本发明涉及植物繁殖技术领域，具体涉及一种建兰与火焰兰属间杂交快速高效培育兰花新品种的方法。
背景技术：
兰花是风靡世界的名贵花卉，是世界上栽培最广、销售量最大的花卉种类之一，近年来发展尤为迅速，每年以10％以上的速度增长，目前全世界兰花的年消费额已超过40亿美元。荷兰、泰国、新加坡、美国、韩国、日本等是兰花产业较发达的国家，泰国是洋兰最大的出口国。目前生产的兰花多为蝴蝶兰、石斛兰和卡特兰等洋兰，具有中国传统特色的国兰则规模不大。
建兰是国兰一种，国兰是我国的传统铭花，观赏价值和经济价值极高，通常指兰科兰属植物中的一部分地生种，一般包括建兰(cymbidiumensifolium)、春兰(c.goeringii)、蕙兰(c.faberi)、墨兰(c.sinense)、寒兰(c.kanran)、莲瓣兰(c.tortis塑料alum)、春剑7个种。国兰淡雅幽香，被誉为“花中君子”，备受文人雅客赏识，在我国已有两千多年的栽培历史，并形成独特的兰文化，国兰在东南亚国家也十分流行。建兰历史悠久、品种丰富、具有良好的观赏性和经济文化价值。
建兰(cymbidiumemiflohtm)为地生植物，假鱗茎卵球形，包藏于叶基之内。叶2至6枚，带形，有光泽，长30～60厘米，宽1～2.5厘米。花亭从假鱗茎基部发出，直立，一般短于叶；总状花序具3～9朵花；花常有香气，色泽变化较大，通常为浅黄绿色而具紫斑；弯片近狭长圆形或狭椭圆形；花瓣狭椭圆形或狭卵状椭圆形，长1.4～2.5厘米，宽5～8厘米，近平展；唇瓣近卵形，长1.5～2.3厘米，略3裂。葫果狭椭圆形，长5～6厘米，宽约2厘米。花期通常为6～10月。
火焰兰属(reanathera)植物全世界约有21种，为附生或半附生植物，分布于东南亚至喜马拉雅地区，包括华南地区，我国原产3种。我国产的3种火焰兰其中1种ren.coccinea产广东，海南地区，植株高大生长健旺，2种(ren.imschootiana和ren.sinica)产云南。火焰兰生长健旺，花色艳丽，花数众多，远观如火焰般绚丽，具有很高的园艺应用价值和育种价值，是国际花卉市场上十分流行的高档花卉，在世界上具有大量的爱好者。
杂交育种是培育兰花新品种的有效手段，将建兰与火焰兰进行杂交，有望培育出具有香味又有更多色彩变化的兰花新品种，但是两者为不同属，且建兰自然开花期为6～10月，而火焰兰的自然开花期为3～5月，其杂交成功需要解决花期不遇及远缘杂交亲和性不高的瓶颈问题，以及新品种的遗传稳定性、一致性和特异性的关键问题。目前，国内已有兰花杂交育种、花粉保存、胚拯救等的论文报道，但未见建兰与火焰兰属间杂交培育新品种的方法报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于开发出一种快速高效培育建兰与火焰兰杂交的兰花新品种的方法，解决兰花杂交育种中远缘杂交成功率低、育种周期长的问题。
本发明选择具明显特性观赏价值高的建兰作为杂交母本，在母本花朵展开后2～4天内进行人工授粉，父本则是采用无菌低温保存的具生活力的具明显特性观赏价值高的火焰兰的花粉。授粉成功得到的果实在发育到一定时间后进行无菌播种，促进杂种胚发育成为单个根状茎，再通过单个根状茎的克隆增殖技术扩大其群体，分化成苗后进行移栽和栽培至开花植株，同时建立新品系的无性繁殖技术体系，最后通过新品种的审定获得新品种证书，从而实现了本发明的目的。
本发明方法采用无菌低温保存兰花花粉、授粉前对花粉进行解冷和回湿处理等技术，解决花粉保存时的霉变问题以及兰花属间杂交花期不遇的瓶颈问题，利用胚拯救培养技术解决属间远缘杂交杂种胚发育不良的关键问题，通过单个杂种胚无菌培养发育为根状茎后进行相对应的根状茎克隆增殖培养，避免传统杂交育种年限长的缺点，可快速高效培育出兰花新品种。
本发明是通过以下技术方案予以实现的：
一种建兰与火焰兰属间杂交快速高效培育兰花新品种的方法，包括以下步骤：
(1)花粉收集及保存：在父本火焰兰单花花瓣刚展开时，应用灭菌的挑取工具挑掉兰花的药帽，再用灭菌的挑取工具将兰花花粉块挑至洁净无菌的容器中密封好，置于4～6℃避光保存；
