一种促进香蕉植株生长和防治香蕉枯萎病的绿僵菌制剂的制作方法

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本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种促进香蕉植株生长和防治香蕉枯萎病的绿僵菌制剂。


背景技术：

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香蕉(musaaaa group)古称甘蔗、芭蕉，又名中国矮蕉、天宝蕉、粉蕉，为芭蕉科芭蕉属多年生植物。香蕉原产热带亚洲地区，现广泛分布于南北纬30
°
之间的热带和亚热带地区，目前全球有一百多个国家和地区栽培香蕉(“香蕉及其保健功能”，朱瑜安，中国食物与营养，2006年第3期，第51页左栏第1段第1-4行，公开日2006年12月31日)。
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香蕉植株为大型操办，从根状茎发出，由叶鞘下部形成高3-6米的假杆；叶长圆形至椭圆形，有的长达3-3.5米，10-20枚簇生茎顶；蕙状花序下垂，由假杆顶端抽出，花多数，淡黄色；果序弯垂，结果20-20串，约50-150个。植株结果后枯死，由根状茎长出的吸根继续繁殖，每一根植株可活多年。
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香蕉果实中钙、磷和铁元素，以及胡萝卜素、硫胺素、核黄素、盐酸和维生素c含量丰富，含少量的镁、硫和铜元素，及维生素d、e等。香蕉果实中含有大量易被人体吸收的糖，还含有较多的多酚氧化酶。香蕉性甘味寒，可清热、润肠、润肺、解毒，具有治疗忧郁症、预防胃溃疡、降低血压、防治中风、润肠通便、治疗批复皲裂等功效。此外，香蕉还具有防治关节炎和通风、治疗皮肤炎症和疱疹、减轻皮肤瘙痒、治疗牙痛、提高运动员技艺等功效(“香蕉及其保健功能”，朱瑜安，中国食物与营养，2006年第3期，第51页右栏第5段第1行至第52页右栏第4段第1行，公开日2006年12月31日)。
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然而，目前，香蕉植株矮小，制约了香蕉产业化生产。


