一种中草药渣定向发酵制备功能性饲料添加剂的方法与流程

文档序号:15266758发布日期:2018-08-28 21:53阅读:628来源:国知局
本发明涉及一种中草药渣定向发酵制备功能性饲料添加剂的方法。
背景技术
::中草药渣是一广泛而丰富的资源,据报道全国年排放量约3000万吨,随着中医药及其保健事业的发展,其产量还在不断增加;如何科学地利用这一资源是当今提倡低碳生活、节能环保和绿色循环经济主题中的重要研究内容之一。大量研究表明中药渣除含有大量的蛋白质、脂肪、微量元素等营养物质外,含有不少未提取出的药性成分;目前中药渣的利用主要是再提取其他有效成分,用于栽培食用菌,用作饲料或饲料添加剂、生物质能源,造纸原料,发酵生产有机肥和处理废物等。中药渣粉碎用作饲料添加剂具有营养调节、改善肉食品品质、增强免疫、调节激素、抗菌抗病毒等作用,保健类中药渣饲养动物可保健促生长,提高生产性能;黄莲、木香、吴茱萸、五味子等药渣应用可防治畜禽鱼消化道疾病、烂鳃病,起到抗生素和杀虫剂类的作用。中药渣生物发酵饲料与功能性饲料添加剂研究,目前,中药渣生物发酵饲料与饲料添加剂研究,多局限用益生菌、酵母菌发酵生产益生菌饲料添加剂,用丝状真菌(白腐菌、曲霉等)发酵生产蛋白饲料或用食药真菌发酵生产蛋白饲料添加剂。其发酵饲料或饲料添加剂主要是考虑指标为降解粗纤维,提高蛋白质含量,增加益生菌等,以平衡营养、提高消耗率、增强免疫和抗病力,提高增重和繁殖率。中草药渣发酵菌种的筛选主要考虑产物营养成分的提高与改善,增强消化酶活、提高抗菌力,如焦巧芳(2010)从众多菌中筛选出棘孢木霉发酵中药渣,使其营养成分大大改善;在兽中药发酵方面研究较多,其菌种筛选主要是用于发酵中草药替代抗生素,如蓝时乐(2010)报道米曲霉发酵中草药、郭舒(2015)枯草芽孢杆菌发酵复方中草药,张立彬(2012)复合益生菌发酵中草药复合饲料添加剂。药(食)用真菌除了含有丰富的营养物质外,还各种药用功能,广泛应用于医药、保健食品业,也大量应用于中草药与药渣的发酵,但大多为“双向发酵”,即中草药制备培养基(药性基质)用药食真菌发酵(生产药性菌质),中草药为药食真菌提供营养,反过来药食真菌生长繁殖过程中菌丝体分泌各种酶转化中草药中的一些无效成分为有效成分,提高药物功能。但这一方法在中草药与菌种组合上未能考虑二者的趋同性,具有很大的盲目性,费工费时,成功率低。药渣含大量可利用的营养成分和药性成分,具有广阔的应用前景,但同时由于药材的多样性、成分的复杂性,致使药渣再利用时存在很多技术问题,如:1、发酵菌种选择、中药渣与菌种的组合缺乏科学性,有很大的盲目性与随意性。2、对中药渣的利用未能很好的利用残存药效成分及原药材的药理药性,大多将其作为普通的粗料或工业副产品来利用。3、对药食用真菌的药理药性未能科学地用应用于中草药渣的发酵,其发酵产品未能充分考虑药性功能的提高或改善。4、中草药渣发酵产品大多追求饲料营养价值的改善与提高,如蛋白质含量的增加,纤维素含量的下降等,缺乏对其药理功能及其成分的深入研究。5、产品应用大多局限于用作常规饲料或一般的提高免疫性功能饲料添加剂,未能合理地用于动物疾病防治的应用。另外,目前中药渣的发酵研究,是将药渣作为一般(或特殊)的培养基料,进行一次性发酵,有单一菌种发酵,也有复合菌种发酵;有单味中药(渣)发酵,也有复合(方)中药(渣)发酵。不论是什么发酵都是基于营养性状的改善(提高粗蛋白、多糖等的含量,降低粗纤维含量等),与一般功能性(提高免疫力、抗应激、抗菌等)的提高,用作一般的营养保健饲料添加剂或饲料。应用药食真菌作为发酵菌种研究少,主要是进行多糖等物质的变化研究,没有很好的把握药(食)真菌的药理性能应用于中药和中药渣的发酵之中,使药用真菌与中药或中药渣发酵做到同质化提升,实现菌质药理药效功能的相加或相乘。目前中药渣应用动物的研究大多是基于其营养资源,虽然知道其中的残留药效成分与相关成分,但大多忽略了科学开发应用,直接粉碎或简单生物发酵用作饲料或饲料添加剂,均没有将其看作药材或组方药物(低质)去挖掘与提升,在中药理论指导下进行二次开发研究,充分发挥中药渣的药理药效功能,用于动物疾病的防治。关于发酵工艺,一般分两步(培养适合性测定与产物测定)或三步(庄毅提出的“三层优选法”)选择方法确定中药(渣)与菌种的发酵组合,再建立相应的生产工艺。开始的方向目标不明确,缺乏科学理论指导,随机性很大,往往要走很多弯路。发酵产物的后处理工艺简单-多为干燥粉碎,菌体未能破解,有效成分消化吸收率低。技术实现要素:本发明旨在克服现有技术的不足,提供一种中草药渣定向发酵制备功能性饲料添加剂的方法。为了达到上述目的,本发明提供的技术方案为:所述中草药渣定向发酵制备功能性饲料添加剂的方法是将中草药渣按其原方药的功能用途分类,根据动物不同病症以中兽医理论为指导进行选择与组方,再与基础营养料配制成药性基质,灭菌后向药性基质中接种与组方药渣药理功能相同或相似的药(食)用真菌菌丝菌种,发酵后得具有特定功能的药性菌质,经菌体自溶或不自溶、烘干、粉碎后即得功能性饲料添加剂;所述药性基质中,基础营养料的质量百分比为10—30%;所述药用真菌菌丝菌种的接种量为5—20%。优选地,所述基础营养料包括玉米粉、豆粕粉、面粉等农副产品与矿物元素促生长因子等。优选地,所述功能性饲料添加剂包括防治感冒与流感的饲料添加剂、防治呼吸系统疾病的饲料添加剂、防治消化道疾病的饲料添加剂、防治生殖系统疾病的饲料添加剂、防治全身性疾病的饲料添加剂、安神与代谢调节的饲料添加剂、防治风湿与外病科的饲料添加剂、补充营养抗菌增免促生长的饲料添加剂。