专利名称：：利用乌饭树叶制备天然防腐剂中间体的方法及其用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种利用乌饭树叶制备天然防腐剂中间体的方法及其用途。技术背景食品的腐败变质是指在微生物为主的各种因素作用下，食品的成分与感官性质发生变化而导致食品质量下降或失去食用价值，甚至造成食物中毒。近年来，全世界农副产品、水产品、果蔬等食品腐烂变质而引起的经济损失十分巨大，因而食品的防腐保鲜始终是食品工业中一个亟待解决的重要问题。长期的研究发现现在普遍使用的化学防腐剂对人体有诱癌性、致畸性等或多或少的毒害作用，并且对自然界的生态环境也会造成不利的影响，例如亚硝酸盐和硝酸盐可能会生成致癌的亚硝胺等，因而必须严格限制其在食品中的用量。比较而言，天然防腐剂具有抗菌性强、安全无毒、水溶性好、热稳定性好、作用范围广等化学防腐剂所无法比拟的优点。但是，天然防腐剂往往由于生产成本较高，品种较少而限制了其广泛应用。乌饭树(Kzcc/w'wm6racto3/wwThunb.)为杜昌粤花禾斗(Ericaceae)越桔属(VacciniumLinn.)的常绿灌木或小乔木，主产于我国华东、华中、华南至西南地区，常分布在丘陵地带或海拔4001400米的山地，常见于山坡林内或灌丛中。在我国江浙一带民间每年农历四月初八素有以乌饭树的嫩茎叶浸汁后染米加工乌饭食用的习惯，做成的乌饭不仅具有很高的营养价值，并且暴露在空气中数日不变色、不变味、不变质，显示出极好的抑菌防腐作用。本发明正是利用乌饭树叶优良的防腐作用，针对目前天然防腐剂成本高、品种少的缺点，
发明内容本发明的目的是提供一种利用乌饭树叶制备天然防腐剂中间体的方法及其用途。它是乌饭树叶加612倍体积百分比浓度为20%95%乙醇，冷浸或加热回流提取14次，每次0.512小时，提取液过滤，合并，浓縮至0.25-1.0g生药/mL，过滤或离心分离后通过AB-8或Du),大孔树脂柱，乌饭树叶与大孔树脂的重量比为1:15，上柱流速14BV/h，树脂柱径高比为1:31:9;用水洗涤树脂38BV，洗脱流速为24BV/h，水洗脱液弃去；用体积百分比浓度为20%95%乙醇洗脱，流速为24BV/h，收集乙醇洗脱液；乙醇液减压浓縮，减压或喷雾干燥，乌饭树叶提取物粉碎后，即得天然防腐剂中间体。所述的提取所用乙醇的体积百分比浓度优选30%95%。所述的洗脱树脂所用乙醇的体积百分比浓度优选30%95%。利用乌饭树叶制备天然防腐剂的中间体用于制备牛奶制品、罐头食品的防腐剂。本发明采用的原材料属于可再生资源，取材容易，成本低；生产工艺简单、可行。由该方法制备的防腐剂中间体对细菌[金黄色葡萄球菌(Sto;/^/ococc^做rem0、大肠杆菌(^c/zm-c/n'"co/f)、枯草芽抱杆菌(5a"7/wssw6"7/51)、苏z金芽包杆菌(5ac/〃MJ2Mn'wg/e"s&)]、霉菌[黑曲霉(^s/erg/〃a黄曲霉(y^/erg/肠y7av"s)、根霉(监zo/ms"jfgn'ctms)]、真菌[白色念珠菌(Ca"d/<iaa/Z/c<ms)、酵母菌(Sacc/2araw;/cescereWw'aei/a""")、]的生长均有良好的抑帝!j作用。通过该方法制备的中间体可与多种辅料配伍，制成天然防腐剂，用于面包、牛奶制品、罐头食品等的防腐。具体实施方式乌饭树叶加612倍体积百分比浓度为20%95%乙醇，冷浸或加热回流提取14次，每次0.512小时，提取液过滤，合并，浓縮至0.251.0g生药/mL，过滤或离心分离后通过AB-8或Dun大孔树脂柱，乌饭树叶与大孔树脂的重量比为1:15，上柱流速14BV/h，树脂柱径高比为1:31:9;用水洗涤树脂38BV，洗脱流速为2-4BV/h，水洗脱液弃去；用浓度为20%95%水乙醇洗脱，流速为24BV/h，收集乙醇洗脱液；乙醇液减压浓縮，减压或喷雾干燥，得乌饭树叶提取物。该提取物粉碎后，即得天然防腐剂中间体。所制备的天然防腐剂中间体总黄酮含量不低于20%(UV法，以荭草素或异荭草素计，重量百分比)；荭草素不低于1%(HPLC法、重量百分比)；异荭草素不低于1%(HPLC法、重量百分比)。