某些化学个体、组合物和方法

专利名称：某些化学个体、组合物和方法
本申请要求2007年8月15日提交的美国专利申请号60/965,020的权益，其通过引用在此并入。
提供了调节平滑肌肌球蛋白和/或非肌肉肌球蛋白的某些化学个体、治疗与平滑肌肌球蛋白和/或非肌肉肌球蛋白相关的疾病和疾患的药物组合物和方法。
肌球蛋白存在于所有的肌肉和肌肉细胞中。在人类细胞中的10种不同类型的肌球蛋白中，肌球蛋白-II被认为是引起骨骼肌、心肌和平滑肌收缩的形式。肌球蛋白-II还是存在于非肌肉肌球蛋白中的同工型，非肌肉肌球蛋白还被称为细胞质肌球蛋白。非肌肉肌球蛋白普遍存在于真核细胞中，而平滑肌肌球蛋白一般存在于平滑肌细胞中。
肌球蛋白-II在氨基酸组成和总体结构上显著不同于其他9种不同类型中的肌球蛋白。肌球蛋白-II由两个球状头部结构域组成，球状头部结构域称为亚片段-1或S1，其通过长α-螺旋卷曲螺旋尾部连接到一起。肌球蛋白的蛋白水解依据蛋白水解条件，产生S1或重酶解肌球蛋白(HMM，具有截尾的双头形式)。S1含有ATP酶和分子的肌动蛋白结合特性。S1已显示出足以体外移动肌动蛋白纤丝，并因此可能是分子的马达结构域。
尽管来自不同组织的肌球蛋白-II同工型的许多生物学特性不同，但它们共享为双重链(约200kDa)的二聚体的相同基础分子结构，所述双重链非共价地连接于两对轻链(约20和17kDa)。两个球状氨基末端头通过形成尾部的羰基末端α-螺旋卷曲螺旋连接到一起。尾部被认为涉及肌球蛋白分子组装成纤丝，而头部被认为具有肌动蛋白活化的Mg2+-ATP酶活性。每个肌球蛋白头可由三个蛋白酶灵敏区分成约25、50和20kDa的肽。更多的氨基末端25kDa-50kDa连接接近ATP结合区，而肌动蛋白结合结构域接近50kDa-20kDa连接。
S1由球状肌动蛋白结合区和称为催化结构域的核苷酸结合区组成。这一结构域在其羧基末端连接于具有各自缠绕于该结构域的两条约20kDa的轻链的α-螺旋。这一S1的轻链结合结构域被称为杠杆臂。当从振动前转换至振动后状态时，杠杆臂被认为从接近核苷酸结合点的催化结构域中的支点旋转约90度的角。“强力振动”是由ATP的水解驱动。
肌球蛋白分子的另一端是涉及肌球蛋白分子自身组装成两极粗纤丝的α-螺旋卷曲螺旋尾部。这些粗纤丝在较细的肌动蛋白纤丝之间相互交错，且在肌肉收缩期间两条纤丝系统彼此滑过。这一纤丝滑动机制被认为涉及肌球蛋白头的构象变化，在损害ATP水解的情况下，该变化使得它们沿着细肌动蛋白纤丝前进。尽管非肌肉肌球蛋白以相似的方式作用，但认为它们以低于平滑肌肌球蛋白的速度滑动。
已经描述了人平滑肌肌球蛋白的全cDNA。人平滑肌肌球蛋白的催化S1区的序列与人心肌球蛋白具有52％的同一性。参见例如PCT公布号WO03/14323。
提供了选自式I的化合物及其药学上可接受的盐的至少一种化学个体，
式I 其中 W1和W2独立地选自CR11R12、NR13和O；条件是W1和W2中的至少一个是NR13； W3选自CR1R2、NR14和O； Z1选自杂芳基和杂环烃基； Z2选自芳基、杂芳基和杂环烃基； R8选自氢、任选地取代的烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基和任选地取代的杂环烃基； R1、R2、R11和R12独立地选自氢、羟基、羧基、磺酰基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的氨基羰氧基、任选地取代的酰氧基、任选地取代的烷氧基羰氧基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基羰基和任选地取代的氨基磺酰基；或R1和R2可任选地与任何插入原子连接到一起以形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的基团； R13和R14独立地选自氢、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基； 对于每次出现时，R3、R4、R5和R6独立地选自氢、羟基、羧基、磺酰基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的氨基羰氧基、任选地取代的酰氧基、任选地取代的烷氧基羰氧基、任选地取代的酰基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基羰基和任选地取代的氨基磺酰基；或R5和R6一起形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的任选地取代的环。
或R1和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的基团； 或R14和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环； 或如果W1是NR13，则R13和R1可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环； 或如果W1是NR13，则R13和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环； R7和R10独立地选自氢、氰基、卤代、羟基、叠氮基、硝基、羧基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基、任选地取代的酰基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基羰基、任选地取代的氨基磺酰基、任选地取代的甲脒基(carbaminodoyl)和任选地取代的炔基； m选自0、1、2和3； n选自0、1、2、3和4； p选自0、1、2和3；且 q选自1、2、3和4。
还提供了包含本文描述的至少一种化学个体以及选自载体、佐剂和赋形剂的至少一种药学上可接受的媒介物的药物组合物。
还提供了治疗与平滑肌肌球蛋白或非肌肉肌球蛋白相关的一种或多种疾病的方法。所述治疗方法包括施用治疗有效量的本文提供的至少一种化学个体或包含本文描述的至少一种化学个体以及选自载体、佐剂和赋形剂的至少一种药学上可接受的媒介物的药物组合物。
还提供了治疗或缓解与哺乳动物的气道壁重塑(airway wall remodeling)相关的疾病的方法，所述方法包括向需要其的哺乳动物施用治疗有效量的本文描述的至少一种化学个体。
从以下详述中，其他方面和实施方案对本领域技术人员将是明显的。
如本说明书所用，以下单词和短语通常期望具有如下所列的含义，除了在使用它们的上下文中另外指出的情况。
以下缩写和术语在全文中具有指明的含义 PIPES＝1，4-哌嗪二乙磺酸 ATP＝5′-三磷酸腺苷 DTT＝DL-二硫苏糖醇 BSA＝牛血清白蛋白 NADH＝烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 PEP＝磷酸烯醇丙酮酸 EGTA＝乙二醇-双(2-氨基乙醚)-N，N，N′，N′-四乙酸 Ac＝乙酰基 APCI＝大气压化学电离 atm＝大气压 Boc＝叔丁氧羰基 c-＝环 CBZ或Cbz＝苄氧羰基＝苄氧基羰基 CDI＝羰基二咪唑 DCM＝二氯甲烷＝亚甲基氯＝CH2Cl2 DIAD＝偶氮二甲酸二异丙酯 DIEA＝DIPEA＝N，N-二异丙基乙胺 DMAP＝4-(二甲基氨基)吡啶 DMF＝N，N-二甲基甲酰胺 DMSO＝二甲基亚砜 (DPPF)PdCl2＝1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II) Et＝乙基 EtOAc＝乙酸乙酯 EtOH＝乙醇 G或g＝克 GC＝气相色谱法 h或hr＝小时 HATU＝O-(7-偶氮苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯 HBTU＝O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯 HOBT＝1-羟基苯并三唑 HPLC＝高压液相色谱法 i-＝异 kg或Kg＝千克 L或l＝升 LC/MS＝LCMS＝液相色谱-质谱法 LDA＝二异丙氨基锂 LRMS＝低分辨率质谱法 m/z＝质荷比 Me＝甲基 NMP＝N-甲基-2-吡咯烷酮 NMR＝核磁共振 MPLC＝中压液相色谱法 min＝分钟 mL＝毫升 mol＝摩尔 mmol＝毫摩尔 MW＝微波 n-＝正 Ph＝苯基 (Ph3P)4Pd＝四(三苯基膦)钯(0) (Ph3P)2PdCl2＝二氯二(三苯基膦)钯(II) RP-HPLC＝反相高压液相色谱法 rt或RT＝室温 s-＝sec-＝仲 t-＝tert-＝叔 TBAF＝氟化四丁铵 TBS＝TBDMS＝叔丁基二甲基硅烷基 TES＝三乙基硅烷基或三乙基硅烷 TMS＝三甲基硅烷基或三甲基硅烷 TFA＝三氟乙酸 THF＝四氢呋喃 TLC＝薄层色谱法 UV＝紫外线 vol＝除非另外陈述，否则为mL/g或L/Kg的体积当量或限量试剂(limiting reagent)。
如本文所用，当任何变量以化学式出现多于一次时，其每次出现时的定义独立于其所有其他出现时的定义。
不在两个字母或符号之间的破折号(“-”)用于指取代基的连接点。例如，-CONH2是通过碳原子连接。
“任选的”或“任选地”指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，且该描述包括其中事件或情况发生的例子和其中事件或情况不发生的例子。例如，“任选地取代的烃基”包括如下定义的“烃基”和“取代的烃基”两者。本领域技术人员应理解，关于含有一个或多个取代基的任何基团，这种基团不期望引入空间上不实际的、合成上不可行的和/或本身不稳定的任何取代或取代方式。
如本文所用，术语“ATP酶”指能够水解ATP的酶。ATP酶包括含有诸如肌球蛋白的分子发动机的蛋白质。
“烃基”包括具有指定数量的碳原子(一般从1至20个碳原子，例如1至8个碳原子，诸如1至6个碳原子)的直链和支链。例如，C1-C6烃基包括1至6个碳原子的直链和支链烃基两者。当指定具有指定数量的碳的烃基残基时，期望包括具有该数量的碳的所有支链和直链版本；因此，例如“丁基”意指包括正丁基、仲丁基、异丁基和叔丁基；“丙基”包括正丙基和异丙基。“低级烃基”指具有一至六个碳的烃基基团。烃基基团的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、异戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基以及类似基团。亚烃基是烃基的子集，指与烃基相同但具有2个连接点的残基。亚烃基基团一般将具有2至20个碳原子，例如2至8个碳原子，诸如2至6个碳原子。例如，C0亚烃基指共价键，而C1亚烃基是亚甲基基团。
“烯基”指具有至少一个碳-碳双键的不饱和支链或直链烃基，所述碳-碳双键通过从母体烃基的相邻碳原子除去一分子氢而获得。基团可以是关于双键的顺式或反式构型。典型的烯基基团包括但不限于乙烯基；丙烯基，诸如丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1-基(烯丙基)、丙-2-烯-2-基；丁烯基，诸如丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、2-甲基-丙-1-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1，3-二烯-1-基、丁-1，3-二烯-2-基；以及类似基团。在某些实施方案中，烯基基团具有2至20个碳原子，且在其他的实施方案中，具有2至6个碳原子。“低级烯基”指具有2至6个碳的烯基基团。
“炔基”指具有至少一个碳-碳三键的不饱和支链或直链烃基，所述碳-碳三键通过从母体烃基的相邻碳原子除去两分子氢而获得。典型的炔基基团包括但不限于乙炔基；丙炔基，诸如丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1-基；丁炔基，诸如丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基；以及类似基团。在某些实施方案中，炔基基团具有2至20个碳原子，且在其他的实施方案中，具有3至6个碳原子。“低级炔基”指具有2至6个碳的炔基基团。
“环烃基”指通常具有3至7个环碳原子的非芳族碳环。该环可以是饱和的，或具有一个或多个碳-碳双键。环烃基基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基和环己烯基，以及桥环和笼型环(caged ring)基团，诸如降莰烷。
“烷氧基”指具有通过氧桥连接的指定数量的碳原子的烃基基团，诸如例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、2-戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基、3-甲基戊氧基以及类似基团。烷氧基基团一般将具有通过氧桥连接的1至7个碳原子。“低级烷氧基”指具有1至6个碳的烷氧基基团。
“单烃基甲酰胺和二烃基甲酰胺”包括式-(C＝O)NRaRb的基团，其中Ra和Rb独立地选自氢和具有指定数量的碳原子的烃基基团，条件是Ra和Rb不都是氢。
“酰基”指基团H-C(O)-；(烃基)-C(O)-；(环烃基)-C(O)-；(芳基)-C(O)-；(杂芳基)-C(O)-；和(杂环烃基)-C(O)-，其中该基团通过羰基官能度连接于母体结构，且其中烃基、环烃基、芳基、杂芳基和杂环烃基如本文所描述。酰基具有指定数量的碳原子，且酮基的碳被包括在编号的碳原子中。例如，C2酰基是具有式CH3(C＝O)-的乙酰基。
“甲酰基”指基团-C(O)H。
“羧基(carboxy)”和/或“羧基(carboxyl)”指基团-C(O)OH。
“烷氧基羰基”指通过羰基碳连接的式(烷氧基)(C＝O)-的基团，其中烷氧基具有指定数量的碳原子。因此，C1-C6烷氧基羰基是具有通过其氧连接至羰基连接体的1至6个碳原子的烷氧基。
“叠氮基”指基团-N3。
“氨基”指基团-NH2。
“单(烃基)氨基和二(烃基)氨基”包括仲烃基氨基基团和叔烃基氨基基团，其中所述烃基基团如上文定义，并具有指定数量的碳原子。烃基氨基基团的连接点是在氮上。单烃基氨基和二烃基氨基的实例包括乙基氨基、二甲基氨基和甲基-丙基-氨基。
术语“氨基羰基”指基团-CONRbRc，其中 Rb选自H、任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基、任选地取代的烷氧基；且 Rc独立地选自氢和任选地取代的C1-C4烃基；或 Rb和Rc与它们所连接的氮一起形成任选地取代的5元至7元含氮杂环烃基，其在杂环烃基环上任选地包括选自O、N和S的1或2个额外的杂原子； 其中每个取代的基团用一个或多个取代基独立地取代，所述取代基独立地选自C1-C4烃基、芳基、杂芳基、芳基-C1-C4烃基-、杂芳基-C1-C4烃基-、C1-C4卤代烃基、-OC1-C4烃基、-OC1-C4烃基苯基、-C1-C4烃基-OH、-OC1-C4卤代烃基、卤代、-OH、-NH2、-C1-C4烃基-NH2、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-NH(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基苯基)、-NH(C1-C4烃基苯基)、氰基、硝基、氧代(作为环烃基、杂环烃基或杂芳基的取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烃基、-CON(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-CONH(C1-C4烃基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烃基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烃基、-C(O)C1-C4烃基苯基、-C(O)C1-C4卤代烃基、-OC(O)C1-C4烃基、-SO2(C1-C4烃基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4卤代烃基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烃基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烃基)、-NHSO2(苯基)和-NHSO2(C1-C4卤代烃基)。
“芳基”包括 6元碳环芳族环，例如苯； 双环系统，其中至少一个环是碳环和芳族环，例如萘、茚满和萘满；以及 三环系统，其中至少一个环是碳环和芳族环，例如芴。
例如，芳基包括稠合于含有1个或多个杂原子的5元至7元杂环烃基环的6元碳环芳族环，所述杂原子选自N、O和S。对于其中环中的唯一一个是碳环芳族环的这种稠合双环系统，连接点可在碳环芳族环上或杂环烃基环上。由取代的苯衍生物形成的并在环原子处具有自由价的二价基团被称为取代的亚苯基。衍生自一价多环烃基的二价基团通过在对应的一价基团的命名上添加“亚”来命名，所述一价多环烃基的命名通过从具有自由价的碳原子上除去一个氢原子而使其以“-基”结尾，例如具有两个连接点的萘基被称为亚萘基。然而，芳基不包括以下单独定义的杂芳基或不会以任何方式与杂芳基一致。因此，如果一个或多个碳环芳族环与杂环烃基芳族环稠合，则产生的环系统按照本文定义，是杂芳基，而不是芳基。
术语“芳氧基”指基团-O-芳基。
术语“芳烃基”指基团-烃基-芳基。
“甲脒基”指基团-C(＝NH)-NH2。
“取代的甲脒基”指基团-C(＝NRe)-NRfRg，其中 Re选自氢、氰基、任选地取代的烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基和任选地取代的杂环烃基；且 Rf和Rg独立地选自氢、任选地取代的烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基和任选地取代的杂环烃基， 条件是Re、Rf和Rg中的至少一个不是氢，且其中取代的烃基、环烃基、芳基、杂环烃基和杂芳基分别指其中一个或多个(诸如多达5个，例如多达3个)氢原子由独立地选自以下的取代基取代的烃基、环烃基、芳基、杂环烃基和杂芳基 -Ra、-ORb、任选地取代的氨基(包括-NRcCORb、-NRcCO2Ra、-NRcCONRbRc、-NRbC(NRc)NRbRc、-NRbC(NCN)NRbRc和-NRcSO2Ra)、卤代、氰基、硝基、氧代(作为环烃基、杂环烃基和杂芳基的取代基)、任选地取代的酰基(诸如-CORb)、任选地取代的烷氧基羰基(诸如-CO2Rb)、氨基羰基(诸如-CONRbRc)、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、硫烷基(诸如SRb)、亚磺酰基(诸如-SORa)和磺酰基(诸如-SO2Ra和-SO2NRbRc)， 其中Ra选自任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基； Rb选自H、任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基；且 Rc独立地选自氢和任选地取代的C1-C4烃基；或 Rb和Rc与它们所连接的氮形成任选地取代的杂环烃基；且 其中每个任选地取代的基团是未取代的，或用独立地选自以下的一个或多个(诸如1个、2个或3个)取代基独立地取代C1-C4烃基、芳基、杂芳基、芳基-C1-C4烃基-、杂芳基-C1-C4烃基-、C1-C4卤代烃基、-OC1-C4烃基、-OC1-C4烃基苯基、-C1-C4烃基-OH、-OC1-C4卤代烃基、卤代、-OH、-NH2、-C1-C4烃基-NH2、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-NH(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基苯基)、-NH(C1-C4烃基苯基)、氰基、硝基、氧代(作为环烃基、杂环烃基或杂芳基的取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烃基、-CON(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-CONH(C1-C4烃基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烃基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烃基、-C(O)C1-C4苯基、-C(O)C1-C4卤代烃基、-OC(O)C1-C4烃基、-SO2(C1-C4烃基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4卤代烃基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烃基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烃基)、-NHSO2(苯基)和-NHSO2(C1-C4卤代烃基)。
术语“卤代”包括氟代、氯代、溴代和碘代，且术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。
“卤代烃基”指用1或多个卤原子，至多最多可允许数量的卤原子取代的具有指定数量的碳原子的如上文定义的烃基。卤代烃基的实例包括但不限于三氟甲基、二氟甲基、2-氟乙基和五氟乙基。
“杂芳基”包括 5元至7元芳族单环，其含有选自N、O和S的一个或多个，例如1至4个，或在某些实施方案中，1至3个杂原子，且剩余环原子是碳； 双环杂环烃基环，其含有选自N、O和S的一个或多个，例如1至4个，或在某些实施方案中，1至3个杂原子，且剩余环原子是碳，并且其中至少一个杂原子存在于芳族环上；和 三环杂环烃基环，其含有选自N、O和S的一个或多个，例如1至5个，或在某些实施方案中，1至4个杂原子，且剩余环原子是碳，并且其中至少一个杂原子存在于芳族环上。
例如，杂芳基包括稠合于5元至7元环烃基或杂环烃基环的5元至7元杂环烃基芳族环。对于其中环中的唯一一个含有一个或多个杂原子的这种稠合双环杂芳基环系统，连接点可以在任何环上。当杂芳基中S和O原子的总数量超过1时，那些杂原子没有彼此邻接。在某些实施方案中，杂芳基中S和O原子的总数量不超过2。在某些实施方案中，芳族杂环中S和O原子的总数量不超过1。杂芳基基团的实例包括但不限于(如从指定优先级1的键合位置起编号)2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2，3-吡嗪基、3，4-吡嗪基、2，4-嘧啶基、3，5-嘧啶基、2，3-吡唑啉基、2，4-咪唑啉基、异噁唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基、噻二唑啉基、四唑基、噻吩基、苯并苯硫基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并咪唑啉基、二氢吲哚基、哒嗪基、三唑基、喹啉基、吡唑基和5，6，7，8-四氢异喹啉基。杂芳基基团的其他实例包括但不限于异喹啉基、异噁唑-3-基和异噁唑-5-基。衍生自一价杂芳基的二价基团通过在对应的一价基团的命名上添加“亚”来命名，所述一价杂芳基的命名通过从具有自由价的碳原子上除去一个氢原子而使其以“-基”结尾，例如具有两个连接点的吡啶基是吡啶亚基。杂芳基不包括如本文定义的芳基、环烃基或杂环烃基或不会与它们一致。
取代的杂芳基还包括用一个或多个氧化物(-O-)取代基诸如吡啶基N-氧化物取代的环系统。
“杂环烃基”指非芳族单环，其一般具有3至7个环原子，含有至少2个碳原子以及独立地选自氧、硫和氮的1-3个杂原子，以及包括上述杂原子中的至少一个的组合。所述环可以是饱和的，或具有一个或多个碳-碳双键。合适的杂环烃基基团包括，例如(如从指定优先级1的键合位置起编号)2-吡咯烷基、2，4-咪唑烷基、2，3-吡唑烷基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基和2，5-哌嗪基(piperizinyl)。还包括吗啉基，吗啉基包括2-吗啉基和3-吗啉基(其中氧被指定为优先级1来编号)。取代的杂环烃基还包括用一个或多个氧代(＝O)或氧化物(-O-)取代基取代的环系统，所述取代基诸如哌啶基N-氧化物、吗啉基-N-氧化物、1-氧代-1-硫代吗啉基和1，1-二氧代-1-硫代吗啉基。
“杂环烃基”还包括双环系统，其中一个非芳族环一般具有3至7个环原子，含有至少2个碳原子以及独立地选自氧、硫和氮的1-3个杂原子，以及包括上述杂原子中的至少一个的组合；而另一个环一般具有3至7个环原子，任选地含有独立地选自氧、硫和氮的1-3个杂原子，且不是芳族的。
如本文所用，“调节”指与本文描述的化学个体不存在时的活性相比，作为对该化学个体的存在的直接或间接响应的活性的变化。该变化可以是活性的增加或活性的减少，且可能是由于化合物与靶的直接相互作用，或由于化合物与转而影响靶的活性的一种或多种其他因素的相互作用。例如，化学个体的存在可通过直接结合于靶，通过(直接或间接)使得另一因素增加或减少靶活性，或通过(直接或间接)增加或减少细胞或生物体中存在的靶的量而，例如增加或减少靶活性。
术语“硫烷基”包括基团-S-(任选地取代的(C1-C6)烃基)、-S-(任选地取代的芳基)、-S-(任选地取代的杂芳基)和-S-(任选地取代的杂环烃基)。因此，硫烷基包括基团C1-C6烃基硫烷基。
术语“亚磺酰基”包括基团-S(O)-(任选地取代的(C1-C6)烃基)、-S(O)-任选地取代的芳基)、-S(O)-任选地取代的杂芳基)、-S(O)-(任选地取代的杂环烃基)和-S(O)-(任选地取代的氨基)。
术语“磺酰基”包括基团-S(O2)-(任选地取代的(C1-C6)烃基)、-S(O2)-任选地取代的芳基)、-S(O2)-任选地取代的杂芳基)、-S(O2)-(任选地取代的杂环烃基)和-S(O2)-(任选地取代的氨基)。
如本文所用，术语“取代的”指在指定原子或基团上的任何一个或多个氢用选择的指定基团取代，条件是不超过指定原子的正常化合价。当取代基是氧代(即＝O)时，则该原子上的两个氢被取代。取代基和/或变量的组合是可允许的，唯一条件是这种组合产生稳定的化合物或有用的合成中间体。稳定的化合物或稳定的结构旨在暗示这样的化合物，其足够稳定以经受得住从反应混合物离析(isolation)和随后配制成至少具有实践应用的剂。除非另外指出，否则将取代基命名成芯结构(core structure)。例如，应理解，当(环烃基)烃基被列为可能的取代基时，这一取代基至芯结构的连接点是在烃基部分。
除非另外清楚地定义，否则术语“取代的”烃基、环烃基、芳基、杂环烃基和杂芳基分别指其中一个或多个(诸如多达5个，例如多达3个)氢原子由独立地选自以下的取代基取代的烃基、环烃基、芳基、杂环烃基和杂芳基 -Ra、-ORb、任选地取代的氨基(包括-NRcCORb、-NRcCO2Ra、-NRcCONRbRc、-NRbC(NRc)NRbRc、-NRbC(NCN)NRbRc、-NRbC(NH2)NC(O)NH2、-NRbC(NH2)N(CN)和-NRcSO2Ra)、卤代、氰基、叠氮基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、任选地取代的酰基(诸如-CORb)、任选地取代的烷氧基羰基(诸如-CO2Rb)、氨基羰基(诸如-CONRbRc)、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-OP(O)(ORb)ORc、硫烷基(诸如SRb)、亚磺酰基(诸如-SORa)和磺酰基(诸如-SO2Ra和-SO2NRbRc)， 其中Ra选自任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基； Rb选自氢、任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基；且 Rc独立地选自氢和任选地取代的C1-C4烃基；或 Rb和Rc与它们所连接的氮形成任选地取代的杂环烃基；且 其中每个任选地取代的基团是未取代的，或用独立地选自以下的一个或多个诸如一个、两个或三个取代基独立地取代C1-C4烃基、芳基、杂芳基、芳基-C1-C4烃基-、杂芳基-C1-C4烃基-、C1-C4卤代烃基、-OC1-C4烃基、-OC1-C4烃基苯基、-C1-C4烃基-OH、-OC1-C4卤代烃基、卤代、-OH、-NH2、-C1-C4烃基-NH2、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-NH(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基苯基)、-NH(C1-C4烃基苯基)、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烃基、-CON(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-CONH(C1-C4烃基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烃基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烃基、-C(O)C1-C4烃基苯基、-C(O)C1-C4卤代烃基、-OC(O)C1-C4烃基、-SO2(C1-C4烃基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4卤代烃基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烃基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烃基)、-NHSO2(苯基)和-NHSO2(C1-C4卤代烃基)。
术语“取代的酰基”指基团(取代的烃基)-C(O)-；(取代的环烃基)-C(O)-；(取代的芳基)-C(O)-；(取代的杂芳基)-C(O)-；和(取代的杂环烃基)-C(O)-，其中所述基团通过羰基官能度连接于母体结构，且其中取代的烃基、环烃基、芳基、杂芳基和杂环烃基分别指其中一个或多个(诸如多达5个，例如多达3个)氢原子由独立地选自以下的取代基取代的烃基、环烃基、芳基、杂芳基和杂环烃基 -Ra、-ORb、任选地取代的氨基(包括-NRcCORb、-NRcCO2Ra、-NRcCONRbRc、-NRbC(NRc)NRbRc、-NRbC(NCN)NRbRc和-NRcSO2Ra)、卤代、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、任选地取代的酰基(诸如-CORb)、任选地取代的烷氧基羰基(诸如-CO2Rb)、氨基羰基(诸如-CONRbRc)、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-OP(O)(ORb)ORc、硫烷基(诸如SRb)、亚磺酰基(诸如-SORa)和磺酰基(诸如-SO2Ra和-SO2NRbRc)， 其中Ra选自任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基； Rb选自H、任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基；且 Rc独立地选自氢和任选地取代的C1-C4烃基；或 Rb和Rc与它们所连接的氮形成任选地取代的杂环烃基；且 其中每个任选地取代的基团是未取代的，或用独立地选自以下的一个或多个诸如一个、两个或三个取代基独立地取代C1-C4烃基、芳基、杂芳基、芳基-C1-C4烃基-、杂芳基-C1-C4烃基-、C1-C4卤代烃基、-OC1-C4烃基、-OC1-C4烃基苯基、-C1-C4烃基-OH、-OC1-C4卤代烃基、卤代、-OH、-NH2、-C1-C4烃基-NH2、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-NH(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基苯基)、-NH(C1-C4烃基苯基)、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烃基、-CON(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-CONH(C1-C4烃基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烃基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烃基、-C(O)C1-C4烃基苯基、-C(O)C1-C4卤代烃基、-OC(O)C1-C4烃基、-SO2(C1-C4烃基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4卤代烃基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烃基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烃基)、-NHSO2(苯基)和-NHSO2(C1-C4卤代烃基)。
术语“取代的烷氧基”指其中烃基组成被取代的烷氧基(即-O-(取代的烃基))，其中“取代的烃基”指其中一个或多个(诸如多达5个，例如多达3个)氢原子由独立地选自以下的取代基取代的烃基 -Ra、-ORb、任选地取代的氨基(包括-NRcCORb、-NRcCO2Ra、-NRcCONRbRc、-NRbC(NRc)NRbRc、-NRbC(NCN)NRbRc和-NRcSO2Ra)、卤代、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、任选地取代的酰基(诸如-CORb)、任选地取代的烷氧基羰基(诸如-CO2Rb)、氨基羰基(诸如-CONRbRc)、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-OP(O)(ORb)ORc、硫烷基(诸如SRb)、亚磺酰基(诸如-SORa)和磺酰基(诸如-SO2Ra和-SO2NRbRc)， 其中Ra选自任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基； Rb选自H、任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基；且 Rc独立地选自氢和任选地取代的C1-C4烃基；或 Rb和Rc与它们所连接的氮形成任选地取代的杂环烃基；且 其中每个任选地取代的基团是未取代的，或用独立地选自以下的一个或多个诸如一个、两个或三个取代基独立地取代C1-C4烃基、芳基、杂芳基、芳基-C1-C4烃基-、杂芳基-C1-C4烃基-、C1-C4卤代烃基、-OC1-C4烃基、-OC1-C4烃基苯基、-C1-C4烃基-OH、-OC1-C4卤代烃基、卤代、-OH、-NH2、-C1-C4烃基-NH2、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-NH(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基苯基)、-NH(C1-C4烃基苯基)、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烃基、-CON(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-CONH(C1-C4烃基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烃基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烃基、-C(O)C1-C4烃基苯基、-C(O)C1-C4卤代烃基、-OC(O)C1-C4烃基、-SO2(C1-C4烃基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4卤代烃基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烃基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烃基)、-NHSO2(苯基)和-NHSO2(C1-C4卤代烃基)。
