专利名称：一种采用梯度pH顺序控制发酵生产腺苷的方法
技术领域：
本发明属于生物工程领域，涉及发酵过程控制，特别是一种梯度pH控制策略，应用于腺苷的发酵法生产。
背景技术：
腺苷(Adenosine)，即为腺嘌呤核苷，化学名9_β -D-呋喃核糖基腺嘌呤，分子式为CltlH13N5O4、相对分子质量为267.24的白色或类白色的粉末。腺苷在生物化学上扮演重要角色，包括以腺苷三磷酸(ATP)或腺苷双磷酸(ADP)形式转移能量，或是以环状腺苷单磷酸(cAMP)进行信号传递等。此外腺苷也是一种抑制性神经传导物(inhibitoryneurotransmitter),可能会促进睡眠。迄今为止,腺苷已被广泛应用于化工、食品、医药、日
化等领域，由此可见，该化 合物具有非常广泛的应用前景。其化学结构式为:
权利要求
1.一种采用梯度PH顺序控制发酵生产腺苷的方法，其特征在于所述方法采用二阶段梯度PH顺序控制的方式分批发酵生产腺苷，在菌体生长阶段，控制pH为6.7-7.0,菌体浓度达到OD600nm*20l.0-1.5后，控制pH为6.0-6.3 ;发酵菌株采用枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis) XGL0
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于该方法具体操作如下:以枯草芽孢杆菌XGL为出发菌株，接种至活化斜面，28 32°C培养24 26h后，用接种环刮取斜面菌种接种至种子培养基，28 33°C，180 220rpm培养7 8h ;按10 15%的接种量转接至装有发酵培养基的发酵罐中，30 34°C，溶氧维持在10 20%，用NH3.Η20调节pH，培养时间58_60h。
3.根据权利要求书2所述的方法，其特征是: ⑴斜面培养基成分以g/L计:葡萄糖2，蛋白胨10，牛肉膏10，酵母粉5，NaC12.5，琼脂30，ρΗ7.0 7.2 ; ⑵种子培养基成分以g/L计:口服葡萄糖20，玉米浆25mL/L，豆柏水解液10mL/L，酵母粉5，味精5，蛋白胨8, KH2PO4I,MgSO4.7Η200.4，尿素5，黄嘌呤0.03，组氨酸0.03，ρΗ7.0 7.2 ； ⑶液体发酵培养基成分以g/L计:口服葡萄糖80，酵母膏18，味精12，K2HP043，黄嘌呤0.03，组氨酸 0.03，MgSO4.7H205, MnSO40.006，FeS047H200.006，CaCl22,玉米浆 15mL/L。
4.根据权利要求书1、2或3所述的方法，其特征在于所述的枯草芽孢杆菌，用其他芽孢杆菌类细菌、肠杆菌 科细菌或酵母类真菌代替。
全文摘要
一种采用梯度pH顺序控制发酵生产腺苷的方法。该方法以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)XGL为生产菌株，以梯度pH的顺序控制方式分批发酵生产腺苷，在菌体生长阶段控制pH为6.7-7.0，在达到一定菌体量后控制pH为6.0-6.3，发酵60h，腺苷产量为18.2g/L。该方法可以提高腺苷的产量，发酵过程无需增加额外设备，适合于工业化生产。
文档编号C12R1/125GK103146786SQ20131009739
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月25日 优先权日2013年3月25日
发明者陈宁, 刘玥, 徐庆阳, 谢希贤, 张成林, 刘淑云 申请人:天津科技大学