一种苹果砧木组培苗无根快速移栽方法与流程

本发明涉及组织培养技术领域，具体涉及一种一种苹果砧木组培苗无根快速移栽方法。

背景技术：

优良的苹果砧木是苹果优质高产的基础。组培技术可有效降低苹果病害，短时间内供应大量优良苗木满足市场需求。苹果属植物组织培养技术较难，影响了组培苗在生产推广中的应用。组培苗高效离体再生与生根是组培快繁技术的关键步骤，能否生根以及生根好坏直接影响成苗。

组培苗的生根一般采用扦插的方式进行，普通扦插一般将组培苗切下，蘸取少量生根剂或直接插入栽培基质，这种方式组培苗的成活率往往较低，可能是因为短时间的生根剂处理起不到诱导生根的目的，即使有植株能够成活，一般也属偶然现象，当然，也不排除有些砧木因其本身特性，不用经过任何处理，茎段直接扦插入栽培基质都能获得极高的成活率，比如圆叶苹果砧木，可以不经任何处理，只需保持合适的温、湿度便可直接扦插成活，这和植物本身的易扦插繁殖特性有关，但极大多数的苹果砧木材料用这种直接扦插的方法，其成活率是非常低的。

现有的组培苗生根移栽方法中，每种类型的苹果砧木，其最适宜的生根培养基中的各激素浓度配比通常是不一样的，也就是说，每种苹果砧木对应一种最佳生根诱导培养基，多种苹果砧木就需要有多种生根培养基，而且在20～30天的生根过程中可能会出现生根不佳、植株顶芽停长等问题，这些都会影响后续的移栽成活率。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种苹果砧木组培苗无根快速移栽方法，用以解决现有技术中生根时间较长以及移栽生活率低的问题。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种苹果砧木组培苗无根快速移栽方法，所述方法包括：将苹果砧木已萌动枝条经过生芽培养和增殖培养后，切取高度2-4cm左右的植株，转入生根诱导培养基中在25℃温度条件下黑暗诱导培养4d，然后快速转入泥炭基质中遮荫培养；移栽一周后移除遮阳网，并逐步掀开塑料膜通风透气降低环境湿度，两周后保湿膜全部移除；移栽18-22天有3-4片新叶长出，至此，组培苗移栽完成。

其中，优选地，所述生芽培养具体步骤为：将苹果砧木已萌动枝条在超净工作台内消毒处理，后接种于生芽培养基ms+6-ba0.2mg/l+naa0.05mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6g/l上诱导腋芽或顶芽萌发，25℃，光照强度2000lux培养18～22d获得无菌芽。

优选地，所述生增殖培养具体步骤为：超净工作台内，将无菌芽转接于增殖培养基ms+6-ba0.5mg/l+naa0.05mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6g/l上，25℃，光照强度2000lux，于组培瓶内培养22～28d；

优选地，所述生根诱导培养基为1/2ms+iba2.0mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6g/l。本发明的生根诱导培养基对于试验过的多种苹果砧木均适用，这也是和普通的苹果砧木组培苗生根移栽方法不同的地方。

优选地，所述泥炭基质在装入栽培箱之前，用质量分数为70％的百菌清可湿性粉剂拌匀进行消毒处理，浇透水备用。

本发明具有如下优点：

本发明最主要的发明点在于组培苗经4d黑暗诱导生根后，经过观察发现此时只有根原基形成，但在实际培养过程中，无需后续生根、炼苗等步骤，而是直接移栽入栽培基质中培养，这也是本发明与普通扦插和通常的生根移栽最本质的区别所在。

我们这种经处理1/2ms+iba2.0mg/l黑暗诱导培养4d后直接扦插在生根诱导培养基1/2ms+iba2.0mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6g/l上培养的移栽方法，可以以不变应万变，目前为止，所实验过的me、m26、唐木田、jm7等几种试验材料在经过此处理后，其成活率均保持在80％以上。计算下来，本发明至少可节约时间25天左右，极大地提高了苹果砧木组培苗的移栽效率。