(2)人工授粉及杂交果实培育：当母本建兰开花时，将步骤(1)保存的花粉块在室温条件下解冻20～30min，然后再加入无菌水进行回湿处理20～30min，得到具有活力的花粉；将具有活力的花粉授粉于母本建兰的花朵柱头上，进行杂交蒴果的培育；
(3)杂种胚培养发育为根状茎：当杂交蒴果发育至180～200天，采摘杂交果实，经消毒后切开杂交果实，将粉末状杂种胚接种至胚拯救培养基中进行无菌培养80～100天，得到根状茎，所述的胚拯救培养基每升含硝酸铵160～200mg、磷酸二氢钾80～100mg、氯化钾160～200mg、硫酸镁80～100mg、硝酸钙80～100mg、硫酸锌1～3mg、硼酸1～3mg、硫酸锰0.1～0.5mg、硫酸铜0.03～0.05mg、氯化镍0.03～0.05mg、碘化钾0.01～0.05mg、硫酸亚铁16～20mg、维生素c30～50mg、烟酸8～10mg、盐酸硫胺素3～5mg、盐酸吡哆醇0.3～0.5mg、谷氨酸0.3～0.5mg、钴胺素0.5～1mg、6-苄基嘌呤0.05～0.1mg、萘乙酸0.2～0.5mg、椰子汁50～100ml、香蕉泥50～80g、蔗糖15～30g、琼脂6～7g，余量为水，ph5.4～5.6；
(4)根状茎增殖：将步骤(3)得到的单个根状茎转移至增殖培养基中进行克隆增殖培养50～60天，得到遗传稳定一致的根状茎群体，所述的增殖培养基每升含硝酸铵160～200mg、磷酸二氢钾80～100mg、氯化钾160～200mg、硫酸镁80～100mg、硝酸钙80～100mg、硫酸锌1～3mg、硼酸1～3mg、硫酸锰0.1～0.5mg、硫酸铜0.03～0.05mg、氯化镍0.03～0.05mg、碘化钾0.01～0.05mg、硫酸亚铁16～20mg、维生素c30～50mg、烟酸8～10mg、盐酸硫胺素3～5mg、盐酸吡哆醇0.3～0.5mg、谷氨酸0.3～0.5mg、钴胺素0.5～1mg、肌醇80～120mg、萘乙酸0.2～2.0mg、苄氨基腺嘌呤0.5～3.0mg、活性炭1～2.0g、香蕉50～150g、蔗糖10～20g、琼脂5～6g，余量为水，ph5.5～5.7：
(5)根状茎分化培养：将步骤(4)得到的根状茎群体转移至分化培养基中进行分化培养，直至类原球茎分化形成高3～5cm的不定芽，所述的分化培养基每升含花宝1号1～2g、花宝2号1～2g、硫酸亚铁20～40mg、乙二胺四乙酸二钠20～40mg、蛋白胨0.5～2g、香蕉泥50～80g、活性碳50～100mg、肌醇80～120mg、甘氨酸1.5～2.5mg、盐酸硫胺素0.05～0.2mg、盐酸吡哆醇0.4～0.8mg、烟酸0.4～0.8mg、6-苄基嘌呤3.0～5.0mg、萘乙酸0.4～0.5mg、蔗糖20～30g、琼脂6～7g，余量为水，ph5.4～5.6；
(6)不定芽生根成苗培养：将步骤(5)得到的不定芽转移至生根壮苗培养基中进行成苗培养，所述的生根壮苗培养基每升含花宝1号1～2g、花宝2号1～2g、硫酸亚铁20～40mg、乙二胺四乙酸二钠20～40mg、蛋白胨0.5～2g、土豆泥50～60g、活性碳500～1000mg、肌醇80～120mg、甘氨酸1.5～2.5mg、盐酸硫胺素5～10mg、盐酸吡哆醇0.5～1.0mg、烟酸5～10mg、萘乙酸0.5～1.0mg、蔗糖15～30g、琼脂6～7g，余量为水，ph5.4～5.6；
(7)成苗移栽及栽培：待不定芽长至高5～8cm的成苗时，转移到自然光下炼苗10～20天，然后移入兰石：木屑：树皮体积比为1:1:1的混合基质中培育，得到建兰与火焰兰属间杂交品种。
所述步骤(3)的在胚拯救培养基中进行无菌培养，其培养条件为：培养温度24～28℃，光照度1500～2000lx，光照12h/d。
所述步骤(4)的在增殖培养基中进行增殖培养，其培养条件为：培养温度24～28℃，光照度1500～2000lx，光照12h/d。
所述步骤(5)的在分化培养基中进行分化培养，其培养条件为：培养温度为25～29℃，光照度2000～3000lx，光照12h/d。
