本发明涉及植物脱毒技术领域，具体为一种百香果脱毒苗的生产方法。
背景技术：
百香果既有多种水果的浓郁香味，又有很高的营养价值，百香果果实可用于生食、制成饮料、榨油、制油漆等用途，百香果果皮可制成饲料、提取果胶和制成药物等，并且百香果苗适应性强，具有抗病虫、产量高、耐贮运等优良特性，因此为满足市场需求进行百香果脱毒和培育无病毒的百香果组培苗是非常有必要的，但是现有的百香果脱毒苗的生产方法存在以下问题：
百香果组培苗的病害率较高，导致其因病毒引起的生活力下降、抗逆力减弱和产量下降现象，并且在种植过程中需要大量使用生化农药，不利于对生态环境的保护，同时传统的传统繁殖方法速度慢、成本高，针对上述问题，急需在原有百香果脱毒苗的生产方法的基础上进行创新设计。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种百香果脱毒苗的生产方法，以解决上述背景技术中提出百香果组培苗的病害率较高，导致其因病毒引起的生活力下降、抗逆力减弱和产量下降现象，并且在种植过程中需要大量使用生化农药，不利于对生态环境的保护，同时传统的传统繁殖方法速度慢、成本高的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种百香果脱毒苗的生产方法，所述生产方法包含以下步骤：所述生产方法包含以下步骤：外植体的选择、茎尖分生组织培养、组培苗放的病毒检测、组培苗的继代培养、生根培养和练苗；
步骤a：外植体的选择，选择生长良好的健康百香果植株茎段（含茎尖），再用自来水冲洗茎尖部，冲洗过后分别采用75%的酒精、0.1%的升汞和5%的氯酸钠进行浸泡，最后采用无菌水冲洗即可；
步骤b：茎尖分生组织培养，在超净工作台上使用显微镜观察并切除部分茎尖部，接种至培养基中，并保持每日稳定光照，当切除位置形成愈伤组织后，再转入ms培养基中继续培养；
步骤c：组培苗放的病毒检测，当幼苗长出4-5片叶时，采用不同的方法对组培苗进行病毒的检测，观察组培苗的长势和长相，将长势弱的、带有病症的如：叶黄、花叶、叶脉黄的明显带病毒的苗木淘汰，留下生长良好且健康的组培苗继续培养；
步骤d：组培苗的继代培养，对经过病毒检测的无病毒的组培苗，在无菌条件下将4-5叶的无病毒苗1叶一节切断，移入培养基中进行培养，并保持每日稳定光照；
步骤e：生根培养，将经过增殖培养的无病毒组培苗移入培养基中进行生根培养；
步骤f：练苗，筛选生长良好且健康的百香果脱毒组培苗放在经过杀虫杀菌的温室中，进行自然光练苗。
优选的，所述步骤a中外植体的选择的自来水冲洗时间为20min，且采用75%的酒精浸泡时间为25s，并且采用0.1%的升汞浸泡时间为5min。
优选的，所述步骤a中外植体的选择的采用5%次氯酸钠浸泡时间为5min，且采用无菌水冲洗的次数为3-5次。
优选的，所述步骤b中茎尖分生组织培养的切除茎尖部的长度为0.2-0.5mm，且培养基的配方为ms+6-ba1.5mg/l，并且组培苗光照的温度为26℃、光照时间为16h、光照强度为1800lx。
优选的，所述步骤c中组培苗放的病毒检测的检测方法有症状学诊断法和指示植物检测法。
优选的，所述步骤d中组培苗的继代培养的培养基配方ms+6-ba1mg/l，且组培苗光照的温度为26℃、光照时间为16h、光照强度为1800lx。
优选的，所述步骤e中生根培养的培养基配方为ms+6-iba2mg/l+naa0.1mg/l+活性炭2g/l。
优选的，所述步骤f中练苗的组培苗自然光照时间为2-3天
与现有技术相比，本发明的有益效果是：该百香果脱毒苗的生产方法，百香果经过脱毒处理，降低了百香果的病害率，有效解决了百香果因病毒引起的生活力下降、抗逆力减弱和产量下降等问题；同时，可以消减生化农药的使用，有利于生态环境的保护；该方法操作简便，适用于大规模的工厂化生产；通过对百香果的茎尖培养实现脱毒，使百香果消除病毒、恢复长势和减轻病害等，提高百香果的产量和品质；通过组织培养可以快速的繁育出大量的百香果脱毒苗，以解决传统繁殖方法速度慢、成本高的问题。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供如下技术方案：
实施例1：
一种百香果脱毒苗的生产方法，生产方法包含以下步骤：
步骤a：外植体的选择，选择生长良好的健康百香果植株茎段（含茎尖），再用自来水冲洗茎尖部，冲洗过后分别采用75%的酒精、0.1%的升汞和5%的氯酸钠进行浸泡，最后采用无菌水冲洗即可，步骤a中外植体的选择的自来水冲洗时间为20min，且采用75%的酒精浸泡时间为25s，并且采用0.1%的升汞浸泡时间为5min，步骤a中外植体的选择的采用5%次氯酸钠浸泡时间为5min，且采用无菌水冲洗的次数为3次；
步骤b：茎尖分生组织培养，在超净工作台上使用显微镜观察并切除部分茎尖部，接种至培养基中，并保持每日稳定光照，当切除位置形成愈伤组织后，再转入ms培养基中继续培养，步骤b中茎尖分生组织培养的切除茎尖部的长度为0.2mm，且培养基的配方为ms+6-ba1.5mg/l，并且组培苗光照的温度为26℃、光照时间为16h、光照强度为1800lx；
