专利名称：一种能提高免疫功能兽药的生产工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种兽药，特别是一种关于能提高免疫功能兽药的生产工艺。
背景技术：
随着我国畜牧养殖业的发展，畜禽传染病已成为困扰畜牧业的一大难题。因此生产和制备治疗畜禽传染病的兽药就显得尤为重要，而生产和制备兽药的生产工艺就成为必不可少的重要环节，目前，市场上已有不少兽药，但一般通常是公知的抗菌素和抗病毒类的药，此类兽药只能“头疼医头，脚疼医脚”通常不能解决畜禽免疫力低下导致的畜禽疾病复杂多变性。因此，寻找和制备具有提高免疫功能的兽药及生产工艺十分必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种能提高免疫功能兽药的生产工艺，它不仅治愈率高还能提高免疫功能，它采用特殊的生产工艺，产量高，发酵周期大大缩短。
本发明的技术方案是提供一种能提高免疫功能兽药的生产工艺，其特征是优选α-溶血性链球菌33#菌种作为生产菌种，经一级发酵和二级发酵，生产甘露聚糖肽发酵液，将发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶15-30，控制pH 7.0-7.4制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1-2.0％及活性炭2-4.0％加入进行精制提纯，搅拌10-20分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液；加香精、矫味剂溶解配制，搅拌均匀后再过滤，配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg、pH 4.0-6.0的配制液，灌装封口，热压灭菌105-121℃，20-30分钟，经灯检合格后包装入库，最终生产出太空诱变菌种生产的α-甘露聚糖肽。
所述的菌种是α-溶血性链球菌33#经过空间诱变育种精心选育的诱变菌作为生产菌种；它经航天搭载诱变后选育出的菌种已经在2003年12月29日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，编号为CGMCCNo.1082。
所述的浓缩过程发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶20，控制pH 7.2制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1.5％及活性炭3％加入进行精制提纯，搅拌15分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液。
所述的发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶30，控制pH 7.3制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1.7％及活性炭3.5％加入进行精制提纯，搅拌17分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液。
所述的配制过程经提纯后的甘露聚糖肽发酵液加0.01-0.015％香精、0.01-0.08％矫味剂溶解搅匀，加纯化水配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg，pH 4.0-6.0的配制液。
所述的甘露聚糖肽发酵精制液含有甘露聚糖肽、多肽、蛋白、多种氨基酸、维生素。
本发明的特点是由于本发明采用的是优选α-溶血链球菌菌种发酵生产的甘露聚糖肽发酵液直接浓缩提纯精制而成的溶液，与甘露聚糖肽提纯制成原料粉药稀释而成的溶液比可保留许多的有效成分，含有比甘露聚糖肽更多的成分如多肽、蛋白、多种氨基酸、维生素。
本发明还在α-溶血链球菌生长规律的基础上，选定较合适生长时期的菌种，采用平皿生长的菌落、浸入其它物质中的菌悬液、带菌的砂土等方法，于2002年3月25日搭载“神舟三号”宇宙飞船在太空轨道(近地点高度200公里、远地点高度350公里)进行了6天零18小时的在轨飞行。太空的特殊条件主要体现为微重力、高真空、高辐射、交变磁场等特殊环境。在外层空间飞行的菌种被置于一个与地球上的生态环境完全不同的环境中，主要包括来自磁场俘获的电子、质子及低能重粒子；来自银河系的宇宙射线如质子、粒子及更重的高能重粒子；来自太阳磁暴的质子及重粒子等。这些粒子作用于微生物细胞核中的DNA双链结构，可导致双链断裂。微重力、高真空环境可使DNA的碱基序列发生重组，即基因组的重组和变异。变异后产生的新菌株，其形态特征、培养特征、生理生化反应、代谢产物、遗传性状及蛋白表达、中试生产指标等均会发生不同程度的变化。在宇宙飞船返回地面后，经过进一步筛选，仅优选出其中0.2％的正变异且遗传特性稳定的菌株，经培育制成生产菌种。这种经航天搭载诱变后选育出的菌种已经在2003年12月29日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，编号为CGMCCNo.1082。(见附页)特别是α-溶血链球菌33#菌株经太空搭载诱变、地面上的筛选、分离和纯化后，选育出发酵单位更高、所分泌的甘露聚糖肽含量更高的高产、优质菌株T33株。实验及中试生产结果表明，经空间诱变后的新型太空菌种在遗传特性上稳定，有较强的生产适应性，尤其发酵产生的甘露聚糖肽含量提高，发酵含量比对照组产物含量平均高出三倍以上，发酵周期大大缩短；发酵过程的工艺控制点比原工艺更适宜发酵的控制；根据兽药的特性，本工艺采用了浓缩提纯后再脱色过滤的方法，合理的控制工艺参数。将发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶15-30，通过控制pH 7.0-7.4制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1-2.0％及活性炭2-4.0％加入进行精制提纯，搅拌10-20分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液。这样可保留发酵液中有效成分去除大部分无用成分和杂质，提高药液的百分含量，可使疗效大大增强，更能提高产品质量及澄清度。