所述步骤(6)的在生根壮苗培养基中进行成苗培养，其培养条件为：培养温度为25～29℃，光照度2000～3000lx，光照12h/d。
本发明还提供了一种建兰与火焰兰属间杂交种的无性繁殖方法，具体的，包括以下步骤：
(1)以上述成苗作材料，切取成苗株系的嫩芽，进行消毒，将消毒后的嫩芽放置于根状茎诱导培养基gb1中，在26±2℃下黑暗培养7～10d，然后在光照强度1000～2000lx，光照时间10h/d，培养温度26±2℃，培养90～100天，诱导出根状茎，所述的根状茎诱导培养基gb1每升含花宝1号1～2g、花宝2号1～2g、硫酸亚铁20～40mg、乙二胺四乙酸二钠20～40mg、蛋白胨0.5～2g、椰子汁50～100ml、肌醇80～120mg、甘氨酸1.5～2.5mg、盐酸硫胺素0.05～0.2mg、盐酸吡哆醇0.4～0.8mg、烟酸0.4～0.8mg、6-苄基嘌呤0.5～1.0mg、萘乙酸1.0～2.0mg、活性炭0.5～1.0g、蔗糖15～30g、琼脂6～7g，余量为水，ph5.4～5.6；
(2)获得根状茎后，重复上述建兰与火焰兰属间杂交快速高效培育兰花新品种的方法中的根状茎增殖、根状茎分化、不定芽生根成苗、成苗移栽及栽培的过程，完成新品系的无性繁殖。
与现有技术相比，本发明的创新性和有益效果在于：
(1)本发明利用无菌低温保存兰花花粉、授粉前对花粉进行解冷和回湿处理等技术，解决花粉保存时的霉变问题以及兰花属间杂交花期不遇的瓶颈问题。
(2)本发明利用胚拯救培养技术培养基中的丰富的营养成分及外源激素能满足杂种胚发育生长的需要从而(杂种胚培养发育为根状茎)解决属间远缘杂交杂种胚发育不良的关键问题，促进杂种胚发育为根状茎。
(3)本发明通过单个杂种胚无菌培养发育为根状茎后进行对应的根状茎克隆增殖培养，通过根状茎的分化、成苗培养可繁殖出大量的遗传稳定的一致的杂交新品系，杂交至培育出兰花新品种只需4～6年，传统兰花杂交培育出新品种往往需要8～10年，避免传统杂交育种需要进行回交纯化繁复程序、育种年限长的缺点，可快速培育出兰花新品种。
(4)本发明每个杂种胚都可以培育成一个新品种，育种效率高。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。实施例中使用的花宝1号(hyponex1)、花宝2号(hyponex2)为美国生产中国台湾台和园艺企业股份有限股份有限公司分装产品。
实施例1
(1)火焰兰花粉收集及保存：
a、挑取工具及存放器皿的准备：用300ml的玻璃瓶分别装进用于挑取花粉块的牙签及存放花粉块的1ml塑料管，盖上盖子，于121℃条件下进行灭菌30分钟后备用。
b、火焰兰(父本)于3月初开花，在其单花花瓣刚展开时，于上午8～9时应用已灭菌的牙签轻轻挑掉花的药帽，再用牙签将花粉块粘连在牙签尖上并迅速将花粉块放至洁净无菌的1ml塑料管内，每管放入1朵花的花粉块，将放置了花粉块的塑料管再用一个无菌的玻璃瓶集中装起来并密封好，置于4℃避光保存。
(2)人工授粉及杂交果实培育：当建兰(母本)于8月初开花时，将步骤(1)保存的火焰兰花粉进行解冷和回湿处理，以恢复和提高花粉的生活力。先将低温保存的火焰兰花粉在室温条件下解冻20min，然后再往放置花粉块的塑料管内加几滴无菌水进行回湿处理20min，最后采用氯化三苯四氮唑染色法测定花粉生活力，染色率达83％，确定花粉有活力，将其授粉于母本建兰已开放2～3天的花朵的柱头上。授粉后套袋，约1星期后去袋，要挂上标签，标签上具有父、母本名称、杂交日期和授粉人等信息。注意观察其发育情况，统计授粉的成功率，结实率达85％以上。成功进行杂交授粉后，加强母本建兰植株的肥水管理，保证杂交蒴果的正常发育。注意观察杂交蒴果的发育情况，等果实发育至180天后即可采集进行无菌播种。