步骤c：组培苗放的病毒检测，当幼苗长出4-5片叶时，采用不同的方法对组培苗进行病毒的检测，观察组培苗的长势和长相，将长势弱的、带有病症的如：叶黄、花叶、叶脉黄的明显带病毒的苗木淘汰，留下生长良好且健康的组培苗继续培养，步骤c中组培苗放的病毒检测的检测方法有症状学诊断法和指示植物检测法；
步骤d：组培苗的继代培养，对经过病毒检测的无病毒的组培苗，在无菌条件下将4-5叶的无病毒苗1叶一节切断，移入培养基中进行培养，并保持每日稳定光照，步骤d中组培苗的继代培养的培养基配方ms+6-ba1mg/l，且组培苗光照的温度为26℃、光照时间为16h、光照强度为1800lx；
步骤e：生根培养，将经过增殖培养的无病毒组培苗移入培养基中进行生根培养，步骤e中生根培养的培养基配方为ms+6-iba2mg/l+naa0.1mg/l+活性炭2g/l；
步骤f：练苗，筛选生长良好且健康的百香果脱毒组培苗放在经过杀虫杀菌的温室中，进行自然光练苗，步骤f中练苗的组培苗自然光照时间为2天。
实施例2：
一种百香果脱毒苗的生产方法，生产方法包含以下步骤：
步骤a：外植体的选择，选择生长良好的健康百香果植株茎段（含茎尖），再用自来水冲洗茎尖部，冲洗过后分别采用75%的酒精、0.1%的升汞和5%的氯酸钠进行浸泡，最后采用无菌水冲洗即可，步骤a中外植体的选择的自来水冲洗时间为20min，且采用75%的酒精浸泡时间为25s，并且采用0.1%的升汞浸泡时间为5min，步骤a中外植体的选择的采用5%次氯酸钠浸泡时间为5min，且采用无菌水冲洗的次数为4次；
步骤b：茎尖分生组织培养，在超净工作台上使用显微镜观察并切除部分茎尖部，接种至培养基中，并保持每日稳定光照，当切除位置形成愈伤组织后，再转入ms培养基中继续培养，步骤b中茎尖分生组织培养的切除茎尖部的长度为0.4mm，且培养基的配方为ms+6-ba1.5mg/l，并且组培苗光照的温度为26℃、光照时间为16h、光照强度为1800lx；
步骤c：组培苗放的病毒检测，当幼苗长出4-5片叶时，采用不同的方法对组培苗进行病毒的检测，观察组培苗的长势和长相，将长势弱的、带有病症的如：叶黄、花叶、叶脉黄的明显带病毒的苗木淘汰，留下生长良好且健康的组培苗继续培养，步骤c中组培苗放的病毒检测的检测方法有症状学诊断法和指示植物检测法；
步骤d：组培苗的继代培养，对经过病毒检测的无病毒的组培苗，在无菌条件下将4-5叶的无病毒苗1叶一节切断，移入培养基中进行培养，并保持每日稳定光照，步骤d中组培苗的继代培养的培养基配方ms+6-ba1mg/l，且组培苗光照的温度为26℃、光照时间为16h、光照强度为1800lx；
步骤e：生根培养，将经过增殖培养的无病毒组培苗移入培养基中进行生根培养，步骤e中生根培养的培养基配方为ms+6-iba2mg/l+naa0.1mg/l+活性炭2g/l；
步骤f：练苗，筛选生长良好且健康的百香果脱毒组培苗放在经过杀虫杀菌的温室中，进行自然光练苗，步骤f中练苗的组培苗自然光照时间为2天。
实施例3：
一种百香果脱毒苗的生产方法，生产方法包含以下步骤：
步骤a：外植体的选择，选择生长良好的健康百香果植株茎段（含茎尖），再用自来水冲洗茎尖部，冲洗过后分别采用75%的酒精、0.1%的升汞和5%的氯酸钠进行浸泡，最后采用无菌水冲洗即可，步骤a中外植体的选择的自来水冲洗时间为20min，且采用75%的酒精浸泡时间为25s，并且采用0.1%的升汞浸泡时间为5min，步骤a中外植体的选择的采用5%次氯酸钠浸泡时间为5min，且采用无菌水冲洗的次数为5次；
步骤b：茎尖分生组织培养，在超净工作台上使用显微镜观察并切除部分茎尖部，接种至培养基中，并保持每日稳定光照，当切除位置形成愈伤组织后，再转入ms培养基中继续培养，步骤b中茎尖分生组织培养的切除茎尖部的长度为0.5mm，且培养基的配方为ms+6-ba1.5mg/l，并且组培苗光照的温度为26℃、光照时间为16h、光照强度为1800lx；
步骤c：组培苗放的病毒检测，当幼苗长出4-5片叶时，采用不同的方法对组培苗进行病毒的检测，观察组培苗的长势和长相，将长势弱的、带有病症的如：叶黄、花叶、叶脉黄的明显带病毒的苗木淘汰，留下生长良好且健康的组培苗继续培养，步骤c中组培苗放的病毒检测的检测方法有症状学诊断法和指示植物检测法；
步骤d：组培苗的继代培养，对经过病毒检测的无病毒的组培苗，在无菌条件下将4-5叶的无病毒苗1叶一节切断，移入培养基中进行培养，并保持每日稳定光照，步骤d中组培苗的继代培养的培养基配方ms+6-ba1mg/l，且组培苗光照的温度为26℃、光照时间为16h、光照强度为1800lx；
步骤e：生根培养，将经过增殖培养的无病毒组培苗移入培养基中进行生根培养，步骤e中生根培养的培养基配方为ms+6-iba2mg/l+naa0.1mg/l+活性炭2g/l；
步骤f：练苗，筛选生长良好且健康的百香果脱毒组培苗放在经过杀虫杀菌的温室中，进行自然光练苗，步骤f中练苗的组培苗自然光照时间为3天
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。