专利名称：：用于辅助平板点样、影印与计数的装置的制作方法
技术领域：
：本发明属于微生物领域，涉及平板点样、平板影印与平板计数的装置。
背景技术：
：在微生物实验中，经常会遇到平板点样、影印和菌落计数的问题。借助经典的模格装置，如图1所示，在一个平板上最多可以点52个菌落。对于保存菌种或少量细菌检测而言，该方法具有良好的效果，操作也非常简单。但是，当需要检测大量菌落或需要保存较多菌株时，这种点样方法就不能满足要求。另外，进行细菌检测(如原位杂交、营养缺陷型菌株筛选等)和保存菌株所要求的平板点样量是不同的，目前还没有一种装置可以同时满足上述要恭另一方面，在平板菌落计数时，对于较低的稀释倍数，8.5厘米的平板上可能会产生800-1000个菌落，有时甚至超过1000个。因为菌落间距小，非常密集，需要划线分区计数。但是，当有多个平板需要计数时划线分区方法就显得操作繁琐。目前尚未发现具有该种功能的可用模格装置。
发明内容本发明提供了一种用于辅助平板点样、影印与计数的装置，是与现有技术有着本质区别的综合性装置，能同时满足微生物实验中关于平板点样、影印与计数的要求，可分别用于平板点样、平板影印和菌落计数，并且点样菌落数可以根据需要调整。本发明所述的一种用于辅助平板点样、影印与计数的装置，包括透明的薄片，该薄片内凸出一个圆形模格部分，其直径比培养皿的直径略小；所述薄片通过圆形模格部分粘附或者吸附在培养皿的底部；通过两条相互垂直的穿过圆心的粗线将所述圆形模格部分限定为四个大扇形区域，通过纵横交错的单线将所述圆形模格部分限定为大小为1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm的小格，每四个邻近的小格通过纵横交错的双线限定为一个中格。进一步地，所述圆形模格部分的两个不相邻的扇形区域，通过一条与粗线成45度角且穿过圆心的细斜线限定为四个小扇形区域。本发明还提供了另一种基于同样原理设计的用于辅助平板点样、影印与计数的装置。本发明所述的一种用于辅助平板点样、影印与计数的装置，包括透明的第一薄片，其内凸出第一圆形模格部分，通过两条相互垂直的穿过圆心的粗线将所述第一圆形模格部分限定为四个大扇形区域；透明的第二薄片，其内凸出第二圆形模格部分，通过纵横交错的单线将所述第二圆形模格部分限定为大小为1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm的小格；透明的第三薄片，其内凸出第三圆形模格部分，通过纵横交错的双线将所述第三圆形模格部分限定为一个中格，该中格的大小相当于四个相邻的所述小格的大小；所述第一、第二与第三圆形模格部分的圆心重叠；所述第一、第二与第三圆形模格部分的直径比培养皿的直径略小；所述第一、第二和/或第三薄片分别通过第一、第二和/或第三圆形模格部分单独或者按任意顺序叠加粘附或者吸附在培养皿的底部。进--步地，本发明所述的用于辅助平板点样、影印与计数的装置，还包括透明的第四薄片，其内凸出第四圆形模格部分，通过一条穿过圆心的细斜线限定为两个半圆区域；所述圆形模格部分的圆心与所述第一、第二、第三圆形模格部分的圆心重叠；所述第四圆形模格部分的直径比培养皿的直径略小；所述第四薄片单独或者与第一、第二、第三薄片按任意顺序叠加粘附在平板培养皿的底部。本发明所述的用于辅助平板点样、影印与计数的装置，当用于辅助平板点样、影印时，具有以下优点1)点样量可以根据需要进行调整；2)不需要在平板上做任何标记，即可进行平板影印；3)寻找目标菌落极为简单，杜绝了找错的可能；4)在边缘不完整的小格点样不会影响细菌生长。本发明所述的用于辅助平板点样、影印与计数的装置，当用于辅助平板计数时，具有以下优点1)操作简单；2)还可以进行抽样计数。此外，本发明所述的装置在设计时已经综合考虑并平衡解决了样品最大容纳量和样品间距的问题。在实际操作中，由于平板点样、平板影印和菌落计数是微生物实验中经常用到的方法，本发明所述装置的应用前景非常广阔。图1为经典的点样模格图，图中显示只能容纳菌落52个，对于大量点样要求显得容量太小。图2为本发明所述的用于辅助平板点样、影印与计数的装置的结构示意图。图3为图2的A向侧视图。图4为本发明所述装置的圆形模格部分。图5为本发明所述装置的第二个实施例的结构示意图。图6为图5的B向侧视图。图7为用本发明所述的模格装置获得的点样效果图，图中显示菌落排列整齐，细菌相互间无接触。图8为用本发明所述的模格装置获得的平板影印结果图，图中显示尽管菌落由于受压变得有些扁平，菌落间仍然未有明显接触。具体实施例方式实施例一用于辅助平板点样、影印与计数的装置的制作本发明所述的一种用于辅助平板点样、影印与计数的装置，如图2和图3所示，包括透明的薄片1，该薄片1内凸出一个圆形模格部分3，其直径比培养皿2的直径略小(例如，小0.5-1.5mm);所述薄片1通过圆形模格部分3粘附或者吸附在培养皿2的底部。