优选地,所述感冒与流感包括风寒感冒、风热感冒、病毒性感冒;所述呼吸系统疾病包括急性炎症、慢性炎症;所述消化道疾病包括急性肠胃炎、慢性肠胃炎、便秘、肝胆综合征;所述生殖系统疾病包括繁殖障碍性疾病、产后疾病、乳房炎;所述全身性疾病包括气血虚弱症、热性疾病;所述安神与代谢调节包括抗应激、调节代谢;所述风湿与外病科病包括风湿痹症、外科炎症等。优选地,制备防治风寒感冒的饲料添加剂时,中草药渣选自治疗风寒感冒的辛温解表类中成药药渣,真菌选自性温发汗祛风寒的药/食用真菌;制备防治风热感冒的饲料添加剂时,中草药渣选自治疗风热感冒的清凉解表中成药药渣,真菌选自疏散风热解表的药/食用真菌;制备防治病毒性感冒的饲料添加剂时,中草药渣选自清热解毒宣肺化痰中成药药渣,真菌选自清热解毒、化痰理气的药/食用真菌;制备防治急性呼吸道炎症的饲料添加剂时,中草药渣选自清热化痰止咳中成药的药渣,真菌选自治肺热咳嗽的药/食用真菌;制备防治慢性呼吸道炎症的饲料添加剂时,中草药渣选自润肺、化痰、止咳、平喘的中成药的药渣,真菌选自补益气血、止咳平喘的药/食用真菌;制备防治急性肠胃炎的饲料添加剂时,中草药渣选自清热燥湿治疗肠胃炎的中成药渣,真菌选自清热利湿、治痢的药/食用真菌;制备防治慢性肠胃炎的饲料添加剂时,中草药渣选自温胃健脾,补中益气,消食化积的中成药渣,真菌选自健脾止泻、和胃消食的药/食用真菌;制备防治便秘的饲料添加剂时,中草药渣选自清热润肠,顺气导滞的中成药渣,真菌选自补气血、润肠通便的药/食用真菌;制备防治肝胆综合症的饲料添加剂时,中草药渣选自疏肝理气,清热祛湿中成药药渣,真菌选自清热解毒、消炎、健脾利湿、保肝护肝的药/食用真菌;制备防治繁殖障碍性疾病的饲料添加剂时,中草药渣选自补肾壮阳,活血通经的中成药或保健食品药渣,真菌选自补肾壮阳、滋补健身的药/食用真菌;制备防治产后疾病的饲料添加剂时,中草药渣选自清热、活血、祛瘀、止痛的妇科和心血管病用中成药药渣,真菌选自活血止血、消炎祛瘀、崩漏带下的药/食用真菌;制备防治乳房炎的饲料添加剂时,中草药渣选自清热解毒、化瘀消肿、活血止痛、疏肝理气治疗乳房炎中药渣和通络下乳的中成药渣,真菌选自具清热解毒,消肿排脓功能的药/食用真菌;制备防治气血虚弱症的饲料添加剂时,中草药渣选自补中健脾、补血益气中成药或保健食品的药渣,真菌选自补脾开胃、补益气血药/食用真菌;制备防治热性疾病的饲料添加剂时,中草药渣选自清热凉血解毒的中成药药渣,真菌选自抗菌抗病毒,凉血止血的药/食用真菌;制备抗应激的饲料添加剂时,中草药渣选自降血压,治疗冠心病等的安神宁心成方剂药渣,真菌选自具镇静安神、滋补健脑、宁心健体的药/食用真菌;制备调节代谢的饲料添加剂时,中草药渣选自高血脂、糖尿病、高胆固醇等代谢性疾病治疗的中成药药渣,真菌选自降血糖、血脂、胆固醇的药/食用菌;制备防治风湿痹症的饲料添加剂时,中草药渣选自通经活血,祛风祛湿治疗风湿骨病中成药渣和行气活血、化瘀通脉治疗心血管病的中成药渣,真菌选自活血通络,驱风祛湿,强筋壮骨的药/食用真菌;制备防治外科疾病的饲料添加剂时,中草药渣选自皮肤黏膜炎症病治疗中成药渣,真菌选自清热解毒、治疗痈、疽、疮、疖、癣的药/食用真菌。制备补充营养抗菌促生长的饲料添加剂,可选自单味纤维含量低营养丰富的中草药和动植物提取后的残渣或其他组方(如肿瘤用药、眼科用药、耳鼻喉及口腔科用药等)中成药的药渣及丸剂、散剂、片剂等制剂的部分中成药提取后的药渣;所述真菌选自生长快蛋白含量高并具抗菌功能的药/食用真菌或用与药渣原药功能相同或相近的药/食用真菌。优选地,中药渣组方包括经典的或疗效确切的成方中成药渣中缺失的个别单味中草药渣可用相应的单味中草药渣或单味中成药补充,也包括相同或相近药理功能的几种中药渣组合,还包括加味组方,如制备防治急炎呼吸道性症的饲料添加剂时,清热化痰止咳中成药的药渣中可加清热毒中成药的药渣或原药材;制备防止慢性肠胃炎的饲料添加剂时,温胃健脾,补中益气,消食止痛的中成药渣中可加涩肠止泻的石榴皮、诃子、乌梅、肉豆蔻、赤石脂等中的一种或几种的药渣或原药材。优选地,所述治疗风寒感冒的辛温解表类中成药药渣包括九味羌活颗粒、小青龙合剂、风寒感冒冲剂、风寒咳嗽颗粒、感冒清热颗粒、荆防感冒冲剂、咳喘宁颗粒、桂枝合剂、桂龙咳喘宁颗粒、表实感冒颗粒、正柴胡饮颗粒、杏苏止咳冲剂、川芎茶调冲剂、宝咳宁颗粒、辛芩颗粒等的药渣,所述性温发汗祛风寒的药(食)用真菌包括麦散黑粉菌、苦白蹄、牛肝菌等;所述治疗发热感冒的清凉解表中成药药渣包括风热感冒冲剂、复方瓜子金颗粒、复方马缨丹片、感冒舒颗粒、感冒退热颗粒、抗感颗粒、抗感解毒口服液、利咽解毒颗粒、双黄连颗粒、午时茶颗粒、银翘解毒胶囊、银黄口服液、复方金银花颗粒、止嗽定喘口服液、桑菊感冒片、小柴胡颗粒、柴黄胶囊、羚羊感冒片、复方马缨丹片、感冒清胶囊、小儿解表颗粒、小儿清热止咳口服液鼻炎片、鼻渊舒口服液、鼻窦炎口服液、暑热感冒冲剂、清凉冲剂等的药渣,所述疏散风热解表的药(食)用真菌包括蝉花、香杏口蘑、牛樟芝等;所述清热解毒宣肺化痰中成药药渣包括正柴胡饮颗粒、香雪抗病毒口服液、羚羊感冒片、板蓝根颗粒、荆防败毒冲剂、双黄连口服液、复方板蓝根冲剂、小儿肺热咳喘口服液、清热解毒口服液、连花清瘟胶囊、抗感颗粒、复方一枝蒿颗粒、小儿感冒茶、复方银黄口服液等的药渣,所述清热解毒