本发明总体上涉及一种动物饲料添加剂，其包含至少一种有机硫化合物和至少一种生物类黄酮。本发明进一步涉及包含所述动物饲料添加剂的动物饲料组合物。本发明还涉及所述动物饲料添加剂和动物饲料组合物的各种用途以及制备所述动物饲料添加剂和动物饲料组合物的方法。
背景
牲畜排放约占全球温室气体排放的15％，是仅次于能源和工业的第三大温室气体的贡献者。甲烷对气候的负面影响大约是二氧化碳的影响的21倍。一头牛平均每年释放85至170kg的甲烷。
反刍动物肠道中特定类型的微生物利用动物食用的营养物产生作为副产物的甲烷。除了甲烷对气候变化的负面影响外，这还减少了动物可利用的营养物。
因此，期望提供替代的和/或改进的组合物以减少甲烷的产生和/或增加营养物对动物的可用性。
概述
根据本发明的第一方面，提供了一种动物饲料添加剂，其包含至少一种有机硫化合物和至少一种生物类黄酮。
根据本发明的第二方面，提供了一种动物饲料组合物，其包含根据本发明的任意方面或实施方案的动物饲料添加剂。
根据本发明的第三方面，提供了根据本发明的任意方面或实施方案的动物饲料添加剂或动物饲料组合物减少动物产生甲烷的用途。同样地，还提供了一种减少动物产生甲烷的方法，该方法包括向动物给予根据本发明任意方面或实施方案的动物饲料添加剂或动物饲料组合物。
根据本发明的第四方面，提供了根据本发明的任意方面或实施方案的动物饲料添加剂或动物饲料组合物增加动物奶和/或肉和/或毛生产和/或提高动物奶和/或肉和/或毛生产效率的用途。同样地，还提供了一种用于增加动物奶和/或肉和/或毛生产和/或提高动物奶和/或肉和/或毛生产效率的方法，该方法包括向动物给予根据本发明的任意方面或实施方案的动物饲料添加剂或动物饲料组合物。
根据本发明的第五方面，提供了根据本发明的任意方面或实施方案的动物饲料添加剂或动物饲料组合物提高营养物对动物的可用性的用途。同样地，还提供了一种用于提高营养物对动物的可用性的方法，该方法包括向动物给予根据本发明任意方面或实施方案的动物饲料补充剂或动物饲料组合物。
根据本发明的第六方面，提供了一种用于制备根据本发明的任意方面或实施方案的动物饲料添加剂的方法，该方法包括将至少一种有机硫化合物和至少一种生物类黄酮组合。
根据本发明的第七方面，提供了一种用于制备根据本发明的任意方面或实施方案的动物饲料组合物的方法，该方法包括将动物饲料与至少一种有机硫化合物和至少一种生物类黄酮组合。
本文所述的用途和方法被认为是纯粹非治疗性的。然而，就本文所述的任意用途和方法被认为是治疗性的而言，作为本发明的另一方面，还提供了治疗用途和方法以及用于所述治疗用途和方法的动物饲料添加剂和动物饲料组合物。
在本发明的任意方面的某些实施方案中，至少一种有机硫化合物是或包括大蒜素。
在本发明的任意方面的某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮中的每一种独立地选自花黄素、黄烷酮(包括黄烷酮糖苷)、黄酮醇、二氢黄酮醇、黄烷、异黄酮、花青素和原花青素。在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮中的每一种独立地选自花黄素和黄烷酮(包括黄烷酮糖苷)。
在本发明的任意方面的某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮选自柚皮苷、新橙皮苷、圣草次苷、异柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、野漆树苷(roifolin)、香叶木苷、香蜂草苷、橙皮素、枸桔苷、儿茶素、芦丁、刺槐素、染料木黄酮、山奈酚、表儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素没食子酸酯和没食子儿茶素没食子酸酯。在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮选自柚皮苷和新橙皮苷。
