本发明属于食用菌栽培,具体涉及一种大球盖菇菌种选育培养基及制备方法。
背景技术:
1、大球盖菇的菇色呈葡萄酒红色,色泽艳丽,菇体清香味鲜,盖滑柄脆,口感十分美好,极具韧性,满口余香,不仅营养丰富,还能防治多种疾病,经常食用会有助于人体的健康。富含相当高的蛋白质和对人体有益的多种矿物质元素及维生素,能治疗或改善人体多种疾病之功效,堪称是色鲜味美,具有“素中之荤”的全价营养保健食品,富含蛋白质、多糖、矿质元素、维生素等生物活性物质,氨基酸含量达17种,人体必需氨基酸齐全。
2、近年来,大球盖菇在我国各地都有栽培并逐渐形成规模,其中华中、华北和华东区域种植大球盖菇的范围较大,由于不同区域的气候和原料存在一定差异,因此各区域都发展出了不同的栽培模式和方法,如林下栽培、露天栽培、大棚栽培等。此外,大球盖菇还可产生降解木质素、纤维素、半纤维素的胞外酶,可以有效降解利用秸秆等农业废弃物。因此大球盖菇的栽培和推广给各地带来了良好的经济和社会效益。
3、现有的大球盖菇原种和栽培种菌种生长中存在的主要问题是:①原种和栽培中菌丝生长缓慢,接种后需培养30天以上,需要占用大量的培养室;②菌种易感染杂菌和出现老化现象,在栽培上出现产量低、病害严重;③由于原种和栽培种培养的时间长,不利于大面积生产出栽培种,使大球盖菇的大面积应用受到限制。
技术实现思路
1、本发明为了解决现有大球盖菇生产的缺陷,提供了一种高出菇率的大球盖菇菌种选育培养基及大球盖菇培养方法。
2、本发明一方面提供大球盖菇菌种选育培养基,其包含下述组分:质量单位1.0-3.0%的蔗糖,麦麸10-20%、50-60%的稻草,5-10%的草木灰,0.1-0.5%的维生素,1-6%的金银花酵母发酵提取物,0.5-1ppm的生长调节剂。
3、其中所述维生素可以为维生素b1、维生素b2、维生素b5、维生素b7中的一种或多种。
4、在一个具体的实施方式中,所述维生素可以为维生素b7。
5、在一个具体的实施方式中,维生素b7的含量可以为0.1-0.5%,优选为0.2-0.4%,更优选为0.3%(w/w)。
6、在一个具体的实施方式中,金银花提取物的含量可以为1-6%,优选为2-5%,更优选为4%。
7、在一个具体的实施方式中,生长调节剂可以为生长素、赤霉素、细胞分裂素、激动素中的一种或多种。
8、在一个具体的实施方式中,所述生长调节剂可以为赤霉素。
9、在一个具体的实施方式中,赤霉素的含量可以为0.5-1ppm,优选为0.6-0.9ppm,更优选为0.8ppm。
10、本发明另一方面提供一种上述培养基的制备方法:
11、将稻草和麦麸粉碎至5-10目,草木灰使用5-10目的筛子过滤。然后将麦麸、稻草、草木灰按比例混合均匀后浸泡或喷淋水,浸水时间为24-36h,至含水量为手握培养料,水珠不滴落即可,然后加入维生素、金银花酵母发酵提取物、生长调节剂混合均匀灭菌即可。
12、本发明的另一方面提供一种大球盖菇的培养方法,其包含如下步骤:
13、1、菌株活化
14、取市售的大球盖菇菌株的试管原种,在超净工作台内酒精灯火焰附近严格按照无菌操作,挑取黄豆粒大小菌块,接种至第一步制好的 pda 斜面中部。塞好试管塞,做好标签,放入25℃恒温培养箱内培养10 d,待长满后备用。
15、2、大球盖菇培养
16、将经灭菌的三角瓶和打孔器放入超净工作台,紫外杀菌 30 min 后开启超净工作台风机,点燃酒精灯,从恒温培养箱中取出活化好的菌种,在超净工作台中用经灭菌的打孔器打出约 8 mm 的小菌块,用接种针将菌丝块接入 250 ml 含有特制培养基三角瓶中,每瓶5 枚菌块,然后盖上封口膜,用橡皮筋捆牢。将接种完毕的三角瓶置入恒温摇床中,160r/min,温度 25℃进行培养,培养10 d 后备用。