在一些实施方案中，取代的烷氧基是“聚烷氧基”或-O-(任选地取代的亚烃基)-(任选地取代的烷氧基)，并包括诸如-OCH2CH2OCH3的基团和乙二醇醚的残基，诸如聚乙二醇和-O(CH2CH2O)xCH3，其中x是2-20的整数，诸如2-10，且例如2-5。另一取代的烷氧基是羟基烷氧基或-OCH2(CH2)yOH，其中y是1-10的整数，诸如1-4。
术语“取代的烷氧基羰基”指基团(取代的烃基)-O-C(O)-，其中该基团通过羰基官能度连接于母体结构，并且其中取代的烃基指其中一个或多个(诸如多达5个，例如多达3个)氢原子由独立地选自以下的取代基取代的烃基 -Ra、-ORb、任选地取代的氨基(包括-NRcCORb、-NRcCO2Ra、-NRcCONRbRc、-NRbC(NRc)NRbRc、-NRbC(NCN)NRbRc和-NRcSO2Ra)、卤代、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、任选地取代的酰基(诸如-CORb)、任选地取代的烷氧基羰基(诸如-CO2Rb)、氨基羰基(诸如-CONRbRc)、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-OP(O)(ORb)ORc、硫烷基(诸如SRb)、亚磺酰基(诸如-SORa)和磺酰基(诸如-SO2Ra和-SO2NRbRc)， 其中Ra选自任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基； Rb选自H、任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基；且 Rc独立地选自氢和任选地取代的C1-C4烃基；或 Rb和Rc与它们所连接的氮形成任选地取代的杂环烃基；且 其中每个任选地取代的基团是未取代的，或用独立地选自以下的一个或多个诸如一个、两个或三个取代基独立地取代C1-C4烃基、芳基、杂芳基、芳基-C1-C4烃基-、杂芳基-C1-C4烃基-、C1-C4卤代烃基、-OC1-C4烃基、-OC1-C4烃基苯基、-C1-C4烃基-OH、-OC1-C4卤代烃基、卤代、-OH、-NH2、-C1-C4烃基-NH2、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-NH(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基苯基)、-NH(C1-C4烃基苯基)、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烃基、-CON(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-CONH(C1-C4烃基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烃基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烃基、-C(O)C1-C4烃基苯基、-C(O)C1-C4卤代烃基、-OC(O)C1-C4烃基、-SO2(C1-C4烃基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4卤代烃基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烃基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烃基)、-NHSO2(苯基)和-NHSO2(C1-C4卤代烃基)。
术语“取代的氨基”指基团NHRd或-NRdRe，其中Rd选自羟基、甲酰基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的酰基、任选地取代的甲脒基、氨基羰基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的烷氧基羰基、亚磺酰基和磺酰基，且其中Re选自任选地取代的烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基和任选地取代的杂环烃基，且其中取代的烃基、环烃基、芳基、杂环烃基和杂芳基分别指其中一个或多个(诸如多达5个，例如多达3个)氢原子由独立地选自以下的取代基取代的烃基、环烃基、芳基、杂环烃基和杂芳基 -Ra、-ORb、任选地取代的氨基(包括-NRcCORb、-NRcCO2Ra、-NRcCONRbRc、-NRbC(NRc)NRbRc、-NRbC(NCN)NRbRc和-NRcSO2Ra)、卤代、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、任选地取代的酰基(诸如-CORb)、任选地取代的烷氧基羰基(诸如-CO2Rb)、氨基羰基(诸如-CONRbRc)、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-OP(O)(ORb)ORc、硫烷基(诸如SRb)、亚磺酰基(诸如-SORa)和磺酰基(诸如-SO2Ra和-SO2NRbRc)， 其中Ra选自任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基； Rb选自H、任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基；且 Rc独立地选自氢和任选地取代的C1-C4烃基；或 Rb和Rc与它们所连接的氮形成任选地取代的杂环烃基；且 其中每个任选地取代的基团是未取代的，或用独立地选自以下的一个或多个诸如一个、两个或三个取代基独立地取代C1-C4烃基、芳基、杂芳基、芳基-C1-C4烃基-、杂芳基-C1-C4烃基-、C1-C4卤代烃基、-OC1-C4烃基、-OC1-C4烃基苯基、-C1-C4烃基-OH、-OC1-C4卤代烃基、卤代、-OH、-NH2、-C1-C4烃基-NH2、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-NH(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)(C1-C4烃基苯基)、-NH(C1-C4烃基苯基)、氰基、硝基、氧代(作为环烃基或杂环烃基的取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烃基、-CON(C1-C4烃基)(C1-C4烃基)、-CONH(C1-C4烃基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烃基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(C1-C4烃基)、-N(C1-C4烃基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烃基、-C(O)C1-C4烃基苯基、-C(O)C1-C4卤代烃基、-OC(O)C1-C4烃基、-SO2(C1-C4烃基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4卤代烃基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烃基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烃基)、-NHSO2(苯基)和-NHSO2(C1-C4卤代烃基)；且 其中任选地取代的酰基、任选地取代的烷氧基羰基、亚磺酰基和磺酰基如本文所定义。
术语“取代的氨基”还指基团-NHRd和NRdRd的N-氧化物，其各自如上文所描述。N-氧化物可通过用例如过氧化氢或间氯过氧苯甲酸处理对应的氨基来制备。本领域技术人员熟悉用于进行N-氧化的反应条件。
术语“磷酸基(phosphato)”指-OP(O)(ORb)ORc，其中Rb选自氢、任选地取代的C1-C6烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的芳基和任选地取代的杂芳基；且Rc独立地选自氢和任选地取代的C1-C4烃基。在一些实施方案中，Rb和Rc是氢。
式I的化合物包括但不限于式I的化合物的光学异构体、其外消旋物和其他混合物。在那些情况下，单一对映体或非对映体，即光学活性形式，可通过不对称合成或通过外消旋物的拆分而获得。可以例如通过常规方法诸如在拆分剂的存在下结晶，或使用例如手性高压液相色谱法(HPLC)柱的色谱法，来完成外消旋物的拆分。此外，式I的化合物包括具有碳-碳双键的化合物的Z-形式和E-形式(或顺式和反式形式)。如果式I的化合物以多种互变异构体的形式存在，则本文描述的化学个体包括所有互变异构形式的化合物。
本文描述的化学个体包括但不限于式I的化合物及其所有药学上可接受的形式。本文所述的化学个体的药学上可接受的形式包括药学上可接受的盐、溶剂合物、结晶形式(包括多晶型物和包合物)、螯合物、非共价络合物、前药及其混合物。在某些实施方案中，本文描述的化学个体是以药学上可接受的盐的形式存在。因此，术语“化学个体(chemical entity)”和“化学个体(chemical entities)”还包括药学上可接受的盐、溶剂合物、螯合物、非共价络合物、前药及混合物。
“药学上可接受的盐”包括但不限于无机酸的盐，诸如盐酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、亚磺酸盐、硝酸盐以及类似的盐；以及有机酸的盐，诸如苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐和链烷酸盐，诸如乙酸盐、HOOC-(CH2)n-COOH(其中n是0-4)以及类似的盐。相似地，药学上可接受的阳离子包括但不限于钠、钾、钙、铝、锂和铵。
此外，如果获得为酸加成盐的式I的化合物，则可通过碱化酸式盐的溶液来获得游离碱。相反地，如果产物是游离碱，则可根据用于由碱化合物制备酸加成盐的常规程序，通过将游离碱溶解于合适的有机溶剂并用酸处理该溶液来制备加成盐，特别是药学上可接受的加成盐。本领域技术人员将了解可用于制备无毒的药学上可接受的加成盐的多种合成方法学。
如上所述，前药例如式I的化合物的酯或酰胺衍生物也属于化学个体的范围。术语“前药”包括当施用于患者时，例如当前药代谢加工时，成为式I的化合物的任何化学个体。前药的实例包括但不限于乙酸酯、甲酸酯、磷酸酯和苯甲酸酯，以及式I的化合物的官能团(例如醇或胺基)的类似衍生物。
术语“溶剂合物”指通过溶剂和化合物的相互作用形成的化学个体。合适的溶剂合物是药学上可接受的溶剂合物，诸如水合物，包括一水合物和半水合物。
术语“螯合物”指通过在两个(或更多个)点处化合物对金属离子的配位作用而形成的化学个体。
术语“非共价络合物”指通过化合物和另一分子的相互作用而形成的化学个体，其中化合物和分子之间未形成共价键。例如，络合作用可通过范德华相互作用、氢键合和静电相互作用(还称为离子键合)而发生。
术语“活性剂”用于指具有生物活性的化学个体。在某些实施方案中，“活性剂”是具有药学应用的化合物。例如，活性剂可以是抗癌治疗剂。
“显著的”指在统计显著性的标准参数检验中为统计学上显著的任何可检测的变化，标准参数检验诸如学生T检验，其中p＜0.05。
术语“治疗有效量”的本文描述的化学个体指当施用于人或非人患者时，有效提供治疗效益，诸如症状的缓解、疾病进展的延缓或疾病的预防的量。
“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”指患者的疾病的任何治疗，包括 a)预防疾病，即使得疾病的临床症状不发展； b)抑制疾病； c)延缓或阻止临床症状的发展；和/或 d)减轻疾病，即使得临床症状消退。
“患者”指已经是或将是治疗、观察或实验的对象的动物，诸如哺乳动物。本文描述的方法可用于人类治疗和兽医应用。在一些实施方案中，患者是哺乳动物；在一些实施方案中，患者是人；且在一些实施方案中，患者选自猫和狗。
提供了选自式I的化合物及其药学上可接受的盐的至少一种化学个体
式I 其中 W1和W2独立地选自CR11R12、NR13和O；条件是W1和W2中的至少一个是NR13； W3选自CR1R2、NR14和O； Z1选自杂芳基和杂环烃基； Z2选自芳基、杂芳基和杂环烃基； R8选自氢、任选地取代的烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基和任选地取代的杂环烃基； R1、R2、R11和R12独立地选自氢、羟基、羧基、磺酰基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的氨基羰氧基、任选地取代的酰氧基、任选地取代的烷氧基羰氧基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基羰基和任选地取代的氨基磺酰基；或R1和R2可任选地与任何插入原子连接到一起以形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的基团； R13和R14独立地选自氢、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基； 对于每次出现时，R3、R4、R5和R6独立地选自氢、羟基、羧基、磺酰基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的氨基羰氧基、任选地取代的酰氧基、任选地取代的烷氧基羰氧基、任选地取代的酰基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基羰基和任选地取代的氨基磺酰基；或R5和R6一起形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的任选地取代的环。
或R1和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的基团； 或R14和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环； 或如果W1是NR13，则R13和R1可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环； 或如果W1是NR13，则R13和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环； R7和R10独立地选自氢、氰基、卤代、羟基、叠氮基、硝基、羧基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基、任选地取代的酰基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基羰基、任选地取代的氨基磺酰基、任选地取代的甲脒基和任选地取代的炔基； m选自0、1、2和3； n选自0、1、2、3和4； p选自0、1、2和3；且 q选自1、2、3和4。
在一些实施方案中，Z1选自杂芳基和杂环烃基。在一些实施方案中，Z1选自喹啉基、异喹啉基、吡啶并[4，3-d]吡啶基、苯并噻唑基、噻二唑基、吡啶并[3，4-d]吡啶基、吡啶基、吡啶并[3，2-d]吡啶基、8-氢吡咯并[1，2-e]嘧啶基、异噁唑基、8-氢吡唑并[1，5-a]吡啶基、吡啶并[2，3-d]吡啶基、苯并[d]异噁唑基、吡嗪基、噻唑基、4-氧代-3-氢喹唑啉基、4-氢咪唑并[1，2-a]吡啶基、1，3-噻唑并[5，4-b]吡啶基、噁二唑基、苯并噁唑基、喹喔啉基、噻吩基、嘧啶基、苯并咪唑基(benzimidazoll)、哌啶基和吡唑基。在一些实施方案中，Z1选自异喹啉-3-基、苯并[d]噻唑-2-基、苯并[d]噁唑-2-基、1，3，4-噻二唑-2-基、吡啶-2-基、喹啉-2-基、喹啉-3-基、噻唑-5-基、噻吩-2-基和吡咯并[1，2-c]嘧啶-3-基。
在一些实施方案中，Z2选自芳基、杂芳基和杂环烃基。在一些实施方案中，Z2选自苯基、萘基和茚满基。在一些实施方案中，Z2是苯基。
在一些实施方案中，W1是CR11R12 在一些实施方案中，R11和R12各自独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，R11和R12各自独立地选自氢和低级烃基。
在一些实施方案中，R11和R12都是氢。
在一些实施方案中，W1是NR13。
在一些实施方案中，R13选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，R13选自氢和低级烃基。
在一些实施方案中，R13是氢。
在一些实施方案中，W1是O。
在一些实施方案中，W2是CR11R12。
在一些实施方案中，R11和R12各自独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，R11和R12各自独立地选自氢和低级烃基。
在一些实施方案中，R11和R12都是氢。
在一些实施方案中，W2是NR13。
在一些实施方案中，R13选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，R13选自氢和低级烃基。
在一些实施方案中，R13是氢。
在一些实施方案中，W2是O。
在一些实施方案中，W1是O，且W2是NR13。在一些实施方案中，R13是氢。
在一些实施方案中，W3是CR1R2。
在一些实施方案中，R1和R2独立地选自氢和任选地取代的烃基。
在一些实施方案中，R1和R2独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，R1和R2独立地选自氢和低级烃基。
在一些实施方案中，R1和R2独立地选自氢和甲基。
在一些实施方案中，R1和R2与它们所连接的碳一起形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的基团。
在一些实施方案中，R1和R2与它们所连接的碳一起形成选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、哌啶基和四氢吡喃基的基团，它们中的任何一个被任选地取代。
在一些实施方案中，R1和R2与它们所连接的碳一起形成选自哌啶和四氢吡喃的基团，它们中的任何一个用2-氨基乙酰基或2-(叔丁氧羰基氨基)乙酰基任选地取代。
在一些实施方案中，R1和R2与它们所连接的碳一起形成选自四氢吡喃、1-(2-(叔丁氧羰基氨基)乙酰基)哌啶-4-基和1-(2-氨基乙酰基)哌啶-4-基的基团。
在一些实施方案中，W3是NR14。
在一些实施方案中，R14选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，R14选自氢、低级烃基和用选自以下的一个或两个基团取代的低级烃基羟基、卤代、任选地取代的氨基和任选地取代的烷氧基。
在一些实施方案中，R14选自氢、低级烃基和用选自以下的一个或两个基团取代的低级烃基羟基、任选地取代的氨基和任选地取代的烷氧基。
在一些实施方案中，R14选自氢、甲基、乙基、丙基和异丙基，其中甲基、乙基、丙基和异丙基用选自以下的一个或两个基团任选地取代羟基、任选地取代的氨基和任选地取代的烷氧基。
在一些实施方案中，R14选自氢、甲基、乙基、丙基和异丙基，其中甲基、乙基、丙基和异丙基用一个或两个羟基任选地取代。
在一些实施方案中，R14选自甲基、乙基、羟基甲基、2-羟基乙基、2，2-二氟乙基和异丙基。
在一些实施方案中，R14选自甲基、乙基、羟基甲基、2-羟基乙基和异丙基。
在一些实施方案中，R14选自甲基和乙基。在一些实施方案中，R14是甲基。
在一些实施方案中，R8选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，R8选自氢和低级烃基。
在一些实施方案中，R8选自氢和甲基。
在一些实施方案中，R8是氢。
在一些实施方案中，q是3。
在一些实施方案中，q是2。
在一些实施方案中，q是1。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R5独立地选自氢、任选地取代的低级烃基和任选地取代的烯基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R5独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R5独立地选自氢、低级烃基和用选自以下的一个、两个或三个基团取代的低级烃基任选地取代的杂环烃基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的烷氧基羰基、羟基、任选地取代的氨基、任选地取代的氨基羰基、酰基、卤代和叠氮基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R5独立地选自氢、低级烃基和用选自以下的一个、两个或三个基团取代的低级烃基任选地取代的杂环烃基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的烷氧基羰基、羟基、任选地取代的氨基、任选地取代的氨基羰基、酰基和叠氮基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R5独立地选自氢、低级烃基和用选自以下的一个、两个或三个基团取代的低级烃基4-(低级烃基)哌嗪-1-基、氧哌嗪-1-基、吗啉基、苄氧基、苄氧基羰基、甲氧基羰基、羟基、氨基、二甲基氨基、甲氧基(甲基)氨基甲酰基、乙酰氨基、乙酰基和叠氮基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R5独立地选自氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、正丙基、正丁基、正戊基、异戊基和4-甲基戊基，其中甲基、乙基、异丙基、异丁基、正丙基、正丁基、正戊基、异戊基和4-甲基戊基中的每一个用选自以下的一个、两个或三个基团任选地取代4-甲基哌嗪-1-基、3-氧哌嗪-1-基、吗啉基、苄氧基、苄氧基羰基、甲氧基羰基、羟基、氨基、二甲基氨基、甲氧基(甲基)氨基甲酰基、乙酰氨基、乙酰基和叠氮基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R5独立地选自氢、乙基、2-(苄氧基)-2-氧代乙基、苄氧基甲基、异丁基、异丙基、甲基、2-羟基乙基、2-甲氧基-2-氧代乙基、3-(苄氧基)-3-氧代丙基、3-羟基丙基、3-甲氧基-3-氧代丙基、4-氨基丁基、4-叠氮基丁基、4-羟基丁基、4-甲氧基-4-氧代丁基、羟基甲基、2-羟基-2-甲基丙基、4-羟基-4-甲基戊基、3-氨基丙基、(4-甲基哌嗪-1-基)甲基、2-(3-氧哌嗪-1-基)乙基、吗啉基乙基、吗啉基甲基、(3-氧哌嗪-1-基)甲基、(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、(二甲基氨基)甲基、(R)-2-羟基丙基、(S)-2-羟基丙基、2-(甲氧基(甲基)氨基)-2-氧代乙基、3-(甲氧基(甲基)氨基)-3-氧代丙基、3-羟基-3-甲基丁基、3-羟基丁基、4-乙酰氨基丁基、4-羟基戊基和4-氧代戊基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R6独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，每个R6独立地选自氢和低级烃基。
在一些实施方案中，对于每次出现时，R6是氢。
在一些实施方案中，-(CR5R6)q-是-CH2CH(R5)-，其中R5选自氢、低级烃基和用选自以下的一个、两个或三个基团取代的低级烃基4-(低级烃基)哌嗪-1-基、氧哌嗪-1-基、吗啉基、苄氧基、苄氧基羰基、甲氧基羰基、羟基、氨基、二甲基氨基、甲氧基(甲基)氨基甲酰基、乙酰氨基、乙酰基、叠氮基、磷酸基(诸如-OP(O)(OH)2)和卤代。
在一些实施方案中，-(CR5R6)q-是-CH2CH(R5)-，其中R5是用选自羟基和磷酸基(诸如-OP(O)(OH)2)的一个、两个或三个基团取代的低级烃基。在一些实施方案中，-(CR5R6)q-是-CH2CH(R5)-，其中R5是用OP(O)(OH)2取代的，并用一个或两个羟基任选地进一步取代的低级烃基。
在一些实施方案中，-(CR5R6)q-是-CH2CH(R5)-，其中R5是用任选地取代的杂芳基取代的低级烃基。在一些实施方案中，R5是用以下取代的低级烃基咪唑-4-基、咪唑-2-基、吡啶-2-基、1，2，4-噁二唑-5-基、异噁唑-5-基、咪唑并[1，5-a]哌嗪-3-基或4-氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-3-基，它们中的每一个被任选地取代。在一些实施方案中，R5是用以下取代的低级烃基咪唑-4-基、咪唑-2-基、吡啶-2-基、1，2，4-噁二唑-5-基、异噁唑-5-基、咪唑并[1，5-a]哌嗪-3-基或4-氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-3-基，它们中的每一个用低级烃基任选地取代。
在一些实施方案中，-(CR5R6)q-是-CH2CH(R5)-，其中R5是用任选地取代的氨基羰基取代的低级烃基。在一些实施方案中，R5是用-C(O)NR11R12取代的低级烃基，其中R11和R12与它们所连接的氮一起形成任选地取代的5元至7元杂环烃基环或任选地取代的8元至12元双环杂环烃基环，它们中的每一个任选地包括选自氧、硫和氮的额外的杂原子。在一些实施方案中，R5是用-C(O)NR11R12取代的低级烃基，其中R11和R12与它们所连接的氮一起形成选自以下的环4-哌嗪基、1，4-二氮杂全氢环庚基(1，4-diazaperhydroepinyl)和4，5，6，7-四氢咪唑并[5，4-c]吡啶-5-基，它们中的每一个被任选地取代。在一些实施方案中，R5是用-C(O)NR11R12取代的低级烃基，其中R11和R12与它们所连接的氮一起形成被任选地取代的4-哌嗪基环。在一些实施方案中，R5是用-C(O)NR11R12取代的低级烃基，其中R11和R12与它们所连接的氮一起形成用选自低级烃基、羟基取代的低级烃基和卤代取代的低级烃基的一个或两个基团任选地取代的4-哌嗪基环。
在一些实施方案中，W2是NH，W1是O，且W3是CR1R2。
在一些实施方案中，W2是NH，W1是CH2，且W3是NR14。
在一些实施方案中，W2是NH，W1是O，且W3是NR14。
在一些实施方案中，m是0。
在一些实施方案中，m选自1和2，且每个R7选自卤代和任选地取代的烃基。
在一些实施方案中，R7选自卤代和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，R7选自卤代和低级烃基。
在一些实施方案中，每个R7选自氯代、氟代和甲基。
在一些实施方案中，-(R7)m与它连接的Z2一起形成选自以下的基团2-氯苯基、2-甲基苯基、2-氯-4-氟苯基、2-氯-3-氟苯基、2，3-二氯苯基、2，3-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基和3-氯-2-氟苯基。
在一些实施方案中，n选自1和2。
在一些实施方案中，n是1。
在一些实施方案中，每个R3和R4独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
在一些实施方案中，每个R3和R4独立地选自氢、甲基、乙基、异丙基和羟基甲基。
在一些实施方案中，R3和R4是氢。
在一些实施方案中，Z1是杂芳基，p选自0、1和2，且R10选自卤代、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的杂环烃基和任选地取代的芳基。
在一些实施方案中，Z1是杂芳基，p选自0、1和2，且R10选自卤代、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基和任选地取代的芳基。
在一些实施方案中，Z1是异喹啉基，p是1，且R10是卤代。在一些实施方案中，Z1是6-氟异喹啉-3-基。
在一些实施方案中，Z1是吡啶-2-基，p是1，且R10选自卤代和任选地取代的低级烃基。在一些实施方案中，Z1是吡啶-2-基，p是1，且R10选自卤代和三氟甲基。
在一些实施方案中，Z1是异噁唑-3-基，p是1，且R10选自任选地取代的苯基。在一些实施方案中，Z1是异噁唑-3-基，p是1，且R10选自苯基和卤代苯基。
在一些实施方案中，Z1是异噁唑-5-基，p是1，且R10选自任选地取代的苯基。在一些实施方案中，Z1是异噁唑-5-基，p是1，且R10选自苯基和卤代苯基。
在一些实施方案中，p是0，且Z1选自2，7-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、1，3，4-噻二唑基、吡啶基、喹啉基、噻唑基、噻吩基和吡咯并[1，2-c]嘧啶基。
在一些实施方案中，p是0，且Z1选自异喹啉基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、1，3，4-噻二唑基、吡啶基、喹啉基、噻唑基、噻吩基和吡咯并[1，2-c]嘧啶基。
在一些实施方案中，p是0，且Z1是异喹啉-3-基。在一些实施方案中，p是0，且Z1是苯并[d]噻唑基。
在一些实施方案中，p是0，且Z1是2，7-萘啶-3-基。
在一些实施方案中，Z1选自异喹啉-3-基、异噁唑-5-基、异噁唑-3-基、苯并[d]噻唑-2-基、苯并[d]噁唑-2-基、1，3，4-噻二唑-2-基、吡啶-2-基、喹啉-2-基、喹啉-3-基、噻唑-5-基、噻吩-2-基和吡咯并[1，2-c]嘧啶-3-基。p选自1和2，且每个R10独立地选自卤代、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基和任选地取代的芳基。
在一些实施方案中，Z1选自异喹啉-3-基、苯并[d]噻唑-2-基、苯并[d]噁唑-2-基、1，3，4-噻二唑-2-基、吡啶-2-基、喹啉-2-基、喹啉-3-基、噻唑-5-基、噻吩-2-基和吡咯并[1，2-c]嘧啶-3-基。p选自1和2，且每个R10独立地选自卤代、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基和任选地取代的芳基。
在一些实施方案中，R10独立地选自卤代、任选地取代的低级烃基、任选地取代的低级烯基和任选地取代的苯基。
在一些实施方案中，R10独立地选自氯代、氟代、溴代、三氟甲基、甲基、乙基、乙烯基和苯基。
在一些实施方案中，Z1是异喹啉-3-基，p选自1和2，且每个R10独立地选自卤代。在一些实施方案中，Z1是异喹啉-3-基，p选自1和2，且每个R10是氟。在一些实施方案中，Z1是异喹啉-3-基，p是1，且R10是氟。
在一些实施方案中，Z1是异噁唑-5-基，p是1，且R10选自任选地取代的苯基。在一些实施方案中，Z1是异噁唑-5-基，p是1，且R10选自用一个或两个卤代基团任选地取代的苯基。
在一些实施方案中，Z1是异噁唑-3-基，p是1，且R10选自任选地取代的苯基。在一些实施方案中，Z1是异噁唑-3-基，p是1，且R10选自用一个或两个卤代基团任选地取代的苯基。
在一些实施方案中，Z1是1，3，4-噻二唑-2-基，p是1，且R10选自任选地取代的苯基。在一些实施方案中，Z1是异噁唑-3-基，p是1，且R10选自用一个或两个卤代基团任选地取代的苯基。
在一些实施方案中，-(R10)p与Z1一起形成选自以下的基团3-苯基异噁唑-5-基、5-苯基异噁唑-3-基、6-甲基苯并[d]噻唑-2-基、5-乙基吡啶-2-基、4-甲基苯并[d]噻唑-2-基、5，6-二氯苯并[d]噻唑-2-基、5，6-二氟苯并[d]噻唑-2-基、5，6-二甲基苯并[d]噻唑-2-基、5-溴吡啶-2-基、5-苯基-1，3，4-噻二唑-2-基、5-乙烯基吡啶-2-基、6-氟异喹啉-3-基、5-氟异喹啉-3-基、7-氟异喹啉-3-基、6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基、5-苯基吡啶-2-基、4-甲基-2-苯基噻唑-5-基、5-甲基吡啶-2-基、5-溴吡啶-2-基和4-甲基噻吩-2-基。
在一些实施方案中，-(R10)p与Z1一起形成选自以下的基团6-甲基苯并[d]噻唑-2-基、5-乙基吡啶-2-基、4-甲基苯并[d]噻唑-2-基、5，6-二氯苯并[d]噻唑-2-基、5，6-二氟苯并[d]噻唑-2-基、5，6-二甲基苯并[d]噻唑-2-基、5-溴吡啶-2-基、5-苯基-1，3，4-噻二唑-2-基、5-乙烯基吡啶-2-基、6-氟异喹啉-3-基、5-氟异喹啉-3-基、7-氟异喹啉-3-基、6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基、5-苯基吡啶-2-基、4-甲基-2-苯基噻唑-5-基、5-甲基吡啶-2-基、5-溴吡啶-2-基和4-甲基噻吩-2-基。
还提供了选自式II的化合物及其药学上可接受的盐的至少一种化学个体
式II 其中W1、W2、W3、Z1、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R10、m、n、p和q如对式I的化合物所描述的。
还提供了选自式III的化合物及其药学上可接受的盐的至少一种化学个体
式III 其中Z1、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R10、m和p如对式I的化合物所描述的。
还提供了选自以下及其药学上可接受的盐的至少一种化学个体





































































































