技术特征：
1.一种长期保存人abo血型红细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1）红细胞洗涤：使用生理盐水洗涤压积红细胞，然后低速离心，弃去上清液获得洗涤后的红细胞；步骤2）红细胞固定：将步骤1）洗涤好的红细胞按照体积比1:20的比例加入固定液中混匀，低速离心，弃去上清液后加入20倍体积的生理盐水继续低速离心，重复两次，所述固定液由0.01-0.03 %wt 戊二醛、0.4-0.8 g/l 磷酸二氢钠、0.2-0.6 g/l 氯化钾、4-8 g/l 氯化钠、2-6 g/l葡萄糖和2-6 g/l 碳酸氢钠组成；步骤3）冻干前处理：将步骤2）固定好的红细胞按照体积比1:20的比例加入冻干保存液中混匀，低速离心，弃去上清液然后加入20倍体积的生理盐水继续低速离心，重复两次，弃去上清液后再按照体积比1:20的比例加入冻干保存液并混匀，所述冻干保存液由0.4-0.8 g/l 磷酸二氢钠、0.2-0.6 g/l 氯化钾、4-8 g/l 氯化钠、8-12 g/l 海藻糖和3-7 g/l 牛血清白蛋白组成；步骤4）红细胞冻干：将步骤3）处理好的红细胞进行冻干，然后置于2-8℃下保存。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固定液由0.03 %wt 戊二醛、0.68 g/l 磷酸二氢钠、0.4 g/l 氯化钾、6 g/l 氯化钠、2 g/l葡萄糖和2 g/l 碳酸氢钠组成。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述冻干保存液由0.68 g/l 磷酸二氢钠、0.4 g/l 氯化钾、6 g/l 氯化钠、10 g/l 海藻糖和5 g/l 牛血清白蛋白组成。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中使用生理盐水洗涤压积红细胞的体积比为10:1。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中低速离心操作为600-800g离心3-6min，重复3次。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2）和步骤3）中低速离心操作为600-800g离心3-6min。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4）的冻干操作包括：1）冷冻：4℃、 2h，-20℃、2h，-40℃、2h；2）升华干燥：设置真空度为5，干燥12h；3）解析干燥：设置真空度为10，干燥12h。8.权利要求1-7任一项所述的方法得到的冻干人abo血型红细胞。9.权利要求8所述的冻干人abo血型红细胞在血型反定型检测中的应用。10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述冻干人abo血型红细胞可直接用于检测血清中的抗体。
技术总结
本发明属于人ABO血型检测领域，具体涉及一种能冻干保存的人ABO血型反定型红细胞及保存方法。本发明采用先固定再冻干的方法，并对冻干工艺进行了优化，由本发明方法制得的冻干红细胞能在2-8℃下保存至一年，并且能直接用于细胞反定型检测。于细胞反定型检测。
技术研发人员：商巧娜 王伟权 黄志刚 王秀柱 王丽 郝进学
受保护的技术使用者：天津德祥生物技术股份有限公司
技术研发日：2022.11.01
技术公布日：2022/11/29