专利名称：一种快速检测生物安全柜交叉污染保护达标的方法
技术领域：
本发明属于微生物检测技术领域，涉及一种快速检测生物安全柜交叉污染保护达 标的方法。
背景技术：
生物安全柜作为一种新兴的安全防护设备广泛应用于生物、医药等行业，运用精 密负压发生技术以避免在原始培养物、菌毒株和诊断标本等传染性实验材料操作时可能产 生的传染性气溶胶扩散，避免交叉污染，实现对操作人员及环境的保护。在生物安全柜中操 作具有感染性的实验材料，可将操作过程中产生的感染性气溶胶局限在安全柜内，避免有 害或有潜在危害的微生物粒子对实验产品、实验室及其周围环境和生态造成危害或潜在危 险，从而保护生产或实验对象，保护生态环境和人体健康。其中生物安全柜的产品交叉污染保护项目是生物安全柜检测项目中最重要的指 标，生物实验室、医疗卫生、生物制药等相关行业一般采用传统的沉降法对以上指标进行检 测，此方法不仅操作不方便、时间较长(48小时以上)，而且对空气中漂浮的小于5 μ m微生 物粒子监测效率低下。
发明内容
本发明的目的是提供一种快速检测生物安全柜交叉污染保护达标的方法。本发明方法的具体步骤如下
步骤(1)开启生物安全柜，使其工作30分钟以上；
步骤( 将盛有浓度为5X IO4 8X IO4个/毫升芽孢杆菌悬浮液的喷雾器放置在生 物安全柜内，紧靠一侧内壁的中心，其喷雾方向平行于工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷 嘴平行于工作台面且与工作台面相距高度为d，76mm ^ d^ 130mm ；
步骤C3)将5个空气微生物检测仪放置于生物安全柜内，其位置分别是喷雾器所在内 壁中心、喷雾器所在内壁的左侧壁中心、喷雾器所在内壁的右侧壁中心、喷雾器所在内壁的 对壁中心以及工作台中心，喷雾器底面紧贴工作台面；
步骤开启喷雾器，使得喷雾效率彡88%，喷射速度为0.50士0.05m/s，每分钟喷 1 X IO4 8 X IO4个芽孢杆菌，持续喷雾5分钟；
步骤(5)关闭喷雾器，开启空气微生物检测仪，读取该仪器显示的数值，即得到生物安 全柜中微生物粒子浓度Ap A2, A3、A4和A5，其中A1为喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪 测得的数值，A2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、A3为喷雾器 所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、A4为喷雾器所在内壁的对壁中心的微 生物检测仪测得的数值和A5为工作台中心的微生物检测仪测得的数值；
步骤(6)判断A2、A3、A4和A5是否超过设定的检测指标，如果A2、A3、A4和A5中任意项数 值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，终止执行步骤(7) 步骤(10)；如果A2、A3、 A4和A5中所有项数值均小于等于检测指标，则执行步骤(7)；步骤(7)将喷雾器放置在生物安全柜内，紧靠另一侧内壁的中心，其喷雾方向平行于 工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷嘴平行于工作台面且与工作台面相距高度为d，然后重 复步骤(3) 步骤(5)，即得到生物安全柜中微生物粒子浓度B” B2, B3、B4和B5，其中B1为 喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪测得的数值，B2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微 生物检测仪测得的数值、 为喷雾器所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、B4 为喷雾器所在内壁的对壁中心的微生物检测仪测得的数值和&为工作台中心的微生物检 测仪测得的数值；
步骤(8)判断B2, B3、B4和B5是否超过设定的检测指标，如果B2, B3、B4和B5中任意项 数值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，终止执行步骤(9)和(10)；如果化、B3、B4 和&中所有项数值均小于等于检测指标，则执行步骤(9)和(10)；
步骤(9)将喷雾器放置在生物安全柜内，紧靠再一侧内壁的中心，其喷雾方向平行于 工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷嘴平行于工作台面且与工作台面相距高度为d，然后重 复步骤(3) 步骤(5)，即得到生物安全柜中微生物粒子浓度C” C2, C3、C4和C5，其中C1为 喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪测得的数值，C2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微 生物检测仪测得的数值、C3为喷雾器所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、C4 为喷雾器所在内壁的对壁中心的微生物检测仪测得的数值和C5为工作台中心的微生物检 测仪测得的数值；
