一种驴奶恰玛古粉及其制备方法与流程

文档序号:12517533阅读:875来源:国知局
一种驴奶恰玛古粉及其制备方法与流程
本发明主要涉及一种食品加工
技术领域
,具体地说,本发明涉及一种营养粉及其制备。
背景技术
:驴奶是最接近人乳的奶中珍品,对人体的心、胃、脾、肺、肝、前列腺等多种器官有保健作用,其营养成分比例接近人乳的99%,可以作为母乳的替代品之一。驴奶不仅具有较高的营养价值,而且具有较广泛的药用价值。《本草纲目》中记载“驴乳,气味甘,冷利,无毒,热频饮之可治气郁,解小儿热毒,不生痘疹”。在维吾尔医学中,也有用驴奶治疗结核病和胃溃疡的记载。在秘鲁,人们把驴奶当成一种万灵仙丹,据称可以用来治疗气喘、支气管炎、糖尿病、溃疡、胃炎等疾病,一些妇女甚至可以靠喝驴奶缓解更年期的不适。此外,由于驴奶具有美容的功效,还被广泛的应用于化妆品行业,从埃及王后及尼罗王妃时代开始,就有记载人们采用驴奶沐浴法护理皮肤古罗马的贵族妇女也曾用驴奶沐浴,使肌肤美白娇嫩。国外的研究表明,驴奶中富含许多免疫活性物质和抗癌物质,可以作为一种免疫促进剂,增强人体免疫功能、延缓衰老、激发性欲的特效。恰玛古又名芜菁、蔓菁,为十字花科芜菁的根块,是新疆维吾尔族居民喜爱的并有较长历史的药食同源之品,芜菁根《食疗本草》:“主消渴,治热毒风肿。”《肘后方》:“捣敷豌豆疮,有根丁疮,卒肿毒起急痛和犬咬伤疮。”《千金方》:“和盐捣敷一切热肿毒,研末酒后服以辟酒气。”《兵部手集方》:“捣敷乳痈痛寒热者。”《本草从新》:“末服解酒毒。”芜菁子《名医别录》“主明目”。《本草纲目》:“辛、苦、平,无毒,可升可降,能汗能吐,能下能利小便,又能明目解毒,其效甚伟。”《大医典》:“生发乌发,润喉顺气,滋补肾脏,通利关节等,治喉燥气短,肾脏瘦虚,骨节不利等。”《药物宝库》:“润肺止咳,软肠通便,开胃增食,溶石排石,通利小便等。”当代《维吾尔药志》中记载:芜菁味甘、辛、苦,性温。入胃、肝、肾三经。开胸顺气、健胃消食、解毒,用于胸闷腹胃胀痛、食欲不振、疮疖肿毒等疾。鲜品、捣汁、干品均可用;内服6-19g。外用适量。现代药理研究证实,其块根中含多种氨基酸:缬氨酸、亮氨酸、精氨酸、蛋氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、天冬酰胺等;糖类:葡萄糖、果糖、蔗糖等;脂肪酸:对-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸、龙胆酸等,尚有核黄素、烟酸、维生素C及钙、磷、铁等无机元素。种子油中含前告伊素、葡萄糖庭荠素、异硫氰酸丙烯酯、菜子甾醇、亚油酸、亚麻酸和大量芥酸等。芜菁内含硫化葡萄糖苷物质,水解后可产生芥子油,具有增进食欲,促进肠胃蠕动,帮助消化等作用。芜菁含丰富食物纤维,可增强胃肠活力,稀释毒素,降低致癌因子浓度,从而发挥排毒防癌作用,对防治结肠癌有显著效果。芜菁富含钙、磷、铁等元素,可调节人体电解质平衡,防治小便涩痛,淋沥不尽等症。但是目前将两者结合应用的还比较少,驴奶难以保存,生产过程中往往容易出现奶管管道堵塞和微生物超标的问题,这样不仅导致了驴奶粉出料率低,而且造成了驴奶粉的营养成分缺失和浪费的现象,大大增加了驴奶粉的生产成本。另外,单独食用驴奶粉可能因为肠道菌群不适应等原因有少部分人也会出现轻微腹泻情况,单独食用营养成分也比较单一。技术实现要素:针对现有技术现状,本发明,将驴奶和恰玛古粉搭配很好解决了食用驴奶粉少数人腹泻的问题,也让营养更加全面,而且采用冻干工艺完整的保存了驴奶粉和恰玛古粉中的营养成分,减少了因为长时间高温过程造成营养流失和后期干燥造成微生物超标。为了实现上述目的,本发明提供了一种技术方案:本发明具体提供的一种驴奶恰玛古粉,由以下方法制备获得:(1)原料预处理:巴旦木仁加入到10倍量的刚煮沸的开水中,搅拌烫2-5分钟,捞出去皮使用,恰玛古剔除腐烂及杂质,削去茎叶、须根、坏烂者,洗净表面,切碎,置于开水中烫2-5分钟,捞出,放冷使用。(2)每称取生驴奶200份至300份,每称取预处理过的恰玛古200份至300份,每称取预处理过的巴旦木仁6份至16份、蜂蜜9份至15份、低聚木糖2份至3份、低聚异麦芽糖2份至5份。(3)将步骤(2)称重好的材料放入胶体磨打磨1-4遍,补加入纯净水过均质机均质两边以上,参数为低压8-12MPa,高压40-60Mpa。