在本发明的任意方面的某些实施方案中，动物饲料添加剂或动物饲料组合物包含两种或更多种生物类黄酮。在某些实施方案中，动物饲料添加剂或动物饲料组合物包含两种生物类黄酮。在某些实施方案中，动物饲料添加剂或动物饲料组合物包含柚皮苷和新橙皮苷。
在本发明的任意方面的某些实施方案中，所述动物是反刍动物或伪反刍动物。
在详述中将进一步描述本发明的实施方案。除非与上下文明显矛盾，否则本文描述的任意实施方案或本文描述的实施方案的任意组合都适用于本发明的任意一个或多个方面。
详述
本发明至少部分基于令人惊讶的发现，即至少一种有机硫化合物和至少一种生物类黄酮的组合可以减少动物如反刍动物的甲烷产生和/或排放。
在下文中，将根据本发明的优选实施方案并参考所附说明来描述本发明。然而，应当理解，将描述限制到本发明的优选实施方案仅是为了便于对本发明的讨论，并且可以设想本领域技术人员可以在不脱离所附权利要求的范围的情况下设计出各种修改。
除非另有指明，否则上文和下文中通常使用的术语优选具有如下所示的含义，由此在本发明的优选实施方案中可以相互独立地使用更具体的含义而不是一般定义，这些更具体的含义描述了本发明的特别优选的实施方案。
在上文和下文中出现术语“至少一个”或“一个或多个”的情况下，这尤其表示一至十个，优选一至五个或一至三个，特别是一个或进一步地两个所列举的特征，如组分。当指示范围时，如重量百分比范围，这些包括指示的极限值；因此，例如，“在x和y之间”表示“从x(包括x)直到y(包括y)”。
术语“产品”或“组合物”可以指药物、营养保健或化妆产品或组合物。该产品或组合物可以例如是固体、半固体(例如凝胶、软膏、乳膏、糊剂)或液体产品或组合物。
术语“治疗性处理”或“治疗方法”还包括预防和减轻对象的疾病和/或障碍的症状，但不是美容处理。如本文所用，“治疗或预防”和类似术语的表述指根据现行医学实践，根据可用的任何测试所判断的旨在消除或避免疾病和/或障碍或减轻其症状的所有形式的医疗保健，包括预防性和治疗性护理。以合理的期望旨在实现特定结果，但并非总是如此的干预包括在“治疗或预防”的表述中。成功减缓或阻止疾病和/或障碍的进展的干预包括在“治疗或预防”的表述中。
术语“营养保健品”指包括或不限于膳食补充剂、功能性食品和药用食品的食品或食品的一部分。根据对象的期望和/或需要，“营养保健品”可以用于治疗性处理和/或非治疗性处理。
术语“由……组成”可以例如排除未明确列举的任意另外的要素、步骤或成分。
术语“基本上由……组成”可以例如排除未明确列举的任意另外的要素、步骤或成分，除非该另外的要素、步骤或成分不实质上影响本发明的基本和新颖的性质。当一种或多种另外的元素、步骤或成分是组合物的一种或多种另外的组分时，则组合物中另外的组分(多种另外的组分)的总量可以，例如，限制为20重量％。例如，组合物中另外的组分(多种另外的组分)的总量可以限制为19重量％、或18重量％、或17重量％、或16重量％、或15重量％、或14重量％、或13重量％、或12重量％、或11重量％、或10重量％、或9重量％、或8重量％、或7重量％、或6重量％、或5重量％、或4重量％、或3重量％、或2重量％、或1重量％。
动物饲料添加剂
