用于改善脑功能的食品组合物的制作方法

本发明涉及用于改善脑功能的食品组合物。

背景技术：

核桃在欧洲、亚洲、以及在日本以长野县、山形县为中心，在世界各国被广泛种植。其中，在中国自古以来就是作为健康食品受到喜爱的食品之一，还作为滋养药用于中药中。此外近些年，在中国核桃的消费量大幅增加到国内生产无法覆盖的程度，进口量也在增加，这表明核桃的健康促进功能受到重视。

在中国有“以形补形”这样的说法，意思是若食用与某部位形状相似的食物则具有补充该部位的作用，特别是广泛认为摄入核桃能够有效地维持脑的健康和功能。作为其相关成分，可列举出：α-亚麻酸、二十二碳六烯酸等ω-3系脂肪酸、褪黑素、维生素e、类黄酮类，例如，非专利文献1中启示出核桃中所含的ω-3油脂中存在改善脑功能的效果。

另外，核桃中包含通常已知具有脑功能改善效果的类黄酮类(非专利文献1)。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：careyanetal.,nutr.neurosci.,2013jan；16(1):13-20

非专利文献2：xiao-yingmaoandyu-feihua,j.foodsci.technol.,(august2014)51(8):1473-1482

非专利文献3：t.ichinose,etal.,b.b.b.,2015；79(9)；1542-7,doi：10.1080/09168451.2015.1044932

技术实现要素：

发明要解决的问题

如上所述，现有技术中，作为改善脑功能的技术一直以来着眼于源自核桃的脂肪酸、类黄酮类。

然而，非专利文献1的技术中，ω-3油脂通常有因氧化而劣化的问题，即使由核桃中仅提取ω-3油脂也有伴随保存而发生劣化的问题，存在不适于要求在常温下长期保存的食品用途这样的问题。

另外，核桃中所含的类黄酮类是微量的，因此仅提取核桃中所含的类黄酮类时变得非常昂贵，存在不适于作为通常食品摄取这样的问题。

本发明的目的在于提供保存稳定性高、能够廉价地摄取的具有脑功能改善功能的食品材料。

用于解决问题的方案

本发明人等针对上述课题进行深入研究。

发明人等对核桃蛋白质是否具有脑功能改善效果进行研究，结果发现核桃蛋白质的水解物具有改善脑功能的作用。进行进一步研究，结果发现核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为55重量％以上，并且包含具有酪氨酸和/或苯丙氨酸作为构成氨基酸的二肽和/或三肽的核桃蛋白质水解物的脑功能改善效果优异，完成了本发明。

即，本发明如下：

(1)一种用于预防脑神经疾病或改善脑功能的食品组合物，其中，核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为55重量％以上，并且将包含具有酪氨酸和/或苯丙氨酸作为构成氨基酸的二肽和/或三肽的核桃蛋白质水解物作为有效成分。

(2)根据(1)所述的用于预防脑神经疾病或改善脑功能的食品组合物，其中，核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为60重量％以上。

(3)根据(1)或(2)所述的用于预防脑神经疾病或改善脑功能的食品组合物，其中，相对于核桃蛋白质水解物中的氨基酸总量，酪氨酸的比率为3重量％以上，并且苯丙氨酸的比率为4.5重量％以上。

(4)根据(1)或(2)所述的用于预防脑神经疾病或改善脑功能的食品组合物，其中，脑神经疾病的预防或脑功能改善是通过促进大脑皮质中的儿茶酚胺的脑内释放而实现的。

(5)一种脑功能改善剂，其中，核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为55重量％以上，并且将包含具有酪氨酸和/或苯丙氨酸作为构成氨基酸的二肽和/或三肽的核桃蛋白质水解物作为有效成分。

(6)一种核桃蛋白质水解物在用于预防脑神经疾病或改善脑功能中的应用。

(7)根据(6)所述的核桃蛋白质水解物在用于预防脑神经疾病或改善脑功能中的应用，其中，核桃蛋白质水解物包含具有酪氨酸和/或苯丙氨酸作为构成氨基酸的二肽和/或三肽，并且核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为55重量％以上。

(8)根据(7)所述的核桃蛋白质水解物在用于预防脑神经疾病或改善脑功能中的应用，其中，核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为60重量％以上。