步骤(10)判断C2, C3、C4和C5是否超过设定的检测指标，如果C2, C3、C4和C5中任意项 数值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，如果C2、C3、C4和C5中所有项数值均小于 等于检测指标，则认为该生物安全柜合格。本发明的有益效果是该方法快速简便，提高了检测效率，同时又提高了对空气中 漂浮的小于5 μ m微生物粒子检测效率。
图1为本发明方法中装置放置示意图。
具体实施例方式以下结合附图和事例对发明做进一步说明 本发明方法的具体步骤如下
步骤(1)开启生物安全柜1，使其工作30分钟以上；
本实施例中生物安全柜1内流入气流速度为0. 661m/s,下降气流速度为0. 359m/s ； 步骤( 将盛有浓度为5X IO4 8X IO4个/毫升芽孢杆菌悬浮液的喷雾器放置在生 物安全柜内；
如图1所示，本实施例中喷雾器紧靠生物安全柜1左侧内壁的中心，其喷雾方向平行于 工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷嘴2平行于工作台面且与工作台面相距d为IOOmm ；
步骤C3)将5个空气微生物检测仪放置于生物安全柜1内，其位置分别是喷雾器所在 内壁中心、喷雾器所在内壁的左侧壁中心、喷雾器所在内壁的右侧壁中心、喷雾器所在内壁 的对壁中心以及工作台中心，其底面紧贴工作台面； 步骤(4)开启喷雾器，持续喷雾5分钟；本实施例中喷雾器的喷射效率达到92%以上，喷射速度为0. 50士0. 05m/s，每分钟喷 6 X IO4个芽孢杆菌；
步骤(5)关闭喷雾器，开启空气微生物检测仪，读取该仪器显示的数值，即得到生物安 全柜中微生物粒子浓度Ap A2, A3、A4和A5，其中A1为喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪 测得的数值，A2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、A3为喷雾器 所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、A4为喷雾器所在内壁的对壁中心的微 生物检测仪测得的数值和A5为工作台中心的微生物检测仪测得的数值；
本实施例中空气微生物检测仪3的抽取空气的速度不低于lOOL/min，可检测到的微生 物颗粒的粒径分辨率为0. 3 μ m。步骤(6)判断A2、A3> A4和A5是否超过设定的检测指标，如果A2、A3、A4和A5中任 意项数值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，终止执行步骤(7) 步骤(10)；如果 A2、A3、A4和A5中所有项数值均小于等于检测指标，则执行步骤(7)和⑶；
本实施例中检测指标距离喷雾器所紧靠的内壁36cm外的微生物检测仪3所检测到的 微生物浓度不大于2个，针对的是生物安全柜二级B型。本实施例中A2、A3、A4和A5的数值分别为:1、1、0、2。步骤(7)将喷雾器放置在生物安全柜内，紧靠右侧内壁的中心，其喷雾方向平行 于工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷嘴平行于工作台面且与工作台面相距高度为d，然后 重复步骤⑶ 步骤⑶，即得到生物安全柜中微生物粒子浓度&為為為和知其中&为 喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪测得的数值，B2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微 生物检测仪测得的数值、 为喷雾器所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、B4 为喷雾器所在内壁的对壁中心的微生物检测仪测得的数值和&为工作台中心的微生物检 测仪测得的数值；
步骤(8)判断B2, B3、B4和B5是否超过设定的检测指标，如果B2, B3、B4和B5中任意项 数值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，终止执行步骤(9)和(10)；如果化、B3、B4 和&中所有项数值均小于等于检测指标，则执行步骤(9)和(10)； 本实施例中B2、B3、B4和&的数值分别为1、1、0、2。步骤(9)将喷雾器放置在生物安全柜内，紧靠后侧内壁的中心，其喷雾方向平行 于工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷嘴平行于工作台面且与工作台面相距高度为d，然后 重复步骤⑶ 步骤(5)，即得到生物安全柜中微生物粒子浓度CpCyC^C4和C5，其中C1S 喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪测得的数值，C2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微 生物检测仪测得的数值、C3为喷雾器所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、C4 为喷雾器所在内壁的对壁中心的微生物检测仪测得的数值和C5为工作台中心的微生物检 测仪测得的数值；