(3)杂种胚培养发育为根状茎：当杂交蒴果发育至180天后，采摘杂交果实，经消毒(将兰花蒴果在体积分数70％乙醇溶液中浸泡15～30s，再用质量分数0.1％升汞溶液消毒15～20min，无菌水冲洗4～5次，用无菌滤纸吸干蒴果表面的水分)后切开杂交果实，将粉末状杂种胚接种至胚拯救培养基中，在培养温度24℃，光照度1500lx，光照12h/d的条件下进行无菌培养60天后可见杂种胚膨大转绿，培养80天时单个杂种胚可萌发形成单个根状茎，所述的胚拯救培养基每升含硝酸铵160mg、磷酸二氢钾80mg、氯化钾160mg、硫酸镁80mg、硝酸钙80mg、硫酸锌1mg、硼酸1mg、硫酸锰0.1mg、硫酸铜0.03mg、氯化镍0.03mg、碘化钾0.01mg、硫酸亚铁(feso4.7h2o)16mg、维生素c30mg、烟酸8mg、盐酸硫胺素(vb1)3mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.3mg、谷氨酸0.3mg、钴胺素0.5mg、6-苄基嘌呤0.05mg、萘乙酸(naa)0.2mg、椰子汁50ml、香蕉泥50g、蔗糖15g、琼脂6g，余量为水，调ph5.4，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(4)根状茎增殖：将步骤(3)得到的单个根状茎转移至单个根状茎增殖培养基中进行克隆增殖培养，继代周期为50天，每个根状茎一个编号分开培养，进行根状茎增殖，经过4～8次继代增殖培养，每一个编号的根状茎可增殖出1000～400000个遗传稳定一致的根状茎群体，所述的根状茎增殖培养基每升含硝酸铵160mg、磷酸二氢钾80mg、氯化钾160mg、硫酸镁80mg、硝酸钙80mg、硫酸锌1mg、硼酸1mg、硫酸锰0.1mg、硫酸铜0.03mg、氯化镍0.03mg、碘化钾0.01mg、硫酸亚铁16mg、维生素c30mg、烟酸8mg、盐酸硫胺素3mg、盐酸吡哆醇0.3mg、谷氨酸0.3mg、钴胺素0.5mg、肌醇80mg、萘乙酸0.2mg、苄氨基腺嘌呤0.5mg、活性炭1g、香蕉50g、蔗糖10g、琼脂5g，余量为水，ph5.5，培养条件为培养温度28℃，光照度2000lx，光照12h/d。
(5)根状茎分化培养：将步骤(4)得到的根状茎群体转移至分化培养基中，在培养温度为25℃，光照度2000lx，光照12h/d的条件下进行分化培养45天后，根状茎群体在培养基上分化形成高3～5cm的不定芽，此不定芽材料编号对应其根状茎编号。所述的分化培养基每升含花宝1号1g、花宝2号1g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)20mg、乙二胺四乙酸二钠(edta-2na)20mg、蛋白胨0.5g、香蕉泥50g、活性碳50mg、肌醇80mg、甘氨酸1.5mg、盐酸硫胺素(vb1)0.05mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.4mg、烟酸0.4mg、6-苄基嘌呤3.0mg、萘乙酸(naa)0.4mg、蔗糖20g、琼脂6g，余量为水，调ph5.4，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(6)不定芽生根成苗培养：将步骤(5)得到的高3～5cm的不定芽转移至生根壮苗培养基中，在培养温度为25℃，光照度2000lx，光照12h/d的条件下进行成苗培养60天，苗高可达到5～8cm，根数3～5条，生根率为100％以上。成苗编号对应其不定芽编号。所述的生根壮苗培养基每升含花宝1号1g、花宝2号1g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)20mg、乙二胺四乙酸二钠(edta-2na)20mg、蛋白胨0.5g、土豆泥50g、活性碳500mg、肌醇80mg、甘氨酸1.5mg、盐酸硫胺素(vb1)5mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.5mg、烟酸5mg、萘乙酸(naa)0.5mg、蔗糖15g、琼脂6g，余量为水，调ph5.4，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(7)成苗移栽及栽培：待不定芽长至苗高5～8cm的成苗时，将培养瓶转移到自然光下炼苗10天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入兰石：木屑：树皮体积比为1:1:1的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，移栽的成活率均可达90％以上，得到建兰与火焰兰属间杂交品种。30d左右成活后的植株能产生新的根系，此时可移入大棚进行正常水、肥、药管理。