(9)根据(7)或(8)所述的核桃蛋白质水解物在用于预防脑神经疾病或改善脑功能中的应用，其中，脑神经疾病的预防或脑功能改善是通过促进大脑皮质中的儿茶酚胺的脑内释放而实现的。

(10)一种用于预防脑神经疾病或改善脑功能的核桃蛋白质水解物。

(11)根据(10)所述的用于预防脑神经疾病或改善脑功能的核桃蛋白质水解物，其中，核桃蛋白质水解物包含具有酪氨酸和/或苯丙氨酸作为构成氨基酸的二肽和/或三肽，核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为55重量％以上。

(12)根据(11)所述的用于预防脑神经疾病或改善脑功能的核桃蛋白质水解物，其中，核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为60重量％以上。

(13)根据(11)或(12)所述的用于预防脑神经疾病或改善脑功能的核桃蛋白质水解物，其中，脑神经疾病的预防或脑功能改善是通过促进大脑皮质中的儿茶酚胺的脑内释放而实现的。

另外，换言之本发明如下：

(1)一种用于预防脑神经疾病或改善脑功能的食品组合物，其中，核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为55重量％以上，并且将包含具有酪氨酸和/或苯丙氨酸作为构成氨基酸的二肽和/或三肽的核桃蛋白质水解物作为有效成分。

(2)根据(1)所述的用于预防脑神经疾病或改善脑功能的食品组合物，其中，相对于核桃蛋白质水解物中的氨基酸总量，酪氨酸的比率为3重量％以上，并且苯丙氨酸的比率为4.5重量％以上。

(3)根据(1)或(2)所述的用于预防脑神经疾病或改善脑功能的食品组合物，其中，脑神经疾病的预防或脑功能改善是通过促进大脑皮质中的儿茶酚胺的脑内释放而实现的。

(4)一种脑功能改善剂，其中，核桃蛋白质水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽和游离氨基酸的总量为55重量％以上，并且将包含具有酪氨酸和/或苯丙氨酸作为构成氨基酸的二肽和/或三肽的核桃蛋白质水解物作为有效成分。

发明的效果

通过摄取本发明的核桃蛋白质水解物而能有助于改善脑功能。

附图说明

图1是示出测定对小鼠经口给予各蛋白质水解物后的大脑皮质中的去甲肾上腺素(na)浓度的结果的图(实施例1、比较例1～3)。

图2是示出测定对小鼠经口给予各蛋白质水解物后的大脑皮质中的3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇(mhpg)浓度的结果的图(实施例1、比较例1～3)。

图3是示出测定对小鼠经口给予各蛋白质水解物后的大脑皮质中的多巴胺(da)浓度的结果的图(实施例1、比较例1～3)。

图4是示出测定对小鼠经口给予各肽后的大脑皮质中的3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇(mhpg)浓度的结果的图(实施例2)。

具体实施方式

以下对本发明进行更详细地说明。

(核桃蛋白质组合物)

本发明中使用的核桃蛋白质组合物可以由作为原料的核桃制备，或还可以由从核桃中去除了油脂的脱脂核桃渣制备，优选由脱脂核桃渣制备。为了以少量发挥脑功能改善功能，优选核桃蛋白质组合物的粗蛋白质含量高者，相对于核桃蛋白质组合物的干燥重量，优选为60重量％以上、更优选为70重量％以上、最优选为80重量％以上。

(核桃蛋白质水解物)

本发明中使用的核桃蛋白质水解物是通过对上述核桃蛋白质组合物进行蛋白酶处理而得到的肽混合物。核桃蛋白质水解物的降解度优选更高者，特别重要的是水解物中的肽和游离氨基酸的总量中所占的、二肽和/或三肽的比率高。具体而言，肽和游离氨基酸的总量中所占的二肽和/或三肽的比率需为55重量％以上，优选60重量％以上。

需要说明的是，本发明中，将二肽和/或三肽规定为从分子量500以下的级分中除去了游离氨基酸后的级分。因此，肽和游离氨基酸的总量中所占的二肽和/或三肽的比率可以通过如下方式计算得到：利用肽用凝胶过滤色谱测定水解物中的分子量500以下的肽级分的比率后，减去利用氨基酸分析测定的水解物中的游离氨基酸含量。水解物中的游离氨基酸含量优选为10重量％以下、更优选为5重量％以下。进而，肽期望为低分子，因此水解物中的肽和游离氨基酸的总量中所占的分子量500以上的级分的比率优选为40重量％以下、更优选为35重量％以下。

