本发明涉及对虾育种技术领域，尤其是一种南美白对虾高氨氮耐受性良种育种方法。
背景技术：
我国是南美白对虾养殖大国，1999年开始成为我国对虾养殖的一个重要品种，在南方三省迅速发展，至今已成为全国普遍推广、产量占首位的养虾品种；在生产高速发展的同时，出现了种苗质量参差不齐、携带病毒和生长缓慢等严重问题，直接威胁我国南美白对虾养殖产业的可持续发展。特别是南美白对虾高氨氮耐受性问题上，一直缺乏一个针对性的养殖系统，导致对虾虾苗的育种率低、生长速度缓慢以及性状不稳定。为此，我们提出一种南美白对虾高氨氮耐受性良种育种方法。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明提供一种南美白对虾高氨氮耐受性良种育种方法，使其适合南美白对虾高氨氮特殊的养殖系统，从而提高对虾虾苗的育种率、提高生长速度以及稳定对虾性状等。
本发明的技术方案为：
一种南美白对虾高氨氮耐受性良种育种方法，包括如下步骤：
(1)亲虾培育池和养殖用水处理：选择面积为20-30m2的亲虾池，水深1.2-1.4m，亲虾池上方设置遮光网，光照强度60-80lx；亲虾池使用之前用80-100×10-5漂白粉或60-180×10-6高锰酸钾对亲虾池消毒；
(2)引种：收集国内自助选育的品种“广泰一号”、“科海一号”、中南美洲、墨西哥湾地域的自然群体的品系12～18个，独立饲养，抽样，病毒pcr检测，留下全部阴性的品系做基础种群；
(3)筛选：对各个来源的品系进行遗传多样性分析，确定他们的亲缘关系，保留远缘的品系5～8个；
(4)亲虾的强化：饲养至亲虾，优选出活力强、体表光滑、无畸形，体重大于平均体重20％以上的作为备用亲虾；
(5)驯化及繁育：将亲虾放入亲虾池中，亲虾池水温应与运输时水温接近；4h后开始投入少量活沙蚕；3天后，开始升温促熟培育，每天升温1℃，至水温23度时，保持3-5天，升温至25度，保持3-5天，此后每天升温0.5℃，升温至27度，保持水温不变进行促熟培育，每天投喂以沙蚕为主，牡蛎和鱿鱼为辅的新鲜饵料3次，投喂量为虾体重的10-15％，并投喂一次添加微生态制剂和虾青素的人工配合饲料；
(5)家系建立：利用人工移植雄虾精荚，在5天的时间内建立自交和杂交的家系100～120个，其中建立半同胞家系50～60个；
(6)育苗：家系育苗过程中采用标准化，蚤状幼体期使用角毛藻，数量不少于5万个/ml；糠虾期使用角毛藻和中肋骨条藻，数量不少于5万个/ml；仔虾期使用丰年虫，每100万虾苗投喂刚孵化出的丰年虫不少于0.75公斤；培苗全程使用优质虾片；
(7)家系的独立培育：虾苗培育至p5～7阶段，家系独立饲养，保种和测试分开，每个家系的p5小苗随机分成三部分，保种在40m2的水泥池，饲养密度20～30尾/m3；测试在2000～3000m2的养殖池塘，养殖池塘中设立若干个网箱，家系隔离、独立饲养，虾苗养殖到3～4cm时，用荧光标记每一个家系，标记完成后，网箱暂养3～5天，将存活的虾计数后合并放到养殖池塘，补充规格0.8～1.0cm的虾苗，使养殖密度达到20/m3；
(8)育苗过程管理：每天进行各期对虾幼体发育镜检、计数，掌握各期幼体的成活率，每天测定水温、溶氧、盐度、ph、氨氮等水质指标，清除池壁及水体杂物，保证良好的水质条件，定期进行病毒检测；
(9)目标家系确定：养殖60～80天后，随机挑抽样进行生长数据测定，对不同家系的生长和成活率性状(为了和盐化成活率区分，简称回捕率)进行评价，分别选择生长快的家系归入快长系(a系)，回捕率高的归于高存活(b系)，回捕率高、生长快的归于高存活/快长系(c系)，盐化率高的归于高盐化系(d系)；