本文提供了一种动物饲料添加剂，其包含至少一种有机硫化合物和至少一种生物类黄酮。术语“添加剂”是指适合和/或意图添加到动物饲料中以提供一种或多种有益效果的产品或组合物，其可以例如是固体、半固体(例如凝胶、软膏、乳膏、糊剂)或液体产品(例如溶液、悬浮液、乳液)或组合物。然而，动物饲料添加剂本身不足以满足动物的营养需要。动物饲料添加剂和动物饲料添加剂的各种组分可以例如以各种浓度存在，并且可以例如在添加到动物饲料组合物时被稀释。尽管可以优选动物饲料添加剂与动物通常的动物饲料一起由动物食用，但动物饲料添加剂也可以与任何动物饲料分开由动物食用，例如以液体(例如用水稀释)或以大丸剂或片剂的形式。
本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物包含一种或多种有机硫化合物。例如，动物饲料添加剂和动物饲料组合物可包含两种或更多种有机硫化合物，或三种或更多种有机硫化合物，或四种或更多种有机硫化合物，或五种或更多种有机硫化合物。例如，动物饲料添加剂和动物饲料组合物可以包含一种、两种、三种、四种或五种生物类黄酮。例如，动物饲料添加剂和动物饲料组合物可以包含一种可以是大蒜素的有机硫化合物。
有机硫化合物是含有硫的有机化合物。在某些实施方案中，每种有机硫化合物可独立地选自硫醚、硫酯、硫缩醛、硫醇、二硫化物、多硫化物、亚砜、砜、硫代亚磺酸酯、磺酰亚胺、亚砜亚胺、砜二亚胺、硫酮、硫醛、锍化物、砜烯、硫代羧酸(包括二硫代羧酸)、磺酸、亚磺酸、次磺酸、磺酸酯、亚磺酸酯、次磺酸酯、磺酸酰胺、亚磺酰胺、次磺酰胺、锍化合物、氧锍化合物、锍内鎓盐、氧锍内鎓盐、硫代羰基内鎓盐、硫烷(sulfurane)和过硫烷(persulfurane)。在某些实施方案中，每种有机硫化合物独立地选自硫酯、亚砜、硫醚、二硫化物、多硫化物(包括三硫化物)和硫醇。在某些实施方案中，每种有机硫化合物独立地选自硫酯、亚砜、硫醚、二硫化物和多硫化物(包括三硫化物)。
在某些实施方案中，每种有机硫化合物独立地选自大蒜素、蒜氨酸、烯丙基二硫化物、二烯丙基三硫化物、s-烯丙基半胱氨酸、乙烯基二噻英(3-乙烯基-4h-1,2-二噻英和2-乙烯基-4h-1,3-二噻英)和二烯丙基二硫化物。在某些实施方案中，至少一种有机硫化合物是或包括大蒜素。
大蒜素是具有化学式c6h10os2和如下所示结构的有机硫化合物。
至少一种有机硫化合物，如大蒜素可以例如从大蒜或另一种葱属物种获得。例如，有机硫化合物(例如大蒜素)可以从诸如大蒜(alliumsativum)的葱属物种的提取物获得。术语提取物包括水提取物、非水提取物、酒精提取物、浓缩物、油、浸渍物、粉末、颗粒以及它们中的两种或更多种的组合。例如，有机硫化合物(例如大蒜素)可以从生大蒜获得。
有机硫化合物(例如大蒜素)可以例如获自当前已知或以后发现的任何葱属亚种和变种，如大蒜(alliumsativum)、熊葱(alliumursinum)，葱(alliumfistulosum)和毛葱(alliumtricoccum)。例如，有机硫化合物(例如大蒜素)可以独立地获自ophioscorodon亚种的大蒜(硬颈大蒜)和sativum亚种的大蒜(软颈大蒜)。例如，有机硫化合物(例如大蒜素)可以独立地获自瓷蒜(porcelaingarlic)、葫蒜(rocambolegarlic)、紫纹蒜(purplestripegarlic)、大理石紫纹蒜(marbledpurplestripegarlic)、釉面紫纹蒜(glazedpurplestripegarlic)、朝鲜蓟蒜(artichokegarlic)、银皮蒜(silverskingarlic)、亚洲蒜(asiaticgarlic)、头巾蒜(turbangarlic)和克里奥尔蒜(creolegarlic)。特别地，有机硫化合物(例如大蒜素)可从大蒜(alliumsativum)获得。