(4)经过均质的物料泵入杀菌罐,向杀菌罐夹层内通入0.1-0.3MPa的蒸汽,对管内物料进行加热杀菌,待物料温度达到70-85℃时恒温杀菌、关闭蒸汽,停止加热。然后向夹层内通入冷水,使罐内物料温度下降至30-45℃。(5)向冻干机装料盘加杀菌后的物料,装盘结束后关闭机门,启动制冷机的降温功能,当冻干盘内的物料全部冻成冰状、且冰温达到-30--50℃时,再继续制冷冻实1-3小时,将制冷功能转向捕水库,使得捕水库温度降至-40℃以下。(6)开启真空泵,让冻干箱和捕水库真空度达到200Pa以下。(7)物料以每小时平均升温1-3℃的速度,逐步将通向冻干机装料盘的冷冻夹层加热,间接加热冻干盘内的驴奶恰玛古至30-55℃,保温保真空5-8小时。(8)关闭真空泵、罗茨泵、制冷压缩机、压缩机冷却系统,取出冻干的物料进行计量装袋,真空包装。本发明中,烫过的恰玛古和巴达木仁不立即使用,应及时置于-10℃以下保存。本发明中,恰玛古需要切成2cm左右的小丁块或2cm厚的片。更优选的是本发明中,称取生驴奶240份,预处理过的恰玛古260份,预处理过的巴旦木仁9份,蜂蜜12份,低聚木糖2.5份,低聚异麦芽糖5份。本发明中,用胶体磨打磨2遍,均质机均质参数为低压8MPa,高压50MPa。本发明中,经过均质的物料泵入杀菌罐,向杀菌罐夹层内通入0.2MPa的蒸汽,对管内物料进行加热杀菌,待物料温度达到72℃时恒温杀菌、关闭蒸汽,停止加热。然后向夹层内通入冷水,使罐内物料温度下降至40℃。本发明中,以每小时平均升温2℃的速度,逐步将通向冻干机装料盘的冷冻夹层加热,间接加热冻干盘内的驴奶至40℃,保温保真空7小时。本发明的有益效果:本发明提供的驴奶恰玛古粉很好解决了少数人食用驴奶粉腹泻的问题,也让营养更加全面,而且采用冻干工艺完整的保存了驴奶粉和恰玛古粉中的营养成分,减少了因为长时间高温灭菌造成营养流失和后期干燥造成微生物超标。同时经过功能性实验可知,本发明提供的冻干驴奶恰玛古粉对于人体具有显著的抗疲劳的功能功能,并对于人体具有显著的增强免疫力的功能。附图说明图1显示为冻干前物料温度和冻干时冰温对冻干驴奶恰玛古粉过程能耗影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图2显示为冻干前物料温度和冻干升温速度对冻干驴奶恰玛古粉过程能耗影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图3显示为冻干前物料温度和冻干升温后保温时间对冻干驴奶恰玛古粉过程能耗影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图4显示为冻干时冰温和冻干升温速度对冻干驴奶恰玛古粉过程能耗影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图5显示为冻干时冰温和冻干升温后保温时间对冻干驴奶恰玛古粉过程能耗影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图6显示为冻干升温速度和冻干升温后保温时间对冻干驴奶恰玛古粉过程能耗影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图7显示为生驴奶和恰玛古对驴奶恰玛古粉口感影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图8显示为生驴奶和巴达木仁对驴奶恰玛古粉口感影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图9显示为生驴奶和蜂蜜对驴奶恰玛古粉口感影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图10显示为恰玛古和巴达木仁对驴奶恰玛古粉口感影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图11显示为恰玛古和蜂蜜对驴奶恰玛古粉口感影响的响应面图(A)和等高线图(B)。图12显示为巴达木仁和蜂蜜对驴奶恰玛古粉口感影响的响应面图(A)和等高线图(B)。