具体实施例方式
优选α-溶血性链球菌33#菌种进行太空搭载，经过太空诱变精心选育的α-溶血性链球菌33#菌珠作为生产菌种，经一级发酵和二级发酵，生产甘露聚糖肽发酵液，将发酵液浓缩、精制、提纯、过滤后，加适量香精、矫味剂溶解配制，搅拌均匀后再过滤，灌装封口，热压灭菌105-121℃，20-30分钟，经灯检合格后包装入库，检验合格后最终生产出太空诱变菌种生产的α-甘露聚糖肽兽药。
①太空菌种制备以经过空间诱变育种精心选育的α-溶血链球菌作为生产菌种。
A.斜面种子制备按配比配制斜面培养基牛肉膏0.2-0.8％，酵母膏0.2-0.8％，蛋白胨0.3-0.8％，葡萄糖0.1-0.8％，氯化钠0.2-0.6％，琼脂1-5％，绵羊血5-10％；pH 7.0-7.4；斜面种子培养基经在温度105-125℃，时间20-30分钟，蒸汽压力0.11-0.13Mpa灭菌；启封菌种冷冻管，在无菌条件下接入血斜面，接种后置30℃恒温培养24-30小时；B.摇瓶种子液制备按配比配制摇瓶培养基牛肉膏0.2-0.8％，酵母膏0.2-0.8％，蛋白胨0.3-0.8％，葡萄糖0.1-0.8％，氯化钠0.2-0.6％；pH 7.0-7.4；摇瓶种 子培养基经在温度105-125℃，时间30分钟，蒸汽压力0.11-0.13Mpa灭菌；将培养好的斜面菌种在无菌条件下按1-9％接种量接入摇瓶种子培养基内，25-40℃恒温培养10-30小时。
②发酵过程所述发酵过程用发酵培养基；牛肉膏0.2-0.8％，酵母膏0.2-0.8％，蛋白胨0.3-0.8％，葡萄糖0.1-0.9％，氯化钠0.2-0.6％；发酵培养基灭菌温度105-125℃，时间30分钟，蒸汽压力0.11-0.13Mpa；A.一级发酵罐将优良的摇瓶菌种在无菌条件下按1-10％接种量接入灭菌后的一级发酵罐，罐压不超过0.02Mpa，通气量以能翻动培养液为宜，在25-40℃恒温培养10-50小时；B.二级发酵罐将一级发酵培养液在无菌条件下按2-20％接种量接入灭菌后二级发酵罐，罐压不超过0.02Mpa，通气量以能翻动培养液为宜；在25-40℃恒温培养50-100小时，灭活放罐，灭活采用加温使发酵液温度达到70-120℃，保温20-60分钟，冷却静置。
③提纯过程将发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶15-25，控制pH 7.0-7.4制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1-2.0％及活性炭2-4.0％加入进行精制提纯，搅拌10-20分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液。
④配制经提纯后的甘露聚糖肽发酵精制液加0.01-0.015％香精(桔子香精、柠檬香精)、0.01-0.08％矫味剂(糖精钠、蛋白糖)溶解搅匀，加纯化水配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg，pH 4.0-6.0的配制液。
⑤灌装封口、灭菌将配制液按100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包装规格进行灌装，封口，热压灭菌105-121℃，20-30分钟后，用亮兰色液抽真空检漏，真空压力-0.078-0.08Mpa。
⑥灯检、包装对灭菌后的α-甘露聚糖肽进行灯检，检查每瓶内不得有异物并挑净兰瓶。贴标签、装箱入库。
⑦检验按α-甘露聚糖肽兽药的质量标准进行检验，合格后投入市场。
实施例1将优选α-溶血性链球菌33#菌种作为生产菌种，经上述一级发酵和二级发酵，生产甘露聚糖肽发酵液；发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶15，控制pH 7.0制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1％及活性炭2％加入进行精制提纯，搅拌10分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液；加入矫味剂糖精钠0.1g，加入香精0.1ml，搅匀，过滤，最后配制成含量为0.5mg/ml、pH 4.0的甘露聚糖肽提纯溶液1000ml，灌装封口制成分别为100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包装规格的α-甘露聚糖肽兽药，经流通蒸汽灭菌105℃，20分钟，灯检，包装，检验合格后投入市场。
实施例2将上述优选α-溶血性链球菌33#菌种进行太空搭载，经过太空诱变精心选育的α-溶血性链球菌33#菌珠作为生产菌种，经上述一级发酵和二级发酵，生产甘露聚糖肽发酵液；发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶20，控制pH 7.2制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1.5％及活性炭3％加入进行精制药，提纯，搅拌15分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液；加入矫味剂蛋白糖0.5g，加入香精0.15ml，搅匀，过滤，最后配制成含量为3mg/ml、pH 4.0-6.0的甘露聚糖肽提纯溶液1000ml，灌装封口制成分别为100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包装规格的α-甘露聚糖肽兽药，经流通蒸汽灭菌121℃，30分钟，灯检，包装，检验合格后投入市场。