例如，可以获得有机硫化合物(例如大蒜素)的葱属植物可以已经过处理或加工。例如，葱属植物可以是“老化的”或“黑色的”(例如老化的或黑色的大蒜)，通过将葱属植物在受控条件下储存并在特定的温度、湿度和溶剂下加热，例如经过几天或几周而获得，在经过美拉德(millard)或褐变反应后，使得蒜瓣颜色变黑。例如，葱属植物可以是“新鲜的”或“未老化的”(例如新鲜或未老化的大蒜)，无需有意地经过将其成分转化或转变为不同化合物的特殊处理或加工即可获得。新鲜或未老化的葱属植物可以例如被处理或加工以去除气味(除臭的)(例如，除臭的大蒜提取物)。通常，可以采用封装或涂覆工艺来掩盖或减少气味。供选择地，可以添加掩味成分如绿茶、欧芹、罗勒、菠菜等，以掩盖或减少组合物中的气味。
在掺入本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物之前，可以分离和/或纯化或者不分离和/或纯化有机硫化合物(例如大蒜素)。这样，在某些实施方案中，本文所述的动物饲料添加剂或动物饲料组合物可包含生大蒜和/或大蒜提取物。
在其他实施方案中，有机硫化合物(例如大蒜素)是化学合成的。在某些实施方案中，大蒜素可通过处理天然的蒜氨酸酶源以释放蒜氨酸酶，将经处理的蒜氨酸酶源与蒜氨酸接触，从而将蒜氨酸酶促转化为大蒜素并任选地提取大蒜素而获得。例如在wo03/004668中进一步描述了合适的方法，该专利的内容通过引用并入本文。在其他实施方案中，大蒜素可以完全化学合成。
术语生物类黄酮指一类植物和真菌次级代谢产物，并且具有由两个苯环(a和b)和杂环(c)组成的15碳骨架的通用结构，有时缩写为c6-c3-c6。术语生物类黄酮包括花黄素(包括黄酮和黄酮醇)、黄烷酮、二氢黄烷醇、黄烷和花青素。术语生物类黄酮还包括具有黄酮骨架(2-苯基-1,4-苯并吡喃酮)、异黄烷骨架(3-苯基色烯-4-酮)或新黄烷骨架(4-苯基香豆素)的化合物。
在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮各自独立地选自花黄素(包括黄酮和黄酮醇)、黄烷酮(包括黄烷酮糖苷)、二氢黄酮醇、黄烷、异黄酮、花青素和原花青素。在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮中的每一种独立地选自花黄素和黄烷酮(包括黄烷酮糖苷)。在某些实施方案中，所有生物类黄酮是花黄素和/或黄烷酮。在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮独立地是黄酮或黄烷酮。在某些实施方案中，所有生物类黄酮是黄酮和/或黄烷酮。黄酮和黄烷酮可以例如分别独立地为黄酮苷和黄烷酮苷。在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮是黄烷酮。在某些实施方案中，所有的生物类黄酮是黄烷酮。在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮是黄烷酮糖苷。在某些实施方案中，所有的生物类黄酮是黄烷酮糖苷。