实施例1乌饭树叶加6倍30%乙醇，加热回流提取l次，每次0.5小时，提取液过滤，合并，浓縮至0.25g生药/mL，过滤后通过AB-8大孔树脂柱，乌饭树叶与AB-8大孔树脂的重量比为1:1，上柱流速lBV/h，树脂柱径高比为1:3;用水洗涤树脂3BV，洗脱流速为2BV/h，水洗脱液弃去；用30%乙醇洗脱，流速为2BV/h，收集乙醇洗脱液；乙醇液减压浓縮，减压干燥，得乌饭树叶提取物，该提取物粉碎，得天然防腐剂中间体。该中间体总黄酮含量为20%(UV法，以荭草素或异荭草素计，重量百分比)；荭草素含量为1%(HPLC法、重量百分比)；异荭草素含量为1%(HPLC法、重量百分比)。实施例2乌饭树叶加12倍95%乙醇，冷浸4次，每次12小时，提取液过滤，合并，浓縮至l.Og生药/mL，离心分离后通过Dw大孔树脂柱，乌饭树叶与Dnn大孔树脂的重量比为1:5，上柱流速4BV/h,树脂柱径高比为1:9;用水洗涤树脂8BV，洗脱流速为4BV/h，水洗脱液弃去；用95%乙醇洗脱，流速为4BV/h，收集乙醇洗脱液；乙醇液减压浓縮，减压或喷雾干燥，得乌饭树叶提取物，该提取物粉碎，得天然防腐剂中间体。该中间体总黄酮含量为90%(UV法，以荭草素或异荭草素计，重量百分比)；荭草素含量为12%(HPLC法、重量百分比)；异荭草素含量为11%(HPLC法、重量百分比)。实施例3乌饭树叶加8倍70%乙醇，冷浸3次，每次8小时，提取液过滤，合并，浓縮至0.5g生药/mL，离心分离后通过D^大孔树脂柱，乌饭树叶与D朋大孔树脂的重量比为1:3，上柱流速2BV/h，树脂柱径高比为1:5;用水洗涤树脂5BV，洗脱流速为3BV/h，水洗脱液弃去；用70%乙醇洗脱，流速为3BV/h，收集乙醇洗脱液；乙醇液减压浓縮，减压或喷雾干燥，得乌饭树叶提取物该提取物粉碎，得天然防腐剂中间体。该中间体总黄酮含量为50%(UV法，以荭草素或异荭草素计，重量百分比)；荭草素含量为8%(HPLC法、重量百分比)；异荭草素含量7%(HPLC法、重量百分比)。所制备的天然防腐剂中间体的抑菌试验结果1、乌饭树叶乙醇提取物抑菌试验乌饭树叶用10倍量70%乙醇冷浸3次，每次12小时，冷浸提取液合并，过滤，浓縮，干燥，得乌饭树叶乙醇提取物。表l乌饭树叶乙醇提取物抑菌试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>("+"表示该样品浓度下指示菌生长呈阳性，"一"表示指示菌生长呈阴性)"提取物"在1.25%的浓度下，对金黄色葡萄球菌有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对金黄色葡萄球菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的浓度下，对枯草芽孢杆菌有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对枯草芽孢杆菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的浓度下，对大肠杆菌有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对大肠杆菌失去抑制作用"提取物"在1.25。％的浓度下，对苏云金芽孢杆菌有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对苏云金芽孢杆菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的浓度下，对黑曲霉有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对黑曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的浓度下，对黄曲霉有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对黄曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25°%的浓度下，对根霉有抑制作用"提取物"在0.625Q/^的浓度下，对根霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的浓度下，对白色念珠菌有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对白色念珠菌失去抑制作用"提取斷'在1.25%的浓度下，对酵母菌有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对酵母菌失去抑制作用2、由乌饭树叶制备的天然防腐剂中间体的抑菌试验表2试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>枯草芽孢杆菌+++大肠杆菌一——+++++_苏云金芽孢杆菌—一——++++一黑曲霉菌+++_黄曲霉菌+++一根霉一—_+++++.