步骤(10)判断C2, C3、C4和C5是否超过设定的检测指标，如果C2, C3、C4和C5中任意项 数值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，如果c2、c3、C4和C5中所有项数值均小于 等于检测指标，则认为该生物安全柜合格。本实施例中(2、(3、(；和C5的数值分别为1、2、0、2。本实施例中测试结果符合二级生物安全柜的产品交叉污染保护项目的检测指标 距离喷雾器所紧靠的内壁36cm外的微生物检测仪3所检测到的微生物浓度不大于2个，且喷雾器放置在不同位置的3次测量结果都达到微生物浓度不大于2个，故本实施例中所测 的生物安全柜合格。
权利要求
1. 一种快速检测生物安全柜交叉污染保护达标的方法，其特征在于该方法包括如下步骤步骤(1)开启生物安全柜，使其工作30分钟以上；步骤( 将盛有浓度为5X IO4 8X IO4个/毫升芽孢杆菌悬浮液的喷雾器放置在生 物安全柜内，紧靠一侧内壁的中心，其喷雾方向平行于工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷 嘴平行于工作台面且与工作台面相距高度为d，76mm ^ d^ 130mm ；步骤C3)将5个空气微生物检测仪放置于生物安全柜内，其位置分别是喷雾器所在内 壁中心、喷雾器所在内壁的左侧壁中心、喷雾器所在内壁的右侧壁中心、喷雾器所在内壁的 对壁中心以及工作台中心，喷雾器底面紧贴工作台面；步骤开启喷雾器，使得喷雾效率彡88%，喷射速度为0. 50士0. 05m/s,每分钟喷 1 X IO4 8 X IO4个芽孢杆菌，持续喷雾5分钟；步骤(5)关闭喷雾器，开启空气微生物检测仪，读取该仪器显示的数值，即得到生物安 全柜中微生物粒子浓度Ap A2, A3、A4和A5，其中A1为喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪 测得的数值，A2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、A3为喷雾器 所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、A4为喷雾器所在内壁的对壁中心的微 生物检测仪测得的数值和A5为工作台中心的微生物检测仪测得的数值；步骤(6)判断A2、A3、A4和A5是否超过设定的检测指标，如果A2、A3、A4和A5中任意项数 值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，终止执行步骤(7) 步骤(10)；如果A2、A3、 A4和A5中所有项数值均小于等于检测指标，则执行步骤(7)；步骤(7)将喷雾器放置在生物安全柜内，紧靠另一侧内壁的中心，其喷雾方向平行于 工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷嘴平行于工作台面且与工作台面相距高度为d，然后重 复步骤(3) 步骤(5)，即得到生物安全柜中微生物粒子浓度B” B2, B3、B4和B5，其中B1为 喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪测得的数值，B2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微 生物检测仪测得的数值、 为喷雾器所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、B4 为喷雾器所在内壁的对壁中心的微生物检测仪测得的数值和&为工作台中心的微生物检 测仪测得的数值；步骤(8)判断B2, B3、B4和B5是否超过设定的检测指标，如果B2, B3、B4和B5中任意项 数值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，终止执行步骤(9)和(10)；如果化、B3、B4 和&中所有项数值均小于等于检测指标，则执行步骤(9)和(10)；步骤(9)将喷雾器放置在生物安全柜内，紧靠再一侧内壁的中心，其喷雾方向平行于 工作台面且垂直于紧靠的内壁，其喷嘴平行于工作台面且与工作台面相距高度为d，然后重 复步骤(3) 步骤(5)，即得到生物安全柜中微生物粒子浓度C” C2, C3、C4和C5，其中C1为 喷雾器所在内壁中心的微生物检测仪测得的数值，C2为喷雾器所在内壁的左侧壁中心的微 生物检测仪测得的数值、C3为喷雾器所在内壁的右侧壁中心的微生物检测仪测得的数值、C4 为喷雾器所在内壁的对壁中心的微生物检测仪测得的数值和C5为工作台中心的微生物检 测仪测得的数值；步骤(10)判断C2, C3、C4和C5是否超过设定的检测指标，如果C2, C3、C4和C5中任意项 数值大于检测指标，则认为该生物安全柜不合格，如果C2、C3、C4和C5中所有项数值均小于 等于检测指标，则认为该生物安全柜合格。
全文摘要
本发明公开了一种快速检测生物安全柜交叉污染保护达标的方法。现有的检测方法操作不方便、检测时间较长。本发明方法首先开启生物安全柜，使其工作设定的时间；然后将盛有芽孢杆菌悬浮液的喷雾器放置在生物安全柜内，并在生物安全柜放置5个空气微生物检测仪；最后开启喷雾器，分别确认空气微生物检测仪的检测值，根据检测标准来判断生物安全柜是否达标。本发明方法快速简便，提高了检测效率。
文档编号C12Q1/06GK102140493SQ201110028219
公开日2011年8月3日 申请日期2011年1月26日 优先权日2011年1月26日
发明者侯德鑫, 叶树亮, 周伦彬, 杨遂军, 胡良勇, 魏贤莉 申请人:中国计量学院, 广州市计量检测技术研究院