具体实施方式下面对本发明的具体实施方式作进一步详细描述,但本发明的配方和方法不限于下述实施例。实施例一:驴奶恰玛古粉的制备驴奶恰玛古粉制备方法具体技术步骤如下:(1)原料预处理:巴旦木仁加入到10倍量的刚煮沸的开水中,搅拌烫2-5分钟,捞出去皮使用,恰玛古剔除腐烂及杂质,削去茎叶、须根、坏烂者,洗净表面,切碎,置于开水中烫2-5分钟,捞出,放冷使用。(2)每称取生驴奶200份至300份,每称取预处理过的恰玛古200份至300份,每称取预处理过的巴旦木仁6份至16份、蜂蜜9份至15份、低聚木糖2份至3份、低聚异麦芽糖2份至5份。(3)将步骤(2)称重好的材料放入胶体磨打磨1-4遍,补加入纯净水过均质机均质两边以上,参数为低压8-12MPa,高压40-60Mpa。(4)经过均质的物料泵入杀菌罐,向杀菌罐夹层内通入0.1-0.3MPa的蒸汽,对管内物料进行加热杀菌,待物料温度达到70-85℃时恒温杀菌、关闭蒸汽,停止加热。然后向夹层内通入冷水,使罐内物料温度下降至30-45℃。(5)向冻干机装料盘加杀菌后的物料,装盘结束后关闭机门,启动制冷机的降温功能,当冻干盘内的物料全部冻成冰状、且冰温达到-30--50℃时,再继续制冷冻实1-3小时,将制冷功能转向捕水库,使得捕水库温度降至-40℃以下。(6)开启真空泵,让冻干箱和捕水库真空度200Pa以下。(7)物料每小时平均升温1-3℃的速度,逐步将通向冻干机装料盘的冷冻夹层加热,间接加热冻干盘内的驴奶恰玛古至30-55℃,保温保真空5-8小时。(8)关闭真空泵、罗茨泵、制冷压缩机、压缩机冷却系统,取出冻干的物料进行计量装袋,真空包装。本发明中,烫过的恰玛古和巴达木仁不立即使用,应及时置于-10℃以下保存。本发明中,恰玛古需要切成2cm左右的小丁块或2cm厚的片。实施例二:驴奶恰玛古粉的制备将巴旦木仁加入到10倍量的刚煮沸的开水中,搅拌烫2-5分钟,捞出去皮使用,恰玛古剔除腐烂及杂质,削去茎叶、须根、坏烂者,洗净表面,切碎,置于开水中烫2-5分钟,捞出,放冷使用;称取生驴奶200kg,预处理过的恰玛古200kg,取预处理过的巴旦木仁6kg、蜂蜜9kg、低聚木糖2kg、低聚异麦芽糖2kg,将称重好的材料放入胶体磨打磨1-4遍,补加入纯净水过均质机均质两边以上,参数为低压8MPa,高压40Mpa,经过均质的物料泵入杀菌罐,向杀菌罐夹层内通入0.1MPa的蒸汽,对管内物料进行加热杀菌,待物料温度达到70℃时恒温杀菌、关闭蒸汽,停止加热。然后向夹层内通入冷水,使罐内物料温度下降至30℃,向冻干机装料盘加杀菌后的物料,装盘结束后关闭机门,启动制冷机的降温功能,当冻干盘内的物料全部冻成冰状、且冰温达到-30℃时,再继续制冷冻实1小时,将制冷功能转向捕水库,使得捕水库温度降至-40℃以下;开启真空泵,让冻干箱和捕水库真空度200Pa以下,物料每小时平均升温1℃的速度,逐步将通向冻干机装料盘的冷冻夹层加热,间接加热冻干盘内的驴奶恰玛古至30℃,保温保真空5小时,关闭真空泵、罗茨泵、制冷压缩机、压缩机冷却系统,取出冻干的物料进行计量装袋,真空包装。上述制备的驴奶恰玛古粉很好解决了少数人食用驴奶粉腹泻的问题,也让营养更加全面,而且采用冻干工艺完整的保存了驴奶粉和恰玛古粉中的营养成分,减少了因为长时间高温灭菌造成营养流失和后期干燥造成微生物超标。实施例三:驴奶恰玛古粉的制备将巴旦木仁加入到10倍量的刚煮沸的开水中,搅拌烫2-5分钟,捞出去皮使用,恰玛古剔除腐烂及杂质,削去茎叶、须根、坏烂者,洗净表面,切碎,置于开水中烫2-5分钟,捞出,放冷使用;称取生驴奶300kg,称取预处理过的恰玛古300kg,称取预处理过的巴旦木仁16kg、蜂蜜15kg、低聚木糖3kg、低聚异麦芽糖5kg,将称重好的材料放入胶体磨打磨1-4遍,补加入纯净水过均质机均质两边以上,参数为低压12MPa,高压60Mpa,经过均质的物料泵入杀菌罐,向杀菌罐夹层内通入0.3MPa的蒸汽,对管内物料进行加热杀菌,待物料温度达到85℃时恒温杀菌、关闭蒸汽,停止加热。然后向夹层内通入冷水,使罐内物料温度下降至45℃,向冻干机装料盘加杀菌后的物料,装盘结束后关闭机门,启动制冷机的降温功能,当冻干盘内的物料全部冻成冰状、且冰温达到-50℃时,再继续制冷冻实3小时,将制冷功能转向捕水库,使得捕水库温度降至-40℃以下;开启真空泵,让冻干箱和捕水库真空度200Pa以下;物料每小时平均升温3℃的速度,逐步将通向冻干机装料盘的冷冻夹层加热,间接加热冻干盘内的驴奶恰玛古至55℃,保温保真空8小时;关闭真空泵、罗茨泵、制冷压缩机、压缩机冷却系统,取出冻干的物料进行计量装袋,真空包装。