重要的是，本发明的核桃蛋白质水解物中包含含有酪氨酸和/或苯丙氨酸的二肽和/或三肽。

即，本发明的本质在于使该含有酪氨酸和/或苯丙氨酸的二肽和/或三肽作为改善脑功能的有效成分发挥作用。

对于该含有酪氨酸和/或苯丙氨酸的二肽和/或三肽，其为二肽的情况下，是包含1个或2个酪氨酸残基或苯丙氨酸残基的肽。其为三肽的情况下，是包含1～3个酪氨酸残基或苯丙氨酸残基的肽。

作为这样的肽，具体而言，作为二肽，可列举出：lys-tyr、tyr-lys、gly-tyr、tyr-gly、asn-tyr、tyr-gln、ala-tyr、arg-tyr、tyr-arg、met-tyr、tyr-met、pro-tyr、tyr-pro、tyr-his、his-tyr、thr-tyr、ile-tyr、tyr-leu、gln-tyr、tyr-ser、val-tyr、tyr-ile、ser-tyr、tyr-asn、phe-tyr、glu-tyr、tyr-glu、tyr-thr、leu-tyr、tyr-val或tyr-ala。优选为arg-tyr、tyr-asn、phe-tyr或tyr-phe。更优选为phe-tyr。

核桃蛋白质水解物中的酪氨酸和/或苯丙氨酸相对于氨基酸总量的比率，酪氨酸优选为3重量％以上、苯丙氨酸优选为4.5重量％以上。

(蛋白酶)

酶降解是以上述核桃蛋白质组合物的浆料或水溶液作为基质进行蛋白酶处理。此处使用的蛋白酶无论是动物来源、植物来源或者微生物来源，均可从在蛋白酶的分类中分类为“金属蛋白酶”、“酸性蛋白酶”、“硫醇蛋白酶”、“丝氨酸蛋白酶”的蛋白酶中适宜选择，优选从分类为“金属蛋白酶”、“硫醇蛋白酶”、“丝氨酸蛋白酶”的蛋白酶中适宜选择。特别是依次或同时使2种以上、或者3种以上属于不同分类的酶发挥作用的降解方法能够增加二肽、三肽等的相对低分子量的肽的比率而优选。

该蛋白酶的分类是在酶科学领域中通常进行的基于活性中心的氨基酸的种类的分类方法。作为各自的代表例，“金属蛋白酶”中可列举出：杆菌(bacillus)中性蛋白酶、链霉菌(streptomyces)中性蛋白酶、曲霉菌(aspergillus)中性蛋白酶、“耐热蛋白酶(thermoase)”等；“酸性蛋白酶”中可列举出：胃蛋白酶、曲霉菌酸性蛋白酶、“sumitubeap”等；“硫醇蛋白酶”中可列举出：菠罗蛋白酶、木瓜蛋白酶等；“丝氨酸蛋白酶”中可列举出：胰蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)、链霉菌(streptomyces)碱性蛋白酶、“alcalase”(碱性蛋白酶)、“bioprase”(枯草溶菌素)等。除此以外的酶也可以根据作用ph、酶与抑制剂的反应性来确认其分类。在活性中心不同的酶之间，由于与基质的作用部位有较大差异，因此可以减少“切断残留”并有效地得到酶降解物。或者通过组合使用不同来源的(来源生物)酶而能够更有效地制造酶降解物。在相同分类中只要来源不同，与作为基质的蛋白质的作用部位就不同，作为结果能够增加二肽、三肽的比率。这些蛋白酶优选外切活性少。

蛋白酶处理的反应ph、反应温度根据使用的蛋白酶的特性进行设定即可，通常反应ph在最佳ph附近进行、反应温度在最佳温度附近进行即可。可以在大致反应温度为20～80℃、优选为40～60℃下进行反应。反应后在足以使酶失活的温度(60～170℃左右)下进行加热，从而使残留酶活性失活。