本发明在基质选择上，通过实验，从成活率及植株各性状等方面综合考虑，选择出最佳的栽培基质是泥炭。

附图说明

图1是me的三个处理在栽培基质①上的生长状况；

图中，处理①对应右边三列植株、处理②对应中间三列植株、处理③对应左边两列植株。

图2是处理①在三种栽培基质上的生长状况；

图中，右边为基质①上植株、中间为基质②上植株、左边为基质③上植株；

图3是经处理①的me根原基及初生新根。

图4是经处理①的m26根原基。

图5是经处理①的砧木jm7移栽成活情况。

具体实施方式

下面将通过具体实施例来对本发明进行进一步的解释，然而应当理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本发明，并且能够将本发明的范围完整的传达给本领域的技术人员。

如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本发明的较佳实施方式，然所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本发明的范围。本发明的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。

如无特殊说明，本发明实验所采用的各种材料均能通过购买的方式获得。

实施例1一种苹果砧木组培苗无根快速移栽方法，包括如下步骤：

①诱导培养：青岛地区3月初，取材定植于玻璃温室的苹果砧木已萌动枝条，超净工作台内消毒处理，后接种于诱导培养基上诱导腋芽或顶芽萌发，室温25℃，光照强度2000lux培养20d左右获得无菌芽；

②增殖培养：超净工作台内，将苹果砧木无菌芽转接于增殖培养基上，室温25℃，光照强度2000lux，于组培瓶内培养至25d左右；

③生根诱导：超净工作台内，切取高度2cm左右的植株，转接于生根诱导培养基(1/2ms+iba2.0mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6g/l)上，25℃，黑暗诱导培养4d；

④基质准备：以泥炭作为栽培基质，在装入栽培箱之前，用质量分数为70％的百菌清可湿性粉剂拌匀进行消毒处理，浇透水备用；

⑤组培苗移栽：移栽在25℃左右的环境中进行，将在生根诱导培养基上黑暗培养4d的植株快速移栽至步骤③的基质上，边移栽边喷雾保湿。定植完毕覆盖塑料薄膜保湿并覆遮阳网遮荫；

⑥移栽后管理：移栽一周后移除遮阳网，并逐步掀开塑料膜通风透气降低环境湿度，两周后保湿膜全部移除；移栽20天左右约有3、4片新叶长出，至此，组培苗移栽完成。

试验例1

以苹果砧木me(me为苹果砧木‘青砧1号’的代号，参考文献：‘青砧1号’苹果砧木组培快繁体系的建立，北方果树2017，4：10-12)的组培苗为试验材料，试验设三种栽培基质和三种试验处理，三种栽培基质各栽植一箱，边移栽边用小喷壶喷雾保湿，移栽完毕后覆盖塑料薄膜保湿并覆遮阳网遮荫。

三种栽培基质分别为：

基质①：泥炭

基质②：泥炭+蛭石(1∶1)

基质③：蛭石

三种试验处理分别为：

处理①：经1/2ms+iba2.0mg/l黑暗诱导培养4d后直接扦插

处理②：蘸取商用生根剂直接扦插

处理③：不经任何处理直接扦插

表1me的三个处理在三种栽培基质上的成活情况统计

表1是苹果砧木me6月19日扦插，7月24日调查的结果。由表1可以看出me的三个处理中，处理①在三种栽培基质上的成活率明显高于处理②和处理③，而处理①在三种栽培基质上以泥炭上的成活状况最好，如图1。

表2处理①在三种栽培基质上的成活状况

表2是苹果砧木me扦插35天时处理①在三种栽培基质上的成活状况。可以看出，基质①上的植株其株高、新叶片数等性状明显优于基质②和基质③上的植株，而且其上的成活率在三者中也为最高。而在基质②上的植株其根长、根宽及粗根数等性状明显优于另外两种栽培基质上的植株，虽然基质②上的植株成活率略低于基质①，但其上植株根系的体积要大于泥炭上植株根系体积，基质②上植株根系的粗根数也为三者之最，这可能是因为基质②本身颗粒大，透气性好，利于新生根系的伸展伸长，但其上营养匮乏，不利于植株的后续生长。综合看成活率及植株各性状，仍以基质①作为这种栽培方法的首选栽培基质，如图2。

进一步实验证明，经处理①这个方法移栽的m26、唐木田、jm7等组培苗均能获得较高的移栽成活率，如图3是经处理①的me根原基及初生新根，图4是经处理①的m26根原基，图5是经处理①的砧木jm7移栽成活植株。

经过上述四种不同品种的试验材料验证，按照此方法处理过的苹果砧木组培苗，其移栽成活率均保持在80％以上。计算下来，本方法至少可节约时间25天左右，极大地提高了苹果砧木组培苗的移栽效率。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。