(10)杂交测试：在建系的同时进行初级正反交杂交组合测试，初级杂交包括a系与b系的正反交，a系和b系的正交分成若干个配种组合，每个配种组合是a系内的家系的父本与b系内的母本随机组合，a系和b系的反交组合是对应的a系内的家系母本与b系内的家系父本的组合，c系与d系的正反交与a系和b系正反交方法相同，所建立的杂交组合在相同条件下进行养殖，并测定繁殖、生长、回捕率性状的数据，测定方法与品系内纯繁的家系测定方法相同，家系选留时综合考虑家系测定结果和初级杂交组合测试效果，通过纯繁的家系和杂交组合表型测定结果，在每个系内进行家系选留，并确立系间最优的杂交组合方式；
(11)品种选育：第五代开始，在进行上述选育的基础上，测定次级杂交的组合效果，上述a系×b系杂交组合中最优的ab系，与c系×d系杂交组合中表现最优的cd系进行正反交，测定四系杂交的组合效果，经过连续三年的四系杂交测试，筛选出最优的交配组合方式，建立了四系配套双杂交制种体系；经过连续七代的品系内纯繁和正反交测试，建立了快长系(a系)，高回捕系(b系)，高存活/高回捕系(c系)，高盐化系(d)四个南美白对虾专门化品系，并建立四系配套双杂交制种技术体系，a系雄虾和b系雌虾杂交形成的父母代ab系作为商品亲虾中的雄虾，具有生长速度快的特点，c系雄虾和d雌虾交配形成的父母代cd系作为商品亲虾中的雌虾，具有盐化率高的特点，ab与cd杂交形成的商品苗种(abcd)即“渤海1号”具有高盐度地区(＞40‰)兼具生长速度快、成活率高的特点，适合我国盐田高盐度地区的外塘养殖。
进一步的，所述家系的独立培育中，第一部分50％用来正常盐度养殖，留种；其余各自25％，渐进提高盐度，分别提高到40‰和50‰两种盐度，提高盐度，记录盐化的成活率；分别在两种盐度条件下进行养殖。
进一步的，所述育苗过程中，水温28～32℃，盐度26～32‰，培育密度10万～20万/m3，投料换水全部操作一致。
本发明的有益效果为：本发明适合南美白对虾高氨氮特殊的养殖系统，从而提高对虾虾苗的育种率、提高生长速度以及稳定对虾性状等。
具体实施方式
实施例1
一种南美白对虾高氨氮耐受性良种育种方法，包括如下步骤：
(1)亲虾培育池和养殖用水处理：选择面积为20m2的亲虾池，水深1.2m，亲虾池上方设置遮光网，光照强度60lx；亲虾池使用之前用80×10-5漂白粉或60×10-6高锰酸钾对亲虾池消毒；
(2)引种：收集国内自助选育的品种“广泰一号”、“科海一号”、中南美洲、墨西哥湾地域的自然群体的品系12个，独立饲养，抽样，病毒pcr检测，留下全部阴性的品系做基础种群；
(3)筛选：对各个来源的品系进行遗传多样性分析，确定他们的亲缘关系，保留远缘的品系5个；
(4)亲虾的强化：饲养至亲虾，优选出活力强、体表光滑、无畸形，体重大于平均体重20％以上的作为备用亲虾；
(5)驯化及繁育：将亲虾放入亲虾池中，亲虾池水温应与运输时水温接近；4h后开始投入少量活沙蚕；3天后，开始升温促熟培育，每天升温1℃，至水温23度时，保持3天，升温至25度，保持3天，此后每天升温0.5℃，升温至27度，保持水温不变进行促熟培育，每天投喂以沙蚕为主，牡蛎和鱿鱼为辅的新鲜饵料3次，投喂量为虾体重的10％，并投喂一次添加微生态制剂和虾青素的人工配合饲料；
(5)家系建立：利用人工移植雄虾精荚，在5天的时间内建立自交和杂交的家系100个，其中建立半同胞家系50个；
(6)育苗：家系育苗过程中采用标准化，蚤状幼体期使用角毛藻，数量不少于5万个/ml；糠虾期使用角毛藻和中肋骨条藻，数量不少于5万个/ml；仔虾期使用丰年虫，每100万虾苗投喂刚孵化出的丰年虫不少于0.75公斤；培苗全程使用优质虾片；
(7)家系的独立培育：虾苗培育至p5～7阶段，家系独立饲养，保种和测试分开，每个家系的p5小苗随机分成三部分，保种在40m2的水泥池，饲养密度20尾/m3；测试在2000m2的养殖池塘，养殖池塘中设立若干个网箱，家系隔离、独立饲养，虾苗养殖到3cm时，用荧光标记每一个家系，标记完成后，网箱暂养3天，将存活的虾计数后合并放到养殖池塘，补充规格0.8cm的虾苗，使养殖密度达到20/m3；