还提供了选自以下及其药学上可接受的盐的至少一种化学个体 N-{(1S)-5-羟基-1-[(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)甲基]戊基}{[(2-氯-4-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-((1S)-1-{[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]甲基}-3，4-二羟基丁基){[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-((1S，3S)-1-{[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]甲基}-3，4-二羟基丁基){[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-((1S，3R)-1-{[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]甲基}-3，4-二羟基丁基){[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-[(4S)-4-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]戊基]-2-氨基乙酰胺； (4S)-4-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]-2-羟基戊基二氢磷酸酯； N-[(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-3-[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]丙基]-2-氨基乙酰胺； N-{(1S)-4-氨基-1-[(N-吡啶并[4，3-d]吡啶-3-基氨基甲酰氧基)甲基]丁基}{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-((1S)-1-{[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]甲基}-4-氧代-4-哌嗪基丁基){[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-(4-[((1E)-1-氨基-2-氨基甲酰基-2-氮杂乙烯基)氨基](1S)-1-{[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]甲基}丁基){[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-[(1S)-4-氨基-1-({N-[5-(三氟甲基)(2-吡啶基)]氨基甲酰氧基}甲基)丁基]{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； (5S)-5-({[(2，3-二氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-6-(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)己基二氢磷酸酯； [(2S)-5-氨基-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)戊氧基]-N-(5-氯(2-吡啶基))甲酰胺； N-((1S)-4-氨基-3，3-二氟-1-{[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]甲基}丁基){[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； [(2S，4R)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-4，5-二羟基戊氧基]-N-(3-异喹啉基)甲酰胺； [(2S，4S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-4，5-二羟基戊氧基]-N-(3-异喹啉基)甲酰胺； [(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-氧代-5-哌嗪基戊氧基]-N-(3-异喹啉基)甲酰胺； N-{(1S，3S)-3，4-二羟基-1-[(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)甲基]丁基}{[(2，3-二氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-{(1S，3R)-3，4-二羟基-1-[(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)甲基]丁基}{[(2，3-二氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； (4S，2R)-4-({[(2，3-二氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-2-羟基-5-(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)戊基二氢磷酸酯； (2S，4S)-4-({[(2，3-二氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-2-羟基-5-(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)戊基二氢磷酸酯； N-{(1S)-4-羟基-1-[(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)甲基]丁基}{[(2，3-二氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； (4S)-4-({[(2，3-二氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)戊基二氢磷酸酯； [(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-羟基-4，4-二甲基戊氧基]-N-(6-氟(3-异喹啉基))甲酰胺； (4S)-4-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-[N-(6-氟(3-异喹啉基))氨基甲酰氧基]-2，2-二甲基戊基二氢磷酸酯； N-((1S，3R)-3，4-二羟基-1-{[N-(3-苯基异噁唑-5-基)氨基甲酰氧基]甲基}丁基){[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； (4S，2R)-4-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-2-羟基-5-(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)戊基二氢磷酸酯； (4S，2R)-4-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-2-羟基-5-[N-(3-苯基异噁唑-5-基)氨基甲酰氧基]戊基二氢磷酸酯； N-{(1S)-1-[(N-苯并噻唑-2-基氨基甲酰氧基)甲基]-4-氧代-4-哌嗪基丁基}{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-{(1S)-1-[((2S)-2，3-二羟基丙氧基)甲基]-2-(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)乙基}{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； (2R)-3-[(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-3-(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)丙氧基]-2-羟基丙基二氢磷酸酯； N-{(1S)-1-[(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)甲基]-4-(1，2，4-三唑并[3，4-c]哌嗪-7-基)丁基}{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； [(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-3-咪唑-4-基丙氧基]-N-(6-氟(3-异喹啉基))甲酰胺； [(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-3-(2-吡啶基)丙氧基]-N-(3-异喹啉基)甲酰胺； [(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-氧代-5-哌嗪基戊氧基]-N-[3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基]甲酰胺； [(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-氧代-5-哌嗪基戊氧基]-N-[5-(3-氟苯基)异噁唑-3-基]甲酰胺； [(2S)-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)-5-[4-(甲基乙基)哌嗪基]-5-氧代戊氧基]-N-(3-异喹啉基)甲酰胺； N-{(1S)-1-[(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)甲基]-4-(4-甲基哌嗪基)丁基}{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-{(1S)-1-[(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)甲基]-4-(2-甲基(4，5，6，7-四氢咪唑并[5，4-c]吡啶-5-基))-4-氧代丁基}{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-{(1S)-1-[(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)甲基]-4-(2-氧哌嗪基)丁基}{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-[(1S)-4-氨基-3，3-二氟-1-({N-[3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基]氨基甲酰氧基}甲基)丁基]{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺； N-[(1S)-1-(咪唑并[1，5-a]哌嗪-3-基甲基)-2-(N-(3-异喹啉基)氨基甲酰氧基)乙基]{[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基甲酰胺；和 [(2S)-3-[(2，2-二氟乙基)氨基]-2-({[(2-氯-3-氟苯基)甲基]氨基}-N-甲基羰基氨基)丙氧基]-N-[3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基]甲酰胺。
任选地取代的起始化合物和其他反应物中的许多种是商业上可得的，例如购自Aldrich Chemical Company(Milwaukee，WI)，或可由本领域技术人员使用通常使用的合成方法学容易地制备。
可利用本领域公知的技术，由商业上可得的起始材料和试剂合成本文描述的化学个体。例如，本文描述的化学个体可参考实施例和反应方案按照以下所示来制备。
除非指出与此相反，否则本文描述的反应发生在大气压下，一般在-10℃至200℃的温度范围内。此外，除了如在实施例中使用或另外指出，否则反应时间和反应条件期望为近似的，例如在约大气压下，在约-10℃至约110℃的温度范围内，在约1至约24小时的时间内发生；反应保持过夜进行，平均时间是约16小时。对于每克限量试剂，1cc(或mL)的溶剂组成1体积当量。
术语“溶剂”、“有机溶剂”和“惰性溶剂”每个都指在随其描述的反应条件下惰性的溶剂[包括，例如苯、甲苯、乙腈、四氢呋喃(“THF”)、二甲基甲酰胺(“DMF”)、氯仿、亚甲基氯(或二氯甲烷)、乙醚、甲醇、N-甲基吡咯烷酮(“NMP”)、吡啶以及类似溶剂]。除非指出与此相反，否则本文描述的反应中使用的溶剂是惰性有机溶剂。除非指出与此相反，否则对于每克限量试剂，1cc(或mL)的溶剂组成1体积当量。
必要时，通过任何合适的分离或纯化程序，诸如例如过滤、萃取、结晶、柱色谱法、薄层色谱法或厚层色谱法(thick-layer chromatography)或这些程序的组合，可实现本文描述的化合物和中间体的离析和纯化。合适的分离和离析程序的具体说明可参见下文的实施例。然而，还可使用其他相当的分离或离析程序。
必要时，(R)异构体和(S)异构体可通过本领域技术人员已知的方法拆分，例如通过形成非对映体盐或络合物，其可例如通过结晶分离；经形成非对映体衍生物，其可例如通过结晶、气-液色谱法或液相色谱法分离；一种对映体与对映体特性试剂的选择性反应，例如酶促氧化或还原，随后分离改性的和未改性的对映体；或在手性环境中的气-液色谱法或液相色谱法，所述手性环境例如在手性支持体(support)，诸如具有结合手性配体的硅石上，或在手性溶剂存在下。应理解，当所需的对映体通过以上描述的分离程序之一转化成另一化学个体时，可能需要进一步的步骤以释出所需的对映体形式。可选地，可通过使用光学活性试剂、底物、催化剂和/或溶剂的不对称合成，或通过由不对称转化将一种对映体转化为另一对映体，来合成具体的对映体。
本文描述的化学个体可用于涉及平滑肌细胞和/或非肌肉细胞的多种应用。在某些实施方案中，可将化学个体用于抑制平滑肌肌球蛋白。化学个体可用于结合平滑肌肌球蛋白，和/或抑制平滑肌肌球蛋白的活性。在某些实施方案中，平滑肌肌球蛋白是人类的，但化学个体可用于结合来自其他生物体诸如其他哺乳动物的平滑肌肌球蛋白，和/或抑制该平滑肌肌球蛋白的活性。
在某些实施方案中，可将化学个体用于抑制非肌肉肌球蛋白。化学个体可用于结合非肌肉肌球蛋白，和/或抑制非肌肉肌球蛋白的活性。在某些实施方案中，非肌肉肌球蛋白是人类的，但化学个体可用于结合来自其他生物体诸如其他哺乳动物的非肌肉肌球蛋白，和/或抑制该非肌肉肌球蛋白的活性。
本文描述的化学个体可用于治疗与平滑肌和/或非肌肉肌球蛋白相关的疾病状态。可由本文描述的化学个体治疗的这种疾病状态包括但不限于高血压、哮喘、失禁、慢性阻塞性肺病、早产以及类似疾病。应理解，一些情况下，细胞可能不处于异常状态，而仍需要治疗。可由本文描述的化学个体治疗的其他疾病状态包括但不限于系统性高血压、慢性心力衰竭、偏头痛和咽峡炎的门诊治疗、肺动脉高压、围手术期高血压、急性高血压、脑血管出血后的脑血管痉挛、咽峡炎的住院治疗(包括非典型性咽峡炎)和/或急性心力衰竭。可治疗的其他疾病状态还包括但不限于支气管痉挛、哮喘、心血管、脑血管和外周血管疾病、脑血管出血后的血管痉挛、勃起功能障碍、胃肠蠕动障碍(例如肠易激综合征)、膀胱过动症/应激性尿失禁和早产。
因此，在某些实施方案中，本文描述的化学个体被应用于细胞，或施用于遭受这些病症或状态中的任何一种的折磨的个体或将要遭受该折磨的受治疗者。
更加具体地，本文描述的化学个体可用于治疗涉及异常增加的肌紧张或过度收缩，或全身循环、冠状循环、肺循环中的血管平滑肌以及微循环平滑肌的痉挛的疾病或症状，诸如全身性高血压、恶性高血压、高血压危象、症状性高血压、肺动脉高压、肺梗死、心绞痛、心肌梗塞、休克状态下的微循环障碍和人或动物体的其他部位或器官出现的梗塞。可用本文描述的化学个体治疗的其他疾病或症状包括 胃肠平滑肌(包括括约肌)的痉挛，诸如由炎症、结石刺激或寄生虫引起的胃痉挛、幽门痉挛和胆道、胰管、尿道的痉挛； 其他内脏器官诸如子宫，输卵管等等的痉挛； 气管支气管树平滑肌、隔膜肌的痉挛，诸如多种哮喘、呼吸暂停、呼吸困难、隔膜惊厥等等； 消化道平滑肌(包括胃、肠和结肠、胆管和胰管等等)的痉挛；和 尿道平滑肌的痉挛。
此外，本文描述的化学个体可用于控制、管理和处理早产(labor duringpregnancy)。该方法特别用于抑制先天早产并在经子宫胎儿外科期间抑制手术人工引产，所述先天早产如果不治疗，将导致早产或流产。该方法还用于过期孕期(overterm pregnancy)的引产，过期孕期中分娩未按时出现，且此时必须引产以便保证正常分娩。
此外，本文描述的化学个体可用于治疗“气道壁重塑”，“气道壁重塑”是与表征为气道壁增厚和呼吸道阻塞的疾病或状态相关的状态，这可能，例如出现在具有某些呼吸道疾病状态诸如慢性阻塞性肺病(COPD)的患者的小气道中。
可由本文提供的化学个体、组合物和方法治疗的这种疾病状态还包括但不限于青光眼和其他眼部适应症。更加具体地，本文描述的化学个体可用于治疗与青光眼相关的疾病或症状，该疾病或症状包括增加的眼内压、降低的眼内房水的流动和眼神经损伤。可用本文描述的化学个体、组合物和方法治疗的其他疾病或症状包括高眼压。
由肌球蛋白采用ATP水解以产生力。ATP水解的增加对应于肌肉收缩力或速度的增加。在肌动蛋白存在时，刺激肌球蛋白ATP酶活性超过100倍。因此，ATP水解的测量不仅测量肌球蛋白酶促活性，还测量其与肌动蛋白纤丝的相互作用。这种活性的测定可采用来自人类来源的平滑肌肌球蛋白，但还可使用来自其他生物体的肌球蛋白。还可使用模拟肌球蛋白结合中钙的调节作用的系统。
ATP水解的体外速率涉及平滑肌肌球蛋白增强活性，其可通过监控ADP或磷酸酯的产生来测量，例如，如美国专利号6,410,254所描述。还可通过将ADP产生与NADH氧化偶联(使用例如酶，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶)，并例如通过吸光度或荧光监控NADH水平，来监控ADP的产生(Greengard，P.，Nature 178(第4534部分)632-634(1956)；Mol Pharmacol 1970年1月；6(1)31-40)。可使用嘌呤核苷磷酸化酶来偶联磷酸酯产生，以分裂嘌呤类似物，来监测磷酸酯的产生，所述嘌呤类似物引起吸光度(Proc Natl Acad Sci US A 1992年6月1日；89(11)4884-7)或荧光(Biochem J 1990年3月1日；266(2)611-4)的变化。尽管采用单一测量，但同一样品在不同时间按顺序多次测量可用于确定蛋白质活性的绝对速率；这种测量具有较高的特异性，特别是在具有相似的吸收度或荧光性质以及酶促读数的测试化合物存在时。
测试化合物可通过将该化合物单独地置于各孔中，或测定它们的混合物来以高度平行方式，使用多孔板来测定。然后，可将包括靶蛋白质络合物、偶联酶和底物的测定组分和ATP加入到各孔，并可以用读板器测量板的各个孔的吸收度或荧光。
一种方法使用384孔板样式和25μL反应体积。丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶结合酶系统(Huang TG和Hackney DD.(1994)J Biol Chem269(23)16493-16501)被用于测量各孔中ATP水解的速率。如本领域技术人员所理解，将测定组分加入到缓冲剂和试剂中。因为本文描述的方法允许动力学测定，因此可优化温育时间以从背景中获得足够的检测信号。实时执行测定以获得ATP水解增加测定的信噪比的动力学。
可在以上描述的测定中的一个或多个中，用其他肌球蛋白替代，并对比获得的结果与使用心肌等同物获得的结果，来确定平滑肌肌球蛋白的选择性。
通过本文描述的方法鉴别为平滑肌肌球蛋白调节剂的化学个体可在效率筛选中进一步检测，所述筛选诸如使用来自例如鸡胗的通透(permeabilized)平滑肌的条状物的筛选。通过解剖鸡胗组织来制备钙敏感平滑肌条，随后用1％Triton X-100处理以使得该条可透过外源化合物(Barsotti，RJ等人，Am J Physiol.1987年5月；252(5页表1)C543-54)。这些条在50％甘油中，在-20℃下储存数周，允许用各批肌肉条执行多次实验。使用20mM咪唑pH 7.0、5.5mM ATP、7mM MgCl2、55mM KCl、1μM钙调蛋白和10mM EGTA的溶液执行实验。根据MAXChelator的计算结果，通过加入不同量的CaCl2，控制游离钙(Patton等人，Cell Calcium.35/5第427-431页，2004)。将等长肌纤维设备用于测量等长张力，例如使用具有用于数据采集的National Instruments PCI-MIO-16E-4，16通道，12bit A/D板的Aurora Scientific 400A传感器。当浸入低钙溶液(pCa 8)时，化学去皮的鸡胗纤维是松弛的，但当浸泡溶液的游离钙增加至pCa 5时，产生等长张力。这些纤维可通过在高钙和低钙浸泡溶液之间转换而重复地收缩和松弛。
通过将松弛的纤维与化合物预温育，随后转移至含有该化合物的高钙溶液，首先测试化合物防止鸡胗条收缩的能力。随后，通过将该化合物加入到已经在高钙溶液中温育的纤维，测试化合物使得收缩的纤维松弛的能力。进行洗出实验以保证抑制效果是可逆的，使得该化合物不会对该平滑肌肌球蛋白引起变性或其他不能修复的损害。
以治疗有效剂量施用化学个体，所述剂量例如足以向先前描述的疾病状态提供治疗的剂量。一般来说，日剂量是从约0.05mg/kg体重至约100mg/kg体重，诸如从约0.10mg/kg体重至约10mg/kg体重，或从约0.15mg/kg体重至约1mg/kg体重。因此对于施用于70kg的人，剂量范围是每天约3.5mg至约7000mg，诸如每天约7mg至约700mg或每天约10mg至约100mg。当然，施用的活性化学个体的量将依赖于所治疗的受治疗者和疾病状态、折磨的严重性、施用的方式和时间表以及处方医生的判断；例如，口服施用的剂量范围可以是每天约70mg至约700mg，而对于静脉内施用，剂量范围可以是每天约700mg至约7000mg。可分别选择较长或较短血浆半衰期的活性剂。
本文描述的化学个体(包括其药学上可接受的盐)的施用可经由作为相似用途的剂的可接受的施用方式中的任何一种，施用方式包括但不限于口服、皮下、静脉内、鼻内、局部、透皮、舌下、黏膜内、腹膜内、肌内、肺内、阴道内、直肠内和眼内(包括眼内注射)。在治疗本文所述的适应症的一些中，口服、局部、胃肠外和眼内施用是常用的。
药学上可接受的组合物包括固体、半固体、液体和气溶胶剂型，诸如例如片剂、胶囊、粉剂、液体、悬浮液、栓剂、气溶胶以及类似剂型。还可施用缓释或控释剂型的化学个体，用于以预定速率延长施用和/或定时施用、脉冲施用，所述缓释或控释剂型包括积存注射、渗透泵、丸剂、透皮(包括电迁移)贴片、滴剂以及类似剂型。可提供适合于精确剂量的单一施用的单位剂量形式的组合物。
可单独地施用或与常规药物载体或类似物(例如甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、交联羧甲纤维素钠、葡萄糖、明胶、蔗糖、碳酸镁以及类似物质)组合施用化学个体。必要时，药物组合物还可含有少量无毒辅助物质，诸如润湿剂、乳化剂、增溶剂、pH缓冲剂以及类似物质(例如乙酸钠、柠檬酸钠、环糊精衍生物、失水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺乙酸酯、三乙醇胺油酸酯)。一般来说，根据期望的施用方式，药物组合物可含有按重量计约0.005％至约95％，例如约0.5％至约50％的本文描述的至少一种化学个体。制备这种剂型的实际方法为本领域技术人员所知，或对其是明显的；例如参见Remington′s Pharmaceutical Sciences(雷明顿药学)，Mack Publishing Company，Easton，Pennsylvania。药物组合物还被称为药物制剂。
此外，化学个体可与其他药剂、药物剂、佐剂以及类似的剂共施用，且药物组合物可包括其他药剂、药物剂、佐剂以及类似的剂。
在某些实施方案中，组合物是丸剂或片剂的形式，并含有活性成分以及以下中的一种或多种稀释剂，诸如乳糖、蔗糖、磷酸二钙以及类似物质；润滑剂，诸如硬脂酸镁以及类似物质；和粘合剂，诸如淀粉、阿拉伯树胶、聚乙烯吡咯烷、明胶、纤维素、纤维素衍生物以及类似物质。在另一固体剂型中，可将粉剂、颗粒、溶液或悬浮液(例如在碳酸丙烯酯、植物油或甘油三酯中)包封于明胶胶囊中。
例如，可通过将至少一种化学个体和一种或多种任选的药物佐剂溶解、分散等等于载体(例如水、盐水、右旋糖水溶液、甘油、二醇类、乙醇以及类似载体)以形成溶液或悬浮液来制备液体药物组合物。可制备作为液体溶液或悬浮液、作为乳剂的常规形式的注射剂，或适合于在注射前溶解或悬浮于液体的固体形式的注射剂。这种胃肠外组合物中含有的化学个体的百分比高度依赖于其具体性质，以及化学个体的活性和受治疗者的需要。然而，可使用溶液中从约0.01％至约10％变化的活性成分的百分比，且如果组合物是随后稀释至以上百分比的固体，活性成分的百分比可更高。在某些实施方案中，组合物具有溶液中约0.2％至约2％的活性成分。
包含至少一种化学个体的组合物可眼内施用(包括眼内、眼周和眼球后注射和输注)。当眼内施用时，无菌组合物通常是含水的。可加入合适的缓冲剂系统以防止储备条件下的pH偏移。当在眼内外科手术程序期间施用时，诸如眼球后或眼周注射和眼内输注或注射时，平衡盐灌洗液的使用可能是必要的。当以多剂量形式使用时，可能需要防腐剂以防止使用期间的微生物污染。
包含至少一种化学个体的组合物还可作为滴眼剂、洗眼剂、乳膏、软膏、凝胶和喷雾剂局部施用。当作为滴眼剂或洗眼剂施用时，活性成分通常被溶解或悬浮于合适的载体，通常是无菌水溶剂中。可加入合适的缓冲剂系统以防止储备条件下的pH偏移。当以多剂量形式使用时，可能需要防腐剂以防止使用期间的微生物污染。
包含至少一种化学个体的组合物还可作为气溶胶，或以用于喷雾器的溶液，或作为用于喷洒的微细粉末，单独或与诸如乳糖的惰性载体组合施用于呼吸道。组合物的颗粒通常具有小于50微米，例如小于10微米的直径。
包装的药物组合物包括本文描述的药物组合物和使用该组合物治疗患有与平滑肌肌球蛋白或非肌肉肌球蛋白相关的疾病的患者的说明书。本文描述的包装的药物组合物还用于治疗患有选自以下的与平滑肌肌球蛋白相关的疾病的患者高血压、哮喘、慢性阻塞性肺病、支气管收缩疾病、青光眼和其他眼部适应症、失禁和其他膀胱功能障碍、肠易激综合征、早产、食道蠕动异常、中风、蛛网膜下出血、经前痛性痉挛、勃起功能障碍和与平滑肌肌球蛋白和/或非肌肉肌球蛋白相关的其他急性和慢性疾病和疾患。
还提供了在哺乳动物中治疗或缓解与平滑肌肌球蛋白或非肌肉肌球蛋白相关的疾病的方法，所述方法包括向需要其的哺乳动物施用治疗有效量的本文描述的至少一种化学个体。
在一些实施方案中，本文描述的治疗或缓解与平滑肌肌球蛋白或非肌肉肌球蛋白相关的疾病的方法用于治疗选自以下的疾病高血压、哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、支气管收缩疾病、青光眼和其他眼部适应症、失禁和其他膀胱功能障碍、肠易激综合征、早产、食道蠕动异常、中风、蛛网膜下出血、经前痛性痉挛、勃起功能障碍和与平滑肌肌球蛋白和/或非肌肉肌球蛋白相关的其他急性和慢性疾病和疾患。
还提供了在哺乳动物中治疗或缓解与气道壁重塑相关的疾病的方法，所述方法包括向需要其的哺乳动物施用治疗有效量的本文描述的至少一种化学个体。
一般来说，为了将本文描述的化学个体用于筛选平滑肌肌球蛋白结合的方法，将平滑肌肌球蛋白结合于支持体，并将至少一种化学个体加入到该测定。可选地，可将化学个体结合于支持体，并加入平滑肌肌球蛋白。其中可尝试新颖的粘合剂的化合物的类型包括特异性抗体、在化学文库筛选中鉴别的非天然粘合剂、肽类似物等等。用于对人类细胞具有低毒性的候选剂的筛选测定被特别关注。各种各样测定可用于这一目的，测定包括体外标记的蛋白-蛋白结合测定、电泳迁移率变动测定、用于蛋白质结合的免疫测定、功能测定(磷酸化测定等等)以及类似测定。参见例如美国专利号6,495,337。
实施例 以下实施例用于更完全地描述使用本发明的方式。为示例性目的提供这些实施例，且这些实施例不应用来限制本发明的真实范围。
实施例16-氟-异喹啉-3-羰基叠氮化物的制备
6-氟异喹啉-3-羰基叠氮化物
将甲醛水溶液(37％wt；400mL)加入到3-氟-DL-苯丙氨酸(100g)的浓HCl(1.0L)悬浮液。将反应混合物加热至90℃，并搅拌3.5h，然后冷却至室温，并搅拌过夜，并过滤。将滤液浓缩，并将残留物与沉淀物合并以获得6-氟-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z196.1。

将SOCl2(50mL)加入到6-氟-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸的甲醇(500mL)悬浮液。然后，将反应混合物回流1h，直到LC-MS指示反应完成。将混合物浓缩，并将产生的残留物溶解于EtOAc(1L)和饱和碳酸氢钠溶液(500mL)的混合物。分离有机层，用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并减压浓缩以获得油状物6-氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-羧酸甲酯(92g)。LRMS(M+H+)m/z210.1。

将6-氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-羧酸甲酯(92g)和硫(42g，3当量)在二甲苯(5L)中的混合物在150℃下搅拌16h。将反应混合物浓缩，并将产生的残留物溶解于EtOAc，其用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并减压浓缩以获得粗混合物。通过快速柱色谱法(己烷/EtOAc，梯度50％-100％)纯化获得淡黄色固体6-氟-异喹啉-3-羧酸甲酯(27g，3步24％)。LRMS(M+H+)m/z 206.1。

将6-氟-异喹啉-3-羧酸甲酯(27g)和肼(42g，10当量)的乙醇(500mL)溶液回流2h。将反应混合物高真空浓缩以除去肼，并且将产生的残留物用乙醇(100mL)研磨以获得淡黄色固体6-氟-异喹啉-3-羧酸酰肼(22.8g，84％)。LRMS(M+H+)m/z 206.1。

0-5℃下，将NaNO2(11.4g，170mmol，1.5当量)的水(100mL)溶液滴加于6-氟-异喹啉-3-羧酸酰肼在HCl(1N，50mL)和水(1L)的悬浮液中。0-5℃下，将混合物搅拌1h。加入另一NaNO2(5.7g，85mmol，0.5当量)的水(30mL)溶液，然后反应在0-5℃下搅拌3h，直到LC-MS指示反应完成。将沉淀物过滤，用冷水洗涤，并在高真空下干燥以获得淡黄色固体6-氟-异喹啉-3-羰基叠氮化物(21.3g，89％)。LRMS(M+H+)m/z 217.1。
实施例2苯并[d]噻唑-2-羰基叠氮化物的制备
苯并[d]噻唑-2-羰基叠氮化物
将肼(15.5g，482.5mmol)加入到苯并[d]噻唑-2-羧酸乙酯(10g，48.25mmol)的乙醇(200mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，并高真空浓缩以除去肼。产生的残留物用乙醇(40mL)研磨以获得苯并[d]噻唑-2-碳酰肼(9.3g，定量)LRMS(M+H+)m/z 194.0。

0-5℃下，将NaNO2(6.9g，100mmol)的水(50mL)溶液滴加到苯并[d]噻唑-2-碳酰肼(9.3g，48.2mmol)在HCl水溶液(1N，75mL，75mmol)和水(200mL)中的悬浮液中。将混合物在0-5℃下搅拌2h，并在室温下搅拌2h。将沉淀物过滤，用冷水洗涤，并在高真空下干燥以获得苯并[d]噻唑-2-羰基叠氮化物(9.0g，92％)。LRMS(M+H+)m/z 205.1。
实施例3异喹啉-3-羰基叠氮化物的制备
异喹啉-3-羰基叠氮化物
将肼(17.1g)加入到异喹啉-3-羧酸甲酯(10g，53.42mmol)的乙醇(100mL)溶液。将反应混合物回流30分钟，并高真空浓缩以除去肼。产生的残留物用乙醇(20mL)研磨以获得异喹啉-3-碳酰肼(8.6g，86％)。LRMS(M+H+)m/z188.1。

将0-5℃下，将NaNO2(23.8g，0.34mol)的水(50mL)溶液滴加到异喹啉-3-碳酰肼(43g，0.23mol)在HCl水溶液(1N，230mL)和水(1L)中的悬浮液。将混合物在0-5℃下搅拌4h。LC-MS指示反应未完成。加入另一NaNO2(11.9g，0.115mol)的水(60mL)溶液，并将反应混合物在0-5℃下搅拌，直到LC-MS指示反应完成。将沉淀物过滤，用冷水洗涤，并在高真空下干燥以获得白色固体异喹啉-3-羰基叠氮化物(42.7g，93.8％)。LRMS(M+H+)m/z 199.2。
实施例45-(3-氟苯基)异噁唑-3-羰基叠氮化物的制备
5-(3-氟苯基)异噁唑-3-羰基叠氮化物
0℃下，将NaH(8.8g，220mmol，1.1当量)分两批在10分钟内加入到3-氟-苯乙酮(27.6g，200mmol，1.0当量)的DMF(400mL)溶液中，然后在20分钟内加入草酸二乙酯(29.8mL，220mmol，1.1当量)。将混合物搅拌15分钟，然后倾入冰和饱和NH4Cl溶液(500mL)的混合物中。混合物用EtOAc(400mLx3)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥，并浓缩。残留物通过快速柱色谱法(己烷/EtOAc，梯度0％至40％)纯化以获得褐色固体4-(3-氟苯基)-2，4-二氧代丁酸乙酯(30g，63％)。LRMS(M+H+)m/z 239.0。

