一种含有多粘类芽孢杆菌KN-03的种子处理组合物及其应用的制作方法

一种含有多粘类芽孢杆菌kn-03的种子处理组合物及其应用
技术领域
1.本发明属于农药技术领域，具体涉及一种含有多粘类芽孢杆菌kn-03的种子处理组合物及其防治农作物病害的应用。


背景技术：

2.小麦纹枯病是由禾谷丝核菌侵染引起的一种土传真菌病害，以菌核在土壤中越冬，也能以菌丝和菌核在作物病残体、杂草上越冬，成为次年主要初侵染源。该病使小麦不能抽穗，或抽穗的秕谷较多，粒重下降。近年来，由于国家倡导秸秆还田，有利于保护环境，增加土壤有机质，但同时也导致了纹枯病的逐年加重，发病严重的地块可减产50％。小麦纹枯病的防治已成为人们关注的重点。常规喷雾不好把握土传病害防治的最佳时期，一旦错过最佳防治时期就会造成无法弥补的损失。而种子处理是防治土传病害最经济有效的方法。种子处理通常包括拌种、浸种、种子包衣等方法。用来防治小麦纹枯病的种子处理剂不多，常规的福美双、三唑酮、多菌灵、烯唑醇等药剂已经不同程度地产生了抗性，防效明显下降。戊唑醇是一种高效、广谱、内吸性三唑类杀菌剂，在种子处理剂上已广泛使用,对小麦纹枯病有较好的防效，但在使用过程中存在一些问题，如较高浓度戊唑醇处理种子后，会抑制小麦种子萌发，推迟出苗时间，降低出苗率，抑制幼苗生长，抑制根系生长，增加畸形植株数量，在低温胁迫条件下易产生药害，随着使用频率和用量增加，可能会导致抗药性产生。
3.多粘类芽孢杆菌kn-03(paenibaciillus polymyxakn-03)是武汉科诺生物科技股份有限公司从山东番茄种植示范基地土样中分离筛选，已于2012年3月13日在中国典型培养物保藏中心进行了保藏，保藏编号为cctcc no:m2012077。多粘类芽孢杆菌kn-03属细菌类生物杀菌剂，是内生芽孢的革兰氏阳性细菌，通过成功定殖至植物根际、体表或体内，同病原菌竞争植物周围的营养，分泌抗菌物质抑制病原菌生长，同时诱导植物防御系统抵御病原菌入侵，从而达到生防的目的。该药对小麦赤霉病、草莓青枯病、西瓜枯萎病等土传病害有一定的防效。该药防治土传病在我国已登记的使用方法主要是灌根和浸种，种子包衣和拌种没有登记使用。
4.基于上述问题，发明人进行了大量配方筛选试验，发现多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇复配，用作种子包衣或拌种，对小麦纹枯病菌的防治效果明显高于对照单剂，且安全性、发芽率、出苗率高，克服了较高浓度戊唑醇单剂处理种子引起的小麦发芽率低、出苗率低、根系生长受到抑制的缺点，表现出明显的促根生长作用和增产效果。在现有的种子处理剂中，未见本发明多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇种子处理组合物用于防治小麦纹枯病的报道。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种含有多粘类芽孢杆菌kn-03的种子处理组合物，有助于促进小麦根系生长、提高小麦的发芽率、出苗率和产量，以及提高对小麦纹枯病的防效。
6.为了实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：
7.一种含有多粘类芽孢杆菌kn-03的种子处理组合物，其有效成分由多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇组成，质量比为100:1～1:1。
8.进一步地，所述含有多粘类芽孢杆菌kn-03的种子处理组合物，其有效成分多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇的质量比为50:1～4:1，优选质量比为30:1～10:1。
9.所述含有多粘类芽孢杆菌kn-03的种子处理组合物，其特征在于，组合物中多粘类芽孢杆菌占组合物总质量百分含量的1％～30％，所述戊唑醇占组合物总质量百分含量的0.1％～30％。
10.所述种子处理组合物的剂型为悬浮种衣剂或种子处理可分散粉剂，施用方法为种子包衣或拌种。
11.进一步地，所述种子处理组合物适用于防治小麦纹枯病、小麦茎基腐病、马铃薯黑痣病、西瓜枯萎病等土传病害，尤其适用于防治小麦纹枯病。
12.本发明所述的种子处理组合物，包括有效成分、助剂和填料。
13.所述有效成分由多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇组成，所述助剂选自润湿剂、分散剂、成膜剂、增稠剂、消泡剂、防冻剂、防腐剂、警戒色中的一种或两种以上的组合。
14.所述填料选自白炭黑、高岭土、硅藻土、膨润土、滑石粉、陶土、蒙脱石、黏土、去离子水、自来水中的一种或两种以上的组合。
