专利名称：植物耐逆性相关蛋白及其编码基因与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种植物耐逆性相关蛋白及其编码基因与应用，特别涉及ー种来源于苔藓植物的植物耐逆性相关蛋白及其编码基因与应用。
背景技术：
自然环境中的干旱、盐碱、低温等胁迫因素对植物的生长发育有重要影响，严重时会造成农作物大規模减产，培育耐逆性作物是种植业的主要目标之一。当前，通过基因工程育种获得具有耐逆性的作物品种是ー种行之有效的方法。而该方法中最关键的技术瓶颈问题是有效抗逆基因的筛选与功能发现。苔藓植物是5亿年前古奥陶纪出现的陆地先鋒植物，其生活史中以“茎叶体”的配子体为主要营养生长阶段。“茎叶体”叶片由单层细胞组成，仅在其“中肋”处由少数几层细胞组成，无输导组织和气孔等调控水分代谢的组织结构，保留着明显的水生植物的特征。由于缺乏水分输导和调控系统，因此，当原始“苔藓植物”离水登陆时，必然首先面对两大胁迫水分亏损、温度骤变。巨大的选择压力迫使苔藓植物进化出不同于“维管植物”(蕨类、种子植物)的逆境应对机制。
发明内容
本发明的目的是提供ー种与植物耐逆性相关的蛋白及其编码基因和应用。本发明所提供的与植物耐逆性相关的蛋白，名称为PpLEA3_19，来源于小立碗藓(Physcomitrella patens),是如下 I)或 2)的蛋白质I)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过ー个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与序列2所示植物耐逆性相关蛋白相同活性的由I)衍生的蛋白质。序列表中序列2由197个氨基酸残基组成。为了使I)中的PpLEA3_19便于纯化，可在由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表I所示的标签。表I.标签的序列
权利要求
1.一种蛋白，是如下I)或2)的蛋白质 1)由序列表中序列2所不的氣基酸残基序列组成的蛋白质； 2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有与序列2所示植物耐逆性相关蛋白相同活性的蛋白质。
2.权利要求I所述蛋白的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于所述编码基因的序列是下列脱氧核苷酸序列之一 1)序列表中序列I的DNA序列； 2)序列表中序列I的自5'末端第153-746位脱氧核糖核苷酸； 3)编码序列表中序列2所示蛋白质序列的多核苷酸； 4)在严格条件下与I)或2)或3)的基因杂交且编码权利要求I所述蛋白的基因； 5)与I)或2)或3)的基因具有90%以上的同源性且编码权利要求I所述蛋白的基因。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组表达载体、转基因细胞系或重组工程菌。
5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于所述重组表达载体为在插有玉米Ubiquitin启动子的质粒pCambial390的多克隆位点间插入权利要求2或3所述基因得到的重组表达载体，所述玉米Ubiquitin启动子插入到质粒pCambial390的HindIII和Kpn I位点间，所述玉米Ubiquitin启动子的序列为自GENBANK Accession Number为pMCG161的5'端第868-2869位脱氧核苷酸序列。
6.扩增权利要求2或3所述基因的全长或其任一片段的引物对。
7.权利要求I所述的蛋白或者其编码基因在培育耐逆性提高的转基因植物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于所述培育耐逆性提高的转基因植物的方法，是将权利要求2或3所述的编码基因转入目的植物中，筛选得到耐逆性提高的转基因植物。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于所述权利要求2或3所述的编码基因通过权利要求4或5所述的重组表达载体转入目的植物。
10.根据权利要求7-9中任意一项所述的应用，其特征在于所述目的植物为双子叶植物或单子叶植物，优选为水稻；所述耐逆性为耐旱性。
全文摘要
本发明公开了一种植物耐逆性相关蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的与植物耐逆性相关的蛋白，是如下1)或2)的蛋白质1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐逆性相关的由1)衍生的蛋白质。将本发明的编码基因导入野生型水稻(日本晴)的实验可以证明提高植物耐逆性水平，尤其是抗旱性，本发明的耐逆相关基因将在单子叶植物中(特别是水稻)等植物耐逆育种中具有良好的应用前景。
文档编号C12N15/82GK102659936SQ201210107040
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月12日 优先权日2012年4月12日
发明者何奕昆, 吴金霞, 崔素霞, 张治国, 李利, 路铁刚 申请人:中国农业科学院生物技术研究所