、化痰理气的药(食)用真菌包括菰菌、牛樟芝、环柄香菇等;所述清热化痰止咳中成药的药渣包括复方蒲芩胶囊、复方鱼腥草片、复方大青叶合剂、止咳橘红口服液、枇杷止咳冲剂、麻杏止咳糖浆、桂龙咳喘宁胶囊、川贝止咳糖浆、银黄清肺胶囊、清热消炎宁片、太极急支糖浆、热炎宁颗粒、小儿百部止咳糖浆、小儿肺热咳嗽口服液、清火栀麦片、千柏鼻炎片、九龙解毒胶囊等的药渣,所述清热毒中成药的药渣包括银黄口服液、穿心莲胶囊、鱼腥草注射液、蒲公英片冲剂、白花蛇舌草注射液、金银花露、一清颗粒的药渣,所述治肺热咳嗽的药(食)用真菌包括金耳、银耳、豆包菌、竹黄等;所述润肺、化痰、止咳的中成药的药渣包括川贝雪梨膏、蛇胆川贝枇杷膏、克咳立效胶囊、玄麦甘桔颗粒、二冬膏、支气管炎片、白杏片、固本咳喘片、橘红痰咳液、金果含片、口炎清颗粒等的药渣,所述补益气血、止咳平喘的药(食)用真菌包括灵芝、隐孔菌、蛹虫草、苦白蹄、毛木耳、竹荪、黑木耳、虎奶菇等;所述清热燥湿治疗肠胃炎的中成药渣包括枫蓼肠胃康胶囊、藿香正气水,芩连片、葛根芩连片、暑湿感冒颗粒、清热除湿止泻颗粒、解毒止泻胶囊、九味清热胶囊、痢特敏颗粒、止泻颗粒、飞扬肠胃炎胶囊、肠康片、炎立消片、穿王消炎胶囊、扁蕾颗粒、复方苦木消炎分散片、炎可宁片、卓丹止泻灵、金银露、复方仙鹤草肠炎胶囊、暑症片、功劳去火片、虎地胶囊等的药渣,所述清热燥湿治疗肠胃炎的中成药渣包括癃清片、清淋颗粒、排石颗粒的药渣,所述清热利湿、治痢的药(食)用真菌包括白侧耳、槐耳白灵菇、榆耳、松乳菇、黄金菇等;所述温胃健脾,补中益气,消食止痛的中成药渣包括小建中合剂、参术健脾冲剂、卓丹复方消食冲剂、四磨汤口服液、小儿腹泻宁糖浆、胃宁冲剂、胃灵冲剂、胃苏冲剂、砂养胃冲剂、三九胃泰胶囊、军铃胃病冲剂、肠胃宁片、安中片、安胃片、儿康宁糖浆、化积口服液、健胃消食片、胃舒宁颗粒、虚寒胃痛颗粒、阴虚胃痛颗粒、气滞胃痛颗粒、复胃散片、胃肠健胶囊、健胃愈疡颗粒、溃疡灵胶囊等的药渣,所述健脾止泻、和胃消食的药(食)用真菌包括茶薪菇、羊肚菌、茶树菇、鸡腿蘑、猴头菇、香菇、毛蜂窝菌、杯珊瑚菌、牛肝菌、茯苓、银耳等;所述清热润肠,顺气导滞的中成药渣包括三黄片、牛黄解毒片、番泻叶冲剂、降脂减肥片、大黄通便冲剂、首乌片、苁蓉通便口服液、牛黄上清胶囊、精乌冲剂、血脂灵片、香丹清胶囊、通便灵胶囊等的药渣,所述治疗痔疮的药渣包括痔炎消颗粒、痔特佳片,所述补气血、润肠通便的药(食)用真菌包括斑玉蕈、阿魏蘑菇、黑木耳、真姬菇、虎奶菇等;所述疏肝理气,清热祛湿中成药药渣包括龙胆泻肝丸、茵栀黄颗粒、黄疸茵陈颗粒、九味肝泰胶囊、九味獐牙菜胶囊、护肝片、利肝隆片、复乐金胆片、肝康宁、肝必复、复肝能、益肝灵片、肝勃宁胶囊、金胆注射液、裸花紫珠片、金马肝泰颗粒、乙肝宁冲剂、茵栀黄口服液、利肝乐口服液、利胆解毒胶囊、复方木鸡冲剂、乙肝扶正胶囊、垂盆草冲剂、乙肝扶正胶囊、慢肝解郁胶囊、乙肝解毒胶囊、健胃愈疡片、裸花紫珠片、茵陈五苓糖浆、气滞胃痛颗粒、胆乐胶囊、利胆排石片等的药渣,所述清热解毒、消炎、健脾利湿、保肝护肝的药(食)用真菌包括亮菌、云芝、茯苓、紫灵芝、假蜜环菌、双孢蘑菇、绿菇、牛樟芝、玉米黑霉、灰树花、白灵菇、金针菇等;所述补肾壮阳,活血通经的中成药或保健食品药渣包括滋肾健脑液、十八味补肾益气口服液、益龄精口服液、阳春口服液、桂枝茯苓胶囊、七宝美髯颗粒、暖宫孕子胶囊、痛经宝颗粒、复方地黄补肾酒、八珍益母膏、桑椹膏、威蠢孕康液、温经合剂、杜仲胶囊、宫环养血颗粒、精乌冲剂、金水宝胶囊、藤黄健骨片、东方神力胶囊、锁阳补肾胶囊、王中王口服液、龟鹿补肾口服液、肾宝糖浆、补肾强身片、清宫长春胶囊、蚕蛾公补片、三宝胶囊、抗骨增生胶囊、妇康宝煎膏、阳春口服液、壮骨伸筋胶囊、活血通脉胶囊等的药渣,所述补肾壮阳、滋补健身的药(食)用真菌包括松茸、羊肚菌、冬虫夏草、金顶侧耳、蛹虫草、虎奶菇裂褶菌等;所述清热、活血、祛瘀、止痛的妇科和心血管病用中成药药渣包括慈航胶囊、产妇安胶囊、妇科千金片、产妇康颗粒、黄柏八味片、妇良片、妇炎康片、妇宝颗粒、红药片、妇科十味胶囊、潮安片、妇炎净胶囊、新生化冲剂、妇科白带胶囊、白带片、治带片、妇乐冲剂、化症回生片、金鸡冲剂、金刚藤糖浆、益母草膏、痛经灵冲剂、痛经宝颗粒、盆炎净片、独一味颗粒、归羊颗粒、痛经胶囊、黄柏八味片、妇科止带片、冠脉宁、冠心片、脉管炎片、脑心通、心可舒片、止痛化癥胶囊等的药渣,所述活血止血、消炎祛瘀、崩漏带下的药(食)用真菌包括麦角、白灵菇、大红菇桑黄、竹红菌、美味牛肝菌、肉球菌、黑木耳、毛木耳、安络小皮伞、马勃、朱红栓菌、牛樟芝等;所述清热解毒、活血消痛、化痰消肿、疏肝理气治疗乳房炎中药渣包括炎可宁片、八珍丸、蒲公英片、乳疮丸、乳疾灵颗粒、乳块消片、乳癖消片、乳宁胶囊、乳核内消颗粒、小败毒膏、祛瘀散结胶囊等的药渣,所述通络下乳的中成药渣包括通乳颗粒的药渣,所述具清热解毒,消肿排脓功能的药(食)用真菌包括虎奶菇、肉球菌、豆包菌、朱红栓菌等;所述补中健脾、补血益气中成药或保健食品的药渣包括参芪阿胶颗粒、参芪片、参茸固本片、四物合剂、八珍膏、琼玉膏、维血冲剂、血神口服液、复方扶芳藤合剂、金牡蛎胶囊、养命宝胶囊、六味地黄口服液、杞菊地黄口服液、贞芪扶正冲剂、当归红枣冲剂、阿胶补血冲剂、养血生发胶囊、健脑益智冲剂、益肾消渴胶囊、益肾补骨口服液、补肾益脑片、王中王口服液、参附射液、精乌冲剂、血神口服液、贞芪扶正冲剂、归芪冲剂、八珍膏、十全大补酒丸、古汉养生精、桂龙