(8)育苗过程管理：每天进行各期对虾幼体发育镜检、计数，掌握各期幼体的成活率，每天测定水温、溶氧、盐度、ph、氨氮等水质指标，清除池壁及水体杂物，保证良好的水质条件，定期进行病毒检测；
(9)目标家系确定：养殖60天后，随机挑抽样进行生长数据测定，对不同家系的生长和成活率性状(为了和盐化成活率区分，简称回捕率)进行评价，分别选择生长快的家系归入快长系(a系)，回捕率高的归于高存活(b系)，回捕率高、生长快的归于高存活/快长系(c系)，盐化率高的归于高盐化系(d系)；
(10)杂交测试：在建系的同时进行初级正反交杂交组合测试，初级杂交包括a系与b系的正反交，a系和b系的正交分成若干个配种组合，每个配种组合是a系内的家系的父本与b系内的母本随机组合，a系和b系的反交组合是对应的a系内的家系母本与b系内的家系父本的组合，c系与d系的正反交与a系和b系正反交方法相同，所建立的杂交组合在相同条件下进行养殖，并测定繁殖、生长、回捕率性状的数据，测定方法与品系内纯繁的家系测定方法相同，家系选留时综合考虑家系测定结果和初级杂交组合测试效果，通过纯繁的家系和杂交组合表型测定结果，在每个系内进行家系选留，并确立系间最优的杂交组合方式；
(11)品种选育：第五代开始，在进行上述选育的基础上，测定次级杂交的组合效果，上述a系×b系杂交组合中最优的ab系，与c系×d系杂交组合中表现最优的cd系进行正反交，测定四系杂交的组合效果，经过连续三年的四系杂交测试，筛选出最优的交配组合方式，建立了四系配套双杂交制种体系；经过连续七代的品系内纯繁和正反交测试，建立了快长系(a系)，高回捕系(b系)，高存活/高回捕系(c系)，高盐化系(d)四个南美白对虾专门化品系，并建立四系配套双杂交制种技术体系，a系雄虾和b系雌虾杂交形成的父母代ab系作为商品亲虾中的雄虾，具有生长速度快的特点，c系雄虾和d雌虾交配形成的父母代cd系作为商品亲虾中的雌虾，具有盐化率高的特点，ab与cd杂交形成的商品苗种(abcd)即“渤海1号”具有高盐度地区(＞40‰)兼具生长速度快、成活率高的特点，适合我国盐田高盐度地区的外塘养殖。
所述家系的独立培育中，第一部分50％用来正常盐度养殖，留种；其余各自25％，渐进提高盐度，分别提高到40‰和50‰两种盐度，提高盐度，记录盐化的成活率；分别在两种盐度条件下进行养殖。
所述育苗过程中，水温28℃，盐度26‰，培育密度10万/m3，投料换水全部操作一致。
实施例2
一种南美白对虾高氨氮耐受性良种育种方法，包括如下步骤：
(1)亲虾培育池和养殖用水处理：选择面积为30m2的亲虾池，水深1.4m，亲虾池上方设置遮光网，光照强度80lx；亲虾池使用之前用100×10-5漂白粉或180×10-6高锰酸钾对亲虾池消毒；
(2)引种：收集国内自助选育的品种“广泰一号”、“科海一号”、中南美洲、墨西哥湾地域的自然群体的品系18个，独立饲养，抽样，病毒pcr检测，留下全部阴性的品系做基础种群；
(3)筛选：对各个来源的品系进行遗传多样性分析，确定他们的亲缘关系，保留远缘的品系8个；
(4)亲虾的强化：饲养至亲虾，优选出活力强、体表光滑、无畸形，体重大于平均体重20％以上的作为备用亲虾；
(5)驯化及繁育：将亲虾放入亲虾池中，亲虾池水温应与运输时水温接近；4h后开始投入少量活沙蚕；3天后，开始升温促熟培育，每天升温1℃，至水温23度时，保持5天，升温至25度，保持5天，此后每天升温0.5℃，升温至27度，保持水温不变进行促熟培育，每天投喂以沙蚕为主，牡蛎和鱿鱼为辅的新鲜饵料3次，投喂量为虾体重的15％，并投喂一次添加微生态制剂和虾青素的人工配合饲料；
(5)家系建立：利用人工移植雄虾精荚，在5天的时间内建立自交和杂交的家系120个，其中建立半同胞家系60个；
(6)育苗：家系育苗过程中采用标准化，蚤状幼体期使用角毛藻，数量不少于5万个/ml；糠虾期使用角毛藻和中肋骨条藻，数量不少于5万个/ml；仔虾期使用丰年虫，每100万虾苗投喂刚孵化出的丰年虫不少于0.75公斤；培苗全程使用优质虾片；