如图4所示，通过两条相互垂直的穿过圆心的粗线将所述圆形模格部分限定为四个大扇形区域，通过纵横交错的单线将所述圆形模格部分限定为大小为1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm的小格，每四个邻近的小格通过纵横交错的双线限定为一个中格。所述圆形模格部分的两个不相邻的扇形区域，通过一条与粗线成45度角且穿过圆心的细斜线限定为四个小扇形区域。本实施例中，可按表1所列方式限定所述圆形模格部分。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>该模格由直径8.23厘米的圆周界定范围，背景部分由行和列交叉组成，包含大小为3.2mmx3.2mm的小格，共计约448个，可以用于密集点样；4个邻近的小格组成一个中格，共计约112个中格，彼此之间由双线分开，可以用作保种点样。由2条相垂直的直径将该区域限定为A、B、C和D4个区，字母分别标记在各区的扇角位置。直径以小格为标准标记刻度，通过该刻度可以确定4个区中的任何一个点。需要说明的是本实施例中设定的小格的大小为3.2mmx3.2mm，实际应用中根据培养皿的规格以及菌落的密度，可以在1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm之间进行调整，并已经过实验验证。本实施例所述的装置用作点样模格工具时，既可以用于密集点样(448菌落/平板)也可以用作保种点样(112菌落/平板)；用作平板计数工具时，可以用于菌落抽样计数和分区计数。如图4所示，A区和C区内各分布有5个计数位置(图中打点的区域)，用于菌落数量较高时的抽样计数。A区计数，C区用作重复。B区和D区各由一条细线分为B1、B2和D1、D2两部分(各为1/8平板面积)，用于菌落数量较高的分区计数。B1或B2作为计数区，对应的D1或D2作为重复。如果菌落数较低，则可以同时计数B1和B2区(即整个B区)，合计为1/4平板面积，同时计数D区作重复。实施例二用于辅助平板点样、影印与计数的装置的制作本实施例是对实施例一的同一构思下的另一产品。如图5和图6所示，包括透明的第一薄片10，其内凸出第一圆形模格部分11，通过两条相互垂直的穿过圆心的粗线将所述第一圆形模格部分限定为四个大扇形区域；透明的第二薄片20，其内凸出第二圆形模格部分21，通过纵横交错的单线将所述第二圆形模格部分限定为大小为1.5mmx1.5mm至3.5mmx3.5mm的小格；透明的第三薄片30，其内凸出第三圆形模格部分31，通过纵横交错的双线将所述第三圆形模格部分限定为一个中格，该中格的大小相当于四个相邻的所述小格的大小。图4中还包括透明的第四薄片40，其内凸出第四圆形模格部分41，通过一条穿过圆心的细斜线限定为两个半圆区域。所述第一圆形模格部分11、第二圆形模格部分21、第三圆形模格部分31、第四圆形模格部分41的圆心重叠；所述第一圆形模格部分11、第二圆形模格部分21、第三圆形模格部分31、第四圆形模格部分41的直径比培养皿50的直径略小(例如，小0.5-1.5mm);所述第一薄片10、第二薄片20、第三薄片30、第四薄片40分别通过第一圆形模格部分11、第二圆形模格部分21、第三圆形模格部分31、第四圆形模格部分41叠加粘附或者吸附在平板培养皿50的底部。如图6所示的圆形模格部分的叠加效果如图4所示。需要说明的是，图5和图6所示的本实施例的薄片叠放顺序只是一种方案，各层薄片通过各自的圆形模格部分可以按任意顺序进行叠加粘附或者吸附在平板培养皿50的底部，组合出不同的使用效果，也可以将各薄片通过各自的圆形模格部分单独粘附或者吸附在平板培养皿50的底部，以独立使用。上述实施例中所述的装置可以用于辅助平板点样、影印与计数。当用于辅助平板点样、影印时，所述的装置具有以下优点1)点样量可以根据需要进行调整。如果要求点样量较大，可以在每个小格内点样，一个直径8.5厘米的平板可以容纳448个菌落而不显密集，并且相互间无接触；如果点样量不大，则可以考虑小格间隔点样，即相当于中格内对角的2个小格点样，直径8.5厘米的平板可以容纳224个菌落；如果点样量还低一些，则考虑用中格点样，可以容纳120个菌落。在做菌落筛选的过程中，按照最大点样量进行点样以用于后续检测。结果如图7所示，用该模格获得的点样效果很好，菌落排列整齐，细菌相互间无接触。如此的菌落排布，既可以使有限的平板空间容纳更大量的样品，方便后续工作的开展；同时由于有设定的坐标，因此寻找目的菌落变得极为简单和准确。并且如图8所示，平板影印时尽管菌落由于受压变得有些扁平，菌落间仍然未有明显接触，表明按照该模格点样后的菌落间有足够的空隙。