将羟胺盐酸盐(17g，252mmol)加入到4-(3-氟苯基)-2，4-二氧代丁酸乙酯(30.0g，126mmol)的EtOH(300mL)溶液。将混合物在80℃下搅拌1h。将混合物浓缩至80mL，并用H2O(100mL)稀释。将沉淀物过滤，并用H2O洗涤以获得5-(3-氟苯基)异噁唑-3-羧酸乙酯(25.8g，87％)。LRMS(M+H+)m/z236.0。

将肼(10.5mL，330mmol，3.0当量)加入到5-(3-氟苯基)异噁唑-3-羧酸乙酯(25.8g，110mmol，1.0当量)的EtOH(300mL)溶液中。将混合物在80℃下搅拌1h，然后冷却至室温。将沉淀物过滤，用H2O洗涤，并在真空下干燥以获得5-(3-氟苯基)异噁唑-3-碳酰肼(20g)。将滤液浓缩，并将产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得所需的产物(2.5g)。LRMS(M+H+)m/z 222.0。

0℃下，将亚硝酸钠(13.9g，202mmol，2.0当量)的H2O(100mL)溶液加入到5-(3-氟苯基)异噁唑-3-碳酰肼(22.5g，101mmol)在H2O(2000mL)和HCl(2N，101mL，2.0当量)中的悬浮液中。将悬浮液在室温下搅拌16h。将沉淀物过滤，并用H2O洗涤。将固体在高真空下干燥以获得黄色固体5-(3-氟苯基)异噁唑-3-羰基叠氮化物(20g，85％)。LRMS(M+H+)m/z 179.0。
实施例53-(3-氟苯基)异噁唑-5-羰基叠氮化物的制备
3-(3-氟苯基)异噁唑-5-羰基叠氮化物
将3-(3-氟苯基)异噁唑-5-羧酸甲酯(根据文献方法制备T.T.Dang，U.Albrecht和P.Langer，Preparation 2006，第15期，2515-252；或用亚硫酰氯和甲醇处理3-(3-氟苯基)异噁唑-5-羧酸)(5.55g，25mmol，1.0当量)、肼(960mg，30mmol)和MeOH(100mL)的混合物回流1h并浓缩。残留物用二氯甲烷洗涤，并在真空下干燥以获得3-(3-氟苯基)异噁唑-5-碳酰肼(5.6g，定量)。LRMS(M+H+)m/z 222.0。

0℃下，将亚硝酸钠(2.03g，29.4mmol，1.5当量)的H2O(10mL)溶液加入到酰肼(4.33g，19.6mmol，1.0当量)在H2O(80mL)和HCl(1N，39.2mL，2.0当量)中的悬浮液中。将悬浮液在室温下搅拌16h。然后将沉淀物过滤，并用H2O洗涤，直到PH＝7。沉淀物在高真空下干燥，获得灰白色固体3-(3-氟苯基)异噁唑-5-羰基叠氮化物(4.0g，88％)。
实施例63-苯基异噁唑-5-羰基叠氮化物的制备
3-苯基异噁唑-5-羰基叠氮化物
将HBTU(2.28g，6mmol，1.2当量)加入到3-苯基异噁唑-5-羧酸(1.0g，5mmol，1.0当量)的DMF(20mL)和THF(20mL)溶液中，随后加入叠氮化钠(0.65g，10mmol，2.0当量)和DIEA(2.6mL，15mmol，3.0当量)。将混合物在室温下搅拌30分钟，浓缩，随后加入H2O(40mL)。将沉淀物过滤，用H2O洗涤，并真空干燥以获得3-苯基异噁唑-5-羰基叠氮化物(0.65g，60％)。LRMS(M-18+H+)m/z 187.1。
实施例7(2-氯-3-氟苯基)甲胺盐酸盐的制备
0℃下，将TFA(48mL，0.643mol)缓慢加入到NaBH4(24.3g，0.643mol)的THF(400mL)溶液。添加完成后，将混合物在0℃下搅拌约20分钟。然后，将在THF(100mL)中的2-氯-3-氟苄腈(20g，0.128mol)在0℃下缓慢加入到混合物中。将混合物从0℃搅拌至室温，直到LCMS没有观察到起始物质。除去一半溶剂，然后0℃下将10％HCl(250mL)缓慢加入到残留物中。将混合物升温，并加热至回流，直到LCMS没有观察到硼络合物。混合物由乙醚萃取。使用NaOH(3N)将水溶液碱化至pH 8-10，用EtOAc萃取。将有机层合并，并浓缩至约300mL。将HCl(4N，50mL)缓慢加入到产生的溶液。沉淀出白色固体，并通过过滤收集以获得(2-氯-3-氟苯基)甲胺盐酸盐(21g，84％)。LRMS(M+H+)m/z 160.1。
实施例82-氯-3-氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯的制备
在氮气气氛下，将4-硝基苯基氯甲酸酯(126.3g，627mmol)、DCM(3000mL)装入5升3口RBF，并在0℃冰浴中冷却。将一份2-氯-3-氟苄胺(100.0g，627mmol)的溶液，随后是固体碳酸钠(155.0g，1460mmol)迅速加入反应溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1h，且采用LC/MS确认起始物质的消耗和硝基苯基中间体的存在。使得反应混合物升至室温，并搅拌约2h。将混合物过滤，并将滤液浓缩以获得白色固体。固体用600ml DCM再次溶解，并加热至40℃，直到所有的物质被溶解。将溶液在0℃冰浴中冷却以形成晶体。收集晶体，并在真空下干燥以获得2-氯-3-氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯。(150g，75％)。
实施例9(2S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(2S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将Boc2O(199g，0.91mol)加入到(S)-2-氨基戊-4-烯酸(100g，0.87mol)、NaOH(2N，455mL)和水(225mL)的THF(910mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌30h。将反应混合物浓缩以除去大部分THF。水溶液用250mLEtOAc洗涤，并在0℃下使用HCl(2N，～260mL)酸化至pH 3-4。混合物用EtOAc(350mLx3)萃取，用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩以获得(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸(185g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+Na+)m/z 238.2。

0-5℃下，将氯甲酸甲酯(71.2mL，0.93mol)加入到(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸(166g，0.77mol)和Et3N(214mL)的THF(2.5L)溶液。将反应混合物搅拌15分钟，并过滤以除去TEA盐。0-5℃下，将NaBH4(60g，1.54mol)在少量水中的溶液加入到滤液中。将反应在室温下搅拌1小时，并用饱和NH4Cl溶液淬灭。将反应混合物浓缩以除去大部分THF，并用EtOAc(700mLx3)萃取。有机层用水、NaOH(1N)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩以获得(S)-1-羟基戊-4-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(165g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 202.1。

将TBS-Cl(135.4g，0.9mol)加入到(S)-1-羟基戊-4-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(165g，0.82mol)和咪唑(72.5g，1.07mol)的DCM(3L)溶液中。将反应在室温下搅拌过夜，并过滤。将滤液浓缩。将产生的残留物溶解于EtOAc(L)，并用水和盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，并浓缩以获得(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(222.0g)，其不经进一步纯化而用于下一步骤。LRMS(M+H+)m/z 316.2。

0℃下，将氢化钠(60％，18g，0.45mol)加入到(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(95g，0.3mol)和MeI(46.7mL，0.75mol)的DMF(500mL)溶液中。将反应在0℃下搅拌3h，并且LC-MS显示反应完成。反应用饱和NH4Cl溶液淬灭，并过滤。将滤液浓缩以除去大部分DMF，并将残留物溶解于EtOAc(1.5L)。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥。以上步骤用另一127g(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯重复。将有机层合并，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(120g，4步40％)。LRMS(M+H+)m/z 230.2。

将HCl(4.0M于1，4-二噁烷中，25mL，0.10mol)加入到(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(3.4g，10.3mmol)的甲醇(10mL)溶液中。将产生的溶液搅拌2h。除去溶剂，且剩余的残留物在真空下干燥以获得(S)-2-(甲基氨基)戊-4-烯-1-醇HCl盐，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 116.2。

将2-氯-3-氟苄胺盐酸盐(2.22g，11.3mmol)和DIEA(5.38mL，30.9mmol)的THF(10mL)溶液加入到4-硝基苯基氯甲酸酯8(2.28g，11.3mmol)的THF(10mL)溶液中。将产生的溶液在室温下搅拌20分钟。将反应溶液加入到(S)-2-(甲基氨基)戊-4-烯-1-醇盐酸盐(10.3mmol)、DIEA(5.38mL，30.9mmol)的THF(100mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，且产生的残留物在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化以获得白色固体(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(1-羟基戊-4-烯-2-基)-1-甲脲(2.56g，82％)。LRMS(M+H+)m/z 301.2。

将6-氟-异喹啉-3-羰基叠氮化物(1.58g，7.32mmol)加入到(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(1-羟基戊-4-烯-2-基)-1-甲脲(2.0g，6.65mmol)和甲苯(50mL)的溶液中。将产生的溶液在100℃下搅拌1h。除去溶剂，且剩余的残留物在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊-4-烯基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(2.50g，77％)。LRMS(M+H+)m/z 489.1。

将4-甲基吗啉N-氧化物(1.08g，9.2mmol)、四氧化锇(46.8mg，0.184mmol)和吡啶(15uL，0.184mmol)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊-4-烯基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.9g，1.84mmol)的THF(24mL)和水(6mL)溶液中。将产生的溶液搅拌1h。反应用LC/MS监控，并加入额外的四氧化锇(46.8mg，0.184mmol)。将产生的溶液搅拌1h。将亚硫酸钠(5g)和碳酸氢钠(5g)加入到反应。将产生的混合物搅拌1h。然后通过过滤除去固体。滤液用乙酸乙酯(100mL)稀释，并用饱和碳酸氢钠洗涤。将有机层浓缩，且产生的残留物在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化以获得(2S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.9g，93％)。LRMS(M+H+)m/z 523.2。
实施例10(2S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(2S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
室温下，将氯膦酸二甲酯(dimethyl chlorophorophosphate)(0.103mL，0.956mmol，2.0当量)加入到(2S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.25g，0.478mmol，1.0当量)、DIEA(0.416mL，2.39mmol，5当量)和DMAP(0.117g，0.956mmol，2.0当量)的无水DCM(10mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌30分钟后，加入另一部分的氯膦酸二甲酯(0.103mL，0.956mmol，2.0当量)和DIEA(0.167mL，0.956mmol，2当量)。反应用MeOH(5mL)淬灭。除去溶剂，并将产生的残留物溶解于EtOAc(100mL)。有机层用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，浓缩，且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(2S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(150mg，50％)。LRMS(M+H+)m/z 631.2。

室温下，将TMSI(0.162mL，1.19mmol，5.0当量)加入到(2S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.15g，0.238mmol，1.0当量)的乙腈(2mL)溶液。室温下搅拌10分钟后，反应用MeOH淬灭。除去溶剂，且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物(0.1％TFA缓冲剂)纯化以获得所需产物。将产物溶解于甲醇和水(2∶1)的混合物，并加入HCl(4M于1，4-二噁烷中，2mL)。除去溶剂。重复这一程序以获得(2S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯HCl盐(98mg，64％)。LRMS(M+H+)m/z 603.0。
实施例11(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将6-氟-异喹啉-3-羰基叠氮化物(661mg，3.06mmol，1.0当量)加入到(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊酸甲酯(1.06g，3.06mmol，1.0当量)的甲苯(12mL)溶液。将反应混合物在100℃下加热1h，并在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸甲酯(400mg)。LRMS(M+H+)m/z535.2。

将LiOH(2N，1.5mL，2.99mmol，4.0当量)加入到(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸甲酯(400mg，0.748mmol，1.0当量)的1，4-二噁烷(1mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1h，然后用HCl(1N)酸化至pH 1-3。将混合物稀释于EtOAc。有机层通过H2O和盐水洗涤，并浓缩。产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸(340mg，87％)。LRMS(M+H+)m/z 521.2。

将HBTU(72mg，0.191mmol，1.2当量)、叔丁基-1-哌嗪羧酸酯(59mg，0.320mmol，2.0当量)和DIEA(83μL，0.480mmol，3.0当量)加入到(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸(83mg，0.160mmol，1.0当量)的DMF(1mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1h，并在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(61mg，55％)。LRMS(M+H+)m/z 689.3。

将HCl(4M于1，4-二噁烷中，1mL)加入到(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(56mg，0.081mmol，1.0当量)的MeOH(1mL)溶液中。将混合物搅拌过夜，并浓缩。产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化。将含有产物的部分(fraction)合并，并浓缩。将产生的固体溶解于EtOAc。有机溶液用饱和NaHCO3洗涤。将HCl(4N)加入到有机溶液。然后，将溶液浓缩以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯HCl盐(35mg，65％)。LRMS(M+H+)m/z 589.2。
实施例12(S)-2-(3-(2-氯-4-氟苄基)-1-甲基脲基)-6-羟基己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-4-氟苄基)-1-甲基脲基)-6-羟基己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
0℃下，将NaHCO3(20g，238mmol，2.5当量)的H2O(50mL)溶液滴加于(S)-2-氨基-6-甲氧基-6-氧代己酸(20g，95mmol)的H2O(50mL)和1，4-二噁烷(150mL)溶液。分三份加入Boc2O(25g，114mmol，1.2当量)。将混合物升至室温，并搅拌1h。除去有机溶剂。水溶液用醚(200mL)洗涤。将溶液冷却至0℃，并用HCl(1N)调节至pH 3-4。溶液用EtOAc(300mL x2)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥，并浓缩以获得(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-6-氧代己酸(23.5g，90％)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 176.1。

将Et3N(14.2mL，102mmol，1.2当量)加入到(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-6-氧代己酸(23.5g，85mmol)的无水THF(100mL)溶液。将溶液冷却至0℃，并滴加氯甲酸异丁酯(12.2mL，93.5mmol，1.1当量)。将溶液搅拌30分钟。滤掉沉淀物。将滤液冷却至0℃，并加入一份硼氢化钠(6.5g，170mmol，2当量)的H2O(3mL)悬浮液。将反应搅拌1h，并用饱和NH4Cl淬灭。除去THF。将残留物溶解于EtOAc(400mL)，并用饱和NH4Cl萃取2次。将有机层合并，干燥并浓缩。残留物在硅胶柱上(己烷/EtOAc 1∶1)纯化以获得无色油状物(S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-羟基己酸甲酯(20g，90％)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 162.1。

将咪唑(7.8g，115mmol，2.5当量)加入到(S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-羟基己酸甲酯(12g，46mmol)的DMF(100mL)溶液。然后分3份加入TBS-Cl(8.25g，55mmol，1.2当量)。使反应在30分钟内完成。将乙醚(200mL)和盐水(300mL)加入到反应溶液。有机层用盐水(300mL)进一步洗涤，干燥并浓缩以获得无色油状物(S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)己酸甲酯(15.9g，92％)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 276.1。

0℃下，将碘甲烷(17g，120mmol，3当量)加入到(S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)己酸甲酯(15g，40mmol)的DMF(100mL)溶液中。分3份加入NaH(60％，2.4g，60mmol，1.5当量)。将反应在室温下搅拌2h。将EtOAc(150mL)和盐水(200mL)加入到反应混合物。有机层用盐水(200mL)洗涤，干燥，并浓缩以获得无色油状物(S)-5-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-6-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)己酸甲酯(15.5g，定量)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 290.1。

将TBAF(1M于THF中，48mL，3当量)缓慢加入到(S)-5-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-6-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)己酸甲酯(6.2g，16mmol)的THF(50mL)溶液中。反应在室温下搅拌1h。除去THF。残留物用EtOAc(100mL)和盐水(100mL)萃取两次。将有机层合并，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱(己烷/EtOAc 1∶1)上纯化，得到无色油状物(S)-5-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-6-羟基己酸甲酯(4.4g，定量)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 176.2。

将CDI(3.1g，19mmol)加入到(S)-5-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-6-羟基己酸甲酯(4.4g，16mmol)的DCM(50mL)溶液中。使反应在30分钟内完成。除去DCM。将残留物在硅胶柱(己烷/EtOAc 1∶1)上纯化以获得无色油状物(S)-2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-6-甲氧基-6-氧代己基1H-咪唑-1-羧酸酯(5.1g，85％)。LRMS(M+Na+)m/z 392.1
0℃下，将六氟磷酸三乙氧鎓(1.61g，6.5mmol，1.2当量)的DCM(5mL)溶液滴加于(S)-2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-6-甲氧基-6-氧代己基1H-咪唑-1-羧酸酯(2g，5.4mmol)的DCM(10mL)溶液中。将溶液温至室温，并搅拌15分钟。加入异喹啉-3-胺(0.94g，6.5mmol，1.2当量)的DCM(5mL)溶液。将溶液搅拌过夜。除去DCM，并将残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-5-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)己酸甲酯(1.4g，58％)。LRMS(M+H+)m/z 446.2。

0℃下，将HCl(4M于1，4-二噁烷中，10mL)滴加于(S)-5-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)己酸甲酯(2.0g，4.5mmol)的MeOH(10mL)溶液。溶液在室温下搅拌2h。高真空下除去溶剂，以获得黄色固体(S)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-5-(甲基氨基)己酸甲酯(1.8g，94％)。LRMS(M+H+)m/z 346.2。

在0℃在N2下，将2-氯-4-氟苄胺(95mg，0.6mmol)和DIEA(0.22mL，1.26mmol，2.2当量)的THF(5mL)溶液滴加于三光气(71mg，0.24mmol，0.4当量)的THF(5mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌30分钟。加入(S)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-5-(甲基氨基)己酸甲酯(0.23，0.6mmol)和DIEA(0.11mL，0.66mmol，1.1当量)的THF(5mL)溶液。将混合物在室温下搅拌1h。除去THF。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得白色固体(S)-5-(3-(2-氯-4-氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)己酸甲酯(0.18g，56％)。LRMS(M+H+)m/z 531.2。

将LiBH4(2M于THF中，0.3mL，4当量)滴加于(S)-5-(3-(2-氯-4-氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)己酸甲酯(80mg，0.15mmol)的MeOH(1mL)和THF(1mL)的溶液中。将反应在室温下搅拌2h。反应用饱和NH4Cl(5mL)淬灭。混合物用EtOAc(10mL)萃取。将有机层浓缩。产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得白色固体10(S)-2-(3-(2-氯-4-氟苄基)-1-甲基脲基)-6-羟基己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(40mg，53％)。LRMS(M+H+)m/z 503.5。
实施例13(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(膦酰氧基)己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(膦酰氧基)己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
室温下，将LiOH水溶液(6.12mL，6.12mmol，3.0当量)加入到(S)-5-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)己酸甲酯(1.45g，2.04mmol，1.0当量)的1，4-二噁烷(18mL)溶液中。室温下搅拌1h后，反应混合物用HCl(1.0N)酸化至pH～3。混合物用EtOAc萃取两次。合并的EtOAc溶液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩以获得(S)-5-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)己酸，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 501.3。

0℃下，将氯甲酸异丙酯(2.80mL，2.80mmol，1.2当量)加入到(S)-5-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)己酸(～2.04mmol，1.0当量)和三乙胺(0.38mL，2.78mmol，1.2当量)的无水THF(7mL)溶液。室温下搅拌20分钟后，将混合物过滤，并转移至NaBH4(0.18g，4.76mmol，2.0当量)的水(2.0mL)溶液。产生的混合物在室温下搅拌1h，并用饱和NH4Cl淬灭。溶液用EtOAC萃取两次。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱(50-100％EtOAc于己烷中，随后10％MeOH于二氯甲烷中)上纯化以获得(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-羟基己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.58g，两步52％)。LRMS(M+H+)m/z 487.3。

室温下，将二甲基磷酰氯(0.18mL，1.53mmol，3.0当量)加入到(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-羟基己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.25g，0.51mmol，1.0当量)、DIEA(0.45mL，2.57mmol，5当量)和DMAP(0.12g，1.53mmol，3.0当量)的无水二氯甲烷(2.0mL)溶液中。室温下搅拌45分钟后，反应混合物用EtOAc萃取。有机层用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩以获得(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(二甲氧基磷酰氧基)己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.28g，93％)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 595.3。

室温下，将TMSI(0.28mL，1.88mmol，4.0当量)加入到(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(二甲氧基磷酰氧基)己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.28g，0.47mmol，1.0当量)的乙腈(25mL)溶液中。室温下搅拌15分钟后，反应用MeOH淬灭。浓缩溶剂。产生的残留物在RP-HPLC上使用具有0.1％TFA的乙腈和H2O的混合物纯化。将含有产物的部分合并，并浓缩。将产生的残留物悬浮于EtOAc，加入5滴HCl(4M于1，4-二噁烷中)，并除去有机溶剂。重复这一程序以获得(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-6-(膦酰氧基)己基异喹啉-3-基氨基甲酸酯盐酸盐(0.16g，57％)。LRMS(M+H+)m/z 567.2。
实施例14(S)-3-(2-氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-3-(2-氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将MsCl(0.55mL，7.04mmol)和DIEA(1.27mL，7.68mmol)加入到(S)-1-(苄氧基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.89g，6.4mmol)的DCM(50mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌30分钟。混合物用DCM(300mL)稀释，用NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。将粗产物溶解于DMF(20mL)。将NaN3(1.25g，19.2mmol)加入该DMF溶液，并将混合物加热至80℃，持续6h。LCMS指示反应完成。将混合物冷却至室温，加入水(20mL)和EtOAc(200mL)。将有机层分离，用NaHCO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。粗产品在硅胶柱上纯化以获得(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.5g，两步73％)。

将(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.5g，4.9mmol)的DMF(10.0mL)溶液加入到NaH(0.29g，7.35mmol)的DMF(10mL)溶液。将混合物搅拌30分钟。然后加入MeI(1.0mL，9.8mmol)。将混合物搅拌另外的2h。LCMS指示反应完成。混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭，并用EtOAc(200mLx2)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g)，其不经纯化而使用。

将Pd/C(300mg)加入到(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g粗品(crude)，4.90mmol)的MeOH(20mL)溶液。将混合物转移至高压釜反应器，载入45psi的氢气，并搅拌过夜。将固体过滤，并将CbzCl(0.83mL，5.88mmol)和DIEA(1.22mL，7.35mmol)加入滤液，并搅拌30分钟。LCMS指示反应完成。将反应混合物减压浓缩，溶解于EtOAc，用NaHCO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得(S)-1-(苄氧基羰基氨基)-3-羟基丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.2g)，其不经纯化而使用。LRMS(M+H+-Boc)m/z 239.1。

将6-氟-异喹啉-3-羰基叠氮化物(1.16g，5.39mmol)分批加入到(S)-1-(苄氧基羰基氨基)-3-羟基丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.2g，～4.90mmol)的甲苯(20mL)溶液，并将混合物加热至100℃，持续1h。将混合物浓缩至1/4量，并在硅胶柱上纯化以获得(S)-3-苄氧基羰基氨基-2-((1-叔丁氧羰基)(甲基)氨基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(1.5g，4步58％)。LRMS(M+H+)m/z527.3。

将TFA(1.0mL)加入到(S)-3-苄氧基羰基氨基-2-((1-叔丁氧羰基)(甲基)氨基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(1.5g，2.85mmol)的DCM(10.0mL)溶液。将混合物搅拌1h，浓缩，并再次溶解于THF(5mL)。向该THF溶液加入预先搅拌的4-硝基苯基氯甲酸酯和2-氯-3-氟苄胺的THF(15mL)溶液。将反应混合物搅拌过夜。将混合物减压浓缩，再次溶解于MeOH，过滤，并通过RP-HPLC使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-3-苄氧基羰基氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(1.3g，75％)。LRMS(M+H+)m/z 612.2。

将TMSI(0.35mL，2.56mmol)加入到(S)-3-苄氧基羰基氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(1.3g，2.13mmol)的CH3CN(20.0mL)溶液中。将混合物搅拌15分钟。加入MeOH(20.0mL)，并持续搅拌另外的15分钟。将混合物浓缩，并在乙醚(30mL)和HCl(2N，20mL)之间分配。将水层分离，调节至pH 9，用EtOAc(200mLx2)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得粗油状物，将其溶解于DMF(6.0mL)中。将Boc-Gly-OH(0.36g，2.03mmol)和HBTU(0.77g，2.03mmol)加入到该DMF溶液。将混合物搅拌1h。将粗品过滤，并在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-3-(2-叔丁氧羰基氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.91g，78％)。LRMS(M+H+)m/z 635.2。

将TFA(3.0mL)加入到(S)-3-(2-叔丁氧羰基氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.87g，1.37mmol)的DCM(30.0mL)溶液中。将混合物搅拌1h。将混合物浓缩，并溶解于EtOAc。EtOAc溶液用Na2CO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并过滤。将HCl(4M于二噁烷中，0.7mL，2.8mmol)加入到滤液。减压除去有机溶剂以获得(S)-3-(2-氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯盐酸盐(730mg，93％)。LRMS(M+H+)m/z 535.2。
实施例15(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基5-(三氟甲基)吡啶-2-基氨基甲酸酯的制备
(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基5-(三氟甲基)吡啶-2-基氨基甲酸酯
在4个微波反应管中，将(S)-5-氨基-2-(苄氧基羰基氨基)戊酸(10.0g，37.56mmol)、1，3-二氧代异吲哚啉-2-羧酸乙酯(9.04g，41.28mmol)在NMP(40.0mL)中的混合物加热至150℃，持续30分钟。混合物用EtOAc(500mL)稀释。有机层用水(100mLx2)、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得油状物，将其溶解于甲苯。向该甲苯溶液加入低聚甲醛、PTSA和分子筛(3

)，并将混合物加热至150℃，持续20分钟。混合物用醚(800mL)稀释，用NaHCO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。粗品在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-4-(3-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙基)-5-氧代噁唑烷-3-羧酸苄酯(11.6g，2步76％)。

将Et3SiH(13.6mL，85.3mmol)加入到(S)-4-(3-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙基)-5-氧代噁唑烷-3-羧酸苄酯(11.6g，28.40mmol)的DCM(30.0mL)溶液。将反应混合物搅拌过夜。将混合物减压浓缩，并溶解于THF(100mL)。0℃下，向该THF溶液加入氯甲酸叔丁酯(4.4mL，34.08mmol)，随后加入TEA(12.0mL，85.2mmol)，并在室温下搅拌30分钟。滤出沉淀物，并在0℃下，将滤液加入到NaBH4的水(1.0mL)悬浮液，并将混合物在室温下搅拌30分钟。LC/MS指示反应完成。使用HCl(1N)将混合物酸化至pH 3。水层用EtOAc(300mLx2)萃取。合并的有机层用NaHCO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。粗品在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基(甲基)氨基甲酸苄酯(5.01g，45％)。LRMS(M+H+)m/z 397.3。

将Pd/C(1.0g)加入到(S)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基(甲基)氨基甲酸苄酯(5.01g，12.65mmol)的MeOH(100mL)溶液。将混合物转移至高压釜反应器，载入50psi的氢气，并搅拌过夜。将混合物过滤，并将滤液减压浓缩以获得(S)-2-(5-羟基-4-(甲基氨基)戊基)异吲哚啉-1，3-二酮(3.2g，97％)。LRMS(M+H+)m/z 263.1。

将2-氯-3-氟苄胺盐酸盐(626mg，2.29mmol)和DIEA(0.76mL，4.58mmol)加入到4-硝基苯基氯甲酸酯(460mg，2.29mmol)的THF(20mL)溶液，并将混合物在室温下搅拌，直到TLC显示2-氯-3-氟苄胺完全消耗。然后，将混合物加入到(S)-2-(5-羟基-4-(甲基氨基)戊基)异吲哚啉-1，3-二酮(500mg，1.91mmol)的THF(10mL)溶液中。将混合物搅拌过夜，浓缩，并在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基)-1-甲脲(401mg，47％)。LRMS(M+H+)m/z448.3。

将DPPA(0.27mL，1.35mmol)加入到(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基)-1-甲脲(200mg，0.45mmol)、5-(三氟甲基)皮考啉酸(256mg，1.35mmol)和DIEA(0.3mL，1.35mmol)的甲苯(5mL)溶液。将混合物加热至100℃，持续2h，并浓缩。产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)戊基5-(三氟甲基)吡啶-2-基氨基甲酸酯(150mg，80％)。LRMS(M+Na+)m/z 658.2。

将NH2NH2(0.2mL)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)戊基5-(三氟甲基)吡啶-2-基氨基甲酸酯(150mg，0.24mmol)的MeOH(5.0mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩，溶解于MeOH，过滤，并在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基5-(三氟甲基)吡啶-2-基氨基甲酸酯(91mg，76％)。LRMS(M+H+)m/z 506.1。
实施例16(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基2，7-萘啶-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基2，7-萘啶-3-基氨基甲酸酯
根据公开的程序(E.Barbu等人Heterocyclic Communications，第6卷，第1期，2000，25-28)，进行一些改良，由3-氰基-4-甲基吡啶制备1-氯-2，7-萘啶-3-羧酸乙酯。