药膏、六味补血颗粒、生血宝颗粒、增抗宁胶囊、益气养血口服液、中汇川黄液、心通口服液等的药渣,所述补脾开胃、补益气血药(食)用真菌包括毛木耳、硫磺菌、豹皮菇、玉米黑粉菌、滑子菇、灵芝、紫芝、乌灵参、蛹虫草、真姬菇等;所述清热凉血解毒的中成药药渣包括清热解毒口服液、抗病毒口服液、清开灵口服液或注射液、甘露解毒口服液、复方板蓝根冲剂、复方大青叶注射液、白虎合剂、荆防冲剂、银黄清肺胶囊、复方板蓝根冲剂、牛黄清脑片、牛黄八宝丸、犀牛丹、清热內消丸、化毒丸、水牛角解毒丸、清火栀麦片、犀牛地黄丸、连花清瘟胶囊、凉血退热排毒丸、复方珍珠解毒口服液等的药渣,所述抗菌抗病毒,凉血止血的药(食)用真菌包括二型革盖菌、白侧耳、金针菇、冬虫夏草、灵芝、牛樟芝、牛舌菌、香菇、竹黄、蜜环菌、、灰树花、东方栓菌、隆纹黑蛋巢菌、桦褐孔菌、大马勃、洛巴口蘑等;所述降血压,冠心病的安神宁心成方剂药渣包括参芪五味子片、脑乐静、脑心舒、正天丸、天麻首乌片、滋心阴口服液、夜宁糖浆、七叶神安片、安神补脑液、安神口服液、安尔眠糖浆、眠安宁脑乐静、养血安神糖浆、安神补心丸、枣仁安神液、七叶神安片等养血安神,滋养心阴中药渣;山菊降压片、清脑降压片、降压冲剂、复方丹参片、安神膏、三宝胶囊、山菊降压、降血压片、强力脑心康胶囊、脑震宁冲剂、滋心阴口服液、脑立清丸等的药渣,所述具镇静安神、滋补安神、宁心健体的药(食)用真菌包括蛤蟆菌、乌灵参、古尼虫草、竹荪、茯苓等;所述代谢性疾病治疗的中成药药渣包括荷丹片、舒冠片、丹参片、活心丹、玉楂冲剂、脉安冲剂、山楂降脂片、丹田降脂丸、抗栓保心片、康尔心胶囊、玉泉丸、消渴丸、渴乐宁胶囊、金芪降糖片、仙灵骨葆胶囊、健肾地黄丸等化痰降浊,活血化瘀治疗高血脂、高血糖、高胆固醇、骨质疏松的归肾丸、苁蓉健肾丸、鱼鳔补肾丸、复方补骨脂冲剂等的药渣,所述降血糖、血脂、胆固醇的药(食)用真菌包括硫磺菌、虎皮菌、蜜环菌、香菇、鸡油菌、灰树花、竹荪、黑牛肝菌、茯苓等;所述通经活血,祛风祛湿治疗风湿骨病中成药渣包括舒筋活血胶囊、风湿骨痛胶囊、风湿马钱片、夏天无胶囊、龟蛇酒、三蛇药酒、国公酒、三两半药酒、风湿酒、伤痛宁片、通天口服液、消栓通络胶、根痛平颗粒、三七伤药片、骨刺消痛片、颈复康颗粒、坎离砂、脑得生片、独一味颗粒、骨筋丸胶囊、愈伤灵胶囊、伤湿止痛膏、安阳精制膏、麝香关节止痛膏等的药渣,所述行气活血、化瘀通脉治疗心血管病的中成药渣包括乐脉颗粒、清脑降压片、通心络胶囊、舒心口服液、心宁精制冠心颗粒、地奥心血康口服液、一洲心可宁、太极通天口服等的药渣,所述活血通络,驱风祛湿,强筋壮骨的药(食)用真菌包括安络小皮伞、华褶孔菌、蜜环菌、竹黄、大红菇、秦蘑菇、空柄牛肝菌等;所述皮肤黏膜炎症病中成药渣包括穿心莲胶囊、肿节风分散片、牛黄消炎片、癣湿药水、京万红痔疮膏、京万红软膏、肤痔清软膏、金果榄凝胶、九味痔疮胶囊、野菊花颗粒、痔疾栓、消肿痔疮片、痔痛安搽剂、疗痔胶囊、紫草膏、烧伤喷雾剂、烧烫伤膏、冻疮未溃膏、复方重楼酊、京万红、三黄膏、伤疖膏、鳖甲消痔胶囊、复方青黛胶囊、苦参疱疹酊等的药渣,所述清热解毒、治疗痈、疽、疮、疖、癣的药(食)用真菌包括朱红栓菌、牛樟芝、马勃菌、粗毛褐孔菌、槐耳等。优选地,所述单味中草药渣选自单味中草药提取后的药渣;所述其它药渣包括肿瘤用药药渣、眼科用药、耳鼻喉及口腔科用药、急症等中成药的药渣及丸剂、散剂、片剂等中成药制剂中部分药材提取后的药渣;所述抗菌促生长真菌选自生长快蛋白含量高并具抗菌增免功能的药(食)用菌或与药渣原药功能相同或相近的药(食)真菌。药食真菌包括药用真菌、食用真菌和药食两用真菌,发酵可用一种或多种混合与中草药渣发酵;也可与丝状真菌、益生菌混合或分步发酵。下面对本发明作进一步说明;本发明实行“四步优选”组合发酵的方法:第一步中草药渣的选择与组方(用其它药渣或药材,对原组方中缺失的作补充,并可根据病症需要进行加减),根据组方药渣原药材的功能与适应症,选用相匹配的药食真菌构建发酵组合,实行定向(功能)发酵,以期相增与互补药效功能。第二步测定或解决发酵组合的适合性(菌能否较好地生长);第三步,测定发酵菌质的主要活性功能成分(组分)测定;第四步,饲喂试验验证效果,制备特定功能性饲料添加剂。首先,选用国内最多的中成药(主要是液体制剂、颗粒剂、膏剂、浓缩丸剂和片剂等)、单味中草药与保健品的药渣及散剂、丸剂、片剂等制剂中部分药材提取后的药渣,按原药材的药理药性及功能作用分类,根据动物不同病症以中(兽)医理论作指导,对中成药药渣进行选择与组方,再选用功能作用相同或相近的药(食)用真菌构建发酵组合。(1)中药渣分类:便于防治动物疾病用药渣选择,将国内产主要中成药药渣分成8大类19小类,具体见表1。(2)组方:在中兽医理论指导下,所选方药渣,用单味或复方中药渣或中草药对缺失药渣(方中个别或部分药材未经提取)补充或进行组方调整:①补充缺失药物:对成方药渣中缺味中药进行补偿,如开发防治肝胆综合症饲料添加剂,选用治疗肝炎的九味肝泰胶囊,其主要成分有三七、郁金、蜈蚣(不去头足)、大黄(酒制)、黄芩、山药、蒺藜、姜黄、五味子共九味,但其中主药三七因粉碎直接入药,没有药渣,所以应补充原药或替代药(茜草、蒲黄等)药材或药渣。②互补功能药渣相加:选择功能互补的中成药渣混合发酵,如开发治疗动物乳房炎饲料添加剂,选用软坚散结,活血消痛,清热解毒的乳癖消片药渣与益气养血,通络下乳的通乳颗粒药渣,二者混合发酵,在清热解毒,消肿去痛的同时通络下乳,可加速乳房炎的康复。