2)不需要在平板上做任何标记，即可进行平板影印。在进行平板影印时，需要在平板底部进行标记，以便区分方向。如果遗忘了标记，有可能寻找到错误的目标菌落。在该方法中，通过A、B、C和D四个分区已经很好的为平板影印方向进行了定位。不需要再进行任何其他标记。3)寻找目标菌落极为简单，杜绝了找错的可能。由于每个分区都有以小格为单位的刻度，定位任何一个点只需要确定其纵坐标和横坐标即可。例如，在影印平板上有我们感兴趣的一个菌落，其坐标为A区6X6位置，则在母板上6X6位置的菌落就是目标菌落。4)在边缘不完整的小格点样不会影响细菌生长。培养皿底盖的直径通常在8.5厘米左右，该模格的直径为8.23厘米，距离平板边缘尚有0.27厘米间隙。因此即使点样到达该模格圆周边界，仍然不会影响菌落生长。在平板计数过程中，如果菌落数稍高一些(例如800~1000个/平板)，就无法简单计数。此时现有技术需要在平板背面划线分区，然后计数某个小区的菌落数，求得总菌数。在划线过程中，通常需要寻找平板圆心，穿过圆心画2条垂直线将平板分成4个区，然后再将某个区分成2部分计数。传统方法存在如下问题1)某个区的限定线理论上是45度夹角延伸，实际上不容易操作，可能导致一边偏大或偏小；2)穿过圆心的2条线不一定垂直，造成4个区大小不一；3)如果同时计数大量平板，对每个平板划线无疑是相当繁琐的事情。本发明所述的装置当用于辅助平板计数时，具有以下优点1)操作简单。该装置只需简单地附在平板底部即可使用，也可以重复使用，由于直接形成了1/4分区和1/8分区，就可以选择计数1/4分区或1/8分区。2)该模格还可以进行抽样计数。本实施例在A区和D区分布有5个抽样计数格(中间打点的格)，如果菌落分布不均，分区计数出现较大变化时，可以采用抽样计数方法。通过计数某个分区的5个计数格，求得单格的菌落数，估算出某个分区的菌落数，进而得到整个平板的菌落数。权利要求1、一种用于辅助平板点样、影印与计数的装置，其特征在于包括透明的薄片，该薄片内凸出一个圆形模格部分，其直径比培养皿的直径略小；所述薄片通过圆形模格部分粘附或者吸附在培养皿的底部；通过两条相互垂直的穿过圆心的粗线将所述圆形模格部分限定为四个大扇形区域，通过纵横交错的单线将所述圆形模格部分限定为大小为1.5mm×1.5mm至3.5mm×3.5mm的小格，每四个相邻的小格通过纵横交错的双线限定为一个中格。2、根据权利要求1所述的装置，其特征在于所述圆形模格部分的两个不相邻的扇形区域，通过一条与所述粗线成45度角且穿过圆心的细斜线限定为四个小扇形区域。3、一种用于辅助平板点样、影印与计数的装置，其特征在于包括透明的第一薄片，其内凸出第一圆形模格部分，通过两条相互垂直的穿过圆心的粗线将所述第一圆形模格部分限定为四个大扇形区域；透明的第二薄片，其内凸出第二圆形模格部分，通过纵横交错的单线将所述第二圆形模格部分限定为大小为1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm的小格；以及透明的第三薄片，其内凸出第三圆形模格部分，通过纵横交错的双线将所述第三圆形模格部分限定为一个中格，该中格的大小相当于四个相邻的所述小格的大小；所述第一、第二与第三圆形模格部分的圆心重叠；所述第一、第二与第三圆形模格部分的直径比培养皿的直径略小；所述第一、第二和/或第三薄片分别通过第一、第二和/或第三圆形模格部分单独或者按任意顺序叠加粘附或者吸附在培养皿的底部。4、根据权利要求3所述的装置，其特征在于还包括透明的第四薄片，其内凸出第四圆形模格部分，通过一条穿过圆心的细斜线限定为两个半圆区域；所述第四圆形模格部分的圆心与所述第一、第二、第三圆形模格部分的圆心重叠；所述第四圆形模格部分的直径比培养皿的直径略小；所述第四薄片单独或者与第一、第二、第三薄片按任意顺序叠加粘附或者吸附在培养皿的底部。全文摘要本发明属于微生物领域，涉及平板点样、平板影印与平板计数的装置。本发明所述的用于辅助平板点样、影印与计数的装置，包括透明的薄片，该薄片内凸出一个圆形模格部分，其直径比培养皿的直径略小；所述薄片通过圆形模格部分粘附或者吸附在培养皿的底部；通过两条相互垂直的穿过圆心的粗线将所述圆形模格部分限定为四个大扇形区域，通过纵横交错的单线将所述圆形模格部分限定为大小为1.5mm×1.5mm至3.5mm×3.5mm的小格，每四个邻近的小格通过纵横交错的双线限定为一个中格。本发明所述装置能同时满足微生物实验中关于平板点样、影印与计数的要求，并且点样菌落数可以根据需要调整。文档编号C12M1/00GK101096635SQ20071002913公开日2008年1月2日申请日期2007年7月12日优先权日2007年7月12日发明者付京花,周世宁,徐民俊,田小群申请人:中山大学