将1-氯-2，7-萘啶-3-羧酸酯(320mg，1.352mmol)、甲酸铵(128mg，2.0mmol)、10％Pd/C(33mg)、EtOAc(5mL)和MeOH(5mL)的混合物回流10分钟。将混合物过滤并浓缩。产生的残留物通过RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得2，7-萘啶-3-羧酸酯(265mg，72％)。LRMS(M+H+)m/z203.0。

将2，7-萘啶-3-羧酸酯(260mg，1.29mmol)、肼(0.20mL，6.44mmol)和乙醇的混合物回流2h，并浓缩至干。产生的残留物与2N HCl(1.3mL，2.60mmol)和H2O(5mL)混合，并用冰浴冷却。将NaNO2的溶液(178mg，2.6mmol于1mL H2O中)滴加于该混合物，并将混合物在0℃下搅拌1h。然后，混合物用饱和NaHCO3中和，并用DCM萃取。DCM溶液用水、盐水洗涤，干燥并浓缩以获得淡黄色固体2，7-萘啶-3-羰基叠氮化物(244mg，95％)。LRMS(M-N2+H+)m/z 172.1。

将2，7-萘啶-3-羰基叠氮化物(14mg，0.07mmol)、(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基)-1-甲基脲(33mg，0.07mmol)和甲苯(2mL)的混合物在100℃下搅拌1h，并浓缩。产生的残留物用肼(0.2mL)和甲醇(1mL)在室温下处理1h。浓缩，然后在RP-HPLC上使用乙腈、H2O和0.1％TFA的混合物纯化获得(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基2，7-萘啶-3-基氨基甲酸酯的TFA盐(28mg，53％)。LRMS(M+H+)m/z 489.1。
实施例17(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酸酯的制备
氮气下，将(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊酸甲酯(4.34mmol)的甲苯(43mL)溶液在油浴中加热至100℃。在30分钟内，分批加入苯并[d]噻唑-2-羰基叠氮化物(973mg，1.0当量)在甲苯(15mL)中的浆状物。反应在100℃下维持30分钟。真空除去溶剂，并且残留物经受使用己烷和EtOAc的混合物的快速色谱法以获得黄色固体(S)-5-(苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酰氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸甲酯(2.35g，定量)。LRMS(M+H+)＝523.5。

将LiOH(2N，4.4mL，2当量)加入到(S)-5-(苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酰氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸甲酯(2.3g，4.4mmol)的1，4-二噁烷(15mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用HCl(1N，～10mL)酸化至pH～3，并加入乙酸乙酯(50mL)。有机层用EtOAc(3x20mL)萃取，用Na2SO4干燥并浓缩。小份样品(30mg)通过RP-HPLC(20-100％ACN于H2O中)纯化以获得白色固体(S)-5-(苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酰氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸(8mg)。残留物不经进一步纯化而使用。LRMS(M-H+)＝507.4。

室温下，将N-Boc-哌嗪(820mg，1当量)、DIEA(1.2mL，1.5当量)和HBTU(2.00g，1.2当量)加入到(S)-5-(苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酰氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸(～4.41mmol)的DMF(8mL)溶液。使得反应搅拌过夜，并且粗品通过RP-HPLC(5-100％ACN于H2O中)纯化以获得白色固体(S)-4-(5-(苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酰氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(801mg，2步27％)。LRMS(M+Na+)＝699.4。

将TFA(1mL)加入到(S)-4-(5-(苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酰氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(713mg，1.05mmol)的DCM(5mL)溶液中，并使之搅拌30分钟。将反应混合物浓缩，且残留物通过RP-HPLC(20-100％ACN于H2O中)纯化，并浓缩以获得灰白色固体(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酸酯(430mg，71％)。LRMS(M+H+)＝577.1。
实施例18(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将TBS-Cl(42.9g，288mmol)加入到(S)-5-(羟基甲基)吡咯烷-2-酮(30.0g，261mmol)和咪唑(23.1g，340mmol)的DCM(900mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，并过滤。滤液用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-5-((叔丁基二甲基硅烷基氧基)甲基)吡咯烷-2-酮(50g，83.7％)。LRMS(M+H+)m/z 230.2。

0℃下，将t-BuOK(30.8g，0.27mol)加入到(S)-5-((叔丁基二甲基硅烷基氧基)甲基)吡咯烷-2-酮(48.5g，0.21mol)的THF(100mL)溶液中。将混合物在0℃下搅拌30分钟，随后在0℃下滴加Cbz-Cl(40.4mL，0.27mol)。产生的混合物在室温下搅拌过夜，用饱和NH4Cl淬灭，并浓缩至小量，并用EtOAc稀释。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-2-((叔丁基二甲基硅烷基氧基)甲基)-5-氧代吡咯烷-1-羧酸苄酯(70g，91％)。LRMS(M+H-44)m/z 320.2。

将LiOH(2N，107.4mL)加入到(S)-2-((叔丁基二甲基硅烷基氧基)甲基)-5-氧代吡咯烷-1-羧酸苄酯(39g，0.107mol)的THF(214mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜，浓缩至干，并溶解于DMF(100mL)。将HBTU(48.9g，0.13mmol)和Boc-哌嗪(24g，0.13mol)加入到产生的溶液。反应混合物在室温下搅拌1h，并用水(200mL)和EtOAc(500mL)稀释。有机层用水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-4-(4-(苄氧基羰基氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(33.3g，56.5％)。LRMS(M+H)m/z 550.3。

0-5℃下，将固体氢化钠(60％，3.5g，88.2mmol)加入到(S)-4-(4-(苄氧基羰基氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(32.3g，58.8mmol)和碘甲烷(7.3mL，117.6mmol)的DMF(450mL)溶液。将混合物在0-5℃下搅拌30分钟，并用饱和NH4Cl溶液淬灭。将混合物在高真空下浓缩以除去大部分DMF。将残留物溶解于EtOAc(700mL)。有机混合物用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得(S)-4-(4-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(34g，粗品)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H)m/z 564.3。

将H2(50psi)载入在乙醇(100mL)中的(S)-4-(4-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(21.5g)和10％Pd/C(2.2g)。将产生的混合物在室温下搅拌过夜，并过滤。将滤液浓缩以获得(S)-4-(5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(甲基氨基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(16g，粗品)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H)m/z 430.3。

将2-氯-3-氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯(12g，37.3mmol)加入到(S)-4-(5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(甲基氨基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(16g，37.3mmol)和DIEA(1.3mL，7.46mmol)的THF(180mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2h，并浓缩。残留物物在硅胶上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-4-(5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(14.3g，3步62.4％)。LRMS(M+H)m/z 615.3。

将TBAF(1M，34.2mL，34.2mmol)加入到(S)-4-(5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(14g，22.8mmol)的THF(70mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1h，并浓缩。有机混合物用2％柠檬酸、NaOH(0.2N)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(12.1g，粗品)，且不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H)m/z501.2。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(4.7g，23.5mmol)加入到(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(11.2g，22.4mmol)的甲苯(110mL)溶液中。将反应混合物在100℃下搅拌30分钟，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10.8g，72％)。LRMS(M+H)m/z 671.3。

将TFA(100mL)加入到(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(22g，32.8mmol)的DCM(200mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌3h，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用MeOH和DCM的混合物纯化。将部分浓缩，溶解于水(200mL)，并用1N NaOH中和至pH 8-9，并用EtOAc(300mLx3)萃取。有机层用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(14g，75％)。LRMS(M+H)m/z 571.1。
实施例19(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-5-(4-异丙基哌嗪-1-基)-5-氧代戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-5-(4-异丙基哌嗪-1-基)-5-氧代戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将乙酸(4滴，～0.2mL)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(610mg，1.07mmol)的丙酮(1mL)和DCM(1mL)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将固体NaBH(OAc)3加入这一混合物，并且产生的混合物在室温下搅拌1h，并浓缩。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物(0.1％HCOOH缓冲液)纯化。收集部分，并浓缩至干，并再次溶解于EtOAc。有机混合物用Na2CO3洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得白色固体(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-5-(4-异丙基哌嗪-1-基)-5-氧代戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(540mg，82％)。LRMS(M+H+)m/z 613.3。
实施例20异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-(2，3-二羟基-丙氧基)-丙酯的制备
将三氟甲磺酸酐(4.14g，14.7mmol)加入到冷却至0℃的(R)-丙酮缩甘油(1.85g，14.0mmol)和2，6-卢剔啶(2.47mL，14.7mmol)在二氯甲烷(45mL)中的混合物。将产生的溶液在0℃下搅拌2h，然后浓缩以获得三氟甲磺酸2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲酯，其不经进一步纯化而使用。

0℃下，将氢化钠(60％，0.378g，9.46mmol)加入到boc-D-丝氨醇(1.33g，4.73mmol)的THF溶液。将反应混合物在0℃下搅拌0.5h，然后0℃下，在5分钟内缓慢加入三氟甲磺酸2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲酯。添加完成后，将反应升至室温，并使之搅拌2h。2h后，将反应混合物冷却至0℃，并加入4mL H2O。然后，将反应混合物浓缩，并将产生的残留物溶解于EtOAc(200mL)。然后，有机层用1M KHSO4、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。浓缩有机层获得黄色油状物，其在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得无色油状物[2-苄氧基-1-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲氧基甲基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(1.39g，72％)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 296.1。

0℃下，将一份氢化钠(60％，0.19g，4.78mmol)加入到[2-苄氧基-1-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲氧基甲基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(1.26g，3.18mmol)的DMF(10mL)溶液中。将反应在0℃下搅拌0.5h，然后加入MeI(1.36g，9.56mmol)。然后将反应混合物在0℃下搅拌3h，此时LC-MS显示反应完成。反应用饱和NH4Cl水溶液淬灭，并用EtOAc(2x100mL)萃取。然后，有机层用水、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。将有机层浓缩以获得[2-苄氧基-1-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲氧基甲基)-乙基]-甲基-氨基甲酸叔丁酯(1.25g，96％)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 310.1。

将Pd/C(300mg)加入到粗品[2-苄氧基-1-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲氧基甲基)-乙基]-甲基-氨基甲酸叔丁酯(1.25g，3.06mmol)的MeOH(10mL)溶液。将混合物转移至高压釜反应器，并载入55psi的氢气，并搅拌。1.5h后，LCMS分析指示反应完成。然后，反应混合物通过硅藻土过滤，并减压浓缩以获得[1-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲氧基甲基)-2-羟基-乙基]-甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.875g，95％)，其不经纯化而使用。LRMS(M-Boc+H+)m/z 220.2。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(2.36g，11.9mmol，1.0当量)加入到[1-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲氧基甲基)-2-羟基-乙基]-甲基-氨基甲酸叔丁酯(3.80g，11.9mmol)的甲苯(200mL)溶液。将反应混合物加热至100℃，持续1h，然后浓缩。在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得异喹啉-3-基-氨基甲酸2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲氧基)-丙酯(2.9g，50％)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 390.2。

0℃下，将TFA(12mL)加入到异喹啉-3-基-氨基甲酸2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲氧基)-丙酯(2.9g，5.93mmol)的DCM(200mL)溶液。将混合物搅拌2h，减压浓缩并再次溶解于THF(10mL)和DIEA(6.6mL，37.8mmol)。0℃下，向该THF溶液加入预先搅拌的4-硝基苯基氯甲酸酯(1.33g，6.62mmol)、2-氯-3-氟苄胺(1.0g，6.3mmol)和DIEA(1.2mL，6.9mmol)的THF(85mL)溶液。将反应混合物搅拌2h，使得反应逐渐升至24℃。将混合物减压浓缩，再次溶解于MeOH，过滤，并通过RP-HPLC使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-(2，3-二羟基-丙氧基)-丙酯(1.1g，2步45％)。LRMS(M+H+)m/z 535.1。
实施例21异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-(2-羟基-3-膦酰氧基-丙氧基)-丙酯的制备
0℃下，将氯磷酸二乙酯(1.3mL，9.0mmol)加入到异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-(2，3-二羟基-丙氧基)-丙酯(1.2g，2.25mmol)、DIEA(1.56mL，9.0mmol)和DMAP(1.11g，9.0mmol.)在无水DCM(250mL)中的混合物。将反应在0℃下搅拌10分钟后，LC/MS分析显示反应完成。反应用MeOH(80mL)淬灭。然后，将混合物浓缩，并将产生的残留物溶解于EtOAc(200mL)。有机层用饱和NaHCO3水溶液、水、盐水洗涤，并浓缩。产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-[3-(二乙氧基-磷酰氧基)-2-羟基-丙氧基]-丙酯(601mg，47％)。LRMS(M+H+)m/z 671.2。

0℃下，将TMSI(1.43g，7.16mmol)滴加于异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-[3-(二乙氧基-磷酰氧基)-2-羟基-丙氧基]-丙酯(0.60g，0.895mmol)的乙腈(30mL)溶液。在0℃下搅拌4.5h后，反应用EtOH淬灭。除去溶剂，产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物(0.1％TFA缓冲剂)纯化以获得异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-(2-羟基-3-膦酰氧基-丙氧基)-丙酯(396mg，73％)。LRMS[M-H]+m/z613.5。

0℃下，将0.1M NaOH(12.8mL，1.28mmol)加入到异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-(2-羟基-3-膦酰氧基-丙氧基)-丙酯(0.15g，0.238mmol)的MeOH(50mL)溶液中。(注意紧密监控pH，确保pH不升至大于8)。0℃下搅拌1h后，除去溶剂，并将产生的残留物溶解于4mL H2O。然后，将溶液在干冰浴中冷冻，并置于高真空下，直到除去所有的H2O以获得异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-3-(2-羟基-3-膦酰氧基-丙氧基)-丙酯二钠盐(410mg)。RMS(M-2Na+3H+)m/z 613.5。
实施例22异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-戊酯的制备
将咪唑(17.7g，0.260mol)加入到5-羟基甲基-吡咯烷-2-酮(20g，0.174mol)的DMF(100mL)溶液，随后加入TBDMSCl(27.5g，0.182mol)。2.5h后，LCMS分析显示反应完成。将EtOAc(600mL)和盐水(300mL)加入到反应溶液。水层用EtOAc(2x350mL)进一步萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥，并浓缩以获得淡黄色油状物5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-吡咯烷-2-酮(39.5g)，其不经进一步纯化而用于下一步骤。LRMS(M+H+)m/z 230.1。

将Boc2O(41.7g，0.238mol)和DMAP(2.11g，17.4mmol)加入到5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-吡咯烷-2-酮(39.5g粗物质，173.7mmol)的CH3CN(570mL)溶液。将混合物在24℃下搅拌14h。除去有机溶剂获得油状物，其在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-5-氧代-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50.9g，2步89％)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 230.1。

将NaOMe(30％于MeOH中，12mL)加入到2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-5-氧代-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50.2，0.152mmol)的MeOH(500mL)溶液，并在24℃下搅拌。1h后，LCMS分析显示反应完成。然后，反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(15mL)处理，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得4-叔丁氧羰基氨基-5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-戊酸甲酯(46.8g，85％)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 262.2。

0℃下，将氢化钠(60％，3.1g，77.6mmol)加入到(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(20g，55.0mmol)和MeI(6.22mL，99.7mmol)的DMF(700mL)溶液中。将反应在0℃下搅拌2h，然后在额外的2h内升至10℃，此时LC-MS显示反应完成。反应用饱和NH4Cl水溶液(800mL)和EtOAc(2L)淬灭。然后，加入水以溶解固体。有机层用水、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。产生的残留物在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(16.9g，81％)。LRMS(M+H+)m/z 230.2。

0℃下，将TMSOTf(87.8mL，485.2mmol)加入到(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(91.0g，242.6mmol)的DCM(750mL)溶液中。将混合物搅拌1h，然后倾入饱和NH4Cl水溶液(1L)和CH2Cl2(1L)(注意加入水(700mL)以溶解盐)。然后，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并减压浓缩。产生的残留物再次溶解于THF(300mL)和DIEA(84.5mL，485.2mmol)。0℃下，向该THF溶液加入预先搅拌的4-硝基苯基氯甲酸酯(56.3g，279.0mmol)、2-氯-3-氟苄胺(46.5g，291.1mmol)和DIEA(50.7mL，291.1mmol)的THF(1.1L)溶液。将反应混合物搅拌2h，使得反应逐渐升至24℃，此时LCMS分析显示反应完成。将混合物减压浓缩，并在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-4-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-戊酸甲酯(73.1g，2步65％)。LRMS(M+H+)m/z 461.1。

将TBAF(1M于THF中，68.4mL，68.4mmol)缓慢加入到5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-4-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-戊酸甲酯(21.0g，45.6mmol)的THF(450mL)溶液。将反应在24℃下搅拌1h。除去THF。残留物用EtOAc(600mL)稀释，并用饱和NH4Cl水溶液和盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，并浓缩。将产生的残留物溶解于甲苯，并在100℃下加入异喹啉-3-羰基叠氮化物(9.07g，45.6mmol)的甲苯溶液。将反应混合物加热至100℃，持续1h，然后浓缩。产生的残留物在硅胶柱上使用己烷和EtOAc纯化以获得无色油状物4-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-戊酸甲酯(16.8g，71％)。LRMS(M+H+)m/z 517.1。

-78℃下，将DiBAL-H(1M于庚烷中，12.2mL，12.2mmol)滴加于4-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-戊酸甲酯(80mg，0.15mmol)的THF(100mL)溶液中。将反应在-78℃下搅拌2h，此时再次加入另一DiBAL-H等份试剂(1M于庚烷中，12.2mL，12.2mmol)。反应在-78℃下搅拌2h，然后在-78℃下加入NaBH4(0.33g.8.72mmol)。将反应搅拌额外的2h，使得反应缓慢升至-20℃，然后加入MeOH(20mL)。然后，将反应混合物浓缩，再次溶解于EtOAc，并用0.5N HCl水溶液和盐水洗涤。然后，有机层用Na2SO4干燥，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱上使用CH2Cl2和MeOH纯化以获得无色油状物异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-羟基-戊酯(2.1g，74％)。LRMS[M+H]+m/z 489.1。

室温下，将异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-羟基-戊酯(2.40g，4.92mmol)加入到Dess-Martin氧化剂(2.40g，5.65mmol)的无水CH2Cl2(100mL)溶液。24℃下，20分钟后，反应通过LC/MS分析，显示反应完成。反应用饱和NaHCO3水溶液和1N Na2S2O3水溶液(各40mL)淬灭，并搅拌0.5h。将有机层分离，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，然后浓缩。产生的残留物为异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-氧代-戊酯(2.37g，粗品)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z4871。

室温下，将N-甲基哌嗪(0.573mL，5.16mmol)加入到异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-氧代-戊酯(2.37g粗混合物，4.92mmol)的无水DCE(5mL)和AcOH 1(1mL)溶液。在室温下搅拌3h后，加入一份三乙酰氧基硼氢化钠(4.17g，19.7mmol)，随后加入10mL DCE。混合物在室温下搅拌2h，在CH2Cl2中稀释，并用NaHCO3水溶液和盐水洗涤。溶液用Na2SO4干燥后，将反应混合物浓缩，并且产生的残留物在RP-HPLC上使用具有TFA缓冲剂的乙腈和H2O的混合物纯化。将纯化的部分浓缩，再次溶解于EtOAc，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。除去溶剂获得异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-戊酯的游离碱(1.43g，51％)。LRMS(M+H+)m/z 571.3。
实施例23异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-戊酯的制备
室温下，将三唑并哌嗪HCl盐(27mg，0.17mmol)加入到异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-氧代-戊酯(75mg粗混合物，0.15mmol)的无水DCE(2mL)和DIEA(56uL，0.32mmol)溶液中。室温下搅拌5分钟后，加入一份三乙酰氧基硼氢化钠(98mg，0.45mmol)。浆状物在室温下搅拌16h，在CH2Cl2稀释，并用NaHCO3水溶液和盐水洗涤。溶液用Na2SO4干燥后，将反应混合物浓缩，并且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-戊酯(30mg，30％)。LRMS(M+H+)m/z 595.2。
实施例24异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-(2-氧代-哌嗪-1-基)-戊酯的制备

24℃下，将(2-氨基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯加入到异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-氧代-戊酯(0.8g粗混合物，1.64mmol)的无水DCE(3mL)和AcOH(0.1mL)溶液。24℃下搅拌10h后，加入一份三乙酰氧基硼氢化钠(1.05g，4.92mmol)。浆状物在24℃下搅拌2h，用甲醇淬灭，并浓缩。产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得异喹啉-3-基-氨基甲酸5-(2-叔丁氧羰基氨基-乙基氨基)-2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-戊酯(0.25g，25％)。LRMS(M+H+)m/z 631.2。

0℃下，将氯乙酰氯(49mg，0.43mmol)加入到异喹啉-3-基-氨基甲酸5-(2-叔丁氧羰基氨基-乙基氨基)-2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-戊酯(0.25g，0.40mmol)的EtOAc(5mL)和饱和NaHCO3水溶液(4mL)溶液中。0℃下搅拌2h后，分离各相，且有机层用盐水洗涤，并浓缩，并且将产生的残留物再次溶解于3mL MeOH并用4M在MeOH中的HCl(0.105mL，0.42mmol)处理。混合物在0℃下搅拌2h，然后加入固体NaHCO3(150mg)。在0℃下搅拌另外2h后，将反应混合物浓缩，并溶解于EtOAc。产生的有机混合物用盐水洗涤，并用Na2SO4干燥，并浓缩。产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物(0.1％TFA缓冲剂)纯化。将纯化的部分浓缩，再次溶解于EtOAc，并用饱和水溶液NaHCO3洗涤。除去溶剂获得异喹啉-3-基-氨基甲酸2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-5-(2-氧代-哌嗪-1-基)-戊酯的游离碱(37mg，17％)。LRMS(M+H+)m/z 571.2。
实施例25(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(1H-咪唑-4-基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(1H-咪唑-4-基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
0-5℃下，将LAH(2M，10mL，20mmol)加入到(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(1H-咪唑-4-基)丙酸(1.0g，3.92mmol)的THF(20mL)溶液中。反应混合物在0-5℃下搅拌30分钟，并加热至回流，持续2h。将反应混合物冷却至0-5℃，并用水(0.8mL)、NaOH(0.8mL)和水(2.4mL)淬灭。产生的悬浮液在室温下搅拌30分钟，并过滤。将滤液浓缩以获得(S)-3-(1H-咪唑-4-基)-2-(甲基氨基)丙-1-醇(400mg，粗品)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M-Boc+H+)m/z 156.1。

将Boc2O(1.6g，7.34mmol)和DIEA(1.5mL，9.06mmol)加入到(S)-3-(1H-咪唑-4-基)-2-(甲基氨基)丙-1-醇(3.92mmol)的乙腈(10mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌1h，并浓缩至干。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-4-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-3-羟基丙基)-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯(260mg，2步19％)。LRMS(M+H+)m/z 356.5。

将6-氟-异喹啉-3-羰基叠氮化物(174mg，0.81mmol)加入到(S)-4-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-3-羟基丙基)-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯(260mg，0.73mmol)的甲苯(10mL)溶液。将反应混合物在100℃下搅拌30分钟，冷却至室温，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-4-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-3-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)丙基)-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯(280mg，71％)。LRMS(M+H+)m/z 544.2。

将HCl(4N于1，4-二噁烷中，2.55mL，10.2mmol)加入到(S)-4-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-3-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)丙基)-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯(280mg，0.51mmol)的THF(10mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1h，并浓缩至干。将残留物悬浮于THF(20mL)。将DIEA(0.27mL，1.53mmol)和2-氯-3-氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯(166mg，0.51mmol)加入到悬浮液。将反应混合物在室温下搅拌2h，并浓缩至干。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(1H-咪唑-4-基)丙基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(35mg，13％)。LRMS(M+H+)m/z529.5。
实施例26(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-3-(吡啶-2-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-3-(吡啶-2-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
0℃下，将LAH(2M于THF中，4.0mL，8.0mmol)加入到(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(吡啶-2-基)丙酸酯(1.05g，3.96mmol)的THF(20mL)溶液中。将产生的溶液在0℃下搅拌30分钟，并加热至回流，持续2h。将反应混合物冷却，并用水(0.32mL)、NaOH(3N，0.32mL)和水(0.96mL)淬灭。产生的悬浮液在室温下搅拌30分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩以获得以获得(S)-2-(甲基氨基)-3-(吡啶-2-基)丙-1-醇(510mg，粗品)，其不经进一步纯化而使用。

将2-氯-3-氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯(1.29g，3.93mmol)加入到(S)-2-(甲基氨基)-3-(吡啶-2-基)丙-1-醇(3.93mmol)的THF(20mL)溶液中。将产生的溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，将产生的残留物溶解于EtOAc(800mL)。有机混合物用NaOH(1N，100mL X 3)、HCl(0.5N，100mL)、NaHCO3(饱和)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(1-羟基-3-(吡啶-2-基)丙-2-基)-1-甲脲(250mg，两步18％)。LRMS(M+H+)m/z 352.2。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(142mg，0.71mmol)加入到(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(1-羟基-3-(吡啶-2-基)丙-2-基)-1-甲脲(250mg，0.71mmol)的甲苯(10mL)溶液。将产生的溶液在100℃下搅拌1h。将混合物冷却，并浓缩。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得白色固体(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊-4-烯基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(277.4mg，75％)。LRMS(M+H+)m/z 522.1。
实施例27(S)-5-(2-氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-5-(2-氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
在4个微波反应管中，将在NMP(40.0mL)中的(S)-5-氨基-2-(苄氧基羰基氨基)戊酸(10.0g，37.56mmol)和1，3-二氧代异吲哚啉-2-羧酸乙酯(9.04g，41.28mmol)加热至150℃，持续30分钟。混合物用EtOAc(500mL)稀释。有机混合物用水(100mLx2)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得油状物，将其再次溶解于甲苯。将低聚甲醛、PTSA和分子筛(3A)加入产生的溶液，并将混合物在微波反应器中加热至150℃，持续20分钟。反应混合物用醚(800mL)稀释，用NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-4-(3-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙基)-5-氧代噁唑烷-3-羧酸苄酯(11.6g，2步76％)。

将Et3SiH(13.6mL，85.3mmol)加入到(S)-4-(3-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙基)-5-氧代噁唑烷-3-羧酸苄酯(11.6g，28.40mmol)的DCM(30.0mL)溶液中。将反应混合物搅拌过夜，减压浓缩，并溶解于THF(100mL)。0℃下，将氯甲酸叔丁酯(4.4mL，34.08mmol)和TEA(12.0mL，85.2mmol)加入到产生的溶液。反应混合物在室温下搅拌30分钟。滤出沉淀物，并在0℃下将滤液加入到NaBH4在水(1.0mL)中的悬浮液。反应混合物在室温下搅拌30分钟。LCMS指示反应完成。反应混合物通过HCl(1N)酸化至pH 3，并用EtOAc(300mLx2)萃取。合并的有机层用饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基(甲基)氨基甲酸苄酯(5.01g，45％)。LRMS(M+H+)m/z 397.3。

将Pd/C(1.0g)加入到(S)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基(甲基)氨基甲酸苄酯(5.01g，12.65mmol)的MeOH(100mL)溶液。将混合物转移至高压釜反应器，载入氢气(50psi)，并在室温下搅拌过夜。将混合物过滤，并将滤液减压浓缩以获得(S)-2-(5-羟基-4-(甲基氨基)戊基)异吲哚啉(3.2g，97％)，其不经纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 263.1。

将2-氯-3-氟苄胺盐酸盐(1.24g，9.39mmol)和DIEA(3.9mL，23.46mmol)的溶液加入到4-硝基苯基氯甲酸酯(1.89g，9.39mmol)的THF(20mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌20分钟。将反应混合物加入到(S)-2-(5-羟基-4-(甲基氨基)戊基)异吲哚啉(2.05g，7.82mmol)的THF(10mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌过夜。将混合物浓缩，并在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基)-1-甲脲(401mg，47％)。LRMS(M+H+)m/z 448.3。

将(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基)-1-甲脲(286mg，0.64mmol)和6-氟异喹啉-3-羰基叠氮化物(152mg，0.70mmol)的甲苯(5mL)溶液加热至100℃，持续1h。将反应混合物浓缩至干。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(400mg，定量)。LRMS(M+H+)m/z 618.2。

将NH2NH2(1.0mL)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(400mg，0.64mmol)的MeOH(10.0mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩，并再次溶解于MeOH。将产生的溶液过滤，并在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(305mg，定量)。LRMS(M+H+)m/z 506.2。

将DIEA(63L，0.38mmol)加入到(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(96mg，0.19mmol)、2-(叔丁氧羰基氨基)乙酸(51mg，0.29mmol)和HBTU(110mg，0.29mmol)的DMF(1.0mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物过滤，并且滤液通过RP-HPLC使用乙腈和水的混合物纯化以获得(6-氟-异喹啉-3-基)-氨基甲酸(S)-5-(2-叔丁氧羰基氨基-乙酰基氨基)-2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-戊酯(105mg，83％)。LRMS(M+Na+)m/z 663.2。