蛋白酶处理后的反应液可以直接使用或进行浓缩来使用，但通常可以进行杀菌并喷雾干燥、冷冻干燥等以干燥粉末的状态来利用。杀菌优选加热杀菌，加热温度优选110～170℃、进一步优选130～170℃。加热时间优选3～20秒。另外还可以预先将反应液调节为任意的ph，还可以利用离心分离、过滤等去除调节ph时产生的沉淀物、悬浮物。另外，还可以进一步利用活性炭、吸附树脂进行纯化。

(脑神经疾病的预防或脑功能改善)

作为脑神经疾病，可列举出：记忆障碍、注意力障碍、执行功能障碍、社会活动障碍等高级脑功能障碍、与这些障碍病理学相关的症状、例如脑梗塞、头部外伤、脑血管性痴呆、阿尔茨海默氏型痴呆、帕金森氏病、精神分裂症、抑郁症、焦虑症等。

另外，作为脑功能改善效果，具体而言可列举出：记忆力改善、学习能提高、注意力改善、压力耐性、抗抑郁作用、抗焦虑作用、注意力改善、睡眠质量改善等。

本发明中，通过使用上述包含含有酪氨酸和/或苯丙氨酸的二肽和/或三肽的核桃蛋白质水解物，从而使大脑皮质中的脑内儿茶酚胺的浓度上升，具体而言，使大脑皮质中的去甲肾上腺素及作为其代谢产物的3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇和多巴胺的浓度上升。通过这些脑内儿茶酚胺浓度上升而可期待脑神经疾病的预防或脑功能改善效果。

本发明的核桃蛋白质水解物可以以药品的形态、或者添加至食品或饲料中的形态、根据需要适宜与其它原材料混合来使用。在以药品形态的形式提供时，可以以液体、散剂、片剂，胶囊等各种形态使用。在以混合至食品中的形态提供时，还可以混合至饼干、蛋糕、面包、食品棒、肉制品等固体状食品中来使用，溶解于水而以饮料的形式、或混合至酸奶、布丁那样的流动状、半固体状食品中也没有问题。另外，还可以混合糖质、维生素、矿物质等而以营养强化剂的形式来利用。在以混合至饲料中的形态提供时，不限定于陆地产、水产，可以与已知的饲料混合来使用。

实施例

以下利用实施例对本发明的实施方式进行具体地说明。

(制造例1)分离核桃蛋白质组合物的制备

依据非专利文献2中记载的方法由脱脂核桃渣制备了分离核桃蛋白质组合物。对脱脂核桃渣加入20倍量的用1mnaoh调节为ph11.0的去离子水，在25℃、2小时的条件下进行搅拌。然后，在10000×g、30分钟、4℃的条件下进行离心分离并回收了上清液。在通过离心分离而产生的沉淀中再次加入20倍量的用1mnaoh调节为ph11.0的去离子水，在25℃、2小时的条件下进行搅拌，在10000×g、30分钟、4℃的条件下进行离心分离并回收了上清液。合并2次的上清液，使用1mhcl调节至ph4.5后，在4℃下静置2小时。静置后在10000×g、30分钟、4℃的条件下进行离心分离。在通过离心分离而得到的沉淀中加入去离子水并进行水洗后，使用1mnaoh调节为ph7，再溶解于去离子水中。然后，通过进行盐透析、冷冻干燥而得到分离核桃蛋白质组合物。分离核桃蛋白质组合物的粗蛋白质含量相对于分离核桃蛋白质组合物的干燥重量为85.0重量％。

(制造例2)核桃蛋白质水解物1的制备

在制造例1中得到的分离核桃蛋白质组合物的3重量％溶液中，以相对于每单位蛋白质为0.125重量％加入作为蛋白酶的“alcalase”(来源：地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)、碱性蛋白酶、novozymes公司制)，在ph9.0、58℃下使之作用60分钟。进行以上处理后，将反应液在90℃下加热20分钟来停止反应，然后进行冷冻干燥，得到了作为抑制了水解的试样的分离核桃蛋白质水解物1。

(制造例3)核桃蛋白质水解物2的制备

在制造例1中得到的分离核桃蛋白质组合物的3重量％溶液中，以相对于每单位蛋白质为0.5重量％加入作为蛋白酶的“alcalase”，此外与制造例2同样地制备，得到了分离核桃蛋白质水解物2。

(制造例4)核桃蛋白质水解物3的制备

在制造例1中得到的分离核桃蛋白质组合物的3重量％溶液中，以相对于每单位蛋白质为3重量％加入作为蛋白酶的“multifectpr6l”(来源：地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)、碱性蛋白酶、genencor公司制)，此外与制造例2同样地制备，得到了分离核桃蛋白质水解物3。