—白色念珠菌一__—++++—酵母菌++—("+"表示该样品浓度下指示菌生长呈阳性，"_"表示指示菌生长呈阴性)"提取物"在0.3125。％的浓度下，对金黄色葡萄球菌有抑制作用"提取物"在0.15625%的浓度下，对金黄色葡萄球菌失去抑制作用"提取物"在0.3125%的浓度下，对枯草芽孢杆菌有抑制作用"提取物"在0.15625%的浓度下，对枯草芽孢杆菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的浓度下，对大肠杆菌有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对大肠杆菌失去抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对苏云金芽孢杆菌有抑制作用"提取物"在0.3125%的浓度下，对苏云金芽孢杆菌失去抑制作用"提取物"在0.3125%的浓度下，对黑曲霉有抑制作用"提取物"在0.15625%的浓度下，对黑曲霉失去抑制作用"提取物"在0.325%的浓度下，对黄曲霉有抑制作用"提取物"在0.15625%的浓度下，对黄曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的浓度下，对根霉有抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对根霉失去抑制作用"提取物"在0.625%的浓度下，对白色念珠菌有抑制作用"提取物"在0.3125%的浓度下，对白色念珠菌失去抑制作用"提取物"在0.15625%的浓度下，对酵母菌有抑制作用"提取物"在0.078125%的浓度下，对酵母菌失去抑制作用权利要求1、一种利用乌饭树叶制备天然防腐剂中间体的方法，其特征在于乌饭树叶加6～12倍体积百分比浓度为20％～95％乙醇，冷浸或加热回流提取1～4次，每次0.5～12小时，提取液过滤，合并，浓缩至0.25～1.0g生药/mL，过滤或离心分离后通过AB-8或D101大孔树脂柱，乌饭树叶与大孔树脂的重量比为1∶1～5，上柱流速1～4BV/h，树脂柱径高比为1∶3～1∶9；用水洗涤树脂柱3～8BV，洗脱流速为2～4BV/h，水洗脱液弃去；用体积百分比浓度为20％～95％乙醇洗脱，流速为2～4BV/h，收集乙醇洗脱液；乙醇液减压浓缩，减压或喷雾干燥，乌饭树叶提取物粉碎后，即得天然防腐剂中间体。2、根据权利要求1所述的一种利用乌饭树叶制备天然防腐剂中间体的方法，其特征在于提取所用乙醇的体积百分比浓度30%95%。3、根据权利要求1所述的一种利用乌饭树叶制备天然防腐剂中间体的方法，其特征在于洗脱树脂所用乙醇的体积百分比浓度30%95%。4、一种如权利要求1所述的利用乌饭树叶制备天然防腐剂中间体的用途，其特征在于用于制备牛奶制品、罐头食品的防腐剂。全文摘要本发明公开了一种利用乌饭树叶制备天然防腐剂中间体的方法及其用途。它是将乌饭树叶加乙醇，冷浸或加热回流提取，提取液过滤，合并，浓缩，过滤或离心后通过大孔树脂，先用水洗涤树脂，水洗脱液弃去；再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；乙醇液减压浓缩，干燥，得乌饭树叶提取物。该提取物粉碎后，即得天然防腐剂中间体。本发明所用资源具有再生性，生产成本低，制备的防腐剂中间体防腐作用强，安全无毒，可与多种辅料配伍制成天然防腐剂，用于面包、牛奶制品、罐头食品等的防腐。文档编号A23L3/3463GK101152018SQ20071007062公开日2008年4月2日申请日期2007年8月31日优先权日2007年8月31日发明者刘洪梅,刘洪辉,亮增,琳张,张红伟,田富饶,田景奎,镭罗,谷希达,波陈申请人:浙江大学