上述制备的驴奶恰玛古粉很好解决了少数人食用驴奶粉腹泻的问题,也让营养更加全面,而且采用冻干工艺完整的保存了驴奶粉和恰玛古粉中的营养成分,减少了因为长时间高温灭菌造成营养流失和后期干燥造成微生物超标。实施例四:驴奶恰玛古粉的制备将巴旦木仁加入到10倍量的刚煮沸的开水中,搅拌烫2-5分钟,捞出去皮使用,恰玛古剔除腐烂及杂质,削去茎叶、须根、坏烂者,洗净表面,切碎,置于开水中烫2-5分钟,捞出,放冷使用,取生驴奶250kg,称取预处理过的恰玛古260kg,称取预处理过的巴旦木仁10kg、蜂蜜10kg、低聚木糖2.5kg、低聚异麦芽糖3kg,将称重好的材料放入胶体磨打磨1-4遍,补加入纯净水过均质机均质两边以上,参数为低压10MPa,高压50Mpa,经过均质的物料泵入杀菌罐,向杀菌罐夹层内通入0.2MPa的蒸汽,对管内物料进行加热杀菌,待物料温度达到80℃时恒温杀菌、关闭蒸汽,停止加热。然后向夹层内通入冷水,使罐内物料温度下降至40℃;向冻干机装料盘加杀菌后的物料,装盘结束后关闭机门,启动制冷机的降温功能,当冻干盘内的物料全部冻成冰状、且冰温达到-45℃时,再继续制冷冻实2小时,将制冷功能转向捕水库,使得捕水库温度降至-40℃以下;开启真空泵,让冻干箱和捕水库真空度200Pa以下;物料每小时平均升温2℃的速度,逐步将通向冻干机装料盘的冷冻夹层加热,间接加热冻干盘内的驴奶恰玛古至40℃,保温保真空7小时;关闭真空泵、罗茨泵、制冷压缩机、压缩机冷却系统,取出冻干的物料进行计量装袋,真空包装。上述制备的驴奶恰玛古粉很好解决了少数人食用驴奶粉腹泻的问题,也让营养更加全面,而且采用冻干工艺完整的保存了驴奶粉和恰玛古粉中的营养成分,减少了因为长时间高温灭菌造成营养流失和后期干燥造成微生物超标。实施例五:驴奶恰玛古粉的制备将巴旦木仁加入到10倍量的刚煮沸的开水中,搅拌烫2-5分钟,捞出去皮使用,恰玛古剔除腐烂及杂质,削去茎叶、须根、坏烂者,洗净表面,切碎,置于开水中烫2-5分钟,捞出,放冷使用,称取生驴奶280kg,称取预处理过的恰玛古220kg,称取预处理过的巴旦木仁8kg、蜂蜜13kg、低聚木糖2.5kg、低聚异麦芽糖4kg,将步骤称重好的材料放入胶体磨打磨1-4遍,补加入纯净水过均质机均质两边以上,参数为低压11MPa,高压45Mpa,经过均质的物料泵入杀菌罐,向杀菌罐夹层内通入0.2MPa的蒸汽,对管内物料进行加热杀菌,待物料温度达到75℃时恒温杀菌、关闭蒸汽,停止加热。然后向夹层内通入冷水,使罐内物料温度下降至35℃,向冻干机装料盘加杀菌后的物料,装盘结束后关闭机门,启动制冷机的降温功能,当冻干盘内的物料全部冻成冰状、且冰温达到-40℃时,再继续制冷冻实1.5小时,将制冷功能转向捕水库,使得捕水库温度降至-40℃以下;开启真空泵,让冻干箱和捕水库真空度200Pa以下;物料每小时平均升温2℃的速度,逐步将通向冻干机装料盘的冷冻夹层加热,间接加热冻干盘内的驴奶恰玛古至35℃,保温保真空6小时;关闭真空泵、罗茨泵、制冷压缩机、压缩机冷却系统,取出冻干的物料进行计量装袋,真空包装。上述制备的驴奶恰玛古粉很好解决了少数人食用驴奶粉腹泻的问题,也让营养更加全面,而且采用冻干工艺完整的保存了驴奶粉和恰玛古粉中的营养成分,减少了因为长时间高温灭菌造成营养流失和后期干燥造成微生物超标。实施例六:驴奶恰玛古粉的制备本发明中,称取生驴奶240kg,预处理过的恰玛古260kg,预处理过的巴旦木仁9kg,蜂蜜12kg,低聚木糖2.5kg,低聚异麦芽糖5kg。本发明中,用胶体磨打磨2遍,均质机均质参数为低压8MPa,高压50MPa。本发明中,经过均质的物料泵入杀菌罐,向杀菌罐夹层内通入0.2MPa的蒸汽,对管内物料进行加热杀菌,待物料温度达到72℃时恒温杀菌、关闭蒸汽,停止加热。然后向夹层内通入冷水,使罐内物料温度下降至40℃。本发明中,每小时平均升温2℃的速度,逐步将通向冻干机装料盘的冷冻夹层加热,间接加热冻干盘内的驴奶至40℃,保温保真空7小时。