(制造例5)二肽和/或三肽高含量核桃蛋白质水解物4的制备

在制造例1中得到的分离核桃蛋白质组合物的3重量％溶液中，以相对于每单位蛋白质为1.5重量％加入作为第一蛋白酶的“thermoase”(来源：嗜热芽孢杆菌(bacillusthermoproteolyticus)、金属蛋白酶、大和化成公司制)，在ph9.0、58℃下使之作用60分钟。接着，在该第一反应液中，以相对于每单位蛋白质为1重量％加入作为第二蛋白酶的“bioprase”(来源：杆菌属(bacillussp.)、丝氨酸蛋白酶、nagasechemtech公司制)，在ph7.5、58℃下使之作用60分钟。接着，在该第二反应液中以相对于每单位蛋白质为1重量％加入作为第三蛋白酶的“sumizymefp”(来源：曲霉属(asprgillussp.)、金属蛋白酶、新日本化学工业公司制)，此外与制造例2同样地制备，得到了分离核桃蛋白质水解物4。

另外，为了与源自其它食品的蛋白质的水解物进行比较，获得了市售品。作为胶原蛋白水解物获得“fsp-as-l”(nippi、inc.制)，作为对照使用。

(粗蛋白质含量(cp)的测定)

相对于以105℃干燥12小时的各种蛋白质材料的干燥重量，用重量％表示利用凯氏定氮法测定的粗蛋白质量的重量。需要说明的是，氮系数为5.3。

(小鼠的饲养方法)

依据非专利文献3中记载的方法如下所述进行小鼠的饲养。由charlesriverlaboratoriesjapan,inc.购入8周龄的“c57bl/6”。在25±1℃下12小时的明暗循环(8：00-20：00为明期、20：00-8：00为暗期)进行1周饲养。饮食自由摄取，作为固体饲料喂食“ce-2”(cleajapan,inc.制)。

(对小鼠经口给予核桃蛋白质水解物及大脑皮质的摘取)

依据非专利文献3中记载的方法如下所述进行对小鼠经口给予核桃蛋白质水解物及大脑皮质的摘取。以每单位体重30g为0.26g/ml对小鼠分别经口给予对照和核桃蛋白质水解物1～4。经口给予30分钟后在使用了麻醉液“异氟醚”(pfizerinc.制)的麻醉下摘取大脑皮质，用于以下的脑内儿茶酚胺测定。

(脑内儿茶酚胺的测定)

依据非专利文献3中记载的方法如下所述利用hplc法进行脑内儿茶酚胺的测定。将大脑皮质的5倍重量的0.2m高氯酸(包含0.1mmedta·2na)和100μg量的异丙肾上腺素加入大脑皮质中，充分进行破碎。破碎后在冰上放置30分钟，在20000×g、30分钟、4℃的条件下进行离心分离。离心分离后回收上清液200μl，添加0.2m乙酸缓冲液35μl后，用过滤器(0.22μm、merckmillipore)进行过滤，进行蛋白质去除。去除蛋白质后供于hplc(htec-500：eicomco.、ltd.制)进行儿茶酚胺的测定。

(统计处理)

显著差异检验使用医学统计专用软件“dr.spssii”(spss公司制)，作为与对照的比较使用dunnett-t(两侧)法进行评价。

(游离氨基酸含量和二肽/三肽含量的测定)

利用使用了以下凝胶过滤柱的hplc法测定了核桃蛋白质水解物的分子量分布。组装使用了肽用凝胶过滤柱的hplc系统，充入作为分子量标记物的已知的肽，对于分子量与保持时间的关系求出校正曲线。需要说明的是，对于分子量标记物，作为八肽使用[β-asp]-血管紧张素(angiotensin)ii的β-asp-arg-val-tyr-ile-his-pro-phe(分子量1046)、作为六肽使用血管紧张素(angiotensin)iv的val-tyr-ile-his-pro-phe(分子量775)、作为五肽作使用leu-enkephalin的tyr-gly-gly-phe-leu(分子量555)、作为三肽使用glu-glu-glu(分子量405)、作为游离氨基酸使用pro(分子量115)。用凝胶过滤用溶剂将水解物(1％)在10000rpm、10分钟离心分离得到的上清液稀释至2倍，将其5μl供于hplc。通过分子量500以下的范围(时间范围)的面积相对于整体的吸光度图表面积的比率求出水解物中的肽和游离氨基酸的总量中所占的分子量500以下的肽级分的比率(％)(使用柱：superdexpeptide7.5/300gl(gehealthcarejapancorporation制)。溶剂：1重量％sds/10mm磷酸缓冲液、ph8.0、柱温25℃、流速0.25ml/分钟、检测波长：220nm)。