(7)家系的独立培育：虾苗培育至p5～7阶段，家系独立饲养，保种和测试分开，每个家系的p5小苗随机分成三部分，保种在40m2的水泥池，饲养密度30尾/m3；测试在3000m2的养殖池塘，养殖池塘中设立若干个网箱，家系隔离、独立饲养，虾苗养殖到4cm时，用荧光标记每一个家系，标记完成后，网箱暂养5天，将存活的虾计数后合并放到养殖池塘，补充规格1.0cm的虾苗，使养殖密度达到20/m3；
(8)育苗过程管理：每天进行各期对虾幼体发育镜检、计数，掌握各期幼体的成活率，每天测定水温、溶氧、盐度、ph、氨氮等水质指标，清除池壁及水体杂物，保证良好的水质条件，定期进行病毒检测；
(9)目标家系确定：养殖80天后，随机挑抽样进行生长数据测定，对不同家系的生长和成活率性状(为了和盐化成活率区分，简称回捕率)进行评价，分别选择生长快的家系归入快长系(a系)，回捕率高的归于高存活(b系)，回捕率高、生长快的归于高存活/快长系(c系)，盐化率高的归于高盐化系(d系)；
(10)杂交测试：在建系的同时进行初级正反交杂交组合测试，初级杂交包括a系与b系的正反交，a系和b系的正交分成若干个配种组合，每个配种组合是a系内的家系的父本与b系内的母本随机组合，a系和b系的反交组合是对应的a系内的家系母本与b系内的家系父本的组合，c系与d系的正反交与a系和b系正反交方法相同，所建立的杂交组合在相同条件下进行养殖，并测定繁殖、生长、回捕率性状的数据，测定方法与品系内纯繁的家系测定方法相同，家系选留时综合考虑家系测定结果和初级杂交组合测试效果，通过纯繁的家系和杂交组合表型测定结果，在每个系内进行家系选留，并确立系间最优的杂交组合方式；
(11)品种选育：第五代开始，在进行上述选育的基础上，测定次级杂交的组合效果，上述a系×b系杂交组合中最优的ab系，与c系×d系杂交组合中表现最优的cd系进行正反交，测定四系杂交的组合效果，经过连续三年的四系杂交测试，筛选出最优的交配组合方式，建立了四系配套双杂交制种体系；经过连续七代的品系内纯繁和正反交测试，建立了快长系(a系)，高回捕系(b系)，高存活/高回捕系(c系)，高盐化系(d)四个南美白对虾专门化品系，并建立四系配套双杂交制种技术体系，a系雄虾和b系雌虾杂交形成的父母代ab系作为商品亲虾中的雄虾，具有生长速度快的特点，c系雄虾和d雌虾交配形成的父母代cd系作为商品亲虾中的雌虾，具有盐化率高的特点，ab与cd杂交形成的商品苗种(abcd)即“渤海1号”具有高盐度地区(＞40‰)兼具生长速度快、成活率高的特点，适合我国盐田高盐度地区的外塘养殖。
所述家系的独立培育中，第一部分50％用来正常盐度养殖，留种；其余各自25％，渐进提高盐度，分别提高到40‰和50‰两种盐度，提高盐度，记录盐化的成活率；分别在两种盐度条件下进行养殖。
所述育苗过程中，水温32℃，盐度32‰，培育密度20万/m3，投料换水全部操作一致。
实施例3
一种南美白对虾高氨氮耐受性良种育种方法，包括如下步骤：
(1)亲虾培育池和养殖用水处理：选择面积为25m2的亲虾池，水深1.3m，亲虾池上方设置遮光网，光照强度70lx；亲虾池使用之前用90×10-5漂白粉或120×10-6高锰酸钾对亲虾池消毒；
(2)引种：收集国内自助选育的品种“广泰一号”、“科海一号”、中南美洲、墨西哥湾地域的自然群体的品系15个，独立饲养，抽样，病毒pcr检测，留下全部阴性的品系做基础种群；
(3)筛选：对各个来源的品系进行遗传多样性分析，确定他们的亲缘关系，保留远缘的品系6个；
(4)亲虾的强化：饲养至亲虾，优选出活力强、体表光滑、无畸形，体重大于平均体重20％以上的作为备用亲虾；