实施例2
(1)火焰兰花粉收集及保存：
a、挑取工具及存放器皿的准备：用300ml的玻璃瓶分别装进用于挑取花粉块的牙签及存放花粉块的1ml塑料管，盖上盖子，于121℃条件下进行灭菌30分钟后备用。
b、火焰兰(父本)于3月初开花，在其单花花瓣刚展开时，于上午8～9时应用已灭菌的牙签轻轻挑掉花的药帽，再用牙签将花粉块粘连在牙签尖上并迅速将花粉块放至洁净无菌的1ml塑料管内，每管放入1朵花的花粉块，将放置了花粉块的塑料管再用一个无菌的玻璃瓶集中装起来并密封好，置于6℃避光保存。
(2)人工授粉及杂交果实培育：当建兰(母本)于8月初开花时，将步骤(1)保存的火焰兰花粉进行解冷和回湿处理，以恢复和提高花粉的生活力。先将低温保存的火焰兰花粉在室温条件下解冻30min，然后再往放置花粉块的塑料管内加几滴无菌水进行回湿处理30min，最后采用氯化三苯四氮唑染色法测定花粉生活力，染色率达83％，确定花粉有活力，将其授粉于母本建兰已开放2～3天的花朵的柱头上。授粉后套袋，约1星期后去袋，要挂上标签，标签上具有父、母本名称、杂交日期和授粉人等信息。注意观察其发育情况，统计授粉的成功率，结实率达85％以上。成功进行杂交授粉后，加强母本建兰植株的肥水管理，保证杂交蒴果的正常发育。注意观察杂交蒴果的发育情况，等果实发育至200天后即可采集进行无菌播种。
(3)杂种胚培养发育为根状茎：当杂交蒴果发育至200天后，采摘杂交果实，经消毒(将兰花蒴果在体积分数70％乙醇溶液中浸泡15～30s，再用质量分数0.1％升汞溶液消毒15～20min，无菌水冲洗4～5次，用无菌滤纸吸干蒴果表面的水分)后切开杂交果实，将粉末状杂种胚接种至胚拯救培养基中，在培养温度28℃，光照度2000lx，光照12h/d的条件下进行无菌培养60天后可见杂种胚膨大转绿，培养100天时单个杂种胚可萌发形成单个根状茎，所述的胚拯救培养基每升含硝酸铵200mg、磷酸二氢钾100mg、氯化钾200mg、硫酸镁100mg、硝酸钙100mg、硫酸锌3mg、硼酸3mg、硫酸锰0.5mg、硫酸铜0.05mg、氯化镍0.05mg、碘化钾0.05mg、硫酸亚铁(feso4.7h2o)20mg、维生素c50mg、烟酸10mg、盐酸硫胺素(vb1)5mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.5mg、谷氨酸0.5mg、钴胺素1mg、6-苄基嘌呤0.1mg、萘乙酸(naa)0.5mg、椰子汁100ml、香蕉泥80g、蔗糖30g、琼脂7g，余量为水，调ph5.6，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(4)根状茎增殖：将步骤(3)得到的单个根状茎转移至单个根状茎增殖培养基中进行克隆增殖培养，继代周期为60天，每个根状茎一个编号分开培养，进行根状茎增殖，经过4～8次继代增殖培养，每一个编号的根状茎可增殖出1000～400000个遗传稳定一致的根状茎群体，所述的根状茎增殖培养基每升含硝酸铵200mg、磷酸二氢钾100mg、氯化钾200mg、硫酸镁100mg、硝酸钙100mg、硫酸锌3mg、硼酸3mg、硫酸锰0.5mg、硫酸铜0.05mg、氯化镍0.05mg、碘化钾0.05mg、硫酸亚铁20mg、维生素c50mg、烟酸10mg、盐酸硫胺素5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、谷氨酸0.5mg、钴胺素1mg、肌醇120mg、萘乙酸2.0mg、苄氨基腺嘌呤3.0mg、活性炭2.0g、香蕉150g、蔗糖20g、琼脂6g，余量为水，ph5.7，其培养条件为培养温度24℃，光照度1500lx，光照12h/d。