还有通经活血,祛风祛湿治疗风湿骨病的中成药渣可与行气活血,化瘀通脉治疗心血管病的中成药渣混合发酵,开发防治动物风湿痹症饲料添加剂等等。③相加:开发功能全面的添加剂,在某一中成药渣的基础上添加另一种加强功能的药渣,如开发防治肺炎的饲料添加剂,选用清肺、止咳、化痰的止咳橘红口服液等中成药药渣,添加银黄口服液、穿心莲胶囊、鱼腥草注射液等清热解毒,消炎的单方或复方中成药药渣,组合发酵功能更全,效果更好。清热燥湿治疗肠炎腹泻的中成药渣加清热通淋治疗尿结石的中成药渣发酵,可加快止泻;还有温胃健脾,补中益气中成药渣加涩肠止泻的中药或药渣可开发治疗治疗慢性肠胃腹泻饲料添加剂。④综合调整组方:选用多种药渣组方发酵,如小建中合剂、健胃消食片、卓丹复方消食冲剂等健胃消食,补中益气中成药渣的一种或二种,加血神口服液、维血冲剂、复方扶芳藤合剂等补血补气中成药渣一种或二种,再加安神膏、脑乐静、夜宁糖浆等安神养心中草药渣的一种或二种发酵可开发健胃助消化、补血补气、促进动物生长的饲料添加剂。(3)组方药渣与药食真菌发酵组合的选择:根据组方药渣原药材的功能与适应症,选用功能作用相匹配的药(食)用真菌构建发酵组合,实行定向(功能)发酵,以期增强与互补药效功能。如开发防治动物风寒感冒的中药渣菌质饲料添加剂,选用麦散黑粉菌、苦白蹄、牛肝菌等性温发汗祛风寒的药(食)用真菌。表1防治动物不同病症饲料添加剂中草药渣与药/食真菌的组合选择注:1、以上各类别药渣,可根据动物疾病的特点与原药材的药理药性,进行拆分与加减,用单味药渣、一种方药渣或多个方药渣混合,还可补充中药。其次,测定或解决发酵组合的适合性(菌能较好地生长)。各选用的中成药渣,按真菌发酵制剂(菌质)的要求,用其他单味药渣(或药材)补充缺失部分(一些中成药组方中的部分药材直接进入成药而未留下药渣)或作组方加减后,干燥粉碎,添加10-30%的基础营养料(玉米粉、豆粕粉、面粉等农副产品与矿物元素促生长因子等)配制发酵基质,灭菌后,接种选用的药(食)用真菌菌丝菌种5-20%(v/w,其中v单位为ml,w单位为g),置适宜的条件下培养,定时观察菌丝的生长情况。菌丝生长好的即发酵组合适宜。如所测菌种均菌丝不生长或生长不好,需查找原因,如系某味中药渣影响菌丝生长,剔除后再组合发酵;也可以将复方药渣先用丝状真菌或益生菌发酵,后用药用真菌发酵的方法等,解决好发酵组合的适合性问题。第三,测定发酵菌质的主要活性功能成分(组分)。用比较测定法,测定药渣发酵前后的主要成分变化情况:营养成分测定、多糖测定、药效组分测定和生物活性(抗菌、抗病毒、免疫、消炎、止痛等)的测定等,以评判发酵组合的实质性效果,最终确定发酵组合及其药性菌质的生产工艺。第四,饲喂试验验证组合发酵药性菌质的效果与功能性饲料添加剂制备:(1)饲喂试验:根据发酵药性菌质的药效功能,选择相应的发病动物或发病养殖场,用其药性菌质作为饲料添加剂(或药物-药性菌质药物),按常规方法进行临床试验,以验证防治效果。(2)功能性饲料添加剂制备:将发酵好的中草药药渣(药性菌质),直接烘干粉碎制备功能性饲料添加剂;加或不加1-3%nacl、蛋白酶,37-50℃,密封条件下进行菌丝细胞自溶后,烘干粉碎制备功能性饲料添加剂。本发明按照中(兽)医理论,将不同方药的中药渣以原药材的药性功能为依据,进行分类并根据动物不同综合病症作药渣组方。组方中药渣用相同或相似功能的药食真菌组合进行定向发酵,生产特定功能的药性菌质饲料添加剂。功能相同或不同的药食真菌复合发酵中药渣,加强或拓展发酵菌质的功能;药食真菌与丝状真菌、益生菌联合或分步对中药渣发酵,以克服部分中药渣不适应药食真菌生长繁殖,不能定向的目标;或定向发酵后进行益生菌培养,以增强活性功能。发酵药渣的药性菌质采用自溶技术行菌丝体自溶,提高营养物质与功能物质的溶出与利用率。中草药药渣定向发酵的药性菌质作功能性饲料添加剂,替代抗生素等化学药物,用于动物保健与疾病防治。与现有技术相比,本发明的有益效果为:1、中药渣作为劣质中药材(含残存药性成分),按照功能与应用进行分类与组方,发酵,提高和转化功能成分的含量,使之具有强效功能,制作功能性饲料添加剂,克服以往将中药渣简单地作为工业副产品利用率低的问题,大大提高资源的利用率与经济效益。2、中药渣与功能相同或相近的药食用真菌定向发酵,实现功能成分的定向转化,达到药效相加或相乘,提高药效;克服目前中药渣发酵作为饲料或饲料添加剂,主要考虑营养价值,功能作用未能充分利用现状,实现中药渣的第二次高效利用。3、用酵母菌等小型真菌、益生菌先发酵中药渣,转化某些不利药食真菌生长的物质,解决药食真菌与部分药渣组合发酵的障碍问题,这一方法系首次报道。4、中药渣定向固体发酵菌质,经菌丝自溶方法使药性成分成分释放,提高其生物利用度,这系真菌自溶技术的新应用。5、定向发酵中药渣制备特定功能的饲料添加剂,替代抗生素等化学药物,防病治病,实行绿色保健养殖,比以往中药渣发酵仅用作一般饲料或饲料添加剂,是技术与理论上的提升。6、该方法也适用于中药单方与复方制剂的开发应用,为中草药的高效应用提供新的技术方法。具体实施方式1九味肝泰药渣组方生物发酵制备鱼肝胆综合症防治饲料添加剂的研究1.1试验方法(1)材料:九味肝泰胶囊药渣(药方为三七、郁金、蜈蚣、大黄、黄芩、山药、蒺藜、姜黄、五味子,具化瘀通络,疏肝健脾功能);灰树花、百灵菇、双孢蘑菇、金针菇、亮菌、云芝、牛樟芝,制备液体菌种。