实施例3将上述优选α-溶血性链球菌33#菌种进行太空搭载，经过太空诱变精心选育的α-溶血性链球菌33#菌珠作为生产菌种，经上述一级发酵和二级发酵，生产甘露聚糖肽发酵液；发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶25，控制pH 7.4制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩2％及活性炭4％加入进行精制提纯，搅拌20分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液。加入蛋白糖0.8g，搅匀，过滤，最后配制成含量为5mg/ml、pH 4.0-6.0的甘露聚糖肽提纯溶液1000ml，灌装封口制成分别为100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包装规格的α-甘露聚糖肽兽药，经流通蒸汽灭菌111℃，25分钟，灯检，包装，检验合格后投入市场。
实施例4将上述优选α-溶血性链球菌33#菌种进行太空搭载，经过太空诱变精心选育的α-溶血性链球菌33#菌珠作为生产菌种，经上述一级发酵和二级发酵，生产甘露聚糖肽发酵液；发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶30，控制pH 7.3制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1.7％及活性炭3.5％加入进行精制提纯，搅拌17分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液；加入蛋白糖0.5g，搅匀，过滤，最后配制成含量为5mg/ml、pH 4.0-6.0的甘露聚糖肽提纯溶液1000ml，灌装封口制成分别为100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包装规格的α-甘露聚糖肽兽药，经流通蒸汽灭菌121℃，30分钟，灯检，包装，检验合格后投入市场。
权利要求
1.一种能提高免疫功能兽药的生产工艺，其特征是优选α-溶血性链球菌33#菌种作为生产菌种，经一级发酵和二级发酵，生产甘露聚糖肽发酵液，将发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶15-30，控制pH7.0-7.4制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1-2.0％及活性炭2-4.0％加入进行精制提纯，搅拌10-20分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液；加香精、矫味剂溶解配制，搅拌均匀后再过滤，配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg、pH4.0-6.0的配制液，灌装封口，热压灭菌105-121℃，20-30分钟，经灯检合格后包装入库，最终生产出太空诱变菌种生产的α-甘露聚糖肽。
2.根据权利要求1所述的一种能提高免疫功能兽药的生产工艺，其特征是所述的菌种是α-溶血性链球菌33#经过空间诱变育种精心选育的诱变菌作为生产菌种；它经航天搭载诱变后选育出的菌种已经在2003年12月29日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，编号为CGMCCNo.1082。
3.根据权利要求1所述一种能提高免疫功能兽药的生产工艺，其特征是所述的浓缩过程发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶20，控制pH7.2制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1.5％及活性炭3％加入进行精制提纯，搅拌15分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液。
4.根据权利要求1所述一种能提高免疫功能兽药的生产工艺，其特征是所述的发酵后的甘露聚糖肽发酵液用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶30，控制pH7.3制成甘露聚糖肽发酵浓缩液；浓缩液按珍珠岩1.7％及活性炭3.5％加入进行精制提纯，搅拌17分钟，过滤后再抽滤提纯，制成甘露聚糖肽发酵精制液。
5.根据权利要求1所述一种能提高免疫功能兽药的生产工艺，其特征是所述的配制过程经提纯后的甘露聚糖肽发酵液加0.01-0.015％香精、0.01-0.08％矫味剂溶解搅匀，加纯化水配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg，pH4.0-6.0的配制液。
6.根据权利要求1所述一种能提高免疫功能兽药的生产工艺，其特征是所述的甘露聚糖肽发酵精制液含有甘露聚糖肽、多肽、蛋白、多种氨基酸、维生素。
全文摘要
本发明涉及一种兽药，特别是一种关于能提高免疫功能兽药的生产工艺，其特征是优选α－溶血性链球菌33#菌种作为生产菌种，经—级发酵和二级发酵，生产甘露聚糖肽发酵液，用浓缩器进行浓缩，使浓缩液体积与发酵液体积比控制在1∶15－30，控制pH7.0－7.4即为发酵浓缩液；加入珍珠岩1－2.0％及活性炭2－4.0％进行精制提纯，搅拌，过滤，再抽滤提纯，制成发酵精制液，加适量香精、矫味剂溶解配制，得到含量是每1000ml含α－甘露聚糖肽50－5000mg，pH4.0－6.0的配制液，灌装封口，热压灭菌105－121℃，20－30分钟，经灯检合格后包装入库，最终生产出太空诱变菌种生产的α－甘露聚糖肽。它不仅治愈率高还能提高免疫功能，它采用特殊的生产工艺，产量高，发酵周期大大缩短。
文档编号C12R1/46GK1827163SQ200510022780
公开日2006年9月6日 申请日期2005年12月31日 优先权日2005年12月31日
发明者赵恒 申请人:赵恒