(5)根状茎分化培养：将步骤(4)得到的根状茎群体转移至分化培养基中，在培养温度为29℃，光照度3000lx，光照12h/d的条件下进行分化培养45天后，根状茎群体在培养基上分化形成高3～5cm的不定芽，此不定芽材料编号对应其根状茎编号。所述的分化培养基每升含花宝1号2g、花宝2号2g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)40mg、乙二胺四乙酸二钠40mg、蛋白胨2g、香蕉泥80g、活性碳100mg、肌醇120mg、甘氨酸2.5mg、盐酸硫胺素(vb1)0.2mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.8mg、烟酸0.8mg、6-苄基嘌呤5.0mg、萘乙酸(naa)0.5mg、蔗糖30g、琼脂7g，余量为水，调ph5.6，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(6)不定芽生根成苗培养：将步骤(5)得到的高3～5cm的不定芽转移至生根壮苗培养基中，在培养温度为29℃，光照度3000lx，光照12h/d的条件下进行成苗培养60天，苗高可达到5～8cm，根数3～5条，生根率为100％以上。成苗编号对应其不定芽编号。所述的生根壮苗培养基每升含花宝1号2g、花宝2号2g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)40mg、乙二胺四乙酸二钠40mg、蛋白胨2g、土豆泥60g、活性碳1000mg、肌醇120mg、甘氨酸2.5mg、盐酸硫胺素(vb1)10mg、盐酸吡哆醇(vb6)1.0mg、烟酸10mg、萘乙酸(naa)1.0mg、蔗糖30g、琼脂7g，余量为水，调ph5.6，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(7)成苗移栽及栽培：待不定芽长至苗高5～8cm的成苗时，将培养瓶转移到自然光下炼苗20天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入兰石：木屑：树皮体积比为1:1:1的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，移栽的成活率均可达90％以上，得到建兰与火焰兰属间杂交品种。30d左右成活后的植株能产生新的根系，此时可移入大棚进行正常水、肥、药管理。
实施例3
(1)以实施例1的不定芽长至苗高5～8cm的成苗作材料，切取成苗株系的嫩芽，进行消毒(嫩芽→干燥棉花擦拭1次→75％乙醇浸泡的棉花擦拭1次→去除多余叶片并将其切成小段，每段包含一个芽点→75％乙醇充分浸泡30s→无菌水清洗3次→0.1％hgcl2充分浸泡4～6min→无菌水冲洗3次→吹干多余水分后剥去苞叶→0.1％hgcl2充分1～2min→吹干多余水分)，将消毒后的嫩芽放置于根状茎诱导培养基gb1中，在26±2℃下黑暗培养7d，然后在光照强度1000lx，光照时间10h/d，培养温度26±2℃，培养90天，诱导出根状茎，所述的根状茎诱导培养基gb1每升含花宝1号1g、花宝2号1g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)20mg、乙二胺四乙酸二钠20mg、蛋白胨0.5g、椰子汁50ml、肌醇80mg、甘氨酸1.5mg、盐酸硫胺素(vb1)0.05mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.4mg、烟酸0.4mg、6-苄基嘌呤0.5mg、萘乙酸(naa)1.0mg、活性炭0.5g、蔗糖15g和琼脂6g，余量为水，调ph5.4，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(2)根状茎增殖：将步骤(1)得到的单个根状茎转移至单个根状茎增殖培养基中进行克隆