15.将上述各组分按照农药种子处理剂的常规加工方法即可制得本发明所述的悬浮种衣剂和种子处理可分散粉剂。
16.本发明所述的种子处理组合物的施用方法可用于但不限于种子包衣或拌种，还可应用于浸种等。
17.本发明所述的种子处理组合物的应用范围可用于但不限于悬浮种衣剂和种子处理可分散粉剂中，还可应用于可湿性粉剂、种子处理悬浮剂、水分散粒剂、种子处理干粉剂、干拌种剂、湿拌种剂、种子处理微囊悬浮剂等农药剂型中。
18.与现有技术相比，本发明产生的有益效果为：
19.(1)本发明的种子处理组合物克服了较高浓度戊唑醇处理种子引起的小麦发芽率低、出苗率低、根系生长受到抑制的缺点；
20.(2)本发明的种子处理组合物防治小麦纹枯病增效作用明显；
21.(3)本发明的种子处理组合物能够明显地促进小麦幼苗根系生长；
22.(4)本发明的种子处理组合物有明显的增产效果；
23.(5)本发明的种子处理组合物中，多粘类芽孢杆菌kn-03作用机理特殊，和戊唑醇复配，作用位点增加，降低了纹枯病病原菌对戊唑醇抗药性风险；
24.(6)本发明的种子处理组合物大大减少了化学农药使用量，安全、环保。
具体实施方式
25.为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明做进一步说明。
26.室内生物测定试验实施例
27.多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇复配对小麦纹枯病菌的室内生物测定试验
28.试验对象：小麦纹枯病菌(rhizoctonia cerealis)。
29.试验方法参考中华人民共和国农业行业标准《农药室内生物测定试验准则ny/t1156.2-2006》，采用菌丝生长速率法。多粘类芽孢杆菌kn-03母药和戊唑醇原药分别采用蒸馏水和丙酮溶解，再用0.1％吐温-80水溶液将单剂及各混配药剂稀释成5个不同质量浓度梯度。设清水为空白对照，每处理重复3次。将培养好的病原菌，在无菌条件下用直径为5mm的打孔器，自菌落边缘切取菌饼，用接种针将菌饼接于不同药剂浓度的培养基平板上，置于26℃恒温箱中培养48h；检查菌落直径，计算各药剂处理抑制菌丝生长的百分率，通过抑制率的机率值和系列浓度的对数值之间的线性回归分析，求出各药剂的ec
50
值，用孙云沛法计算混剂的共毒系数(ctc)，以此来评价供试药剂对病菌的活性。复配剂的共毒系数(ctc)≥120表现为增效作用；ctc≤80表现为拮抗作用；80＜ctc＜120表现为相加作用。
30.表1多粘类芽孢杆菌kn-03与戊唑醇复配对小麦纹枯病菌的室内毒力测定试验结果
[0031][0032]
室内毒力测定试验结果表明：多粘类芽孢杆菌kn-03与戊唑醇以质量比为100:1～1:1比例混配对小麦纹枯病菌有较好的毒力，均表现为增效作用。其中多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以30:1～10:1之间的比例复配，其共毒系数均大于180，增效作用最为显著。
[0033]
制剂配方实施例
[0034]
种子处理可分散粉剂
[0035]
按照配方要求，将有效成分、润湿剂、分散剂、警戒色、填料预混合均匀，再进行粉碎，然后混合均匀，控制指标随时检测，合格后出料，分装，即得种子处理可分散粉剂。
[0036]
以下实施例1—实施例3均按照以上制备工艺。
[0037]
实施例1：10.1％多粘类芽孢杆菌kn-03
·
戊唑醇种子处理可分散粉剂
[0038]
[0039][0040]
实施例2：20.4％多粘类芽孢杆菌kn-03
·
戊唑醇种子处理可分散粉剂
[0041][0042]
实施例3：60％多粘类芽孢杆菌kn-03
·
戊唑醇种子处理可分散粉剂
[0043][0044]
悬浮种衣剂
[0045]
按照配方要求，将有效成分、润湿剂、分散剂、成膜剂、增稠剂、防冻剂、消泡剂、防腐剂、警戒色和去离子水等混合，进行高剪切预分散，然后加入砂磨釜中，进行研磨至粒径小于5μm，即可制得悬浮种衣剂。
[0046]
以下实施例4—实施例6均按照以上制备工艺进行。
[0047]
实施例4：4.2％多粘类芽孢杆菌kn-03
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戊唑醇悬浮种衣剂
[0048][0049]
实施例5：6.2％多粘类芽孢杆菌kn-03
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戊唑醇悬浮种衣剂
[0050][0051]
实施例6：5％多粘类芽孢杆菌kn-03
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戊唑醇悬浮种衣剂
[0052][0053]
