一种离体肝脏灌注保存液的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及器官移植技术领域，更具体地，涉及一种离体器官灌注保存液。
【背景技术】
[0002] 器官移植是一些疾病的最终治疗手段，通过器官移植，一些患者的生命得以延续。 器官移植中一个非常关键的步骤是离体器官的保存，这在很大程度上决定了器官移植的成 败，一般从其他供体上切取的器官不可能马上就移植到患者体内，必然有一个储存转运的 过程，而在常温下，离体器官的细胞仍进行缺氧代谢，引起细胞内酸中毒、线粒体产能障碍、 细胞内钙超载、细胞肿胀、大量自由基生成，最终导致离体器官发生不可逆转的病变或死 亡，因此，需要对获得的离体器官进行适当的灌注保存。
[0003] 临床上公认的离体器官的保存液有UW液，其主要缺点是其抗氧化作用弱，因 UW液中含有含羟乙基淀粉，从而粘滞性过高、对离体器官和肺保存效果不好；申请号为 200610124269. 3的中国专利公开了一种新型多器官储存保护液，该保护液应用了褪黑素、 维生素 C和水溶性维生素 E组成的抗氧化系统，旨在降低器官储存过程中自由基导致的氧 化损伤；申请号为200810036928. X的中国专利公开了一种离体肝脏灌注保存液，其更有效 的应用于离体肝脏的0~4°C保存，可防止低温导致的缺血性损伤、细胞水肿及继发性损 伤。
[0004] 另外，在肝脏移植中还有很多移植机会由于保存时间限制而失去，即使移植手术 很成功，却因为保存过程对肝组织的损伤导致肝脏质量下降和免疫排斥造成移植失败，为 了提高肝脏移植手术的成功率，有必要研制一种针对于离体肝脏的灌注保存液。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的问题是克服现有技术所存在的缺陷，提供一种离体器官灌注保 存液。
[0006] 本发明所述目的是通过以下技术方案予以实现的： 一种离体肝脏灌注保存液，每820mL保存液中含有以下各组分： 供体全血 500~BOOmT,； 抗生素 （λ 8~2g ; 20%白蛋白 20~50mL; 胰岛素 300~500u ; 肝素 20000 ~30000u ; 10%复方氨基酸 20~40mL ; 葡萄糖 10~20g ; 地塞米松 2~IOmg ; 10%氯化钠 2~5mL ; 5%碳酸氢钠 20~30mL ; 生理盐水 80~120mL ; ATP-MgCl2 50 ~65g ; S-腺苷蛋氨 1~3g ; 前列地尔 10~20ug ; 余量为去离子水，所述的复方氨基酸为复方氨基酸注射液18aa。
[0007] 在进行器官移植时，需要对从供体切下的器官进行暂时的灌注和保存，现有技术 中也有器官灌注保存液，但其所公开的灌注保存液仅能从一个方面解决问题，例如，申请号 为200610124269. 3的中国专利公开了一种新型多器官储存保护液，该保护液应用了褪黑 素、维生素 C和水溶性维生素 E组成的抗氧化系统，旨在降低器官储存过程中自由基导致的 氧化损伤；申请号为200810036928. X的中国专利公开了一种离体肝脏灌注保存液，其更有 效的应用于离体肝脏的0~4°C保存，可防止低温导致的缺血性损伤、细胞水肿及继发性损 伤；本发明所述灌注保存液针对肝脏移植手术，探索出了新的全面保护离体肝脏，同时能够 持续为离体肝脏提供能量和代谢底物的灌注保存液。
[0008] 本发明所述离体肝脏的灌注保存液包括按照比例混合而成的供体全血、白蛋 白、抗生素、胰岛素，肝素，复方氨基酸，葡萄糖、地塞米松、氯化钠、碳酸氢钠、生理盐水、 ATP_MgCl2、S-腺苷蛋氨。