一种或多种生物类黄酮可以例如选自柚皮苷、新橙皮苷、圣草次苷、异柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、野漆树苷(roifolin)、香叶木苷、香蜂草苷、橙皮素、枸桔苷(poncirin)、儿茶素、芦丁、刺槐素、染料木黄酮、山奈酚、表儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素没食子酸酯和没食子儿茶素没食子酸酯。在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮包括柚皮苷和新橙皮苷。在某些实施方案中，一种或多种生物类黄酮是柚皮苷和新橙皮苷的组合。
本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物包含一种或多种生物类黄酮。例如，动物饲料添加剂和动物饲料组合物可包含两种或更多种生物类黄酮、或三种或更多种生物类黄酮、或四种或更多种生物类黄酮、或五种或更多种生物类黄酮。例如，动物饲料添加剂和动物饲料组合物可以包含一种、两种、三种、四种或五种生物类黄酮。例如，动物饲料添加剂和动物饲料组合物可以包含两种生物类黄酮，所述两种生物类黄酮可以是柚皮苷和新橙皮苷。
一种或多种生物类黄酮可以例如从植物(例如水果或蔬菜)的一部分获得。例如，黄酮醇可获自番茄、豆、杏仁和/或萝卜。例如，黄烷-3-醇可获自桃子、李子、草莓和/或绿茶。例如，黄酮可获自西瓜和/或胡椒。例如，黄烷酮可以从柑橘属品种水果获得。例如，花青素可获自蓝莓、香蕉、草莓、蔓越莓和/或李子。
一种或多种生物类黄酮可以例如从柑橘属品种水果例如橙子、柠檬、葡萄柚、柚子或酸橙获得。特别地，一种或多种生物类黄酮可以获自橙子。
例如，一种或多种生物类黄酮可以从柑橘属品种水果的提取物获得。术语提取物包括水提取物、非水提取物、酒精提取物、浓缩物、油、浸渍物、粉末、颗粒以及它们中的两种或更多种的组合。例如，一种或多种生物类黄酮可获自生柑橘属水果。
在掺入本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物之前，可以分离和/或纯化或者不分离和/或纯化一种或多种生物类黄酮。同样地，在某些实施方案中，本文所述的动物饲料添加剂或动物饲料组合物可包含生柑橘属水果和/或柑橘属水果提取物。
在其他实施方案中，一种或多种生物类黄酮可以各自独立地化学合成。
在某些实施方案中，本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物包含两种生物类黄酮。第一生物类黄酮与第二生物类黄酮的比例范围可以例如为约0.5∶5至约3∶1。例如，第一生物类黄酮与第二生物类黄酮的比例可在约0.5：5至约2.5：1、或约0.5：5至约2：1、或约0.5：5至约1.5：1、或约0.5：5至约1：1的范围内。例如，第一生物类黄酮与第二生物类黄酮的比例可以在约1：5至约3：1、或约1.5：5至约3：1、或约2：5至约3：1、或约2.5：5至约3：1、或约3：5至约3：1、或约3.5：5至约3：1、或约4：5至约3：1、或约4.5：5至约3：1、或约5：5到约3：1的范围内。
在某些实施方案中，本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物包含柚皮苷和新橙皮苷。柚皮苷与新橙皮苷的比例范围可以例如为约0.5∶5至约3∶1。例如，柚皮苷与新橙皮苷的比例可以在约0.5：5至约2.5：1、或约0.5：5至约2：1、或约0.5：5至约1.5：1、或约0.5：5至1：1的范围内。例如，柚皮苷与新橙皮苷的比例可以在约1：5至约3：1、或从约1.5：5至约3：1、或从约2：5至约3：1、或从约2.5：5至约3：1、或约3：5至约3：1、或约3.5：5至约3：1、或约4：5至约3：1、或约4.5：5至约3：1、或约5：5到约3：1的范围内。