17、3、大球盖菇生物量以及相应指标测定
18、1)菌丝体生物量测量
19、摇匀菌液后,过滤菌丝体,反复冲洗,直至漂洗出来的水中无可见固形物残渣,收集到质量称量完毕的平皿中,60℃恒温烘干,直至平皿重量 12 h 内不再变化,取出平皿,置于分析天平中称量质量,得到菌丝体干重,将所得数值换算至 g/l,得到菌丝生物量。
20、菌丝体生物量=烘干后培养皿质量-培养皿实际质量。
21、2)菌丝球直径测量
22、充分摇匀菌液后,取 10 ml 菌液于直径 9 cm 培养皿中,拍摄照片后参照白光红等方法使用 imagej 软件进行处理,选用五点法划定范围,即在培养皿的中间、左上、左下、右上、右下,分别随机选取 6 个菌球,共计 50 个,使用 imagej 测量工具测定菌球直径。
23、3)菌丝球回接试验的菌丝萌发时间和生长速度测定
24、在无菌环境下取 10 ml 菌液于直径 9 cm 培养皿中,用镊子夹取菌丝球接种于cym 平板上,每个处理重复 5 次,接种后置于 25℃恒温培养箱中培养,并在接种后观察菌丝萌发情况并记录萌发时间。
25、在无菌环境下取 10 ml 菌液接种于回接栽培试管中,每个处理重复 10 次,接种后置于 25℃恒温培养箱中培养,并在接种后观察菌丝在栽培试管中的生长情况,记录试管满管时间,进行统计分析并计算平均长速。
26、回接试管平均长速=栽培料长度/平均满管时间。
27、4)大球盖菇菌丝氨基酸含量测定。
28、5)大球盖菇菌丝蛋白质含量测定。
29、6)大球盖菇菌丝vc含量测定。
30、有益效果:本发明的大球盖菇菌种选育培养基以及制备方法具备以下优势:
31、1、配方简单,取材容易,成本低。
32、2、显著缩短菌丝生长周期,加快生长速度。
33、3、提高了大球盖菇的生物量,并增加了其氨基酸、蛋白质以及vc的含量,大大增加了大球盖菇的营养价值。
1.一种大球盖菇菌种选育培养基,其包含如下组分:质量单位1.0-3.0%的蔗糖,麦麸10-20%、50-60%的稻草,5-10%的草木灰,0.1-0.5%的维生素,1-6%的金银花酵母发酵提取物,0.5-1ppm的生长调节剂。
2.根据权利要求1所述的培养基,其中维生素可以选自维生素b1、维生素b2、维生素b5、维生素b7中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的培养基,维生素含量优选为0.2-0.4%,更优选为0.3%。
4.根据权利要求1所述的培养基,生长调节剂的含量0.5-1ppm,优选为0.6-0.9ppm,更优选为0.8ppm。
5.根据权利要求1所述的培养基,金银花酵母发酵提取物的含量优选为2-5%,更优选为4%。
6.根据权利要求1所述的培养基,其组分含量为:2%的蔗糖,麦麸20%,50%的稻草,10%的草木灰,0.3%的维生素b7,4%的金银花酵母发酵提取物,0.8ppm的赤霉素。
7.一种大球盖菇的生产方法,其特征在于,使用权利要求1-6任一项所述的培养基培养。
8.根据权利要求7所述的方法,其中培养基的配置步骤如下:将稻草和麦麸粉碎至5-10目,草木灰使用5-10目的筛子过滤。然后将麦麸、稻草、草木灰按比例混合均匀后浸泡或喷淋水,浸水时间为24-36h,至含水量为手握培养料,水珠不滴落即可,然后加入维生素、金银花酵母发酵提取物、生长调节剂混合均匀灭菌即可。
9.根据权利要求7的方法,其中金银花酵母发酵提取物的提取步骤为:
10.一种大球盖菇,其由权利要求1-6任一项所述的培养基或权利要求7-9任一项所述的方法生产得到。