(2)方法:①药渣配伍与组合发酵:九味肝泰药渣用茜草替代其方剂药渣中缺乏的三七,另加10-20%柴胡药渣药渣以增强疏肝理气的功能,干燥粉碎,加基础营养料(玉米粉:麦麸:豆粕粉以4:3:3的比例配料,再按质量比添加3%kh2po4和1.5%mgso4·7h2o,混合而成;)20%(w/w),混合,加适量水,配制药性基质,高温消毒灭菌后,分别接种各种药用真菌液态菌种10%(v/w),26-28℃培养,定时观察菌丝的生长情况。结果筛选出亮菌和白灵菇两种为发酵组合的适合菌种。再以这2株菌的混合(1:1)菌发酵药性基质3-4天;为了进一步提高药效功能,将其发酵好的药性菌质,添加5-10%的基础营养料,高温灭菌消毒后,再接种枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、纳豆芽孢杆菌、乳酸菌芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌等的混合(1:1:1:1:1)益生菌,35-37℃培养2天。②效果测定:用常规方法测定营养成分;用牛津杯法测定浸提液对病菌的抑制效果;对曾发生过鱼肝胆综合症的两口精养鱼池,以1%的量添加饲料中和不添加的常规饲料进行为期50天的对比饲养试验,测定防治效果。1.2试验结果:(1)营养成分含量测定:药性菌质粗蛋白和粗粗灰分都有大幅度的增加,增长幅度分别达46.35%和43.55%;粗脂肪、粗纤维均下降,下降幅度分别为28.21%、12.85%;各种微量元素含量均有增加,增长幅度为磷70.71%,锰36.31%,钙5.41%,镁47.06%,铁9.08%。见下表2与3。表2九泰胶囊药渣药性基质和药性菌质的常规营养成分含量(%)table4routinenutrientcontentsofchineseherbresidues(chr)andfermentedchr(%)表3九泰胶囊药渣药性基质和药性菌质的矿物元素含量(mg/kg)(2)抗病菌性能测定药性菌质对5种病原菌,除对链球菌作用较弱外,均有较强的抑菌效果,抑菌圈直径大1.2cm以上;经益生菌发酵后抑菌效果进一步提高,结果见表4。表4发酵的药性菌质的抑菌试验结果(抑菌圈)单位:cm(3)临床应用效果测定:试验期试验组鱼池未发生鱼病和死鱼现象;而对照组鱼池在7月上层出现草鱼和鲤鱼等发病死亡,病鱼呈游动无力,采食量减少,摄食后出现窜游、暗浮头或痉挛等现象。解剖病鱼和死鱼发现肝显著肿胀、质地变脆、轻触易碎;有点状或块状出血,或瘀血或花斑肝;胆囊肿大或萎缩;胆汁颜色深绿或墨绿等病变。随后按1%添加该饲料添加剂饲喂,病情逐步得以控制。2王中王口服液中药渣定向发酵制备功能性饲料添加剂的研究2.1试验方法:(1)材料:王中王口服液药渣(原药材为当归、熟地、淮山、党参、枸杞、桑葚、大枣、黄芪、牛骨头)。虎奶菇、裂褶菌、桑黄、羊肚菌、松茸,制备液体菌种。(2)方法:①发酵组合筛选与工艺:按照实例1的方法,将王中王口服液药渣加基础营养料(8:2)配制药性基质,分别接种羊肚菌、松茸、灵芝、虎奶菇、白灵菇、桑黄、裂褶菌、凤尾菇、根酶、木霉和曲霉等大型和小型丝状真菌,26-28℃,培养7天,均未生长。为了解决药用真菌的培养问题,其药性基质改用白地霉、产元假丝酵母、扣囊酵母和啤酒酵母等酵母菌先发酵,发酵好的菌质捣碎,加5%基础营养料配制药性基质,灭菌后分别接种药用真菌,26-28℃,培养至菌丝长满;选择生长快,药性强的药用真菌种作为发酵组合菌,与酵母菌发酵后的王中王中药渣组合发酵,再经干燥、粉碎,制备功能性饲料添加剂。②效果测定:观察法测定药用真菌在酵母菌发酵药渣基质中的生长情况;常规方法测定药用真菌发酵药性菌质的营养成分含量变化;牛津杯法测定药用菌质水提液的抗病菌效果;硫酸-苯酚法(测定总糖)结合3,5–二硝基水杨酸(dns)比色法(测定还原糖)测定多糖含量(多糖含量=总糖含量-还原糖含量):用紫外法(香草醛-高氯酸比色法测定总皂苷)测定总皂苷含。③选择30头5-6胎的大长杂经产母猪,平均分为发酵药渣试验、未发酵药渣对照组和空白对照3组,试验组饲料中添加1%药性菌质添加剂(裂褶菌和虎奶菇混合发的药性酵菌质),对照组添加1%未发酵药渣,空白对照组不添加用原日粮,进行大围产期(怀孕90天至仔猪断奶,为期60天)的饲养试验,比较测定仔猪生长与母猪体质等情况。2.2试验结果:(1)食药真菌在酵母发酵药渣培养基的生长情况五种大型真菌除桑黄外,其它4四种均能在3种酵母发酵后的王中王口服液药渣培养基中生长,特别是裂褶菌和虎奶菇生长最好,均48h菌丝几乎长满;但均不能在未经酵母菌发酵的中药渣培养基上生长(见表5)。表5:药食真菌在经酵母发酵王中王口服液药渣的菌质培养基中的生长情况(2)发酵药性菌质性能测定①抑菌试验3种发酵药渣提取物对5种病菌,除链球菌外,无论是革兰氏阴性菌,还是革兰氏阳性菌均有中等度的抑菌效果;而未发酵药渣提取物则无抑菌效果。结果见表6.表6:二次发酵的王中王口服液药渣菌质的抑菌试验结果单位:cm②营养成分检测常规营养成分:酵母菌与3种药用真菌发酵王中王药渣,常规营养成分有较大的变化,粗蛋白与粗纤维增长明显,分别增长26.3%、46.9%、48.75%和24.2%、47.0%、60.2%;粗脂肪下降,能量变化不明显。结果见表7。表7中药渣和二次发酵中药渣的常规营养成分含量(%)矿物元素:中药渣经虎奶菇和裂褶菌发酵后矿物元素变化显著,其中猛和镁增量最大,达一倍或一倍以上,结果见表8。