响应面法对上述工艺参数的优化过程如下:表1:响应面因素水平表冻干条件单位最小值最大值冻干前物料温度℃3045冻干时冰温℃-50-30冻干升温速度℃/h13冻干升温后保温时间h58能耗KWhResponse0.038表2:Box-bohnken实验设计结果响应面法优化实验结果显示,参见附图1至附图6,要达到相同程度的干燥驴奶恰玛古粉,冻干前物料温度、冻干时冰温、冻干升温速度、冻干升温后保温时间的二次项对整个冻干过程中能耗均具有明显显著性。如果冻干过程中温度偏低或者时间不够会造成驴奶恰玛古粉含水量不合格,需要返工会增加能耗,如果一味提高温度或者延长时间也会增加能耗,最佳组合即为冻干前物料温度40℃,冻干时冰温-40℃,冻干升温速度2℃/h,冻干升温后保温7h,获得能耗最低,可以达到接近300KWh。实施例七:感官评定实验本申请采用响应面法对驴奶恰玛古粉配方进行了优化,由于所加原料中恰玛古和巴达木仁都有特殊口感,为了能够得到最佳口感的配方,申请人邀请了10位具有营养粉评定经验的食品专家,对上述方法驴奶恰玛古粉的外观、酸甜度、回味型感官综合评价。按好、中等、差等级,进行综合评分,统计评分结果,评定如下表3标准进行驴奶恰玛古粉感官评价。表3:驴奶恰玛古粉感官评定标准口感指标感官描述分值外观冲泡后浓稠适中,颜色均匀、乳白0-30分酸甜度有淡淡蜜糖味,酸甜度适中0-30分回味型绵纯、滑润、略带甜味0-40分注:感官评价的满分为100分,颜色评分以30分为满分,颜色焦黄,色泽较暗0-8分,颜色乳白,色泽较暗9-15分,颜色乳白,外表光亮16-30分;酸甜度是驴奶的甘甜加入蜂蜜的甜味,评分以30分为满分,无甘甜味0-10分,驴奶甘甜味不明显11-20分,既有驴奶的甘甜味,也略带蜂蜜的甜味21-30分;回味型评分以40分为满分,恰玛古味太重0-10分,巴达木仁苦涩味11-25分,驴奶的甘甜,恰玛古的芳香、巴达木仁的果仁味、蜂蜜的甜均得到体现26-40分。根据感官评分进行响应面法分析过程如下:表4:响应面因素水平表冻干条件单位最小值最大值生驴奶kg180300恰玛古kg220300巴旦木仁kg616蜂蜜kg915口感KWhResponse1.74表5:Box-bohnken实验设计结果响应面法优化实验结果显示,参见附图7至附图12,巴旦木仁、蜂蜜、所有二次项及巴旦木仁-蜂蜜、恰玛古-蜂蜜交互项对口感有显著影响。同时也反映出巴达木口感独特,加入量尽可能少些口感更好,其他原料都是随着加入量增加口感达到最佳值后逐渐变差,最佳组合即为生驴奶240kg,恰玛古260kg,巴达木仁9kg,蜂蜜12kg,获得口感最好,评分可以达到96左右。实施例八:本发明抗疲劳功能实验1.材料:1.1样品:采用上述实施例一至实施例五以及由新疆玉昆仑天然食品工程有限公司提供系列冻干驴奶恰玛古粉。1.2实验动物及饲养:SPF级雄性ICR小鼠,体重19~22g。1.3主要仪器:SBA-生物传感分析仪,奥林巴斯AU400型自动生化分析仪,VIS-7200可见分光光度计,匀浆机,离心机,电子天平。2.实验方法2.1剂量选择:将实验动物随机分为空白对照组和3个本发明试验组。受试物剂量分别为1500mg/kg.bw、3000mg/kg.bw、4500mg/kg.bw。灌胃液配制:称取3g、6g和9g本发明样品,分别溶于40ml蒸馏水中,按20mg/kg.bw灌胃。空白对照组动物以蒸馏水灌胃,各实验组动物以相应剂量的蒸馏水溶液灌胃,每日一次,连续灌胃30天后进行实验。2.2实验步骤:2.2.1负重游泳实验:末次给予受试物30min后,将尾部负荷5%体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。箱中水深不少与30cm,水温25±1℃,记录小鼠自游泳开始至死亡的时间。2.2.2血乳酸测定:末次给予受试物30min后,将动物置温度为30℃的水中不负重游泳10min,并于游泳前、游泳后立即、游泳后休息20min各采眼球血20μL测定乳酸含量。并按下述公式计算血乳酸曲线下面积,以判断运动后血乳酸变化情况。血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min血乳酸值+2×游泳后休息20min血乳酸值)。