一种花叶红叶石楠的组培快繁方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物组织培养技术领域，涉及一种组培方法，具体涉及一种花叶红叶石楠的组培快繁方法。
【背景技术】
[0002]花叶红叶石楠x fraseri ??是红叶石楠的一个变种，为常绿灌木，因其鲜红色的新梢和叶片的叶缘带白斑而得名，具有较高的观赏价值。花叶红叶石楠作为珍贵的常绿彩叶树种，具有生长快，耐修剪，株型紧凑，萌芽力强，适生范围广的特点；其喜阴、耐酸、耐盐碱、耐旱、耐寒且耐贫瘠，黄河以南绝大部分地区均可种植。花叶红叶石楠的叶片在初现时为红色，边缘白色，随着叶片成熟而逐渐转变为深绿色而具银白色叶脉，如同大理石一般，在生长后期带有粉色色调，配合修剪可常年保持极其醒目的鲜红色；它的用途广泛，可作绿篱、绿墙、造型树、孤植树等，效果俱佳。
[0003]随着人们生活水平的不断提高，环境的净化和美化愈来愈受到人们的普遍关注，用于园林绿化的植物除了占绝对量的绿色植物外，还具有大量起构图、配色和点睛作用的彩叶植物，尤其是红叶树种。花叶红叶石楠是近年新发现的品种，在市场上的发展潜力非常大，目前还处于种苗繁育阶段，市场上尚未有销售。花叶红叶石楠常规的繁殖方法为扦插，繁殖速度慢，大大限制了花叶红叶石楠的推广速度。
[0004]植物快繁基本采用植物组织培养技术，进入20世纪60年代以来，植物的组织培养技术进入产业化应用阶段，研宄深入扎实，实现了工业化育苗，是一种切实有效的方法和途径，具有丰富的理论价值和现实意义。现在尚没有关于花叶红叶石楠快繁技术的公开，因此，急需进行花叶红叶石楠组培快繁技术的研宄，建立花叶红叶石楠组培快繁体系，获得花叶红叶石楠无菌组培苗。
【发明内容】
[0005]本发明解决了现有技术中花叶红叶石楠繁殖速度慢的问题，提拱了一种花叶红叶石楠的组培快繁方法，为花叶红叶石楠的工业化育苗提供了技术支持。
[0006]本发明的目的通过以下技术方案实现:一种花叶红叶石楠的组培快繁方法，它包括以下步骤:
(I)外植体灭菌:采集无病虫害的花叶红叶石楠当年生幼嫩茎段，去掉叶片，用清水冲洗30?40min，洗涤剂浸泡8?12min，清水冲洗3?5次，放置在超净工作台上，用70?80%酒精灭菌18?25s，0.1?0.2%升未处理5?8min，用无菌水冲洗4?6次；(2)初代培养:将灭菌后的幼嫩茎段切割成2?3cm茎段，接种到初代培养基中，在培养室内培养2?3周，腋芽伸长2?4cm;
(3)继代培养:将腋芽切下接种到继代培养基中，在培养室中培养3?4周，植株的叶腋处丛生芽生成；
(4)生根培养:将生成的丛生芽切下接种到生根培养基中，在培养室内培养3?4周，得到健壮的生根花叶红叶石楠无菌组培苗，植物生长6?7cm，生根数为2?4根，根长3?5cm ；
(5)炼苗移栽:将生根强壮的花叶红叶石楠无菌组培苗置于室外2?5天后，炼苗6?8天，洗掉花叶红叶石楠无菌组培苗上的培养基，移栽到大棚苗床上，控制大棚内的温度为22?26°C，空气湿度为65%?72%。
[0007]进一步地，所述的初代培养基为1/2WPM+ ΙΑΑ0.3mg/L + GA0.5mg/L +蔗糖30g/L+琼脂 5g/L, pH 5.8 ?6.2。
[0008]进一步地，所述的继代培养基为ΝΝ69+ΖΤ0.2mg/L+CPPU 0.5mg/L+0.3g/L水解酪蛋白+鹿糖30g/L+琼脂5g/L, pH 5.8?6.2ο
[0009]进一步地，所述的生根培养基为1/4WPM+NAA0.3mg/L +蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH5.8 ?6.2ο
[0010]进一步地，步骤(2)、步骤(3)和步骤(4)中所述的培养室内条件为:光照强度2800LX ?3200LX，光照时间 14 ?18h/d，温度 22 ?26。。。
[0011]进一步地，所述的移栽过程中移栽基质为珍珠岩和腐殖土混合，两者重量比为1:1.5?2.5 ;大棚里面用市售的遮阳网遮光降温保湿。
[0012]更进一步地，所述的移栽过程包括每天早晚叶面喷水，培养3?5周后，见到新叶开始生长，表明移栽的花叶红叶石楠成活。