表8中药渣和二次发酵中药渣的矿物元素含量(mg/kg)氨基酸:氨基酸分析结果显示,发酵后各类氨基酸均呈上涨趋势,尤其是裂褶菌发酵后氨基酸增长幅度最大,总氨基酸含量提高52.8%,其中芳香族氨基酸提高98.7%,支链氨基酸55.7%、直链氨基酸32.7%、酸性氨基酸45.45、碱性氨基酸61.6%、羟基氨基酸56.4%;其次是虎奶菇发酵后的药渣,松茸发酵后的药渣氨基酸变化不明显。结果见表9。表9中药渣和二次发酵中药渣的氨基酸含量(%)多糖与皂苷含量测定3种发酵药渣发酵菌质均较发酵前多糖与皂苷的含量有大幅度的增加,达一倍以上。结果见表10。表10中药渣二次发酵菌质的多糖与皂苷含量测定结果(3次平均值)(3)临床应用用虎奶菇发酵的药性菌质与未发酵药渣,均按1%量添加饲料中,饲喂怀孕后期母猪(产前1月-仔猪28日龄断奶),三组各饲喂5-6胎母猪10头,结果显示:无论是仔猪的各项指标,还是母猪的健康指标,发酵药渣试验组显著优于未发酵药渣对照组,更优于空白对照组(结果见11)。表11发酵王中王药渣饲喂怀孕后期与哺乳期期母猪的效果3.金耳发酵麻杏宣肺颗粒药渣制备防治畜禽肺炎的功能性饲料添加剂(1)发酵组合选择:畜禽呼吸道炎症主要是因感冒等病因所致肌体抵抗力下降,病菌病毒感染所致,多呈急性发病,高热、咳嗽、痰多,属痰热咳嗽证,因此选用麻杏宣肺颗粒药渣制作发酵基质。该药渣系麻黄、苦杏仁、桔梗、浙贝母、鱼腥草、金银花、陈皮、甘草经水提后的残渣,其方药具有宣肺止咳,清热化痰的功能,用于慢性支气管炎急性发作属痰热咳嗽证。为了充分发挥药渣中残留药效成分,并加强其功能作用,选用药用真菌金耳。金耳菌性温中带寒,味甘,能化痰、止咳、定喘、调气,平肝肠,主治肺热、痰多,感冒咳嗽、气喘、高血压等,与麻杏宣肺颗粒的功能作用相似,以实现功能相同,作用相加。(2)组合发酵试验:经初步试验显示金耳菌能很好地在麻杏宣肺颗粒药渣培养基中生长繁殖,而后进行正式试验:将药渣干燥粉碎,按实例1的方法添加20%的基础营养料,加适量水,配制药性基质,接种10%的金耳液态菌种,26-28℃发酵3-4天,待菌丝长满。(3)药性菌质饲料添加剂制备:将发酵好的菌质用碳酸氢钠液调ph8,密封40℃处理12小时,使菌丝自溶,而后60-80℃鼓风干燥,粉碎成细粉,制备药性菌质饲料添加剂。(4)临床应用试验:某牛场从北方运回60头8-12月龄小牛,分两栋牛舍饲养;第二天开始各有1头牛发病,表现为食欲不振、体温升高(40℃)、精神沉郁,眼鼻黏液性分泌物,呼吸急促、气喘、咳嗽、流涎。随后各牛舍又有2-3头牛发病,初步诊断为牛支原体肺炎,立即采取紧急防疫治疗,一栋注射泰乐菌素5mg/kg体重,一天2次,连用2周;另一栋在注射泰乐菌素的同时,在饲料中添加1%的药性菌质添加剂。结果:第一组先3头发病中有1头死亡,剖检呈典型的牛支原体肺炎病变:肺和胸膜轻度粘连,有少量积液;心包积水,液体黄色澄清;肺尖叶及心叶及部分膈叶的局部红色肉变;同时有化脓灶散在分布。另2头发病牛仍然消瘦,时有腹泻,精神不良,继续治疗。第二组的4头发病牛全部康复。4.槐耳发酵肠康片药渣+葛根芩连片药渣制备防治动物肠胃炎药性菌质饲料添加剂(1)药渣组方与发酵组合:急性肠胃炎是动物的常发疾病,由病菌、病毒或毒素侵袭所致,以腹泻为主要症状,西医以抗菌、消炎、止泻方法治疗,中兽医认为外感风寒、暑湿、疫毒或内伤饮食伤及胃肠,水湿转化功能受损所致,据其病因与症状分为寒泻、热泻、虚泻等症,但其基本治疗原则是燥湿止泻。因此,选用葛根芩连片药渣(炙甘草、葛根、黄连、黄芩的水提残渣),具有清热燥湿,解肌止泻的功能;加肠康片药渣(木香、吴茱萸的水提残渣)有芳香理气,止泻止痛的功能;两方药渣组合有一定的治疗肠胃炎的作用。选用槐耳、白侧耳、白灵菇、榆耳4种具有清热利湿,凉血止痢功能的药食用真菌,进行组合发酵生产药性菌质,以增强其功能作用。(2)发酵组合测定:按照实例1的方法,药渣粉碎,添加10%的基础营养料,配制固体培养基,分别接种10%的不同液体菌种,28℃培养,定时观察菌丝的生长情况,结果4.1种菌均能在其培养基上良好地生长。结果见表12。表12不同菌种在复合药渣培养基中的生长情况注:+为有小散状菌落,++菌落增大增多,+++菌落成片,++++菌丝长满(3)组合发酵药性菌质的抑菌效果测定:按照实例1的方法,水提取4种药性菌质,牛津杯法测定提取液对病原菌的抑制效果。结果显示:4种药食真菌发酵混合药渣菌质提取液对5种病菌均有较强的抑制作用,结果见表13表13药食真菌发酵混合药渣提取液的抑菌实验单位:cm(4)药性菌质临床应用试验:用榆耳菌发酵复合药渣制备药性菌质饲料添加剂,在一发生猪流行性腹泻猪场,选用60头断奶仔猪,分三组,每组20头,第1组用西药(50mg/kg病毒唑+庆大霉素,肌肉注射);第2组用药性菌质药物,10g/只,用温水调糊喂服;第3组,药性菌质10g+辅助剂3g(活性炭+人工口服盐),用温水调糊喂服;所有治疗仔猪一天2次给药。结果:经5天治疗,西药的治愈率仅35%,有效率65%;药性菌质药物的治愈率70%,有效率90%;药性菌质+辅助剂的治愈率达75%,有效率达95%。见表14。表14复合药渣发酵菌质对仔猪流行性腹泻的治疗试验组别仔猪数治愈率%显效率%总有效率%无效率%综合评价西药对照2035(7/20)30(6/20)65(2/20)35(7/20)较差药性菌质2070(14/20)20(4/20)90(18/20)10(2/20)良好药性菌质+辅助剂2075(15/20)20(4/20)95(19/20)5(1/20)优秀5.