接着，通过氨基酸分析进行核桃蛋白质水解物中的游离氨基酸含量的测定。将水解物(4mg/ml)加入等量的3重量％磺基水杨酸中，在室温下振荡15分钟。以10000rpm进行10分钟离心分离并用0.45μm过滤器过滤所得到的上清液，通过氨基酸分析器(日本电子制jlc500v)测定游离氨基酸。蛋白质中的游离氨基酸含量以相对于利用凯氏定氮法得到的蛋白质含量的比率计算出。

将从上述得到的“分子量500以下的肽级分的比率”中减去“游离氨基酸含量”而得到的值进一步除以总蛋白质量而得到的值作为水解物中的“二肽/三肽含量”。需要说明的是，“二肽/三肽含量”术语是指本发明的权利要求中记载的“二肽和/或三肽”的含量。

(表1)各种食品蛋白质水解物的分析值

(表2)各核桃蛋白质水解物的氨基酸量

na：去甲肾上腺素

mhpg：3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇

da：多巴胺

(实施例1、比较例1～3)

为了评价由制造例5中得到的分离核桃蛋白质降解物4的经口摄取带来的脑功能改善效果，利用第0032～0033段中记载的方法对小鼠进行核桃蛋白质水解物的经口给予、进行大脑皮质的摘取和脑内儿茶酚胺的测定(实施例1)。

另外，对于制造例2～4中得到的分离核桃蛋白质降解物，与实施例1同样地进行脑内儿茶酚胺的测定(比较例1～3)。

将脑内儿茶酚胺的测定结果示于表3和图1～3。

(表3)

比较例1～3中的核桃蛋白质水解物1～3的经口摄取中，与对照相比未观察到脑内的去甲肾上腺素及作为其代谢产物的3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇和多巴胺浓度有显著的变化。另一方面，实施例1中的核桃蛋白质水解物4的经口摄取中，可观察到与对照相比显著的脑内去甲肾上腺素及作为其代谢产物的3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇和多巴胺的浓度上升。核桃蛋白质水解物4和核桃蛋白质水解物1～3之差在二肽/三肽含量上存在较大差异(表1)，表明二肽/三肽含量的不同可能会强烈影响脑内儿茶酚胺浓度变化。

去甲肾上腺素和多巴胺被广泛认为是脑内主要的神经递质，其强烈地参与认知、记忆、情感这样的对于人类而言重要的要素。另外，根据不仅使脑内的去甲肾上腺素浓度上升，而且还使作为其代谢产物的3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇浓度也上升，由此可知在脑内增加的去甲肾上腺素得以被有效地使用和代谢。

另外，如表1所示实施例中使用的核桃蛋白质水解物4中几乎不包含脂质，因此可认为由实施例1中的核桃蛋白质水解物4的经口摄取带来的脑功能改善效果是由主要包含在核桃蛋白质水解物4中的肽所引起的。根据以上结果，强烈表明核桃蛋白质水解物4的摄取具有特异性脑功能改善效果。

(实施例2)

对小鼠进行arg-tyr、tyr-asn、phe-tyr、tyr-phe的经口给予，利用与实施例1同样的方法进行大脑皮质的摘取，进行脑内的3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇(mhpg)的测定。需要说明的是，arg-tyr、tyr-asn、phe-tyr、tyr-phe使用委托genscriptjapaninc.合成的肽。

将测定结果示于图4。

arg-tyr、tyr-asn、phe-tyr、tyr-phe这4种肽的经口摄取中，可观察到与对照相比显著的3-甲氧基-4-羟基苯基乙二醇(mhpg)的浓度上升。因此，表明arg-tyr、tyr-asn、phe-tyr、tyr-phe这4种肽的摄取具有特异性脑功能改善效果。