在某些实施方案中，总有机硫化合物与总生物类黄酮的比例范围为约10∶1至约1∶30。例如，总有机硫化合物与总生物类黄酮的比例可以在约9∶1至约1∶25、或约8∶1至约1∶20、或约7∶1至约1∶15、或约6：1至约1:10、或约5：1至约1：8、或约4：1至约1：7、或约3：1至约1：6、或约2：1至约1：5、或约1：1至约1：4的范围内。例如，总有机硫化合物与总生物类黄酮的比例可以在约1：1至约1：3、或约2：1至约1：4的范围内。例如，总有机硫化合物与总生物类黄酮的比例可以为约1：3。
在某些实施方案中，大蒜素与总生物类黄酮的比例范围为约10∶1至约1∶30。例如，大蒜素与总生物类黄酮的比例可以在约9∶1至约1∶25、或约8∶1至约1∶20、或约7∶1至约1∶15、或约6∶1至约1:10、或约5：1至约1：8、或约4：1至约1：7、或约3：1至约1：6、或约2：1至约1：5、或约1：1至约1：4的范围内。例如，大蒜素与总生物类黄酮的比例可以在约1：1至约1：3、或约2：1至约1：4的范围内。例如，大蒜素与总生物类黄酮的比例可以为约1：3。
动物饲料添加剂可例如除活性物质外还包含其他组分，例如调味剂、着色剂、稳定剂、缓冲剂、乳化剂、分散剂、增稠剂、增溶剂、微量营养素(例如硒)、维生素、饲料材料(例如碳水化合物)等。
动物饲料组合物
本文公开的动物饲料添加剂(包括所有实施方案和实施方案的任意组合)可以与动物饲料组合以形成动物饲料组合物。
动物饲料可以是，例如，适合向动物特别是反刍动物提供营养的任何组合物。例如，动物饲料可以适合任何反刍动物，例如牛、山羊、绵羊、牦牛、鹿或羚羊。例如，动物饲料可以适合任何伪反刍动物，例如骆驼和河马。例如，动物饲料可以适合任何单胃动物，例如袋鼠、大鼠、狗、猪、猫、马和兔。例如，动物饲料可适合单胃食草动物，例如袋鼠、马和兔。
动物饲料可以是固体、半固体(例如凝胶、软膏、乳膏、糊剂)或液体(例如溶液、悬浮液、乳剂)。动物饲料添加剂可以独立地是固体、半固体(例如凝胶、软膏、乳膏、糊剂)或液体(例如溶液、悬浮液、乳剂)。例如，动物饲料和动物饲料添加剂可以都是液体，或者都是半固体，或者都是固体。供选择地，动物饲料和动物饲料添加剂可各自为不同的物理状态。例如，动物饲料可以是固体或半固体，而动物饲料添加剂可以是液体。动物饲料添加剂可以例如用于“顶装(top-dress)”(在顶部添加)反刍动物饲养场日粮，或者可以用于混合成总混合日粮。例如，可以将动物饲料添加剂添加到动物的饮用水。在某些实施方案中，动物饲料添加剂可以在摄食之前立即，例如在摄食之前至多1小时、或在摄食之前至多30分钟、或在摄食之前至多15分钟、或在摄食之前至多5分钟添加到动物的饮用水。
动物饲料的三种主要类型包括粗饲料、精饲料和混合饲料。通常，粗饲料包含高百分比的粗纤维和低百分比的可消化营养物。例如，粗饲料可以被定义为包含等于或大于20重量％的粗纤维和等于或小于60重量％的总可消化营养物。粗饲料可包括，例如，干粗饲料(例如干草、稻草、含有至少90重量％干物质的人工脱水的草料)、青贮饲料(由如草、苜蓿、高粱和玉米等绿色草料形成，并以20％至50％干物质含量保存在筒仓中)和牧草(例如，提供具有高含水量和仅20％至30％干物质的草料的绿色生长牧草)。粗饲料的两种基本类型包括草和豆类。草的纤维和干物质通常比豆类高。豆类的蛋白质、能量、维生素和矿物质含量通常较高。