2.2.3血清尿素氮测定:末次给予受试物30min后,将小鼠置温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后采眼球血0.5mL,血凝固后取血清用奥林巴斯AU400型自动生化分析仪测定血清尿素氮含量。2.2.4肝糖原测定:于末次给予受试物30min处死动物,取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,迅速称取肝脏100mg,测定肝糖原含量(蒽酮法)。3.实验数据统计:实验数据用PEMSforWindows3.0统计软件包进行方差分析;方差不齐数据进行适当的变量转换;若变量转换后仍未达到方差齐者,用秩和检验统计。4结果4.1本发明对小鼠体重的影响。表6:本发明对小鼠体重的影响(负重游泳实验)表7:本发明对小鼠体重的影响(血乳酸测定)表8:本发明对小鼠体重的影响(尿素氮测定)表9:本发明对小鼠体重的影响(肝糖原测定)由表6-9可见,本发明三个剂量组合空白对照组间小鼠初始体重、实验中期体重和实验结束时体重无显著性差异(P>0.05)。表明本发明对小鼠体重无影响。4.2本发明对小鼠负重游泳时间的影响表10:本发明对小鼠负重游泳时间的影响由表10可见,本发明中剂量组和高剂量组小鼠负重游泳时间显著长于空白对照组(P<0.05)。4.3本发明对小鼠血乳酸含量的影响表11:本发明对小鼠血乳酸含量的影响由表11:可见,本发明各剂量组游泳后三个时点血乳酸曲线下面积与空白对照组无显著性差异(P>0.05)。4.4本发明对小鼠血清尿素氮含量的影响表12:本发明对小鼠血清尿素氮含量的影响由表12可见,本发明3个剂量组血清尿素氮含量显著低于空白对照组(P<0.05,P<0.01)。4.5本发明对小鼠肝糖原含量的影响表13:本发明对小鼠肝糖原含量的影响由表13可见,本发明低剂量组肝糖原含量显著高于空白对照组(P<0.05)。5.总结:本发明中、高剂量组小鼠负重游泳时间显著长于空白对照组(P<0.05);低、中、高三个剂量组血清尿素氮含量显著低于空白对照组(P<0.05,P<0.01);低剂量组肝糖原含量显著高于空白对照组(P<0.05)。依据《保健食品检验与评价技术规范》2003年版可以判定,本发明上述实施例提供的冻干驴奶恰玛古粉具有抗疲劳的功能,可知,本发明上述实施例一至实施例五提供的驴奶恰玛古粉对于人体具有显著的抗疲劳的功能功能。实施例九:增强免疫力功能实验1.材料:1.1样品:采用上述实施例一至实施例五以及由新疆玉昆仑天然食品工程有限公司提供系列冻干驴奶恰玛古粉。1.2实验动物:昆明种小鼠160只,全雌,体重18-22g。2.实验方法:2.1剂量选择:受试物设2000mg/kg.BW、4000mg/kg.BW、6000mg/kg.BW三个剂量组,分别称取50.00g、100.00g、150.00g受试物加蒸馏水至250ml混匀,冷藏保存,用完再配,另设食用植物油阴性对照组,每组40只动物。分为免疫一组、二组、三组、四组,其中一组用于小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验;二组用于NK细胞活性测定及淋巴细胞转化实验;三组用于抗体生成细胞实验、血清溶血素测定和迟发型变态反应;四组用于小鼠碳廓清实验。小鼠按10mg/kg.BW体重一次经口灌胃,连续给予30天,每周称一次体重,调整灌胃体积。2.2实验步骤:2.2.1小鼠碳廓清试验:连续灌胃30天后,于小鼠尾静脉注射用4倍生理盐水稀释的印度墨汁,按0.1ml/10g墨汁注入后立即计时,于注入墨汁后第2、10min分别从内眦静脉丛取血20μl,加到2mlNa2CO3溶液中,以Na2CO3溶液作空白对照,用723分光光度计在600nm处测定光密度值。取血后处死小鼠,取肝、脾称重,计算吞噬指数。2.2.2小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法):连续灌胃30天后,每只小鼠腹腔注射20%的鸡红细胞悬液1ml,30分钟后,颈椎脱臼处死,将其固定在鼠板上,正中剪开腹壁皮肤,经腹腔注入生理盐水2ml,转动鼠板1分钟,吸出腹腔洗液1ml,平均滴于2张载玻片上,置湿盒37℃30分钟,取出在生理盐水漂洗、晾干、固定,4%GiemsaPBS染色3分钟,蒸馏水漂洗晾干,镜检。