实施例7：1.1％多粘类芽孢杆菌kn-03
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戊唑醇悬浮种衣剂
[0054][0055]
室内发芽率、出苗率实施例
[0056]
为了观察不同复配种子处理组合物对小麦种子发芽率、出苗率的影响，本发明按照gb/t 3543.4-1995试验标准进行了小麦种子发芽率、出苗率的测定，采用土培法。
[0057]
表2不同复配种子处理组合物对小麦发芽率、出苗率的影响结果
[0058][0059]
从表2可以看出，多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以本发明的不同比例组合物处理小麦种子后，小麦发芽率和出苗率比戊唑醇单剂对照明显提高，比清水对照略高，可见多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以一定比例复配可以提高小麦种子的发芽率和出苗率，克服了较高浓度戊唑醇处理种子对小麦发芽率和出苗率的影响。
[0060]
田间药效实施例
[0061]
田间药效试验方法参考gb/t 17980.108-2004。于2018年10月-2019年6月在河南省博爱县西张茹村进行了制剂实施例1—7包衣处理小麦种子防治小麦纹枯病的田间试验。对照药剂为100亿cfu/克多粘类芽孢杆菌kn-03悬浮种衣剂、6％戊唑醇悬浮种衣剂和15％吡虫啉
·
福美双
·
烯唑醇悬浮种衣剂。试验共设9个处理，每个处理重复4次，共计36个小区，小区面积20m2，采用随机区组排列。试验于2018年10月8日种子包衣或拌种，阴凉处风干备用，10月10日播种，播种至调查结果间未施用其它杀菌剂。
[0062]
作物健康调查：于11月27日调查记录各处理区小麦生长情况，方法为每个处理区调查5点，每点200株，包括根长、根数等等指标。
[0063]
药效调查：于3月3日调查每个处理区纹枯病的发生情况，方法为每个处理区调查5点，每点200株，调查各小区纹枯病的发病指数，统计防效。
[0064]
测产调查：于6月5日调查每个处理的小麦产量，方法为每个处理区调查5点，调查亩有效穗数(每点计1平方米的有效穗数)、穗粒数(每点取30个穗，计每穗的穗粒数)、千粒
重等指标，计算每个处理的亩产量。
[0065]
表3不同复配种子处理组合物对小麦幼苗根系的影响结果
[0066][0067][0068]
从表3可以看出，多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以本发明的不同比例组合物处理小麦种子后，小麦根数和根长比戊唑醇单剂对照和清水对照明显增加，可见多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以一定比例复配，不仅克服了较高浓度戊唑醇处理种子对小麦根系的抑制影响，而且表现出了明显的根系促生长作用。
[0069]
表4不同复配种子处理组合物对小麦纹枯病的防治效果
[0070][0071][0072]
从表4可以看出，多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以本发明的不同比例组合物处理小麦种子后，对小麦纹枯病的防效均在86％以上，明显高于单剂对照和常规药剂对照的防效，可见多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以一定比例复配对小麦纹枯病有很好的增效作用。
[0073]
表5不同复配种衣剂组合物对小麦产量的影响
[0074][0075]
从表5可以看出，多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以本发明的不同比例组合物处理小麦种子后，对小麦亩产量有明显的影响。以本发明不同比例组合物处理的小麦亩产量明显高于单剂对照、常规药剂对照和清水对照，小麦亩产量增加比明显高于单剂对照和常规药剂对照，高达39％，可见多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇以一定比例复配能够明显增加小麦亩产量。
[0076]
从表2、表3、表4和表5可以看出，使用多粘类芽孢杆菌kn-03和戊唑醇复配的种子处理剂防治小麦纹枯病，可以减少化学农药的用药量，减轻环境污染。
[0077]
上面结合实施例对本发明进行了示例性的描述，显然本发明的实现并不受上述实施例的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种改进，或未经改进将本发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围内。