专利名称：液体培养肉灵芝及利用其培养液制备肉灵芝营养液的方法
技术领域：
本发明涉及一种液体培养肉灵芝及利用其培养液制备肉灵芝营养液的方法，属于微生物菌体培养及营养保健食品领域。
背景技术：
肉灵芝是上古时期原始状态下的一种真菌体，被称为一切动植物的祖先。[山海经]中称肉灵芝为视肉，封。近代著名学者郭璞谓“视肉形如牛肝，有两目，食之无尽寻复生如旧也。”明代医学家李时珍在[本草纲目]中记载“肉芝状如肉，附于大石，头尾俱有，白者如截脂，黄者如紫金，久食可轻身不老，延年神仙。”并称肉灵芝为本草上品，但由于肉灵芝行踪不定，十分罕见，因而在民间被蒙上种种神秘的面纱，历史上人们尊称肉灵芝为“太岁”，视之为神物或敬而远之，或恐而避之，致使原本就稀有罕见的物种濒临灭绝境况。
上世纪80年代初，陕西省西安市首次发现了肉灵芝的行迹，在首都公展后引起了我国政府及外国政要的高度关注，中国科学院，西北大学等科研部门的专家开始利用现代科学方法对肉灵芝所含的核酸，灵芝多肽，多糖，白地霉，吡咯琳酮醌，硒等数十种珍稀营养物质进行了科学的检测与分析，现已被认定为“特大型罕见的粘复合体”。政府的重视也引起了国内外科学界对肉灵芝的应用价值展开了发掘，尽管现在不同种类的菌类制药和营养品不断面市，但由于肉灵芝菌体十分奇缺，人工培育尚属空白，所以真正以肉灵芝为主导产品开发利用，仍是目前亟待解决的难题。
发明内容
本发明的目的是提供一种液体培养肉灵芝及利用其培养液制备肉灵芝营养液的方法，用此方法可在较短的时间内收获成倍体的肉灵芝菌种体，为肉灵芝在科研，药用，营养保健等方面的应用提供宝贵资源。本发明的另一个目的是提供肉灵芝营养口服液原液，从根本上降低肉灵芝营养口服液的生产成本，本发明所采用的肉灵芝菌体是发明人于1993年在青海省煌中县发现的原生物肉灵芝活菌体，培养液是集发明人20年培养肉灵芝经验所积累和完善的秘方组成。
本发明的解决方案如下无菌条件下将肉灵芝菌体接种于培养液中激活，在静置的状态下开放式培养68-108天，收获成倍体的肉灵芝活菌体；取收获肉灵芝活菌体后的培养液200-500kg加热至58度，上离子塔用碱性洗液洗脱除去杂质，收集洗脱液进行沉淀，过滤得到80％的上清液经灌装，检验，标签，包装。即为肉灵芝营养口服液原液
1.肉灵芝培养液有以下物质按重量百分比配制而成的人参5-8％，青刺果10-15％，阿胶5-15％，蜂王浆10-20％，红枣10-15％，蛋白胨5-10％，香附1-3％，六神曲2-6％，山药10-20％，苏合香2-6％。
2.肉灵芝菌体活体培养a.取人参，青刺果，红枣，香附，山药，苏合香洗净沥干水分，放入陶瓷或不锈钢容器中加水升温至100度灭菌30分钟后捞出，再放入盛有200kg的深井水的陶瓷容器中浸泡48小时。
b将上述浸泡液升温至58度，加入阿胶，蜂王浆，蛋白胨，六神曲充分搅拌后，取上清液自然发酵72小时，即为肉灵芝菌体培养液。
c将肉灵芝菌体放入培养液中，在22--28度的条件下开放式培养68-108天，肉灵芝菌体在此期间自然激活，快速倍体增长，1kg菌体可倍增至2--5kg成品肉灵芝，成品肉灵芝形如肉状，分层，表面为乳白色胶质，中层和下层为深色肉质纤维状，带有较强的酸味。
d无菌条件下取出成品肉灵芝活菌体，将90％的培养液上清液吸出作为肉灵芝营养口服液原液，剩余部分再添加用a，b两法获得的培养液混合后再放入肉灵芝菌体继续培养，形成循环的培养模式。
3.肉灵芝营养口服液的制备方法取用d方法获得的肉灵芝营养口服液原液用胶体磨研磨后。加热至58度，上离子塔用碱性洗液洗脱除去杂质，收集洗脱液进行沉淀72小时，过滤后得到80％的上清液，经灌装，检验，标签，包装。即为肉灵芝营养口服液。
4.将上述沉淀物及肉灵芝培养液中所得的药渣与玉米淀粉按0。2∶1∶1例混合均匀，加入适量的70％乙醇湿润制粒，干燥后装入硬胶囊中，即为肉灵芝营养胶囊。
本发明的营养口服液含有治疗有效量的提取物为活性成分，以及含有一种或多种药学上可接受的载体。
上述载体是指药学领域常规的药物栽体，包括稀释剂，赋形剂，填充剂，湿润剂，吸收促进剂，吸附载体。
本发明的营养口服液优选重量比为1-99％活性成分，优选含有10-90％，更优选20-80％，最佳优选68％的本发明培养液。
本发明的每日用量为肉灵芝营养口服液50-100毫升，肉灵芝营养胶囊12-18g，分2-3次服用。