计算吞噬百分率及吞噬指数。2.2.3迟发型变态反应(DTH)(足跖增厚法):灌胃30天后,给小鼠腹腔注射2%压积SRBC(0.2ml/每鼠)致敏4天后,测量左后足跖厚度,然后再测量部位皮下注射20%(v/v)SRBC(20μl/每鼠),于注射后24h测量左后足跖厚度,同一位测量三次,取平均值,以攻击前后足跖厚度差值(足跖肿胀度)来表示DTH的程度。2.2.4ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验(MTT法):首先进行脾细胞悬液的制备。将细胞浓度调整为3×106个/ml,然后将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中,每孔1ml,一孔加75μlConA液,另一孔作对照,置5%CO2孵箱37℃培养72h。培养结束前4h,每孔轻轻吸去上清液0.7ml加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液,同时加入MTT(5mg/ml)50μl/孔继续培养4h,培养结束后,每孔加入1ml酸性异丙醇,使紫色结晶完全溶解,然后将每孔液体移入比色杯中,用723分光光度仪于570nm波长处比色测定光密度值。2.2.5抗体生成细胞检测(Jernr改良玻片法):连续灌胃30天后,每只小鼠腹腔注射2%压积SRBC0.2ml,将免疫5天半后的小鼠颈椎脱臼处死,取出脾脏放在盛有Hank’s液的平皿内,制成脾细胞悬液。将琼脂糖配成1%水溶液,水浴煮30min,与等量双倍Hank’s液混合,分装小试管,每管0.5ml,再向管内加10%(用SA缓冲液配制)压积SRBC50μl,脾细胞悬液各20μl做两个平行样,迅速混匀后,倾倒于琼脂糖薄层玻片上,待琼脂凝固后,将玻片水平扣放在片架上,放入二氧化碳培养箱中孵育1.5h,然后将补体加入到玻片架凹槽内,继续温育1.5h,计数溶血空斑数。2.2.6血清溶血素测定(血凝法):在连续灌胃30天后,每只小鼠腹腔注射2%SRBC0.2ml免疫,继续灌胃5天后,摘除眼球取血于离心管内,放置1h,剥离,2000r/min离心10min,收集血清,用生理盐水将血清作倍比稀释,每份稀释12孔,将不同稀释度的血清置于血凝板中,每孔100μl,再加入0.5%SRBC悬液100μl,混匀,置湿盒37℃3h后观察结果,记录每孔的凝集程度。计算抗体积数。2.2.7NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶LDH测定法):连续灌胃30天后,颈椎脱臼处死动物,取出脾脏,撕碎,过200目筛网后,用Hank’s液洗3次,用完全RPMI1640培养液配成2×107个/ml细胞悬液。将各只小鼠的细胞悬液取300μl分3孔置于96孔培养板中,每孔100μl,每孔加靶细胞(YAC-1细胞,4×105个/ml)100μl,同时做靶细胞自然释放孔(靶细胞100μl+培养液100μl)及最大释放孔(靶细胞100μl+2.5%Triton100μl)各8孔,37℃5%CO2培养4小时,取出1500r/min离心5min。将各孔上清液100μl置于另一培养板中,每孔再加入100μl基质液,10分钟后加1mol/L的HCL30μl终止反应,在490nm处测定OD值,计算NK细胞活性率。3.试验数据统计:试验数据采用SPSS10.0forWindows软件包处理。对照组与剂量组的数据经方差齐性检验,方差齐,进行方差分析,如P值小于0.05,则用Dunnett法进行两两比较;若方差不齐,则进行数据转换,仍不齐,改用秩和检验,如P值小于0.05,则用Dunnett’sT3法进行两两比较(P>0.05为非显著性差异,P<0.05为显著性差异)。4.结果4.1本发明对小鼠体重的影响见表14-17。表14:各组小鼠的初始体重表15:各组小鼠的中期体重表16:各组小鼠的结束体重表17:本发明对小鼠体重增重的影响由表14-17可见,本发明免疫一组、免疫二组、免疫三组及免疫四组小鼠的初始体重与阴性对照组相比,经方差齐性检验,方差齐(P〉0.05),且方差分析结果(P〉0.05),说明各组小鼠与阴性对照组之间的初始体重是均衡的。