增殖培养，继代周期为55天，每个根状茎一个编号分开培养，进行根状茎增殖，经过4～8次继代增殖培养，每一个编号的根状茎可增殖出1000～400000个遗传稳定一致的根状茎群体，所述的根状茎增殖培养基每升含硝酸铵180mg、磷酸二氢钾90mg、氯化钾180mg、硫酸镁90mg、硝酸钙90mg、硫酸锌2mg、硼酸2mg、硫酸锰0.2mg、硫酸铜0.04mg、氯化镍0.04mg、碘化钾0.03mg、硫酸亚铁18mg、维生素c40mg、烟酸9mg、盐酸硫胺素4mg、盐酸吡哆醇0.4mg、谷氨酸0.4mg、钴胺素0.8mg、肌醇100mg、萘乙酸1mg、苄氨基腺嘌呤2mg、活性炭1.5g、香蕉80g、蔗糖15g、琼脂5g，余量为水，ph5.7，其培养条件为培养温度26℃，光照度1800lx，光照12h/d。
(3)根状茎分化培养：将步骤(2)得到的根状茎群体转移至分化培养基中，在培养温度为28℃，光照度2500lx，光照12h/d的条件下进行分化培养45天后，根状茎群体在培养基上分化形成高3～5cm的不定芽，此不定芽材料编号对应其根状茎编号。所述的分化培养基每升含花宝1号1.5g、花宝2号1.5g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)30mg、乙二胺四乙酸二钠30mg、蛋白胨1g、香蕉泥65g、活性碳75mg、肌醇100mg、甘氨酸2mg、盐酸硫胺素(vb1)0.1mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.6mg、烟酸0.6mg、6-苄基嘌呤4.0mg、萘乙酸(naa)0.45mg、蔗糖25g、琼脂6.5g，余量为水，调ph5.5，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(4)不定芽生根成苗培养：将步骤(3)得到的高3～5cm的不定芽转移至生根壮苗培养基中，在培养温度为28℃，光照度2500lx，光照12h/d的条件下进行成苗培养60天，苗高可达到5～8cm，根数3～5条，生根率为100％以上。成苗编号对应其不定芽编号。所述的生根壮苗培养基每升含花宝1号1.5g、花宝2号1.5g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)30mg、乙二胺四乙酸二钠30mg、蛋白胨1g、土豆泥55g、活性碳800mg、肌醇100mg、甘氨酸2mg、盐酸硫胺素(vb1)8mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.8mg、烟酸8mg、萘乙酸(naa)0.8mg、蔗糖20g、琼脂6.5g，余量为水，调ph5.5，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(5)成苗移栽及栽培：待不定芽长至苗高5～8cm时，将培养瓶转移到自然光下炼苗20天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入兰石：木屑：树皮体积比为1:1:1的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，移栽的成活率均可达90％以上，得到建兰与火焰兰属间杂交品种。30d左右成活后的植株能产生新的根系，此时可移入大棚进行正常水、肥、药管理。
实施例4
(1)以不定芽长至苗高5～8cm的成苗作材料，切取成苗株系的嫩芽，进行消毒(嫩芽→干燥棉花擦拭1次→75％乙醇浸泡的棉花擦拭1次→去除多余叶片并将其切成小段，每段包含一个芽点→75％乙醇充分浸泡30s→无菌水清洗3次→0.1％hgcl2充分浸泡4～6min→无菌水冲洗3次→吹干多余水分后剥去苞叶→0.1％hgcl2充分1～2min→吹干多余水分)，将消毒后的嫩芽放置于根状茎诱导培养基gb1中，在26±2℃下黑暗培养10d，然后在光照强度2000lx，光照时间10h/d，培养温度26±2℃，培养100天，诱导出根状茎，所述的根状茎诱导