.953.48叶瘟防治效果-36.97％25.64％颈穗瘟病情指数12.788.759.26颈穗瘟防治效果-31.54％27.54％对于任何熟悉本领域的技术人员而言，在不脱离本发明技术方案范围情况下，都可利用上述揭示的技术内容对本发明技术方案作出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均应仍属于本发明技术方案保护的范围内。当前第1页12