(5)驯化及繁育：将亲虾放入亲虾池中，亲虾池水温应与运输时水温接近；4h后开始投入少量活沙蚕；3天后，开始升温促熟培育，每天升温1℃，至水温23度时，保持4天，升温至25度，保持4天，此后每天升温0.5℃，升温至27度，保持水温不变进行促熟培育，每天投喂以沙蚕为主，牡蛎和鱿鱼为辅的新鲜饵料3次，投喂量为虾体重的12.5％，并投喂一次添加微生态制剂和虾青素的人工配合饲料；
(5)家系建立：利用人工移植雄虾精荚，在5天的时间内建立自交和杂交的家系110个，其中建立半同胞家系55个；
(6)育苗：家系育苗过程中采用标准化，蚤状幼体期使用角毛藻，数量不少于5万个/ml；糠虾期使用角毛藻和中肋骨条藻，数量不少于5万个/ml；仔虾期使用丰年虫，每100万虾苗投喂刚孵化出的丰年虫不少于0.75公斤；培苗全程使用优质虾片；
(7)家系的独立培育：虾苗培育至p5～7阶段，家系独立饲养，保种和测试分开，每个家系的p5小苗随机分成三部分，保种在40m2的水泥池，饲养密度25尾/m3；测试在2500m2的养殖池塘，养殖池塘中设立若干个网箱，家系隔离、独立饲养，虾苗养殖到3.5m时，用荧光标记每一个家系，标记完成后，网箱暂养4天，将存活的虾计数后合并放到养殖池塘，补充规格0.9cm的虾苗，使养殖密度达到20/m3；
(8)育苗过程管理：每天进行各期对虾幼体发育镜检、计数，掌握各期幼体的成活率，每天测定水温、溶氧、盐度、ph、氨氮等水质指标，清除池壁及水体杂物，保证良好的水质条件，定期进行病毒检测；
(9)目标家系确定：养殖70天后，随机挑抽样进行生长数据测定，对不同家系的生长和成活率性状(为了和盐化成活率区分，简称回捕率)进行评价，分别选择生长快的家系归入快长系(a系)，回捕率高的归于高存活(b系)，回捕率高、生长快的归于高存活/快长系(c系)，盐化率高的归于高盐化系(d系)；
(10)杂交测试：在建系的同时进行初级正反交杂交组合测试，初级杂交包括a系与b系的正反交，a系和b系的正交分成若干个配种组合，每个配种组合是a系内的家系的父本与b系内的母本随机组合，a系和b系的反交组合是对应的a系内的家系母本与b系内的家系父本的组合，c系与d系的正反交与a系和b系正反交方法相同，所建立的杂交组合在相同条件下进行养殖，并测定繁殖、生长、回捕率性状的数据，测定方法与品系内纯繁的家系测定方法相同，家系选留时综合考虑家系测定结果和初级杂交组合测试效果，通过纯繁的家系和杂交组合表型测定结果，在每个系内进行家系选留，并确立系间最优的杂交组合方式；
(11)品种选育：第五代开始，在进行上述选育的基础上，测定次级杂交的组合效果，上述a系×b系杂交组合中最优的ab系，与c系×d系杂交组合中表现最优的cd系进行正反交，测定四系杂交的组合效果，经过连续三年的四系杂交测试，筛选出最优的交配组合方式，建立了四系配套双杂交制种体系；经过连续七代的品系内纯繁和正反交测试，建立了快长系(a系)，高回捕系(b系)，高存活/高回捕系(c系)，高盐化系(d)四个南美白对虾专门化品系，并建立四系配套双杂交制种技术体系，a系雄虾和b系雌虾杂交形成的父母代ab系作为商品亲虾中的雄虾，具有生长速度快的特点，c系雄虾和d雌虾交配形成的父母代cd系作为商品亲虾中的雌虾，具有盐化率高的特点，ab与cd杂交形成的商品苗种(abcd)即“渤海1号”具有高盐度地区(＞40‰)兼具生长速度快、成活率高的特点，适合我国盐田高盐度地区的外塘养殖。
所述家系的独立培育中，第一部分50％用来正常盐度养殖，留种；其余各自25％，渐进提高盐度，分别提高到40‰和50‰两种盐度，提高盐度，记录盐化的成活率；分别在两种盐度条件下进行养殖。
所述育苗过程中，水温30℃，盐度29‰，培育密度15万/m3，投料换水全部操作一致。
上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理和最佳实施例，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。