培养基gb1每升含花宝1号2g、花宝2号2g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)40mg、乙二胺四乙酸二钠40mg、蛋白胨2g、椰子汁100ml、肌醇120mg、甘氨酸2.5mg、盐酸硫胺素(vb1)0.2mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.8mg、烟酸0.8mg、6-苄基嘌呤1.0mg、萘乙酸(naa)2.0mg、活性炭1.0g、蔗糖30g和琼脂7g，余量为水，调ph5.6，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(2)根状茎增殖：将步骤(1)得到的单个根状茎转移至单个根状茎增殖培养基中进行克隆增殖培养，继代周期为60天，每个根状茎一个编号分开培养，进行根状茎增殖，经过4～8次继代增殖培养，每一个编号的根状茎可增殖出1000～400000个遗传稳定一致的根状茎群体，所述的根状茎增殖培养基每升含硝酸铵160mg、磷酸二氢钾100mg、氯化钾160mg、硫酸镁80mg、硝酸钙100mg、硫酸锌3mg、硼酸3mg、硫酸锰0.4mg、硫酸铜0.04mg、氯化镍0.03mg、碘化钾0.03mg、硫酸亚铁18mg、维生素c40mg、烟酸9mg、盐酸硫胺素4mg、盐酸吡哆醇0.4mg、谷氨酸0.3mg、钴胺素0.8mg、肌醇90mg、萘乙酸1.5mg、苄氨基腺嘌呤1.5mg、活性炭1g、香蕉90g、蔗糖15g、琼脂5g，余量为水，ph5.7，其培养条件为培养温度26℃，光照度1500lx，光照12h/d。
(3)根状茎分化培养：将步骤(2)得到的根状茎群体转移至分化培养基中，在培养温度为29℃，光照度3000lx，光照12h/d的条件下进行分化培养45天后，根状茎群体在培养基上分化形成高3～5cm的不定芽，此不定芽材料编号对应其根状茎编号。所述的分化培养基每升含花宝1号1.5g、花宝2号1.5g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)40mg、乙二胺四乙酸二钠30mg、蛋白胨1.5g、香蕉泥70g、活性碳90mg、肌醇100mg、甘氨酸2.5mg、盐酸硫胺素(vb1)0.2mg、盐酸吡哆醇(vb6)0.8mg、烟酸0.5mg、6-苄基嘌呤4.0mg、萘乙酸(naa)0.5mg、蔗糖30g、琼脂7g，余量为水，调ph5.6，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(4)不定芽生根成苗培养：将步骤(3)得到的高3～5cm的不定芽转移至生根壮苗培养基中，在培养温度为29℃，光照度3000lx，光照12h/d的条件下进行成苗培养60天，苗高可达到5～8cm，根数3～5条，生根率为100％以上。成苗编号对应其不定芽编号。所述的生根壮苗培养基每升含花宝1号2g、花宝2号1g、硫酸亚铁(feso4.7h2o)30mg、乙二胺四乙酸二钠30mg、蛋白胨1.5g、土豆泥60g、活性碳700mg、肌醇90mg、甘氨酸2.5mg、盐酸硫胺素(vb1)8mg、盐酸吡哆醇(vb6)1.0mg、烟酸8mg、萘乙酸(naa)0.5mg、蔗糖20g、琼脂7g，余量为水，调ph5.6，其制备方法是将所有成分按其含量混合均匀，调ph值，灭菌消毒即可。
(5)成苗移栽及栽培：待不定芽长至苗高5～8cm时，将培养瓶转移到自然光下炼苗20天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入兰石：木屑：树皮体积比为1:1:1的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，移栽的成活率均可达90％以上，得到建兰与火焰兰属间杂交品种。30d左右成活后的植株能产生新的根系，此时可移入大棚进行正常水、肥、药管理。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。