三个剂量组小鼠试验中期、末期的体重以及试验期间小鼠体重的增长与阴性对照组相比,经统计学处理,无显著性差异(P〉0.05),即本发明对小鼠的体重增长无影响。4.2本发明对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响表18:本发明对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响由表18可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠的碳廓清能力与阴性对照组相比,经统计学处理,无显著性差异(P>0.05)。表19:本发明对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响由表19可见,连续灌胃30天后,三个剂量组动物的吞噬率和吞噬指数与阴性对照组相比,经统计学处理,中、高剂量组吞噬指数有显著性差异(P<0.05)。由表18、表19可见,本发明对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能试验结果阳性。4.3本发明对小鼠细胞免疫的影响表20:本发明对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响由表20可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠的足跖肿胀度与阴性对照组相比,经统计学处理,无显著性差异(P>0.05)。表21:本发明对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响由表21可见,连续灌胃小鼠30天后,三个剂量组小鼠的淋巴细胞增殖能力与阴性对照相比,经统计学处理,无显著性差异(P>0.05)。由表20、表21可见本发明对小鼠细胞免疫试验结果为阴性。4.4本发明对小鼠体液免疫的影响表22:本发明对小鼠抗体生成细胞的影响由表22可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠的溶血空斑数与阴性对照相比,经统计学处理,低、中剂量组有显著性差异(P<0.05)。表23:本发明对小鼠血清溶血素的影响由表23可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠的抗体积数与阴性对照组相比,经统计学处理,低剂量组有极显著性差异(P<0.05)由表22、表23可见,本发明对小鼠体液免疫试验结果呈阳性。4.5本发明对小鼠NK细胞活性的影响表24:本发明对小鼠NK细胞活性的影响由表24可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠NK细胞活性与阴性对照相比,经统计学处理,无显著性差异(P>0.05)。本发明对小鼠的NK细胞活性试验结果显阴性。5.总结:本发明连续灌胃小鼠30天后,对小鼠体重无明显影响;对小鼠的细胞免疫试验结果阴性;对小鼠的NK细胞试验结果阴性;对小鼠的体液免疫试验,三个剂量组的溶血空斑数与阴性对照组比较,低、中剂量组差异均有显著性(P<0.05),试验结果阳性;对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能试验,三个剂量组小鼠的吞噬率和吞噬指数与阴性对照组比较,中、高剂量组差异有显著性(P<0.05),试验结果阳性。依据《保健食品检验与评价技术规范》2003年版可以判定,本发明上述实施例提供的冻干驴奶恰玛古粉对动物具有增强免疫力的功能,可知,本发明上述实施例一至实施例五提供的驴奶恰玛古粉对于人体具有显著的增强免疫力的功能。如上所述,即可较好地实现本发明,上述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述,并非对本发明的范围进行限定,在不脱离本发明设计精神的前提下,本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进,均应落入本发明确定的保护范围内。当前第1页1 2 3 
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