[0013]本发明具有以下有益效果:(I)本发明采用组织培养技术，建立了组培快繁体系，经济高效、不受季节气候变化及自然灾害的影响，花叶红叶石楠的工业化育苗提供了技术支持；(2)本发明培养流程明了，操作简便，提高了花叶红叶石楠的繁殖效率，能够快速获得花叶红叶石楠无菌组培苗；(3)本发明得到的花叶红叶石楠无菌组培苗经过炼苗移栽成活率在80%以上。
【附图说明】
[0014]图1是本发明所述的花叶红叶石楠初代培养中腋芽；
图2是本发明所述的花叶红叶石楠继代培养中叶腋处丛生芽；
图3是本发明所述的花叶红叶石楠生根培养中花叶红叶石楠组培苗根部；
图4是本发明所述的花叶红叶石楠移栽成活植株。
【具体实施方式】
[0015]下面结合实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述。
[0016]实施例1:一种花叶红叶石楠的组培快繁方法，它包括以下步骤:
(1)外植体灭菌:采集无病虫害的花叶红叶石楠当年生幼嫩茎段，去掉叶片，用清水冲洗30min，洗涤剂浸泡12min，清水冲洗5次，放置在超净工作台上，用70%酒精灭菌18s，0.1%升未处理5min，用无菌水冲洗4次；
(2)初代培养:将灭菌后的幼嫩茎段切割成2cm茎段，接种到初代培养基中，在培养室内培养2周，腋芽伸长2cm，其中:初代培养基为:1/2WPM+ IAA0.3mg/L + GA0.5mg/L +蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH 5.8 ;培养室内条件为:光照强度2800LX，光照时间14h/d，温度26 °C ；
(3)继代培养:将腋芽切下接种到继代培养基中，在培养室中培养3周，植株的叶腋处丛生芽生成，其中:继代培养基为:NN69+ZT0.2mg/L+CPPU 0.5mg/L+0.3g/L水解酪蛋白+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH 5.8 ;培养室内条件与步骤(2)中一致；
(4)生根培养:将生成的丛生芽切下接种到生根培养基中，在培养室内培养3周，得到健壮的生根花叶红叶石楠无菌组培苗，植物生长6cm，生根数为2根，根长3cm，其中，生根培养基为:1/4WPM+NAA0.3mg/L +蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH 5.8 ;培养室内条件与步骤(3)中一致；
(5)炼苗移栽:将生根强壮的花叶红叶石楠无菌组培苗置于室外2天后，炼苗6天，洗掉花叶红叶石楠无菌组培苗上的培养基，移栽到用市售的遮阳网遮光降温保湿的温室大棚的苗床上，控制大棚内的温度为22°C，空气湿度为65%，其中:移栽过程中所用基质为珍珠岩和腐殖土混合，两者重量比为1:1.5。
[0017]所述的移栽过程包括每天早晚叶面喷水，培养3?5周后，见到新叶开始生长，表明移栽的花叶红叶石楠成活，再过2周，调查花叶红叶石楠的成活率，成活率为80%。
[0018]实施例2:—种花叶红叶石楠的组培快繁方法，它包括以下步骤:
(1)外植体灭菌:采集无病虫害的花叶红叶石楠当年生幼嫩茎段，去掉叶片，用清水冲洗40min，洗涤剂浸泡8min，清水冲洗3次，放置在超净工作台上，用80%酒精灭菌25s，0.2%升未处理8min，用无菌水冲洗6次；
(2)初代培养:将灭菌后的幼嫩茎段切割成3cm茎段，接种到初代培养基中，在培养室内培养3周，腋芽伸长4cm，其中:初代培养基为:1/2WPM+ IAA0.3mg/L + GA0.5mg/L +蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH 6.2 ;培养室内条件为:光照强度3200LX，光照时间18h/d，温度22 0C ；
(3)继代培养:将腋芽切下接种到继代培养基中，在培养室中培养4周，植株的叶腋处丛生芽生成，其中:继代培养基为:NN69+ZT0.2mg/L+CPPU 0.5mg/L+0.3g/L水解酪蛋白+蔗糖30g/L+琼脂5g/L, pH 6.2 ;培养室内条件与步骤(2)中一致；
(4)生根培养:将生成的丛生芽切