[0009] 其中，供体全血可提供体外灌注时离体器官所需红细胞，作为载氧剂；同时全血中 的血浆可维持灌注液中的胶体渗透压；抗生素可抑制在器官获取及灌注过程中进入灌注液 及器官内的革兰氏阴性杆菌、阳性球菌以及厌氧菌。
[0010] 20%白蛋白可维持灌注液中胶体渗透压，使细胞内外胶体渗透压保持平衡。
[0011] 胰岛素促进葡萄糖向细胞内转移，并促进蛋白质合成；10%复方氨基酸为离体器 官的蛋白质合成提供代谢底物；5%葡萄糖为离体器官的能量代谢提供底物，是主要能量来 源；而50%葡萄糖除了作为能量来源外，同时可促进肝细胞再生。
[0012] 地塞米松：稳定细胞膜和细胞器膜，减轻器官炎症反应。
[0013] 肝素防止灌注液中的全血成分出现凝固血块，同时溶解灌注器官的微小血管中形 成的血栓；10%氯化钠维持灌注液中的晶体渗透压，提供灌注液中的钠离子；5%碳酸氢钠可 中和器官在获取过程中及灌注前由于无氧代谢所产生的大量酸性物质，稳定灌注液中的PH 值。
[0014] 生理盐水：增加灌注液容量，做为灌注液的主要溶剂，同时可提供稳定的晶体渗透 压，使灌注液处于等渗状态；ATP-MgCl2:向细胞直接提供能量，恢复器官细胞一定的能量贮 备，使热缺血的器官组织ATP含量增加；稳定细胞膜和细胞器膜，降低细胞膜通透性，减轻 细胞水肿；改善复流后的微循环和区域灌注量，从而缓解肝组织的低氧和低能状态；S-腺 苷蛋氨：可提高肝细胞DNA甲基化水平，促进DNA的合成，诱导肝细胞早期有丝分裂，促其再 生，同时有利于细胞内ATP的产生；前列地尔可扩张器官内血管，改善灌注血流；维持晶体 渗透压和胶体渗透压。
[0015] 优选地，上述灌注保存液还包括5~IOmL 10%葡萄糖酸钙；葡萄糖酸钙可以维护 细胞膜和毛细血管的正常通透性，从而使肝脏细胞更好的浸泡在灌注保存液中。
[0016] 申请人在复配上述灌注保存液的过程中，发现前列地尔与葡萄糖酸钙的配比对灌 注液的保存效果影响显著，优选地，只有前列地尔与10%葡萄糖酸钙的用量比为10~16ug : 6~IOmL时，离体肝脏在所述灌注保存液中的保存时间长，且对肝脏的不良影响最小。
[0017] 优选地，上述保存液中，每820mL保存液中含有以下各组分： 供体全血 500~520mL ; 抗生素 0. 8~I. 5g ; 20%白蛋白 25~35mL; 胰岛素 400~420u ; 肝素 25000 ~28000u ; 10%复方氨基酸 25~30mL ; 葡萄糖 10~18g ; 地塞米松 4~IOmg ; 10%氯化钠 2~5mL ; 5%碳酸氢钠 25~30mL ; 生理盐水 80~IOOmL ; ATP-MgCl2 60 ~65g ; S-腺苷蛋氨 1~3g ; 前列地尔 10~16ug ; 10%葡萄糖酸1丐 6~IOmL 余量为去尚子水。
[0018] 优选地，所述的抗生素选自甲硝唑、头孢唑林中的一种或两种。
[0019] 提供上述任意一种肝脏灌注保存液在制备器官移植保存制剂中的应用。
[0020] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果： 本发明提供了一种离体肝脏的灌注保存液，包括按照比例混合而成的供体全血、白 蛋白、抗生素、胰岛素，肝素，复方氨基酸，葡萄糖、地塞米松、氯化钠、碳酸氢钠、生理盐水、 ATP_MgCl2、S-腺苷蛋氨；离体肝脏在该灌注保存液中保存50h，肝细胞仅有轻微肿胀，其余 正常，