技术实现要素：

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有鉴于此，本发明的目的在于提供一种促进香蕉植株生长的绿僵菌制剂。
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为实现上述目的，本发明的技术方案为：
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绿僵菌在制备促进香蕉植株生长的药剂中的应用。
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进一步，所述绿僵菌包括金龟子绿僵菌。
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进一步，所述金龟子绿僵菌包括金龟子绿僵菌cqma421。
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进一步，所述药剂为油悬浮剂，且药剂中绿僵菌的含量为20-100亿孢子/ml。
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本发明的目的之二在于保护促进香蕉植株生长的方法，其采用包括绿僵菌的药剂对香蕉植株进行灌根处理或土壤处理。
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进一步，所述药剂中绿僵菌的含量为20-100亿孢子/ml。
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本发明的目的还在于保护绿僵菌在制备防治香蕉枯萎病(又名香蕉黄叶病、香蕉巴拿马病)的药剂中的应用。
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进一步，所述绿僵菌包括金龟子绿僵菌。
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进一步，所述金龟子绿僵菌包括金龟子绿僵菌cqma421。
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进一步，所述药剂为油悬浮剂，且药剂中绿僵菌的含量为20-100亿孢子/ml。
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本发明的有益效果在于：
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本发明能够显著促进香蕉植株生长。
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本发明对于香蕉黄叶病具有良好的防效。
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本发明具有安全、高效，无药物残留，无毒副作用等优点。
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本发明的方法简单，有利于实现工业化生产。
具体实施方式
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所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
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以下金龟子绿僵菌cqma421油悬浮剂购于重庆聚立信生物工程有限公司，含孢量为80亿孢子/ml。
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实施例1
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龟子绿僵菌cqma421油悬浮剂对香蕉室内盆栽促生效果
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香蕉品种：巴西蕉(购于广东亿通农业开发有限公司)；
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试验处理：香蕉苗移栽入盆，待香蕉苗成活后，分别用金龟子绿僵菌cqma421油悬浮剂200倍稀释液、400倍稀释液和800倍稀释药液灌根，并以清水灌根的处理为对照，每盆植株500ml，每个处理30盆，重复3次；试验处理后，40天测量植株高度，并将植株拔出洗净，于烘箱中杀青烘干后分别称量香蕉植株地上部分和根部干重，计算平均值，并采用spss和excel统计分析数据，结果如表1所示。
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表1金龟子绿僵菌cqma421对香蕉促生作用效果
[0030][0031]
备注：小写字母不同表示差异显著。
[0032]
由表1可知，与对照组相比，金龟子绿僵菌cqma421油悬浮剂200-800倍稀释药液处理的香蕉植株的株高、地上干重和根干重得到了显著提高。由此证明，采用金龟子绿僵菌cqma421油悬浮剂对香蕉植株进行灌根处理，能显著促进植株生长，增加植株干物质积累量。
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实施例2
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金龟子绿僵菌cqma421对香蕉枯萎病菌室内平板试验效果验证
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实验方法
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古巴专化型尖孢镰刀菌(fusa rium oxysporum fs.p.cubense，foc)由重庆大学生命科学院提供。
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采用平板对峙培养法，将供试的香蕉枯萎病病菌菌饼(直径9mm)移至平板中央，四
周2cm处接种cqma421菌，于27℃生化培养箱培养，每个处理重复3次，以其平均值作为检测结果；
[0038]
待对照组菌丝长满平板时，采用十字交叉法测量菌落直径、抑菌带直径，计算平均值，并按照以下公式计算对番茄炭疽病的抑制率，结果如表2所示。
[0039][0040]
表2对香蕉枯萎病菌室内抑制活性
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供试菌株抑制率(％)古巴专化型尖孢镰刀菌68.5
[0042]
由表2可知，绿僵菌cqma421对香蕉枯萎病菌菌丝生长均具有显著的抑制作用，菌丝生长抑制率为68.5％。
[0043]
实施例3
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金龟子绿僵菌cqma421油悬浮剂对香蕉枯萎病室内盆栽防效
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病原：古巴专化型尖孢镰刀菌(fusa rium oxysporum fs.p.cubense，foc)由重庆大学生命科学院提供
[0046]
香蕉品种：巴西蕉(购于广东亿通农业开发有限公司)；
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病原制备：将尖孢镰刀菌接种于马铃薯琼脂糖(pda)培养基上，25℃培养7天，在菌落边缘用打孔器打3个菌饼，将菌饼接种到100ml马铃薯葡萄糖液体培养液中，25℃，180r/min条件下震荡培养5天，用4层无菌擦镜纸过滤，用血球计数板调节孢子浓度至1
×
106孢子/ml备用。
[0048]
试验处理：香蕉苗移栽入盆前分别用金龟子绿僵菌cqma421油悬浮剂稀释200倍液、油悬浮剂稀释400倍液、油悬浮剂稀释800倍液和清水浸根，浸泡2h后移栽入盆，待香蕉苗成活后，分别用对应浸根浓度的药液灌根，每个处理30盆香蕉，重复3次，每盆植株灌根500ml，1周灌根1次，共灌根3次，最后1次灌根处理1周后接种病原，病原浓度为1
×
106孢子/ml，每盆60ml，25
±
5℃条件下培养，常规管理，观察香蕉的生长和枯萎病发生情况，接种35天左右观察地上部茎、叶黄化情况，测量植株高度，统计病害发生情况，根据分级标准记录发病等级，计算发病率、病情指数和防效；
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分级标准：0级-植株无枯黄症状；1级-植株下部叶片出现轻微的枯黄症状，嫩叶完好，少部分根系轻微褐变，茎部出现水渍状褐变；2级-植株下部叶片出现明显的枯黄症状，但嫩叶完好，根系出现褐变，茎部和假茎部出现水渍状褐变；3级-整个植株出现枯黄症状，根系褐变腐烂，茎部和假茎部褐变连片，少数叶柄出现红褐；4级-植株出现枯萎死亡症状，根系严重褐变腐烂。
[0050]
计算方法：根据调查数据，计算发病率、病情指数和防效；
[0051]
发病率(％)＝发病植株数/调查植株总数
×
100；
[0052]
病情指数：按照公式(1)计算，结果保留小数点后1位。
[0053][0054]
式中：
[0055]
x——病情指数；
[0056]
n
i
——各级病叶数；
[0057]
i——相对级数值；
[0058]
n——调查总叶数。
[0059][0060]
式中：
[0061]
p——防治效果，单位为百分数(％)；
[0062]
ck——空白对照病情指数；
[0063]
pt——药剂处理病情指数。
[0064]
防治效果：按照公式(2)计算，结果保留小数点后1位。
[0065]
统计分析：用spss和excel统计分析数据，结果如表3所示。
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表3室内盆栽试验防效测定
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处理发病率(％)病情指数防效(％)株高(cm)200倍稀释液43.3b19.2b56.6a61.6a400倍稀释液50.0b20.8b52.9a59.8a800倍稀释液53.3b21.7b51.0a58.9a清水90.0a41.2a-43.0b
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备注：小写字母不同表示差异显著。
[0069]
由表3可知，与清水组相比，金龟子绿僵菌油悬浮剂200倍稀释液、400倍倍稀释液和800倍稀释液处理的香蕉株高得到了显著提高。由此证明，金龟子绿僵菌能够显著促进香蕉植株生长。
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此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。