将TFA(1.0mL)加入到(6-氟-异喹啉-3-基)-氨基甲酸(S)-5-(2-叔丁氧羰基氨基-乙酰基氨基)-2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-戊酯(105mg，0.16mmol)的DCM(10.0mL)溶液。将混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩，并再次溶解于DCM。DCM层用K2CO3(2N)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化以获得(S)-5-(2-氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(71mg，79％)。LRMS(M+H+)m/z 563.2。
实施例28(S，E)-5-(2-氨基甲酰基胍基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S，E)-5-(2-氨基甲酰基胍基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基)-1-甲脲(286mg，0.64mmol)和6-氟异喹啉-3-羰基叠氮化物(152mg，0.70mmol)的甲苯(5mL)溶液加热至100℃，持续1h。将反应混合物浓缩至干。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(400mg，定量)。LRMS(M+H+)m/z 618.2。

将NH2NH2(1.0mL)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(400mg，0.64mmol)的MeOH(10.0mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩，并再次溶解于MeOH。将混合物过滤，并在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(305mg，定量)。LRMS(M+H+)m/z 506.2。

将DIEA(0.12mL，0.70mmol)加入到(S)-5-(2-氨基乙酰氨基)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(190mg，0.35mmol)和N-氰亚胺代碳酸二苯酯(83mg，0.35mmol)的DCM(10.0mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌4h。将混合物减压浓缩，以获得(S，Z)-2-(3-(2-氯-3-氟苯基)-N-甲基丙酰氨基)-5-((氰基亚氨基)(苯氧基)甲基氨基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 650.2。

将(S，Z)-2-(3-(2-氯-3-氟苯基)-N-甲基丙酰氨基)-5-((氰基亚氨基)(苯氧基)甲基氨基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(100mg，粗品，0.12mmol)的MeOH(7N氨，1.0mL)溶液在微波反应器中，在110℃下加热20分钟。将混合物过滤，且滤液通过RP-HPLC使用乙腈和水的混合物(0.1％TFA缓冲剂)纯化。然后将混合物浓缩。混合物经RP-HPLC使用乙腈和水的混合物再次纯化以获得(S，E)-5-(2-氨基甲酰基胍基)-2-(3-(2-氯-3-氟苯基)-N-甲基丙酰氨基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(18mg，25％)。LRMS(M+H+)m/z 591.2。
实施例29(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基5-氯吡啶-2-基氨基甲酸酯的制备
(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基5-氯吡啶-2-基氨基甲酸酯
将DPPA(0.46mL，2.15mmol)加入到(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-羟基戊-2-基)-1-甲脲(480mg，1.07mmol)、5-氯皮考啉酸(339mg，2.15mmol)和DIEA(0.36mL，2.15mmol)的甲苯(10mL)溶液。将反应混合物加热至100℃，持续2h，并浓缩至干。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)戊基5-氯吡啶-2-基氨基甲酸酯(280mg，80％纯度)。LRMS(M+H+)m/z 602.2。

将NH2NH2(0.13mL，4.7mmol)加入到(S)2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)戊基5-氯吡啶-2-基氨基甲酸酯(280mg，0.47mmol)的MeOH(5.0mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩，并再次溶解于MeOH。将产生的溶液过滤，并在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基5-氯吡啶-2-基氨基甲酸酯(162mg，73％)。LRMS(M+H+)m/z 472.2。
实施例30(2S，4R)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯和(2S，4S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(2S，4R)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)(2S，4S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨氨基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基 基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基氨基甲酸酯 甲酸酯
将2，6-卢剔啶(4.8mL，41.4mmol)加入到(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(10.5g，31.9mmol)的DCM(100mL)溶液中，随后加入TMSOTf(7.5mL，41.4mmol)。将产生的溶液在室温下搅拌30分钟。除去溶剂，且残留物减压干燥以获得(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-N-甲基戊-4-烯-2-胺，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z230.2。

将2-氯-3-氟苄胺盐酸盐(6.09g，38.3mmol)和DIEA(7.9mL，47.9mmol)的THF(20mL)溶液加入到4-硝基苯基氯甲酸酯(7.69g，38.3mmol)的THF(20mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌20分钟。将反应混合物加入到(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-N-甲基戊-4-烯-2-胺(31.9mmol)的THF(100mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌过夜。除去溶剂，且产生的残留物再次溶解于EtOAc(500mL)。有机混合物用NaOH(1N，100mL X 3)、HCl(0.5N，100mL)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化以获得白色固体(S)-1-(1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(10.08g，76％)。LRMS(M+H+)m/z 415.2。

将HCl(1N，32.0mL)加入到(S)-1-(1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(5.80g，10.8mmol)的MeOH(50mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌30分钟。将混合物部分浓缩，并过滤。滤液在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得白色固体(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(1-羟基戊-4-烯-2-基)-1-甲脲(2.0g，77％)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 301.2。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(1.24g，6.22mmol)加入到(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(1-羟基戊-4-烯-2-基)-1-甲脲(1.7g，5.65mmol)的甲苯(20mL)溶液中。将产生的溶液在100℃下搅拌1h。将混合物冷却，并滤出固体。固体用甲苯洗涤，并在高真空下干燥以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊-4-烯基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(2.50g，77％)。LRMS(M+H+)m/z 471.1。

将4-甲基吗啉N-氧化物(2.36g，20.15mmol)和四氧化锇(103.0mg，0.4mmol)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊-4-烯基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(1.9g，4.03mmol)的THF(48mL)和水(12.0mL)溶液中。将产生的溶液在室温下搅拌2h。向该混合物加入亚硫酸钠(3g)，并将产生的混合物搅拌2h。然后通过过滤除去固体。滤液用乙酸乙酯(100mL)稀释。有机层用HCl(0.5N)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，过滤，并浓缩。残留物通过RP-HPLC使用乙腈和水的混合物纯化以获得(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(296mg，15％)、(2S，4S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(18.3mg，9％)和1g的混合物。LRMS(M+H+)m/z 505.2。
实施例31(2R，4S)-4-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠的制备
(2R，4S)-4-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠
0℃下，将氯磷酸二乙酯(0.3mL，2.06mmol)加入到(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.26g，0.51mmol)、DIEA(0.51mL，3.06mmol)和DMAP(0.251g，2.06mmol)的无水THF(20mL)和DCM(30mL)溶液中。室温下搅拌10分钟后，混合物用EtOH淬灭。产生的混合物用DCM(100mL)稀释。有机混合物用饱和NaHCO3、HCL(1N)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二乙氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(310mg，95％)。LRMS(M+H+)m/z 641.2。

室温下，将TMSI(0.87mL，6.4mmol)加入到(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二乙氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(310mg，0.64mmol)的乙腈(10mL)溶液中。室温下搅拌1h后，反应用H2O和DIEA(0.1mL，0.64mmol)淬灭。除去溶剂，且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物(0.1％HCOOH缓冲液)纯化以获得(2S，4R)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(212mg，57％)。LRMS(M+H+)m/z 585.5。

0℃下，将NaOH(0.1N，7.3mmol)加入到((2S，4R)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(212mg，0.36mmol)的MeOH(8mL)溶液。在0℃下搅拌1h后，将混合物浓缩以获得白色固体(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠(235mg，定量)。LRMS(M-2Na++3H+)m/z 585.5。
实施例32(2S，4R)-2-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯和(2S，4S)-2-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(2S，4R)-2-((2，3-二氟苄基)(甲基)(2S，4S)-2-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨氨基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基 基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基氨基甲酸酯 甲酸酯
将2，3-二氟苄胺(4.26mL，36.4mmol)和DIEA(13.2mL，75.9mmol)的THF(20mL)溶液加入到4-硝基苯基氯甲酸酯(7.04g，34.9mmol)的THF(100mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌20分钟。将反应溶液加入到(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-N-甲基戊-4-烯-2-胺(31.9mmol)的THF(50mL)溶液中。产生的溶液在室温下搅拌过夜。除去溶剂，并将产生的残留物再次溶解于EtOAc(500mL)。有机混合物用NaOH(1N，100mL X 3)、HCl(0.5N，100mL)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化以获得白色固体(S)-1-(1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基)-3-(2，3-二氟苄基)-1-甲脲(6.8g，49％)。LRMS(M+H+)m/z 399.2。

将HCl(4N于二噁烷中，11.0mL)加入到(S)-1-(1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基)-3-(2，3-二氟苄基)-1-甲脲(3.45g，8.65mmol)的MeOH(60mL)溶液中。将产生的溶液在室温下搅拌30分钟。将混合物浓缩，并再次溶解于EtOAc。有机混合物用饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得白色固体(S)-3-(2，3-二氟苄基)-1-(1-羟基戊-4-烯-2-基)-1-甲脲(2.5g，定量)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 285.2。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(2.46g，8.65mmol)加入到(S)-3-(2，3-二氟苄基)-1-(1-羟基戊-4-烯-2-基)-1-甲脲(2.5g，8.65mmol)的甲苯(20mL)溶液中。将产生的溶液在100℃下搅拌1h。将混合物冷却，并浓缩至一半体积，随后加入己烷和DCM以获得沉淀物。将混合物过滤，并且固体用己烷洗涤以获得(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊-4-烯基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(3.42g，定量)。LRMS(M+H+)m/z 455.2。

将4-甲基吗啉N-氧化物(4.4g，37.6mmol)和四氧化锇(254.2mg，0.75mmol)加入到(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊-4-烯基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(3.42g，7.52mmol)的THF(100mL)和水(25.0mL)溶液中。将产生的溶液搅拌过夜。向该混合物加入亚硫酸钠(3g)，并将产生的混合物搅拌2h。然后通过过滤除去固体。滤液用乙酸乙酯(200mL)稀释。有机层用HCl(0.5N)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，过滤，并部分浓缩。将混合物过滤，并且收集固体并干燥以获得1∶2比例的(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯和(2S，4S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(1g)的混合物。将滤液浓缩，并通过P-HPLC使用乙腈和水的混合物纯化以获得(2S，4R)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(14mg)、(2S，4S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(10mg)和两者的混合物(300mg)。LRMS(M+H+)m/z 489.2。
实施例33(2R，4S)-4-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠的制备
(2R，4S)-4-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠
0℃下，将氯磷酸二甲酯(0.11mL，1.0mmol)加入到(2S，4R)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.245g，0.50mmol)、DIEA(0.17mL，1.0mmol)和DMAP(0.122g，1.0mmol)的无水THF(12mL)溶液。室温下搅拌1h后，在0℃下加入额外的氯磷酸二甲酯(0.27mL，2.51mmol)。将反应混合物搅拌30分钟，并用MeOH淬灭。产生的混合物用EtOAc(100mL)稀释。有机混合物用饱和NaHCO3、HCL(1N)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(2S，4R)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(150mg，50％)。LRMS(M+H+)m/z 597.2。

0℃下，将TMSI(0.14mL，1.0mmol)加入到在乙腈(10mL)中的(2S，4R)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(150mg，0.25mmol)。室温下搅拌10分钟后，反应用MeOH淬灭。除去溶剂，且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物(0.1％ HCOOH缓冲液)纯化以获得(2S，4R)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(100mg，70％)。LRMS(M+H+)m/z 569.2。

0℃下，将NaOH(0.1N，3.6mL，0.36mmol)加入到在MeOH(4mL)中的((2S，4R)-2-((2，3-氟苄基)(甲基)氨基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(100mg，0.176mmol)。0℃下搅拌1h后，将混合物浓缩以获得白色固体(2R，4S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠(100.1mg，93％)。LRMS(M-2Na+3H+)m/z 569.5。
实施例34(2S，4S)-4-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠的制备
(2S，4S)-4-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠
0℃下，将氯磷酸二甲酯(0.13mL，1.23mmol)加入到(2S，4S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.61g，1.23mmol)、DIEA(0.41mL，2.45mmol)和DMAP(0.30g，2.46mmol)的无水THF(20mL)溶液。室温下搅拌1h后，在0℃下加入额外的氯磷酸二甲酯(0.66mL，6.15mmol)。将反应混合物搅拌30分钟，并用MeOH淬灭。混合物用EtOAc(100mL)稀释。有机混合物用饱和NaHCO3、HCL(1N)、饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(2S，4S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(161mg，22％)。LRMS(M+H+)m/z 597.2。

0℃下，将TMSI(0.15mL，1.08mmol)加入到在乙腈(5mL)中的(2S，4S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(161mg，0.27mmol)。室温下搅拌10分钟后，反应用MeOH淬灭。除去溶剂，且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物(0.1％HCOOH缓冲液)纯化以获得以获得(2S，4S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(70mg，46％)。LRMS(M+H+)m/z 569.2。

0℃下，将NaOH(0.1N，3.6mL，0.36mmol)加入到在MeOH(4mL)中的((2S，4S)-2-((2，3-氟苄基)(甲基)氨基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(100mg，0.176mmol)。0℃搅拌1h后，将混合物浓缩以获得白色固体(2S，4S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠(80mg，定量)。LRMS(M-2Na++3H+)m/z 569.5。
实施例35(2S，4S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯和(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(2S，4S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯3-基氨基甲酸酯
将粗品(2S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.07g)的DCM(1mL)溶液载入TLC硅胶60F254(20X20cm)板上，并用DCM和甲醇(20∶1)的混合物展开。收集顶层，并在甲醇(50mL)中搅拌10分钟。过滤后，将滤液浓缩以获得(2S，4S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.01g，14.3％)。LRMS(M+H+)m/z 523.2。将相同的过程应用于底层以获得(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(27mg，38.6％)。LRMS(M+H+)m/z 523.2。
实施例36(2S)-2-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(2S)-2-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将2，3-二氟苄胺(4.04mL，34.5mmol)和DIEA(17.5mL，100.5mmol)的THF(20mL)溶液加入到4-硝基苯基氯甲酸酯(6.66g，33.0mmol)的THF(100mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌20分钟。将反应溶液加入到(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(甲基氨基)戊酸甲酯(28.8mmol)的THF(30mL)溶液中。将产生的溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，并将产生的残留物再次溶解于EtOAc(500mL)。有机混合物用NaOH(1N，100mL X 3)、HCl(0.5N，100mL)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化以获得油状物(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸甲酯(9.7g，3步76％)。LRMS(M+H+)m/z 445.2。

将HCl(4N于二噁烷中，5.4.0mL，21.6mmol)加入到(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸甲酯(9.7g，21.6mmol)的MeOH(40mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌1h。将混合物浓缩，并再次溶解于EtOAc。有机混合物用饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得白色固体(S)-甲基4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸酯(6.84g，粗品)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z331.2。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(1.33g，6.75mmol)加入到(S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸甲酯(2.23g，6.75mmol)的甲苯(20mL)溶液中。将产生的溶液在100℃下搅拌1h。将混合物冷却，并浓缩。残留物在硅胶上纯化以获得(S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸甲酯(2.48g，2步73％)。LRMS(M+H+)m/z 501.2。

0℃下，将LAH(2.0M于THF中，1.5mL，3.0mmol)加入到(S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸甲酯(1.0g，2.0mmol)的THF(10mL)溶液，并在0℃下搅拌20分钟。混合物用H2O(0.12mL)、NaOH(3N，0.12mL)和H2O(0.36mL)淬灭，并且将产生的悬浮液在室温下搅拌30分钟并过滤。将滤液浓缩，且残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.52g，55％)。LRMS(M+H+)m/z 473.2。
实施例37(S)-4-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠的制备
(S)-4-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠 方法A
室温下，将氯磷酸二甲酯(0.36mL，3.36mmol)加入到(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.52g，1.11mmol)、DIEA(0.96mL，5.52mmol)和DMAP(0.27g，2.21mmol)的无水DCM(10mL)溶液中。室温下搅拌15分钟后，反应混合物MeOH淬灭。混合物用EtOAc(100mL)稀释。有机混合物用饱和NaHCO3、HCl(1N)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(626mg，98％)，其不经纯化而使用。LRMS(M+h+)m/z 581.2。

0℃下，将TMSI(0.50mL，3.66mmol)加入到在乙腈(18mL)中的(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(531mg，0.91mmol)。室温下搅拌10分钟后，反应混合物MeOH淬灭。除去溶剂，且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物(0.1％HCOOH缓冲液)纯化以获得(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(261mg，52％)。LRMS(M+H+)m/z553.5。

0℃下，将NaOH(0.1N，9.2mL，0.92mmol)加入到在MeOH(10mL)中的(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(261mg，0.472mmol)。0℃下搅拌1h后，将混合物浓缩以获得白色固体(S)-4-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠(260mg，88％)。LRMS(M+H+)m/z 585.5。
方法B
0℃下，将LiBH4(2M于THF中，56.0mL，0.112mol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酸甲酯(40g，0.111mol)的THF(100mL)和MeOH(5.0mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物冷却至0℃，并用饱和NaHCO3溶液缓慢淬灭。将产生的混合物在室温下搅拌过夜，并过滤。固体用EtOAc洗涤。合并的滤液用额外的EtOAc(200mL)洗涤。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-羟基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(39.5g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+Na+)m/z 356.4.2。

0℃下，将乙酰氯(150mL，333.2mmol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酸甲酯(111mmol)和吡啶(150mL，1.662mol)的THF(500mL)溶液。将产生的混合物在室温下搅拌1h。除去溶剂，且剩余的残留物用EtOAc稀释。有机混合物用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。残留物在硅胶柱上纯化以获得(S)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊基乙酸酯(39.6g，95％)。LRMS(M+H+-Boc)m/z 276.2。

0℃下，将氢化钠(60％，9.9g，0.248mol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊基乙酸酯(48.2g，0.124mol)和MeI(23.2mL，0.372mol)的DMF(500mL)溶液。将产生的混合物在0℃下搅拌21/2h，且LC-MS指示反应完成。反应用饱和NH4Cl溶液淬灭，并用EtOAc稀释。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊基乙酸酯(51g，粗品)。LRMS(M+H+-Boc)m/z 290.2。

室温下，将氢氧化钠(2N，93mL，0.186mol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊基乙酸酯(0.124mol)的THF(200mL)和MeOH(50mL)溶液中。将反应在室温下搅拌2h，且LC-MS指示反应完成。反应混合物用EtOAc稀释，并且有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-羟基戊-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(37.9g，88％)。LRMS(M+H+-Boc)m/z 248.2。

将2，6-卢剔啶(25.3mL，218.4mmol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酸甲酯(37.9g，109.2mmol)的DCM(200mL)溶液中，随后加入TMSOTf(29.6mL，163.8mmol)。将产生的溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，且剩余的残留物用EtOAc稀释。有机混合物用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(甲基氨基)戊-1-醇，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z248.2。

将2，3-二氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯(43.72g，142.0mmol)加入到(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(甲基氨基)戊-1-醇(109.2mmol)的THF(200mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，并将产生的残留物溶解于EtOAc(800mL)。有机混合物用NaOH(1N，100mL X 3)、HCl(0.5N，100mL)、NaHCO3(饱和)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAC和己烷的混合物纯化以获得淡黄色油状物(S)-1-(1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-羟基戊-2-基)-3-(2，3-二氟苄基)-1-甲脲(35.1g，76％)。LRMS(M+H+)m/z 417.2。

室温下，将四唑(0.34M于乙腈中，172.0mL，58.64mmol)加入到(S)-1-(1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-羟基戊-2-基)-3-(2，3-二氟苄基)-1-甲脲-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸酯(6.1g，14.66mmol)的THF(20mL)溶液，随后加入二异丙基亚磷酰胺二叔丁酯(9.3mL，29.32mmol)。将产生的溶液在室温下搅拌2h。室温下，向该混合物加入MCPBA(70％，7.3g，29.32mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，并用Na2SO3淬灭。将混合物过滤，并且将滤液浓缩，并溶解于EtOAc。有机混合物用NaOH(1N X 2)、NaHCO3(饱和)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊基磷酸二叔丁酯(4.1g，54％)。LRMS(M+H+-2tBu)m/z 491.2。

将TBAF(1.0M于THF中，8.0mL，8.0mmol)加入到(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)戊基磷酸二叔丁酯(4.1g，7.95mmol)的THF(40mL)溶液中。将产生的溶液在室温下搅拌1h。混合物用饱和NH4Cl淬灭，并用EtOAc稀释。有机层用饱和NH4Cl(X 2)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得无色油状物(S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊基磷酸二叔丁酯(2.52g，61％)。LRMS(M+H+-2tBu)m/z 383.0。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(1.2g，5.86mmol)和DIEA(1.2mL，7.32mmol)加入到(S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊基磷酸二叔丁酯(2.52g，4.88mmol)的甲苯(100mL)溶液。将产生的溶液在100℃下搅拌1h。将混合物冷却，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物(0.1％TEA缓冲液)纯化以获得(S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸甲酯(1.95g，60％)。LRMS(M+H+)m/z 665.2。

室温下，将HCl(6N于MeOH/水中，8mL，48mmol)加入到(S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸甲酯(1.65g，2.48mmol)的MeOH溶液，并在室温下搅拌30分钟。将混合物浓缩至接近干涸，冷却至0℃，并使用NaOH(1N)调节pH至2。收集产生的沉淀物，并干燥以获得(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(膦酰氧基)戊基(1.37g，99.8％)。LRMS(M+H+)m/z 553.5。

0℃下，将NaOH(0.1N，90.7mL，9.07mmol)加入到(S)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(2.50g，4.54mmol)的MeOH(100mL)溶液。0℃下搅拌1h后，将混合物浓缩以获得白色固体(S)-4-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠(2.15g，79％)。LRMS(M-2Na++3H+)m/z 553.5。
实施例38(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-2，2-二甲基戊基磷酸钠的制备
(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-2，2-二甲基戊基磷酸钠
-76℃下，将LDA(2M于THF中，14mL，28mmol)加入到(S)-3，3-二甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮(3.6g，23.2mmol)和碘甲烷(1.74mL，27.9mmol)的THF(100mL)溶液中。-76℃下搅拌4h后，将额外的在THF(100mL)中的碘甲烷(1.86mL，30mmol)和LDA(2M于THF中，15mL，30mmol)加入到反应混合物。将产生的混合物在-76℃下搅拌4h，升至室温，室温下搅拌4天，并用饱和NH4Cl溶液淬灭。产生的混合物用EtOAc稀释。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-3，3，6，6-四甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮(3.1g，73％)。LRMS(M+H+)m/z 184.1。

将HCl(4N于1，4-二噁烷中，10mL，40mmol)加入到(S)-3，3，6，6-四甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮的甲醇(20mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌30分钟，浓缩至干，并再次溶解于DCM(50mL)。将咪唑(1.5g，22mmol)和TBS-Cl(2.8g，18.6mmol)分别加入产生的溶液。将混合物在室温下搅拌过夜，并过滤。将滤液浓缩，且残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-5-((叔丁基二甲基硅烷基氧基)甲基)-3，3-二甲基吡咯烷-2-酮(3.1g，71.2％)。LRMS(M+H+)m/z 258.3。

将Boc2O(4.4g，20mmol)加入到(S)-5-((叔丁基二甲基硅烷基氧基)甲基)-3，3-二甲基吡咯烷-2-酮(3.1g，12.1mmol)和DMAP(2.7g，21.8mmol)的THF(50mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌3h，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-5-((叔丁基二甲基硅烷基氧基)甲基)-3，3-二甲基-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.3g，定量)。LRMS(M-Boc+H+)m/z 258.2。

将LiOH(1N，15.2mL，15.2mmol)加入到(S)-5-((叔丁基二甲基硅烷基氧基)甲基)-3，3-二甲基-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2.7g，7.56mmol)的THF(27mL)和水(3mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜，并浓缩。将残留物溶解于水(20mL)，用10％柠檬酸酸化至pH 6-7，并用EtOAc萃取。有机层用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得(S)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-2，2-二甲基戊酸(2.6g，91.7％)，其不经进一步纯化而使用。LRMS (M-Boc+H+)m/z 276.2。

0-5℃下，将氯甲酸异丁酯(1.1mL，8.04mmol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-2，2-二甲基戊酸(2.5g，6.7mmol)和TEA(1.9mL，13.4mmol)的THF(50mL)溶液中。将反应混合物在0-5℃下搅拌15分钟，并过滤。0-5℃下，向该滤液加入NaBH4(0.5g，13.4mmol)在水(5mL)中的悬浮液。反应混合物在0-5℃下搅拌30分钟，用饱和NH4Cl溶液淬灭，并用EtOAc(200mL)萃取。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-羟基-4，4-二甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(2.0g，83.1％)。LRMS(M+H+-Boc)m/z 262.2。

将吡啶(0.79mL)和乙酰氯(0.386g，4.91mmol)加入到(S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-羟基-4，4-二甲基戊-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.23g，3.27mmol)的THF(20mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜，并过滤。将滤液浓缩以获得(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-2，2-二甲基戊基乙酸酯(1.36g，粗品)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M-Boc+H+)m/z 318.2。

将TBAF(1.0M，16.3mL，16.3mmol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-2，2-二甲基戊基乙酸酯(3.27mmol)的THF(100mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌1h，并浓缩至干。将残留物溶解于EtOAc。有机混合物用10％柠檬酸、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-羟基-2，2-二甲基戊基(0.95g，粗品)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M-Boc+H+)m/z 204.1。

将6-氟异喹啉-3-羰基叠氮化物(0.83g，3.84mmol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-羟基-2，2-二甲基戊基(3.27mmol)的甲苯(20mL)溶液。将反应混合物在100℃下搅拌30分钟，冷却，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-2，2-二甲基戊基乙酸酯(1.5g，3步93％)。LRMS(M+H+)m/z 492.5。

将HCl(4N于1，4-二噁烷中，19mL，76mmol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-2，2-二甲基戊基乙酸酯(1.9g，3.8mmol)的THF(50mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌1h，并浓缩至干。将残留物悬浮于THF(100mL)。向该悬浮液加入DIEA(2.0mL，11.4mmol)和2-氯-3-氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯(1.2g，3.8mmol)。反应混合物在室温下搅拌2h，并浓缩。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基-4，4-二甲基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(1.1g，53％)。LRMS(M+H+)m/z 535.5。

室温下，将氯磷酸二甲酯(0.72mL，6.72mmol)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基-4，4-二甲基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.45g，0.84mmol)、DIEA(0.73mL，4.2mmol)和DMAP(1.02g，8.4mmol)的无水DCM(20mL)溶液。室温下搅拌30分钟后，将额外部分的氯磷酸二甲酯(0.103mL，0.956mmol)和DIEA(0.167mL，0.956mmol)加入到该反应混合物。反应混合物通过LC/MS监控。当反应完成时，混合物用MeOH(10mL)淬灭。除去溶剂，并将产生的残留物溶解于EtOAc(100mL)。有机混合物用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)-4，4-二甲基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(280mg，52％)。LRMS(M+H+)m/z 643.6。

0℃下，将TMSI(0.848mL，6.23mmol)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二甲氧基磷酰氧基)-4，4-二甲基戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.5g，0.79mmol)的乙腈(50mL)溶液。在0℃下搅拌30分钟后，反应用MeOH淬灭。除去溶剂，并且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物(0.1％HCOOH缓冲液)纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二甲基-5-(膦酰氧基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(340mg，71.1％)。LRMS(M+H+)m/z 615.5。

0℃下，将NaOH(0.1N，10.8mL，1.08mmol)加入到S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二甲基-5-(膦酰氧基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(340mg，0.55mmol)的MeOH(30mL)溶液。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，并浓缩。将残留物溶解于少量的水，并冻干以获得白色固体(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-2，2-二甲基戊基磷酸钠(343mg，94.1％)。LRMS(M-2Na++3H+)m/z 615.5。
实施例39溴代亚磷酸二叔丁酯的制备
将四溴化碳(16.58g，50mmol)、苄基三乙基氯化铵(1.14g，5.0mmol)和二氯甲烷(50mL)加入到设置有滴液漏斗和温度计的500mL 3口烧瓶中。剧烈搅拌下加入20％w/w NaOH溶液(50mL)，随后滴加亚磷酸二叔丁酯(20g，100mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液，控制加入的速率以保证反应混合物的温度不超过25℃。添加亚磷酸酯后，将混合物在室温下进一步搅拌3h，用二氯甲烷(20mL)稀释，并分离。有机相在室温下用饱和亚硫酸氢钠、水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。除去溶剂后，残留物在真空中进一步抽吸1h以获得无色油状物溴代磷酸二叔丁酯(23.5g，86％)。
实施例401-((2S，4R)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4，5-二羟基戊-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲的制备
1-((2S，4R)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4，5-二羟基戊-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲 方法A
氮气下，将4-硝基苯基氯甲酸酯(19.3g，96mmol)和THF(400mL)加入到2L 3-口RBF，并在冰浴中冷却至0℃。向该混合物加入一份2，3-二氟苄胺(14.2g，92mmol)和DIEA(17.4mL，100mmol)的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌5分钟，然后进行LC/MS或TLC以确认起始物质的消耗和硝基苯基中间体的存在。将一份[(S)-1-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-丁-3-烯基]-甲基-胺(76mmol)的THF(150mL)溶液迅速加入到反应混合物，随后加入DIEA(31.7mL，182mmol)。使得反应混合物升至室温，持续约2h。除去溶剂。粗品用乙酸乙酯(1L)稀释，用NaOH(1N，500mLx4)和盐水洗涤，用硫酸氢钠干燥，过滤，并减压浓缩。粗品油状物在硅胶上使用0至30％乙酸乙酯于己烷中的梯度纯化，以获得白色固体(S)-1-(1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基)-3-(2，3-二氟苄基)-1-甲脲(26.1g，70％)。