复合中药渣定向发酵生产保健促长生物饲料添加剂(1)药渣与组方:阿胶补血口服液药渣(熟地黄、党参、黄芪、枸杞子和白术的水/水醇提取残渣)、小建中颗粒(白芍、大枣、桂枝、炙甘草、生姜水提残渣)、五味安神颗粒(小麦、葛根、大枣、甘草、银杏叶浸提残渣)3种药渣,其原药综合具有滋阴补血,补中益气,健脾润肺,养心安神之功。(2)发酵组合与生长测定:选用灵芝、紫芝、蛹虫草等补益安神,滋阴壮阳的药用真菌及有益肠胃、助消化的养肚菌等与之组合发酵,经28-30℃发酵培养测定,几种菌均能较好的生长,3-4天菌丝既可长满。(1)组合发酵效果测定:①理化与营养指标测定:按常规方法测定物理性状、常规营养、多糖、多肽含量及对益生菌生长繁殖(药性菌质加10%的基础营养料准备培养基,接种乳酸菌和丁酸梭菌混合菌,37℃培养12h,测定)的影响。结果显示:几种菌发酵后粗蛋白、氨基酸、多糖、多肽含量大幅度提高,粗纤维含量下降,且发酵后的菌质更适合益生菌生长繁殖。结果见表15。表15复合中药渣组合发酵前后饲料营养与功能成分变化情况②对小鼠免疫力的影响测定:发酵药渣菌质以1%的比例添加日粮中,饲喂小鼠14天,按标准方法测定菌质对其免疫功能的影响,结果显示,各项免疫指标均有较大幅度提升。见表16。表16发酵中药渣饲喂小鼠对免疫力的影响测定注:※羊肚菌和灵芝菌各5%。(3)混合菌发酵中药渣饲喂僵猪试验:在某猪场选择20头因疾病生长缓慢的断奶弱仔猪(大约克×长白·大围子猪),随机平均分为2组,分别饲喂试验料(添加1%发酵中药渣)和对照料(添加1%未发酵药渣),饲喂期60d。结果显示:僵仔猪饲喂发酵药渣效果显著,与未发酵药渣比,日增重提高41.3%,提高料重比16.3%。见表17。表17混合发酵药渣对病弱仔猪60天饲养实验结果6.发酵滋肾健脑液中药渣制备功能性饲料添加剂(1)组合发酵:滋肾健脑液中药渣(枸杞子、女贞子、金樱子、菟丝子、覆盆子、何首乌、黄芪、肉桂、白芍、甘草、丹参、淫羊藿水提后的残渣)添加20%的基础营养料制备发酵基质,用同功能的虎奶菇、裂褶菌发酵制备药性菌质药物。(2)菌丝体自溶:将发酵好的药性菌质以1:3-5的料水比加入水,打浆,调ph至8,分装4个三角瓶中,其中3个为试验组,分别加0.05%碱性蛋白酶、2%nacl、0.05%碱性蛋白酶+2%nacl;另1个不加酶与nacl作对照;密封,于40℃水浴中处理,定时取样置显微镜下观察菌丝体的裂解情况。(3)重要活性成分测定:①测定内容与方法多糖测定:硫酸-苯酚法(测定总糖)结合3,5–二硝基水杨酸(dns)比色法(测定还原糖)测定多糖含量(多糖含量=总糖含量-还原糖含量)。总黄酮测定:紫外分光光度法(对照品:芦丁rutin)。②抑制病菌试验:用平板-牛津杯法测定药性菌质水浸提液对病菌的抑制效果。(4)结果:①菌丝自溶试验:结果显示药性菌质中真菌菌丝在密封、ph8、40℃水浴条件下,4小时开始自溶,8小时大部分菌丝碎裂,12小时几乎全碎裂;加碱性蛋白酶对菌丝自溶有一定的促进作用,但不显著;加2%nacl有显著的促进自溶。②重要活性物质测定:活性成分测定结果显示,药渣发酵后,多糖和总黄酮含量显著增加;经抑菌试验表明,自溶菌质对革兰氏阴性的大肠杆菌和沙门氏杆菌呈较强的抑制作用,抑菌圈1.1-1.2cm,结果见表18表18中药渣发酵菌质的多糖、总黄酮含量测定与抑菌效果(3次平均值)注:*硫酸-苯酚法;※紫外分光度法(对照品:芦丁rutin)(5)功能性饲料添加剂制备:自溶好的药性菌质60-80℃条件下干燥,粉碎,包装,即滋补肝肾,健脑安神的功能性饲料添加剂,可用于催肥促长。5.7实例7:两种单味药渣发酵功能性饲料添加剂研究柴胡药渣和黄芪药渣分别添加20%的基础营养料(玉米粉:麦麸:豆粕粉为4:3:3的比例配料,再按质量比添加3%kh2po4和1.5%mgso4.7h2o,混合而成;)配制药性基质,用与其性味功能相似的药食真菌进行定向发酵,开发具有原药材功能的药性菌质药物。(1)柴胡药渣:用清热泻火,疏风散热,防治感冒发烧、咳嗽哮喘的虎奶菇、白灵芝和牛樟芝与其药渣定向发酵,以开发可防治动物感冒发热的新型菌质药物;用清热解毒(抗菌抗病毒)、保肝利胆、调节肠胃的松乳菇、羊肚菌和亮菌与其药渣定向发酵,以开发可防治动物肝胆疾病的新型菌质药物。结果显示,6种大型真菌发酵柴胡药渣菌质的提取物对沙门氏菌有较强的抑制作用,对大肠杆菌、葡萄球菌、巴氏杆菌和链球菌有不同程度的抑制作用;同时松乳菇、羊肚菌发酵粗蛋白分别提高66.91%和66.18%,相应氨基酸大幅度提高(约2倍),粗纤维分别下降36.88%和29.10%。这为感冒或肝胆疾病的防治提供了新的菌质药物(材)。(2)黄芪药渣:用功能相似(补气益气、强壮身体、化痰止咳、健胃止泻、脱毒排脓、利水消肿)的桑黄、白灵芝、羊肚菌和松乳菇进行定向发酵,以开发新型的具有与黄芪相应功能的药性菌质药物。结果显示,4种药食真菌发酵的药性菌质具有较强的抑制病菌的功能;同时羊肚菌、松乳菇发酵粗蛋白分别提高26.40%和13.23%,粗纤维下降25.35%和40.11%,各种氨基酸含量大幅度增加(约1倍),增强抗病、保健、滋补功能。当前第1页12当前第1页12
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