本发明具有以下积极效果利用液体基培养肉灵芝菌体，不仅能收获成倍体的肉灵芝活菌体，实现了肉灵芝的快速繁育，使之产业化开发条件趋于成熟，还可以从其培养液中制备肉灵芝营养口服液和肉灵芝营养胶囊，具有调节和提高人体免疫功能，抗病毒，抗感染，防癌变和缓解疲劳，增强体力以及降血压，血脂，血糖，延缓衰老等功效。适合工业化生产与家庭培养，提高了肉灵芝的科研及营养应用价值。
具体实施例方式实施例1取人参5-8％、青刺果10-15％、红枣10-15％、香附1-3％、山药10-20％、苏合香2-6％，洗净沥干水分，放入陶瓷或不锈钢容器中加水升温灭菌30分钟后捞出放入盛有200kg深井水中浸泡48小时再升温至38度，加入阿胶5-15％、蜂王浆10-20％、蛋白胨5-10％、六神曲2-6％充分搅拌，然后吸取上清液190kg自然发酵72小时，无菌条件下放入肉灵芝菌体，在室温22度-28度静置开放式培养68-108天，收获成倍体肉灵芝活菌体。
实施例2取实施例1培养肉灵芝菌体后的培养液180kg用胶体磨研磨，上离子塔用碱性洗液(0.5N的氨水)洗脱除去杂质，收集洗脱液沉淀72小时，取上清液灌装得肉灵芝营养口服液。
实施例3取实施例2沉淀物及实施例1所得的药渣与玉米淀粉按0.2∶1∶1的比例混合均匀加入适量70％乙醇湿润制粒，干燥后装入硬胶囊中制成肉灵芝营养胶囊。
实用例1肉灵芝菌体培养液人参200g，青刺果500g，红枣800g，香附100g，山药1000g，苏合香100g，洗净沥干水分，放入陶瓷或不锈钢容器中加水升温灭菌30分钟后捞出放入盛有200kg深井水中浸泡48小时再升温至38度，加入阿胶500g，蜂王浆800g，蛋白胨600g，六神曲200g充分搅拌，然后吸取上清液190kg自然发酵72小时，无菌条件下放入肉灵芝菌体，在室温22度-28度静置开放式培养68-108天，收获成倍体的肉灵芝活菌体。
实用例2肉灵芝营养口服液取肉灵芝培养液(实用例1所得)190g，用胶体磨研磨，上离子塔用碱性洗液(0.5N的氨水)洗脱除去杂质，收集洗脱液沉淀72小时，吸取上清液180kg灌装，每瓶净重量为20毫升或100-500毫升，即得肉灵芝营养口服液，其他项目应符合中华人民共和国药典2000版有关营养口服液的要求。
实用例3肉灵芝胶囊取肉灵芝营养口服液沉淀物(实用例2所得)及实用例1所得的药渣与玉米淀粉按0.2∶1∶1的比例混合均匀加入适量70％乙醇湿润制粒，干燥后分装入硬胶囊中制成肉灵芝营养胶囊，每个胶囊重0.3g。其他项目应符合中华人民共和国药典2000版有关胶囊的要求。
本发明的具体实例，可根据成分的加减变化出许多相似的配方和工艺流程，只要跟本文献中配方剂型相同或相似，无论采用何种工艺流程加工生产，都属于本发明专利的保护范围。
权利要求
1.一种液体培养肉灵芝及利用其培养液制备肉灵芝营养液的方法，是利用现代生物技术与常规的营养学原理将肉灵芝菌种体接种在无菌条件下的生物培养液中，其特征在于静置培养，自然激活，倍体增长，收获2-5kg成品肉灵芝。
2.一种液体培养肉灵芝及利用其培养液制备肉灵芝营养液的方法，其特征在于集中收取培养肉灵芝菌体后的培养液上清液200-500kg，加热至58度上离子塔用碱性洗液洗脱除去杂质，收集上清液进行再过滤至原体积的80-90％灌装，取得肉灵芝营养口服液。
3.根据权利要求2所得的肉灵芝营养口服液符合药学上可接受的载体。
4.根据权利要求2，3所得的肉灵芝营养口服液，优选重量比为1-99％培养液的活性成分，优选含有10-90％，更优选20-80％，最佳优选为68％的本发明培养液。
5.一种液体培养肉灵芝及利用其培养液制备肉灵芝营养液的方法，其特征在于肉灵芝培养液由以下物质按重量百分比构成人参5-8％，青刺果10-15％，阿胶5-15％，蜂王浆10-20％，红枣10-15％，蛋白胨5-10％，香附1-3％，六神曲2-6％，山药10-20％，苏合香2-6％，深井水200kg。
全文摘要
本发明公开一种液体培养肉灵芝及利用其培养液制备肉灵芝营养液的方法，无菌条件下将肉灵芝菌体接种于培养液中激活，在静置条件下开放式培养68－108天，收获成倍体的肉灵芝活菌体，然后取其培养液上离子塔用碱性洗液洗脱除去杂质，吸取原液体的90％上清液灌装，获得肉灵芝营养口服液。利用液体培养肉灵芝，不仅能收获成倍体的肉灵芝活菌体，还可以利用其培养液制备肉灵芝营养口服液，充分利用了肉灵芝这一十分罕见的古生物资源。
文档编号C12N1/14GK1896225SQ200610017640
公开日2007年1月17日 申请日期2006年4月13日 优先权日2006年4月13日
发明者马兰英 申请人:马兰英