室温下，将K2CO3(17.0g，123mmol)、(DHQD)2Pyr(361mg，0.41mmol)、K2OsO2(OH)4(151mg，0.41mmol)、K3FeCN6(40.5g，123mmol)加入到t-BuOH(300mL)和水(300mL)的混合物。将混合物在室温下搅拌2h，然后冷却至0℃。向该混合物加入(S)-1-(1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊-4-烯-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(17.0g，41mmol)的100mL t-BuOH/水(1∶1)的悬浮液，并将反应在0℃下搅拌过夜。LC-MS指示反应完成，将Na2S2O3.5H2O(30.6g，123mmol)加入到反应，并将反应在室温下搅拌30分钟。混合物用乙酸乙酯(1L)稀释，用水(250mL X 2)和盐水(250mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并过滤。将滤液浓缩，并在硅胶上纯化以获得无色油状物1-((2S，4R)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4，5-二羟基戊-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(10.1g，55％)。

0℃下，将2，2-二甲氧基丙烷(12.45mL，100.0mmol)和PPTS(0.050g，0.02mmol)加入到1-((2S，4R)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4，5-二羟基戊-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲1(4.5g，10.0mmol)的DMF(170mL)溶液。1h后，将反应升至室温，并搅拌额外的2.5h。然后，将粗反应混合物加入到NaHCO3的饱和水溶液(350mL)，并用EtOAc(3x300mL)萃取。合并的有机层用盐水(2x400mL)洗涤，并用MgSO4干燥。然后，将溶液浓缩以获得1-((S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 490.1。

将四丁基氟化铵(10.0mL，1M于THF中，10.0mmol)加入到以上粗品的1-((S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲的THF(300mL)溶液。然后，将产生的溶液在室温下搅拌1h。将反应混合物加入到NH4Cl的饱和水溶液(350mL)，并用EtOAc(2x350mL)萃取。合并的有机层用盐水(2x400mL)洗涤，并用MgSO4干燥。然后将溶液浓缩。产生的残留物在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化，以获得3-(2-氯-3-氟苄基)-1-((S)-1-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-3-羟基丙-2-基)-1-甲脲(2.3g，2步61％)。LRMS(M+H+)m/z 375.1。
方法B
将LiAlH4(2M于THF中，186mmol)加入到(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸(20g，93mmol)的无水THF(3mL)溶液中。将混合物加热至65℃。使得反应搅拌3h，直到根据LC/MS完成。将反应冷却至0℃，并加入H2O(7.6mL)，并搅拌4分钟，随后加入NaOH(3N，7.6mL)和第二份H2O(23mL)。通过过滤除去白色沉淀物(EtOAc洗涤)，并将滤液浓缩以获得澄清黏稠油状物(S)-2-(甲基氨基)戊-4-烯-1-醇，其不经进一步纯化而使用。

将粗品(S)-2-(甲基氨基)戊-4-烯-1-醇(～93mmol)和DIEA(17.8mL)的THF(310mL)溶液在室温下搅拌，并加入一份氨基甲酸硝基苯酚酯(18.8g，93mmol)，随后加入另外的DIEA(32.4mL)。将反应搅拌40分钟，直到LC/MS显示完成，并用EtOAc(200mL)稀释，用饱和Na2CO3(3x50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩。残留物经受快速色谱法(0至100％EtOAc于己烷中)以获得白色固体(S)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-(1-羟基戊-4-烯-2-基)-1-甲脲(16.9g，2步52％)。LRMS(M+H+)m/z 301.0。

将K2CO3(8.5g)的水(100mL)溶液加入到干燥的500mL圆底烧瓶中。加入叔丁醇(100mL)，随后加入K2OsO2(OH)4(136mg，0.02当量)、(DHQD)2Pyr(363mg，0.02当量)和K3Fe(CN)6(20.3g，3当量)。将混合物在室温下搅拌，直到大多数固体已经溶解(～30分钟)。将混合物冷却至0℃，并加入一份底物(6.2g，1当量)。反应在4℃下搅拌24h。使得混合物升至室温，并用水(300mL)稀释。有机层用EtOAc(3x200mL)萃取，用无水Na2SO4干燥，并浓缩。将产生的粗物质溶解于丙酮(100mL)，并加入PTSA(400mg)。使得反应搅拌3h，并用EtOAc(100mL)稀释，加入固体Na2CO3(5g)，并混合物搅拌1h。将混合物过滤，并浓缩。残留物经受快速色谱法(0至100％EtOAc于己烷中)以获得非对映体的混合物，其在BuOAc中重结晶以获得白色固体3-(2-氯-3-氟苄基)-1-((S)-1-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-3-羟基丙-2-基)-1-甲脲(1.3g，17％)。LRMS(M+H)m/z 375.1。
实施例41(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯 方法A
0℃下，将TBAF(23mmol，1当量)滴加于1-((S)-1-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(11.4g，23mmol)的THF溶液。反应在30分钟内完成。除去溶剂。将残留物溶解于EtOAc(150mL)，并用3％柠檬酸(150mL)洗涤2次，随后加入饱和NaHCO3(100mL)和盐水(100mL)。将有机层浓缩以获得3-(2-氯-3-氟苄基)-1-((S)-1-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-3-羟基丙-2-基)-1-甲脲，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 375.4。

100℃下，将酰基叠氮化物(4.35g，22mmol，1当量)分批加入到3-(2-氯-3-氟苄基)-1-((S)-1-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-3-羟基丙-2-基)-1-甲脲(8.4g，22mmol)的甲苯(200mL)混合物。将混合物在100℃下搅拌30分钟，并浓缩至干。残留物硅胶上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得淡黄色固体(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(7.6g，64％)。LRMS(M+H+)m/z 545.1。
方法B
500mL 3口RBF设置有磁力搅拌器、加热罩、设定点控制器、热电偶套管、热电偶和氮气鼓泡器。将3-(2-氯-3-氟苄基)-1-((S)-1-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-3-羟基丙-2-基)-1-甲脲(15.7g，41.9mmol)、碘代苯二乙酸酯(27g，2.0当量)和甲基叔丁基醚(141mL)装入烧瓶。将混合物升至～55℃，并以小份加入酰胺(7.6g，1.05当量)。将反应搅拌1h。将反应冷却至室温，并通过加入饱和NaHCO3水溶液(150mL)淬灭。有机相用乙酸乙酯萃取，并且合并的有机物用水和盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥，并浓缩。残留溶剂通过DCM和己烷共沸物(3x)除去以获得固体(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(25.3g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 545.1。
实施例42(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠和(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钾的制备
(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰 脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠 氧基)戊基磷酸钾
0℃下，将HCl/二噁烷(4N，35mL)滴加于(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(7.6g，14mmol)的MeOH(35mL)溶液中。将溶液升至室温，并搅拌2h。除去溶剂。然后，加入DCM(100mL)。pH通过Et3N调节至pH 8。滤出沉淀物，且用DCM洗涤。获得6.1g所需产物，其为白色固体。将滤液浓缩，并通过HPLC纯化以获得0.4g所需产物。合并产物获得(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(6.5g，92％)。LRMS(M+H+)m/z 505.1。

-20℃下，将二叔丁基磷酰溴(5.46g，20mmol，4当量)在N2下滴加于(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(2.5g，5mmol)的无水吡啶(20mL)溶液。反应在5分钟内完成。加入EtOH(1mL)淬灭反应。除去溶剂。将残留物溶解于EtOAc。滤出吡啶HBr盐，并将滤液浓缩以获得(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二叔丁氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 697.2。

0℃下，将浓HCl(12N，8mL，20当量)滴加于以上粗品(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二叔丁氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的MeOH(8mL)溶液。将混合物搅拌30分钟，并浓缩。将残留物溶解于50mL H2O。加入NaOH水溶液(1N)将PH调节至3～4。然后加入EtOAc(50mL)。将混合物在室温下搅拌1h。然后，滤出白色固体，并用H2O和EtOAc洗涤，随后真空干燥以获得白色粉末(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(2.4g，2步86％)。LRMS(M+H)m/z 585.5。

0℃下，将NaOH溶液(0.5N，16mL，2当量)滴加于(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的MeOH(50mL)溶液。溶液在0℃下搅拌1h，并浓缩以获得白色固体(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠(定量)。固体可通过用EtOH研磨进一步结晶，随后在EtOH-H2O(6∶1)中重结晶以获得晶体形式。LRMS(M-2Na+3H+)m/z 585.5。

0℃下，将KOH溶液(0.5N，13.6mL，2当量)滴加于以上膦酸(2.0g，3.4mmol)的MeOH(20mL)溶液。将溶液搅拌1h。除去溶剂。残留物用EtOH研磨，随后在60℃下EtOH-H2O(6∶1)中重结晶以获得晶体形式的(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钾。LRMS(M-2K+3H+)m/z 585.5。
实施例43(2R，4S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠的制备
(2R，4S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠
-30℃下，将二叔丁基磷酰溴(7.88g，28.87mmol)在N2气氛下滴加于(2S，4R)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(4.7g，9.62mmol)的无水吡啶(12mL)和二氯甲烷(36mL)的溶液。将反应混合物在-30℃下剧烈搅拌75分钟，直到反应完成。然后，加入EtOH(2mL)淬灭反应。除去溶剂。残留物用EtOAc(200mL)研磨。滤出吡啶HBr盐，并将滤液浓缩以获得(2S，4R)-5-(二叔丁氧基磷酰氧基)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯，其不经进一步纯化而使用。

0℃下，将浓HCl(12N，16mL，192.4mmol)滴加于粗品(2S，4R)-5-(二叔丁氧基磷酰氧基)-2-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的MeOH(15mL)溶液。将混合物搅拌30分钟，并浓缩。将残留物溶解于50mL H2O。加入NaOH水溶液(1N)以将PH调节至3～4。然后，加入EtOAc(50mL)。混合物在室温下搅拌1h。然后，滤出白色固体，并用H2O和EtOAc洗涤，并在高真空下干燥以获得白色粉末(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(2.85g)(4.95g，2步89％)。LRMS(M-H+)m/z 567.5。

0℃下，将NaOH溶液(0.5N，20.07mL，2当量)滴加于粗品(2.85g)(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的MeOH(10mL)溶液。溶液在0℃下搅拌1h，并浓缩以获得白色固体(2R，4S)-4-(3-(2，3-二氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠(3.08g，定量)。LRMS(M-H+)m/z 567.5。固体可通过用EtOH研磨进一步结晶，随后在EtOH-H2O(6∶1)中重结晶以获得晶体形式。
实施例44(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-3-(2，2-二氟乙基氨基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-3-(2，2-二氟乙基氨基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将MsCl(0.55mL，7.04mmol)加入到(S)-1-(苄氧基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.89g，6.4mmol)的DCM(50mL)溶液，随后加入DIEA(1.27mL，7.68mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，并用DCM(300mL)稀释。有机混合物用NaHCO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。然后，将残留物溶解于DMF(20.0mL)。向该产生的溶液加入NaN3(1.25g，19.2mmol)，并将混合物在80℃下加热6h。LCMS指示反应完成。将混合物冷却至室温，并加入水(20mL)和EtOAc(200mL)。将有机层分离，用NaHCO3和盐水洗涤，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.5g，2步73％)。

将(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.5g，4.9mmol)的DMF(10.0mL)溶液加入到NaH(0.29g，7.35mmol)的DMF(10mL)溶液。将混合物在室温下搅拌30分钟，随后加入MeI(1.0mL，9.8mmol)。将产生的混合物搅拌另外的2h。LCMS指示反应完成。混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭，并用EtOAc(200mL X 2)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g，粗品)，其不经纯化而使用。

将PD/C(300mg)加入到粗品(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g，～4.90mmol)的MeOH(20mL)溶液。将混合物转移至高压釜反应器，载入氢气(45psi)，并在室温下搅拌过夜。滤出固体。将CbzCl(0.83mL，5.88mmol)和DIEA(1.22mL，7.35mmol)加入滤液，并将产生的混合物在室温下搅拌30分钟。将反应混合物减压浓缩，并溶解于EtOAc。有机混合物用NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得[(S)-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-羟基-丙基]氨基甲酸苄酯(2.2g粗品)，其不经纯化而使用(2.2g粗品)。LRMS(M+H+-Boc)m/z 239.1。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(1.16g，5.39mmol)分批加入到[(S)-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-羟基-丙基]氨基甲酸苄酯(2.2g粗混合物，4.90mmol)的甲苯(20mL)溶液，并将混合物加热至100℃，持续1h。将混合物浓缩至1/4量，并且剩余的残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得[(S)-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-丙基]-氨基甲酸苄酯(1.5g，4步58％)。LRMS(M+H+)m/z 527.3。

将HCl(4N于1，4-二噁烷中，22.5mL，90.0mmol)加入到[(S)-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-丙基]-氨基甲酸苄酯(4.58g，9.0mmol)的MeOH(7.5mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌2h，并再次溶解于EtOAc。有机混合物用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以获得异喹啉-3-基-氨基甲酸(S)-3-苄氧基羰基氨基-2-甲基氨基-丙酯(3.59g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 409.2。

室温下，将2-氯-3-氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯(2.85g，8.79mmol)和DIEA(2.3mL，13.2mmol)加入到粗品异喹啉-3-基-氨基甲酸(S)-3-苄氧基羰基氨基-2-甲基氨基-丙酯(9.0mmol)的THF(35mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。除去溶剂，并将残留物溶解于EtOAc(400mL)。有机混合物用NaOH(1N，50mL X 3)、HCl(0.5N，50mL)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得白色泡沫异喹啉-3-基-氨基甲酸(S)-3-苄氧基羰基氨基-2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-丙酯(3.8g，2步71％)。LRMS(M+H+)m/z 594.2。

将TMSI(0.35mL，2.56mmol)加入到异喹啉-3-基-氨基甲酸(S)-3-苄氧基羰基氨基-2-[3-(2-氯-3-氟-苄基)-1-甲基-脲基]-丙酯(1.3g，2.13mmol)的CH3CN(20.0mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌15分钟，并用MeOH(20.0mL)淬灭。将产生的混合物搅拌另外的15分钟，浓缩至干并在醚(30mL)和HCl(2N，20mL)之间分配。将水层分离，碱化至pH 9，并用EtOAc(200mLx2)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩以获得淡黄色泡沫状固体(S)-3-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(2.7g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z460.1。

室温下，将三氟甲磺酸2，2-二氟乙酯(94mg，0.44mmol)和DIEA(0.15mL，0.88mmol)加入到(S)-3-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(200mg，0.44mmol)的THF(2.0mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。除去溶剂。产生的残留物溶解于MeOH，并且混合物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(2，2-二氟乙基氨基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(130mg，2步56％)。LRMS(M+H+)m/z 524.2。
实施例45(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-3-(2，2-二氟乙基氨基)丙基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-3-(2，2-二氟乙基氨基)丙基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯
将Pd/C(10％，1.0g)加入到(S)-1-叠氮基-3-(苄氧基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4g，11.66mmol)的EtOH(100mL)和AcOH(10mL)溶液。将产生的混合物转移至高压釜，并载入氢气(45psi)。将反应混合物在室温下搅拌1h，并过滤。将滤液浓缩以获得(S)-1-氨基-3-(苄氧基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+Na+)m/z 317.2。

将三氟甲磺酸2，2-二氟乙酯(1.09g，5.1mmol)和DIEA(1.68mL，10.2mmol)加入到(S)-1-氨基-3-(苄氧基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(5.1mmol)的MeOH(50mL)溶液。将产生的混合物在室温下搅拌1h，随后加入Boc2O(1.67g，7.65mmol)。将混合物浓缩，并且残留物在硅胶柱上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得[(S)-3-苄氧基-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-丙基]-(2，2-二氟-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(2.42g，定量)。LRMS(M+Na+)m/z 481.2。

将Pd/C(10％，1.0g)加入到[(S)-3-苄氧基-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-丙基]-(2，2-二氟-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(2.42g，5.28mmol)的MeOH(20mL)和AcOH(2.0mL)溶液。将反应混合物转移至高压釜，并载入氢气(50psi)。将反应混合物在室温下搅拌20h，并过滤。浓缩滤液，并且残留物在硅胶上使用EtOAc和己烷的混合物纯化以获得[(S)-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-羟基-丙基]-(2，2-二氟-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(1.81g，93％)。LRMS(M+Na+)m/z391.2。

将3-(3-氟苯基)异噁唑-5-羰基叠氮化物(317mg，0-86mmol)加入到[(S)-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-羟基-丙基]-(2，2-二氟-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.86mmol)的甲苯(8.0mL)溶液。将产生的溶液在100℃下搅拌1h。将混合物冷却，并浓缩。残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得{(S)-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-[3-(3-氟-苯基)-异噁唑-5-基氨基甲酰氧基]-丙基}-(2，2-二氟-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(291mg，60％)。LRMS(M+Na+)m/z 595.2。

将TFA(1.0mL)加入到{(S)-2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-3-[3-(3-氟-苯基)-异噁唑-5-基氨基甲酰氧基]-丙基}-(2，2-二氟-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(291mg，0.62mmol)的DCM(5mL)溶液。将混合物在室温下搅拌1h，浓缩，并溶解于THF(10mL)。0℃下，向产生的溶液2-氯-3-氟苄基氨基甲酸4-硝基苯酯(220mg，0.68mmol)和TEA(0.3mL，1.24mmol)。产生的混合物在0℃下搅拌1h。除去溶剂，并且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得白色固体(S)-2-((2，3-二氟苄基)(甲基)氨基)-5-(2-甲基-6，7-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5(4H)-基)-5-氧代戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(135mg，2步39％)。LRMS(M+H+)m/z 559.2。
实施例46(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-5-(2-甲基-6，7-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5(4H)-基)-5-氧代戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-5-(2-甲基-6，7-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5(4H)-基)-5-氧代戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将LiOH(2N，1.3mL，2.6mmol)加入到(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸甲酯(220mg，0.43mmol)的1，4-二噁烷(5mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌1h，并浓缩以获得(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸锂，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 503.2。

将2-甲基-4，5，6，7-四氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶二盐酸加入到(S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)戊酸锂(0.43mmol)和HBTU(244mg，0.64mmol)在DMF(5mL)中的悬浮液。将产生的混合物在室温下搅拌1h，过滤，并在RP-HPLC上使用乙腈和水的混合物纯化以获得(S)-2-((2-氯-3-氟苄基)(甲基)氨基)-5-(2-甲基-6，7-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5(4H)-基)-5-氧代戊基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(182.1mg，2步68％)。LRMS(M+H+)m/z 622.2。
实施例47(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将樟脑磺酸(CSA)(753mg，催化剂)加入到S-(+)-5-羟基甲基-2-吡咯烷酮(7.5g，65.1mmol)和2，2-二甲氧基丙烷(DMP)(50mL)的混合物。将混合物回流2h，并真空浓缩。然后，加入新制的DMP(50mL)，并将混合物搅拌过夜。浓缩后，剩余的残留物制备型硅胶柱(己烷和乙酸乙酯)上纯化以获得淡黄色油状物(S)-3，3-二甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮(4.0g，40％)。LRMS(M+H+)m/z 156.2。

-78℃下，将nBuLi的溶液(39.1mL，0.391mmol，1.9当量)(10M)缓慢加入到二异丙胺(58.2mL，0.412mol，2.0当量)和THF(600mL)的混合物，并将产生的溶液搅拌40分钟。缓慢加入(S)-3，3-二甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮(32g，0.206mmol)的THF(50mL)溶液。将产生的浅黄色混合物在-78℃下搅拌1h。加入NFSi(84.4g，0.268mmol，1.3当量)的THF(100mL)溶液后，使得反应在低于-55℃下搅拌1h。反应用饱和NH4Cl水溶液淬灭，并将混合物升至室温。真空除去THF，且产生的残留物在EtOAc和H2O之间分配。分离各层后，水层用EtOAc进一步萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩以留下橙色残留物，其通过硅胶柱(己烷/EtOAc)纯化以获得类油状固体(S)-6，6-二氟-3，3-二甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮和(5S)-2，2-(7aS)-6-氟-3，3-二甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮(20.0g，55.8％)。LRMS(M+H+)m/z 174.2。
(5S)-2，2-(7aS)-6-氟-3，3-二甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮(20.0g，0.115mol)第二次经受相同的氟化程序以获得((S)-6，6-二氟-3，3-二甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮(15.0g，68.2％)。LRMS(M+H+)m/z192.2。

在冰水浴下，将在二噁烷中的HCl(2.65mL，4N)加入到(S)-6，6-二氟-3，3-二甲基-二氢吡咯并[1，2-c]噁唑-5(1H，3H，6H)-酮(1.35g，0.706mmol)的甲醇(10mL)溶液，然后在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。产生的残留物溶解于THF(10mL)，并加入TEA(5mL)。将产生的溶液搅拌1h。将反应混合物浓缩以获得粗混合物。通过快速柱色谱法纯化(己烷/EtOAc)获得(S)-3，3-二氟-5-(羟基甲基)吡咯烷-2-酮(0.80g 75％)。LRMS(M+H+)m/z 152.2。

将二叔丁基-二碳酸酯(83.4g，0.382mol)加入到(S)-3，3-二氟-5-(羟基甲基)吡咯烷-2-酮(28.9g，0.191mol)、三乙胺(53.2mL，0.382mol)和DMAP(11.7g，0.0955mol)在THF(200mL)中的混合物。将反应混合物搅拌2h，并浓缩。产生的残留物用甲醇(200mL)稀释，并加入氰化钾(3.6g，0.0955mol)。将产生的混合物搅拌1h。真空除去溶剂，并且产生的残留物在DCM和H2O之间分配。分离各层后，水层用DCM进一步萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩，并且产生的残留物通过硅胶柱(己烷/EtOAc)纯化以获得(S)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-(叔丁氧基羰氧基)-2，2-二氟戊酸甲酯(44.1g，60％)。LRMS(M+Na+)m/z 406.4。

0℃下，将氢化钠(60％，7.2g，0.18mol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-(叔丁氧基羰氧基)-2，2-二氟戊酸甲酯(46.0g，0.12mol)和MeI(15.0mL，0.24mol)在DMF(300mL)中的混合物。将反应混合物在0℃下搅拌3h，并且LC-MS显示反应完成。反应用饱和NH4Cl溶液淬灭，并过滤。将滤液浓缩以除去大部分DMF，并将残留物溶解于EtOAc(1.5L)。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥。将有机层合并，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱(己烷/EtOAc)上纯化以获得(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁氧基羰氧基)-2，2-二氟戊酸甲酯(42g，88％)。LRMS(M+Na+)m/z 420.4。

0℃下，将在THF中的硼氢化锂(79.3mL，2M，0.159mol)加入到(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁氧基羰氧基)-2，2-二氟戊酸甲酯(42.0g，0.106mol)的THF(300mL)溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1h，并在室温下搅拌2h。LC-MS显示反应完成。将反应混合物浓缩，并在EtOAc和H2O之间分配。分离各层后，水层用EtOAc进一步萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩，并且产生的残留物通过硅胶柱(己烷/EtOAc)纯化以获得(S)-1-(叔丁氧基羰氧基)-4，4-二氟-5-羟基戊-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(35.3g，90％)。LRMS(M+Na+)m/z 392.4。

0℃下，将三氟甲磺酸酐(19.3mL，0.115mol)加入到(S)-1-(叔丁氧基羰氧基)-4，4-二氟-5-羟基戊-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(35.3g，0.0956mol)和卢剔啶(22.2mL，0.191mol)在DCM(300mL)中的混合物。将反应混合物在0℃下搅拌1h。LC-MS显示反应完成。将反应混合物浓缩。将产生的残留物溶解于DMF(100mL)，并加入叠氮化钠(62.1g，0.956mol)。反应混合物在室温下搅拌过夜。反应溶液在EtOAc和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。分离各层后，水层用EtOAc进一步萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩，并且产生的残留物通过硅胶柱(己烷/EtOAc)纯化以获得(S)-5-叠氮基-1-(叔丁氧基羰氧基)-4，4-二氟戊-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.0956mol，100％)。LRMS(M+Na+)m/z 417.4。

将盐酸(4.0M于1，4-二噁烷中，240mL，0.596mol)加入到(S)-5-叠氮基-1-(叔丁氧基羰氧基)-4，4-二氟戊-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(95.6mmol)的甲醇(10mL)溶液。将产生的溶液搅拌过夜。除去溶剂，并将剩余的残留物减压干燥以获得(S)-5-叠氮基-4，4-二氟-2-(甲基氨基)戊-1-醇HCl盐，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 195.3。

将邻(4-硝基苯基)-N-(2-氯-3-氟苄基)氨基甲酸酯(34.1g，0.105mol)加入到(S)-5-叠氮基-4，4-二氟-2-(甲基氨基)戊-1-醇HCl盐(95.6mmol)和DIEA(33.3mL，0.191mol)的THF(300mL)溶液。将产生的混合物在室温下搅拌1h。除去溶剂，并且产生的残留物在硅胶柱(DCM/MeOH)上纯化以获得(S)-1-(5-叠氮基-4，4-二氟-1-羟基戊-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(25.4g，70％)。LRMS(M+H+)m/z 380.4。

将6-氟异喹啉-3-羰基叠氮化物(17.4g，0.0803mol)加入到(S)-1-(5-叠氮基-4，4-二氟-1-羟基戊-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(25.4g，0.0669mol)和甲苯(500mL)的溶液。将产生的溶液在100℃下搅拌2h，并浓缩，并且剩余的残留物在硅胶柱(DCM/MeOH)上纯化以获得(S)-5-叠氮基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(25.0g，84.7％)。LRMS(M+H+)m/z 568.5。

将三苯基膦(13.9g，0.0529mol)和HCl水溶液(53mL，2N，0.106mol)加入到(S)-5-叠氮基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(25.0g，0.0441mol)、THF(300mL)和水(100mL)的混合物。将产生的混合物在室温下搅拌1h，并浓缩至约200mL。然后加入水(200mL)。产生的混合物(pH＜4)用EtOAc(300mL)萃取，并弃去EtOAc溶液。通过加入NaOH(2N)，将剩余的水溶液调节至pH＞8，并用DCM(200mL X 3)萃取。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥。将有机层合并，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱(DCM/MeOH)上纯化以获得(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(12.1g，50.7％)。LRMS(M+H+)m/z 542.5。
实施例48(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯
0℃下，将氯甲酸异丁酯(6.05mL，0.0463mol)加入到(S)-2-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)-4-叔丁氧基-4-氧代丁酸二环己铵盐(20g，0.0386mol)和Et3N(7.90mL，0.0579mol)在THF(500mL)中的混合物。将反应混合物搅拌1h，并过滤以除去TEA盐。0-5℃下，向该滤液加入NaBH4(2.19g，0.0579mol)的THF(50mL)和水(100mL)的溶液。反应混合物在室温下搅拌1h，并用饱和NH4Cl溶液淬灭。将反应混合物浓缩以除去大部分THF，并用EtOAc(700mLx3)萃取。有机层用水、NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩以获得(S)-3-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)-4-羟基丁酸叔丁酯(10g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+Na+)m/z 346.1。

将异喹啉-3-羰基叠氮化物(2.94g，14.9mmol)加入到(S)-3-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)-4-羟基丁酸叔丁酯(4.0g，12.4mmol)和甲苯(100mL)的混合物中。将产生的混合物在100℃下搅拌2h。除去溶剂，且剩余的残留物在硅胶柱(己烷/EtOAc)上纯化以获得(S)-3-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)-4-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)丁酸叔丁酯(3.6g，58.9％)。LRMS(M+H+)m/z 494.1。

将10％Pd-C(500mg)加入到(S)-3-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)-4-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)丁酸叔丁酯(1.8g，3.65mmol)和MeOH(5mL)的溶液。将产生的混合物在12psi的氢气下搅拌1h。将混合物过滤，并浓缩，且剩余的残留物被真空干燥以获得(S)-4-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-3-(甲基氨基)丁酸叔丁酯(1.3g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 360.1。

将邻(4-硝基苯基)-N-(2-氯-3-氟苄基)氨基甲酸酯(1.78g，0.00547mol)加入到(S)-4-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)-3-(甲基氨基)丁酸叔丁酯(1.3g，3.65mmol)和DIEA(1.27mL，7.3mmol)在THF(50mL)中的混合物。将产生的混合物在室温下搅拌2h，并用EtOAc(100mL)稀释。有机层通过NaHCO3溶液洗涤，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱(己烷/EtOAc)上纯化以获得(S)-3-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)丁酸叔丁酯(1.1g，55.3％)。LRMS(M+H+)m/z 545.1。

将TFA(10mL)加入到(S)-3-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)丁酸叔丁酯(0.8g，1.47mmol)和DCM(10mL)的混合物中。将产生的溶液在室温下搅拌1h。将混合物浓缩，且剩余的残留物真空干燥以获得(S)-3-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)丁酸(1.3g)，其不经进一步纯化而使用。LRMS(M+H+)m/z 489.1。

将DIEA(0.512mL，2.94mmol)和HBTU(0.667g，1.76m mol)加入到粗品(S)-3-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-(异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)丁酸(1.47mmol)和DMF(5mL)的混合物。将产生的混合物在室温下搅拌10分钟，并加入2-氨基甲基吡嗪(0.192g，1.76mmol)。产生的混合物在室温下搅拌30分钟。混合物用EtOAc(100mL)稀释。有机层通过NaHCO3溶液洗涤，并浓缩。产生的残留物在硅胶柱(DCM/MeOH)上纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-氧代-4-(吡嗪-2-基甲基氨基)丁基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.65g，76.2％)。LRMS(M+H+)m/z 580.1。

将磷酰氯(0.514mL，0.00561mol)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-氧代-4-(吡嗪-2-基甲基氨基)丁基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(650mg，1.12mmol)和DCM(50mL)的混合物。将产生的混合物在室温下搅拌过夜。将产生的溶液浓缩。产生的残留物在制备型HPLC(ACN/H2O和0.1％HCOOH)上纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(咪唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.27g，43％)。LRMS(M+H+)m/z562.1。

将10％Pd-C(100mg)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(咪唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(100mg，0.178mmol)和MeOH(5mL)的溶液。将产生的混合物在12psi的氢气下搅拌5h。将混合物过滤，并浓缩。产生的残留物在制备型HPLC(ACN/H2O和0.1％HCOOH)上纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-(5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)丙基异喹啉-3-基氨基甲酸酯(35mg，35％)。LRMS(M+H+)m/z 566.1。
实施例49(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(3-(2-羟基乙基)脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(3-(2-羟基乙基)脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯
将异氰酸基乙酸乙酯(0.108mL，0.950mmol)加入到(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.40g，0.792mmol)、DIEA(0.276mL，1.58mmol)和THF(2mL)的混合物。将混合物回流30分钟，并浓缩。剩余的残留物在硅胶柱(DCM/MeOH)上纯化以获得(S)-1-(2-氯-3-氟苯基)-5-((6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)甲基)-4-甲基-3，10-二氧代-2，4，9，11-四氮杂十三-13-酸乙酯(0.40g，80％)。LRMS(M+H+)m/z635.6。

0℃下，将在THF中的硼氢化锂(1.57mL，2M，3.15mmol)加入到(S)-1-(2-氯-3-氟苯基)-5-((6-氟异喹啉-3-基氨基甲酰氧基)甲基)-4-甲基-3，10-二氧代-2，4，9，11-四氮杂十三-13-酸乙酯(0.40g，0.63mmol)的THF(20mL)溶液。将反应在0℃下搅拌10分钟。将MeOH(1mL)加入到反应溶液，并将产生的溶液在室温下搅拌2h。反应用饱和NH4Cl溶液淬灭。产生的残留物在EtOAc和H2O之间分配。水层用EtOAc进一步萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩，并且产生的残留物通过硅胶柱(己烷/EtOAc)纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(3-(2-羟基乙基)脲基)戊基6-氟异喹啉-3-基氨基甲酸酯(0.34g，91％)。LRMS(M+Na+)m/z 593.6。
实施例50(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯的制备
(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯
100℃下，将3-苯基异噁唑-5-羰基叠氮化物(0.3g，1.4mmol，1.0当量)加入到3-(2-氯-3-氟苄基)-1-((S)-1-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-3-羟基丙-2-基)-1-甲脲(0.52g，1.4mmol，1.0当量)的甲苯(20mL)溶液。将溶液搅拌1h。除去溶剂，且剩余的残留物在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯(0.42g，60％)。LRMS(M+H+)m/z 561.1。

0℃下，将HCl/二噁烷(4N，3mL)加入到(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-3-((R)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)丙基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯(0.4g，0.7mmol，1.0当量)的MeOH(5mL)溶液。将混合物升至室温，并搅拌1h，浓缩并在硅胶柱上使用DCM和MeOH的混合物纯化以获得(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯(0.35g，96％，白色固体)。LRMS(M+H+)m/z 521.1。
实施例51(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠的制备
(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠
℃下，将氯磷酸二乙酯(0.20mL，1.44mmol，3.0当量)滴加于(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，5-二羟基戊基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯(0.25g，0.48mmol，1.0当量)、DMAP(0.23g，1.92mmol，4.0当量)和DIEA(0.33mL，1.92mmol，4.0当量)在DCM(50mL)中的混合物。反应在5分钟内用EtOH淬灭，随后用饱和NaHCO3处理。将有机层浓缩，且产生的残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二乙氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯(56mg，20％)。LRMS(M+H+)m/z 657.1。

℃下，将TMSI(0.115mL，0.85mmol，10.0当量)加入到(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(二乙氧基磷酰氧基)-4-羟基戊基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯(56mg，0.085mmol，1.0当量)在乙腈(5mL)中的混合物。在室温下搅拌10分钟后，反应用MeOH淬灭。除去溶剂，且产生的残留在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物(具有0.1％TFA缓冲剂)纯化。将产物的部分浓缩，溶解于甲醇和水(2∶1)的混合物，随后加入HCl(4N于1，4-二噁烷中，2mL)。将混合物浓缩以获得白色固体(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯(48mg，94％)。LRMS(M+H+)m/z 601.5。

0℃下，将NaOH(0.1N，1.6mL，2.0当量)滴加于(2S，4R)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4-羟基-5-(膦酰氧基)戊基3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酸酯(48mg，0.08mmol，1.0当量)的混合物。混合物在室温下搅拌1h，随后浓缩以获得白色固体(2R，4S)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-2-羟基-5-(3-苯基异噁唑-5-基氨基甲酰氧基)戊基磷酸钠(55mg，定量)。LRMS(M-2Na+3H+)m/z 601.5。
实施例52(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯
0℃下，将TMSOTf(23.7mL，131mmol，1.2当量)滴加于(S)-4-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酸甲酯(41g，109mmol，1.0当量)、卢剔啶(19mL，163mmol，1.5当量)在DCM(400mL)中的混合物。将溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，且残留物不经进一步纯化而使用。

将2-氯-3-氟苄胺(19.1g，120mmol，1.1当量)和DIEA(46mL，264mmol，2.2当量)的THF(100mL)溶液加入到4-硝基苯基氯甲酸酯(24.22g，120mmol，1.1当量)的THF(100mL)溶液。将产生的溶液在室温下搅拌20分钟。将反应混合物加入到(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(甲基氨基)戊酸甲酯(30g，109mmol，1.0当量)、DIEA(23mL，132mmol，1.1当量)的THF(100mL)溶液。产生的混合物在室温下搅拌1h。除去溶剂，并将产生的残留物溶解于EtOAc(300mL)，并用盐水(400mL)、饱和Na2CO3(400mL)和盐水(400mL)洗涤。将有机层浓缩，并且残留物在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得淡黄色固体(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸甲酯(32.6g，65％)。LRMS(M+H+)m/z 461.1。

将LiOH(1N，34.5mL，3当量)滴加于(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸甲酯(5.3g，11.5mmol，1.0当量)的二噁烷(60mL)溶液。将溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，并且残留物不经进一步纯化而使用。

将HBTU(5.69g，15mmol，1.5当量)、1-N-Boc-哌嗪(2.79g，15mmol，1.5当量)和DIEA(5.21mL，30mmol，3.0当量)依次加入到(S)-5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酸(4.46g，10mmol，1.0当量)的DMF(50mL)溶液。反应在15分钟内完成。将醚(100mL)和盐水(100mL)加入到反应混合物。将有机层干燥，并浓缩。残留物在硅胶柱上使用己烷和EtOAc的混合物纯化以获得(S)-4-(5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.2g，68％)。LRMS(M+H+)m/z 615.2。

将HCl(2N，0.68mL，1.36mmol，0.2当量)加入到(S)-4-(5-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.2g，6.8mmol，1.0当量)的MeOH(35mL)溶液。将反应在室温下搅拌1h。加入NaHCO3(1.1g，13.6mmol，2.0当量)以淬灭反应。除去溶剂。将残留物溶解于EtOAc(100mL)。滤掉盐，并将滤液浓缩以获得(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.4g，定量)。LRMS(M+H+)m/z 501.2。

100℃下，将3-(3-氟苯基)异噁唑-5-羰基叠氮化物(0.13g，0.6mmol，1.0当量)加入到(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.30g，0.6mmol，1.0当量)的甲苯(10mL)溶液中。将溶液搅拌1h。除去溶剂，并且残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酰氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.3g，60％)。LRMS(M+H+)m/z705.1。

0℃下，将HCl/二噁烷(4N，0.9mL，3.6mmol，10当量)加入到(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酰氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.3g，0.36mmol，1.0当量)的MeOH(2mL)溶液。将溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，并且残留物在RP-HPLC上使用具有0.1％TFA的乙腈和H2O的混合物纯化。洗脱液用EtOAc(10mL)稀释，然后用饱和NaHCO3碱化。将有机层干燥，并浓缩以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯(0.2g，92％)。LRMS(M+H+)m/z 605.1。
实施例53(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基5-(3-氟苯基)异噁唑-3-基氨基甲酸酯的制备
(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基5-(3-氟苯基)异噁唑-3-基氨基甲酸酯
100℃下，将5-(3-氟苯基)异噁唑-3-羰基叠氮化物(0.13g，0.6mmol，1.0当量)加入到(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-羟基戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.30g，0.6mmol，1.0当量)的甲苯(10mL)溶液中。将混合物搅拌1h。除去溶剂，并且残留物在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(5-(3-氟苯基)异噁唑-3-基氨基甲酰氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.3g，60％)。LRMS(M+H+)m/z7051。

0℃下，将HCl/二噁烷(4N，0.9mL，3.6mmol，10当量)加入到(S)-4-(4-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-(5-(3-氟苯基)异噁唑-3-基氨基甲酰氧基)戊酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.3g，0.36mmol，1.0当量)的MeOH(2mL)溶液中。将溶液在室温下搅拌1h。除去溶剂，且残留物在RP-HPLC上使用具有0.1％TFA的乙腈和H2O的混合物纯化。稀释液用EtOAc(10mL)稀释，然后用饱和NaHCO3碱化。将有机层干燥，并浓缩以获得(S)-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-5-氧代-5-(哌嗪-1-基)戊基5-(3-氟苯基)异噁唑-3-基氨基甲酸酯(0.18g，90％)。LRMS(M+H+)m/z 605.1。
实施例54(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯的制备
(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯
将2-氯-3-氟苄胺(1.27g，8mmol)和DIEA(2.78mL，16mmol，2.0当量)的THF(10mL)溶液加入到4-硝基苯基氯甲酸酯(1.62g，8mmol)的THF(10mL)溶液。将产生的混合物在室温下搅拌20分钟，并加入到(S)-5-叠氮基-4，4-二氟-2-(甲基氨基)戊-1-醇(1.5g，8.0mmol，1.0当量)、DIEA(2.78mL，16mmol)和THF(10mL)的混合物。将产生的混合物在室温下搅拌1h。除去溶剂，并在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得白色固体(S)-1-(5-叠氮基-4，4-二氟-1-羟基戊-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(2.6g，86％)。LRMS(M+H+)m/z 380.1。

100℃下，将3-(3-氟苯基)异噁唑-5-羰基叠氮化物(0.19g，0.8mmol，1.0当量)加入到(S)-1-(5-叠氮基-4，4-二氟-1-羟基戊-2-基)-3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲脲(0.30g，0.8mmol，1.0当量)的甲苯(20mL)溶液中。将混合物在100℃下搅拌1h。将混合物浓缩，并在RP-HPLC上使用乙腈和H2O的混合物纯化以获得白色固体(S)-5-叠氮基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯(0.33g，71％)。LRMS(M+H+)m/z 584.1。

将10％Pd/C(0.1g)加入到(S)-5-叠氮基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯(0.35g，0.6mmol)在MeOH(2mL)中的混合物。将混合物转移至高压釜反应器，载入10psi氢气，并搅拌10分钟。滤掉催化剂，并将滤液浓缩。残留物在RP-HPLC上使用具有0.1％TFA的乙腈和H2O的混合物纯化。稀释液用饱和NaHCO3洗涤。将有机层浓缩以获得白色固体(S)-5-氨基-2-(3-(2-氯-3-氟苄基)-1-甲基脲基)-4，4-二氟戊基3-(3-氟苯基)异噁唑-5-基氨基甲酸酯(0.18g，54％)。LRMS(M+H+)m/Z 558.1。
实施例55 使用含有以下试剂的丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶偶联ATP酶测定进行筛选测定钾PIPES(50mM)、MgCl2(3mM)、KCl(100mM)、ATP(0.15mM)、DTT(1mM)、BSA(0.1mg/ml)、NADH(0.5mM)、PEP(1.5mM)、丙酮酸激酶(4U/ml)、乳酸脱氢酶(8U/ml)和防沫剂(50ppm)(表达的浓度是最终测定浓度)。22℃下，通过加入氢氧化钾将pH调节至6.80。用含有以下试剂的更加敏感的丙酮酸激酶/辣根过氧物酶/丙酮酸氧化酶偶联ATP酶测定进行先导物优化测定钾PIPES(12mM)、MgCl2(2mM)、KCl(100mM)、ATP(0.15mM)、BSA(0.05mg/ml)、磷酸钾(2mM)、amplex红(amplex red)(0.1mM)、PEP(0.1mM)、丙酮酸激酶(4U/ml)、辣根过氧物酶(0.5U/ml)、丙酮酸氧化酶(0.5U/ml)和防沫剂(50ppm)(表达的浓度是最终测定浓度)。22℃下，通过加入氢氧化钾将pH调节至7.00。
对这一测定具有特异性的蛋白质组分是鸡胗平滑肌肌球蛋白亚片段-1，其已经使用过量的1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺化学地交联于心肌动蛋白或骨骼肌动蛋白。通过滴定以实现所需的ATP水解的速率，经验地确定测定中交联平滑肌肌球蛋白的精确浓度。由于每种制剂中活性分子的部分的变化，浓度在各蛋白质制剂之间变化。
通过首先制备测试化合物的稀释系列进行化合物剂量响应测定，稀释系列中的每一个具有含有以下的测定混合物钾PIPES、MgCl2、KCl、ATP、BSA、磷酸钾、amplex红、PEP、交联平滑肌肌动球蛋白(亚片段-1)、防沫剂和水。通过加入等体积的含有以下的溶液启动测定钾Pipes、MgCl2、KCl、BSA、磷酸钾、丙酮酸激酶、辣根过氧物酶、丙酮酸氧化酶、防沫剂和水。通过测量amplex红的荧光(480nm激发，615nm发射)监控ATP水解。通过4参数方程y＝谷值+((峰值-谷值)/(1+((IC50/X)^峰高(hill))))拟合产生的剂量响应曲线。IC50被定义为ATP酶活性在剂量响应曲线的峰值和谷值之间的中间值时的浓度。
本文描述的某些化学个体具有小于10μM的IC50；例如小于1μM。
实施例56 使用与本文描述的那些程序相似的程序，合成并测试以下表中的化合物。
尽管已经参考本发明的具体的实施方案来描述本发明，但本领域技术人员应理解，可进行多种变化，且等同物可以被替代，而不脱离本发明的真正精神和范围。此外，可进行许多改良以使特定的情况、物质、物质组合、过程、一个或多个过程步骤符合本发明的目的、精神和范围。所有这种改良期望属于附加于此的权利要求的范围内。
权利要求
1.选自式I的化合物及其药学上可接受的盐的至少一种化学个体
式I
其中
W1和W2独立地选自CR11R12、NR13和O；条件是W1和W2中的至少一个是NR13；
W3选自CR1R2、NR14和O；
Z1选自杂芳基和杂环烃基；
Z2选自芳基、杂芳基和杂环烃基；
R8选自氢、任选地取代的烃基、任选地取代的环烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基和任选地取代的杂环烃基；
R1、R2、R11和R12独立地选自氢、羟基、羧基、磺酰基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的氨基羰氧基、任选地取代的酰氧基、任选地取代的烷氧基羰氧基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基羰基和任选地取代的氨基磺酰基；或R1和R2可任选地与任何插入原子连接到一起以形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的基团；
R13和R14独立地选自氢、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基；
对于每次出现时，R3、R4、R5和R6独立地选自氢、羟基、羧基、磺酰基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的炔基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的氨基羰氧基、任选地取代的酰氧基、任选地取代的烷氧基羰氧基、任选地取代的酰基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烃基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基羰基和任选地取代的氨基磺酰基；或R5和R6一起形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的任选地取代的环；
或R1和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的基团；
或R14和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环；
或如果W1是NR13，则R13和R1可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环；
或如果W1是NR13，则R13和一个出现的R5可任选地与任何插入原子连接到一起以形成任选地取代的杂环烃基环；
R7和R10独立地选自氢、氰基、卤代、羟基、叠氮基、硝基、羧基、亚磺酰基、硫烷基、任选地取代的烷氧基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的杂芳氧基、任选地取代的杂环烷氧基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的芳氧基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂环烃基、任选地取代的氨基、任选地取代的酰基、任选地取代的烷氧基羰基、任选地取代的氨基羰基、任选地取代的氨基磺酰基、任选地取代的甲脒基和任选地取代的炔基；
m选自0、1、2和3；
n选自0、1、2、3和4；
p选自0、1、2和3；且
q选自1、2、3和4。
2.如权利要求1所述的至少一种化学个体，其中W1是NR13。
3.如权利要求2所述的至少一种化学个体，其中R13选自氢和任选地取代的低级烃基。
4.如权利要求3所述的至少一种化学个体，其中R13选自氢和低级烃基。
5.如权利要求4所述的至少一种化学个体，其中R13是氢。
6.如权利要求1所述的至少一种化学个体，其中W1是CR11R12。
7.如权利要求6所述的至少一种化学个体，其中R11和R12各自独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
8.如权利要求7所述的至少一种化学个体，其中R11和R12各自独立地选自氢和低级烃基。
9.如权利要求8所述的至少一种化学个体，其中R11和R12都是氢。
10.如权利要求1所述的至少一种化学个体，其中W1是O。
11.如权利要求1至5中任一项所述的至少一种化学个体，其中W2是CR11R12。
12.如权利要求11所述的至少一种化学个体，其中R11和R12各自独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
13.如权利要求12所述的至少一种化学个体，其中R11和R12各自独立地选自氢和低级烃基。
14.如权利要求13所述的至少一种化学个体，其中R11和R12都是氢。
15.如权利要求1至10中任一项所述的至少一种化学个体，其中W2是NR13。
16.如权利要求15所述的至少一种化学个体，其中R13选自氢和任选地取代的低级烃基。
17.如权利要求16所述的至少一种化学个体，其中R13选自氢和低级烃基。
18.如权利要求17所述的至少一种化学个体，其中R13是氢。
19.如权利要求1至5中任一项所述的至少一种化学个体，其中W2是O。
20.如权利要求1至19中任一项所述的至少一种化学个体，其中W3是CR1R2。
21.如权利要求20所述的至少一种化学个体，其中R1和R2独立地选自氢和任选地取代的烃基。
22.如权利要求21所述的至少一种化学个体，其中R1和R2独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
23.如权利要求22所述的至少一种化学个体，其中R1和R2独立地选自氢和低级烃基。
24.如权利要求23所述的至少一种化学个体，其中R1和R2独立地选自氢和甲基。
25.如权利要求6、11或20所述的至少一种化学个体，其中R1和R2与它们所连接的碳一起形成选自任选地取代的环烃基和任选地取代的杂环烃基的基团。
26.如权利要求25所述的至少一种化学个体，其中R1和R2与它们所连接的碳一起形成选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、哌啶基和四氢吡喃基的基团，它们中的任何一个被任选地取代。
27.如权利要求26所述的至少一种化学个体，其中R1和R2与它们所连接的碳一起形成选自哌啶和四氢吡喃的基团，它们中的任何一个用2-氨基乙酰基或2-(叔丁氧羰基氨基)乙酰基任选地取代。
28.如权利要求27所述的至少一种化学个体，其中R1和R2与它们所连接的碳一起形成选自四氢吡喃、1-(2-(叔丁氧羰基氨基)乙酰基)哌啶-4-基和1-(2-氨基乙酰基)哌啶-4-基的基团。
29.如权利要求1至19中任一项所述的至少一种化学个体，其中W3是NR14。
30.如权利要求29所述的至少一种化学个体，其中R14选自氢和任选地取代的低级烃基。
31.如权利要求30所述的至少一种化学个体，其中R14选自氢、低级烃基和烃基用选自以下的一个或两个基团取代的低级烃基羟基、任选地取代的氨基和任选地取代的烷氧基。
32.如权利要求31所述的至少一种化学个体，其中R14选自氢、甲基、乙基、丙基和异丙基，其中甲基、乙基、丙基和异丙基用选自以下的一个或两个基团任选地取代羟基、任选地取代的氨基和任选地取代的烷氧基。
33.如权利要求32所述的至少一种化学个体，其中R14选自氢、甲基、乙基、丙基和异丙基，其中甲基、乙基、丙基和异丙基用一个或两个羟基任选地取代。
34.如权利要求33所述的至少一种化学个体，其中R14选自甲基、乙基、羟基甲基、2-羟基乙基和异丙基。
35.如权利要求34所述的至少一种化学个体，其中R14选自甲基和乙基。
36.如权利要求1至35中任一项所述的至少一种化学个体，其中R8选自氢和任选地取代的低级烃基。
37.如权利要求36所述的至少一种化学个体，其中R8选自氢和低级烃基。
38.如权利要求37所述的至少一种化学个体，其中R8选自氢和甲基。
39.如权利要求38所述的至少一种化学个体，其中R8是氢。
40.如权利要求1至39中任一项所述的至少一种化学个体，其中q是2。
41.如权利要求1至39中任一项所述的至少一种化学个体，其中q是1。
42.如权利要求1至41中任一项所述的至少一种化学个体，其中R5选自氢、任选地取代的低级烃基和任选地取代的烯基。
43.如权利要求1至41中任一项所述的至少一种化学个体，其中R6选自氢和任选地取代的低级烃基。
44.如权利要求43所述的至少一种化学个体，其中R6选自氢和低级烃基。
45.如权利要求44所述的至少一种化学个体，其中R6是氢。
46.如权利要求1所述的至少一种化学个体，其中W2是NH，W1是O，且W3是CR1R2。
47.如权利要求1所述的至少一种化学个体，其中W2是NH，W1是CH2，且W3是NR14。
48.如权利要求1所述的至少一种化学个体，其中W2是NH，W1是O，且W3是NR14。
49.如权利要求1至48中任一项所述的至少一种化学个体，其中m是0。
50.如权利要求1至48中任一项所述的至少一种化学个体，其中m选自1和2，且每个R7选自卤代和任选地取代的烃基。
51.如权利要求40所述的至少一种化学个体，其中每个R7选自卤代和任选地取代的低级烃基。
52.如权利要求51所述的至少一种化学个体，其中每个R7选自卤代和低级烃基。
53.如权利要求52所述的至少一种化学个体，每个R7选自氯代、氟代和甲基。
54.如权利要求53所述的至少一种化学个体，其中-(R7)m与其所连接的Z2一起形成选自以下的基团2-氯苯基、2-甲基苯基、2-氯-4-氟苯基、2-氯-3-氟苯基、2，3-二氯苯基、2，3-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基和3-氯-2-氟苯基。
55.如权利要求1至54中任一项所述的至少一种化学个体，其中n选自1和2。
56.如权利要求55所述的至少一种化学个体，其中n是1。
57.如权利要求1至56中任一项所述的至少一种化学个体，其中每个R3和R4独立地选自氢和任选地取代的低级烃基。
58.如权利要求57所述的至少一种化学个体，其中每个R3和R4独立地选自氢、甲基、乙基、异丙基和羟基甲基。
59.如权利要求58所述的至少一种化学个体，其中每个R3和R4是氢。
60.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中Z1是杂芳基，p选自0、1和2，且R10选自卤代、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基、任选地取代的杂环烃基和任选地取代的芳基。
61.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中p是0，且Z1选自2，7-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、1，3，4-噻二唑基、吡啶基、喹啉基、噻唑基、噻吩基和吡咯并[1，2-c]嘧啶基。
62.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中p是0，且Z1选自异喹啉基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、1，3，4-噻二唑基、吡啶基、喹啉基、噻唑基、噻吩基和吡咯并[1，2-c]嘧啶基。
63.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中p是0，且Z1是异喹啉-3-基。
64.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中p是0，且Z1是2，7-萘啶-3-基。
65.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中Z1选自异喹啉-3-基、异噁唑-5-基、异噁唑-3-基、苯并[d]噻唑-2-基、苯并[d]噁唑-2-基、1，3，4-噻二唑-2-基、吡啶-2-基、喹啉-2-基、喹啉-3-基、噻唑-5-基、噻吩-2-基和吡咯并[1，2-c]嘧啶-3-基，p选自1和2，且每个R10独立地选自卤代、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基和任选地取代的芳基。
66.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中Z1选自异喹啉-3-基、苯并[d]噻唑-2-基、苯并[d]噁唑-2-基、1，3，4-噻二唑-2-基、吡啶-2-基、喹啉-2-基、喹啉-3-基、噻唑-5-基、噻吩-2-基和吡咯并[1，2-c]嘧啶-3-基，p选自1和2，且每个R10独立地选自卤代、任选地取代的烃基、任选地取代的烯基和任选地取代的芳基。
67.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中Z1是异喹啉-3-基，p选自1和2，且每个R10独立地选自卤代。
68.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中Z1是异噁唑-5-基，p是1，且R10选自任选地取代的苯基。
69.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中Z1是异噁唑-3-基，p是1，且R10选自任选地取代的苯基。
70.如权利要求1至59中任一项所述的至少一种化学个体，其中Z1是1，3，4-噻二唑-2-基，p是1，且R10选自任选地取代的苯基。
71.如权利要求1至70中任一项所述的至少一种化学个体，其中Z2是苯基。
72.一种药物组合物，所述药物组合物包括药学上可接受的载体和权利要求1至71中任一项所述的至少一种化学个体。
73.如权利要求72所述的药物组合物，其中所述组合物被配制成选自片剂、胶囊、粉剂、液体、悬浮液、栓剂和气溶胶的形式。
74.一种包装的药物组合物，所述包装的药物组合物包括权利要求72或73所述的药物组合物和使用所述组合物治疗患有与平滑肌肌球蛋白或非肌肉肌球蛋白相关的疾病的患者的说明书。
75.如权利要求74所述的包装的药物组合物，其中与平滑肌肌球蛋白相关的疾病选自高血压、哮喘、慢性阻塞性肺病哮喘、支气管收缩疾病、青光眼和其他眼部适应症、失禁和其他膀胱功能障碍、肠易激综合征、早产、食道蠕动异常、中风、蛛网膜下出血、经前痛性痉挛、勃起功能障碍和与平滑肌肌球蛋白和/或非肌肉肌球蛋白相关的其他急性和慢性疾病和疾患。
76.一种治疗或缓解哺乳动物的与平滑肌肌球蛋白或非肌肉肌球蛋白相关的疾病的方法，所述方法包括向需要其的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求1至71中任一项所述的至少一种化学个体。
77.如权利要求76所述的方法，其中所述与平滑肌肌球蛋白相关的疾病选自高血压、哮喘、慢性阻塞性肺病哮喘、支气管收缩疾病、青光眼和其他眼部适应症、失禁和其他膀胱功能障碍、肠易激综合征、早产、食道蠕动异常、中风、蛛网膜下出血、经前痛性痉挛、勃起功能障碍和与平滑肌肌球蛋白和/或非肌肉肌球蛋白相关的其他急性和慢性疾病和疾患。
78.一种治疗或缓解哺乳动物的与气道壁重塑相关的疾病的方法，所述方法包括向需要其的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求1至71中任一项所述的至少一种化学个体。
全文摘要
描述了调节平滑肌肌球蛋白和/或非肌肉肌球蛋白的化学个体、治疗与平滑肌肌球蛋白和/或非肌肉肌球蛋白相关的疾病和疾患的药物组合物和方法。
文档编号C12N9/12GK101821279SQ200880111558
公开日2010年9月1日 申请日期2008年8月11日 优先权日2007年8月15日
发明者钱向平, 庄智媛(格瑞斯), 卢普平, 姚冰, 陆清(凯文), 姜红霞, 王文月, 布拉德利·P·摩根, 小戴维·摩根斯 申请人:赛特凯恩蒂克公司