精饲料与粗饲料相反，其包含低百分比的粗纤维和高百分比的可消化营养物。例如，精饲料可以被定义为包含小于20重量％的粗纤维和大于60重量％的总可消化营养物。精饲料可包括例如富含能量的谷物和糖蜜。玉米、燕麦、大麦和蜀黍(高粱谷物)是能量丰富的谷物，包含约70至80重量％的总可消化营养物。精饲料还包括麦麸、米糠、小麦麸、黑麦麸和米末。
混合饲料通常是粗饲料和精饲料的混合物，以提供“完全”的均衡日粮，并且能量、蛋白质或纤维含量可以高或低。
所述至少一种有机硫化合物和至少一种生物类黄酮可以例如以各种量与动物饲料组合，这取决于要给予动物的有机硫化合物(多种有机硫化合物)和生物类黄酮(多种生物类黄酮)的总量。例如，有机硫化合物(多种有机硫化合物)和生物类黄酮(多种生物类黄酮)的总量可以足够使得每天可以向一只动物给予多达10克的总有机硫化合物(多种有机硫化合物)和生物类黄酮(多种生物类黄酮)。
存在于本文所述的动物饲料添加剂或动物饲料组合物中的总有机硫化合物的浓度可以例如高于葱属物种中天然存在的每种各自的有机硫化合物的浓度。
基于动物饲料组合物的总干重，动物饲料组合物可以例如包含约0.3重量％至约10重量％的总有机硫化合物。例如，基于动物饲料组合物的总干重，动物饲料组合物可包含约0.4重量％至约9.5重量％、或约0.5重量％至约9重量％、或约0.6重量％至约8.5重量％、或约0.7重量％至约8重量％、或约0.8重量％至约7.5重量％、或约0.9重量％至约7重量％、或约1重量％至约6重量％、或约1.5重量％至约5.5重量％、或约2重量％至约5重量％、或约2.5重量％至约4.5重量％、或约3重量％至约4重量％的总有机硫化合物。
基于动物饲料组合物的总干重，动物饲料组合物可例如包含约0.3重量％至约10重量％的大蒜素。例如，基于动物饲料组合物的总干重，动物饲料组合物可包含约0.4重量％至约9.5重量％、或约0.5重量％至约9重量％、或约0.6重量％至约8.5重量％、或约0.7重量％至约8重量％、或约0.8重量％至约7.5重量％、或约0.9重量％至约7重量％、或约1重量％至约6重量％、或约1.5重量％至约5.5重量％、或约2重量％至约5重量％、或约2.5重量％至约4.5重量％、或约3重量％至约4重量％的大蒜素。
存在于本文所述的动物饲料添加剂或动物饲料组合物中的总生物类黄酮的浓度可以例如高于植物或柑橘属水果中天然存在的每种各自的生物类黄酮的浓度。
基于动物饲料组合物的总干重，动物饲料组合物可以例如包含约0.1重量％至约10重量％的总生物类黄酮。例如，基于动物饲料组合物的总干重，动物饲料组合物可包含约0.2重量％至约10重量％、或约0.3重量％至约10重量％、或约0.4重量％至约9.5重量％、或约0.5重量％至约9重量％、或约0.6重量％至约8.5重量％、或约0.7重量％至约8重量％、或约0.8重量％至约7.5重量％、或约0.9重量％至约7重量％、或约1重量％至约6重量％、或约1.5重量％至约5.5重量％、或约2重量％至约5重量％、或约2.5重量％至约4.5重量％、或约3重量％至约4重量％的总生物类黄酮。
动物饲料组合物可以例如进一步包含其他动物饲料添加剂，包括例如维生素、矿物质、抗生素、生长刺激剂及其组合。例如，动物饲料组合物可以包含其他生物活性的动物饲料添加剂，例如适合减少甲烷的产生/排放和/或增加营养物对动物的可用性的动物饲料添加剂。维生素可以是维生素a、维生素d、维生素e、维生素k、硫胺素、核黄素、吡哆醇、氰钴胺素、类胡萝卜素(包括β-胡萝卜素、玉米黄质、叶黄素和番茄红素)、烟酸、叶酸、泛酸、生物素、维生素c、胆碱、肌醇及其盐和衍生物中的任意一种或多种。矿物质可以是钙、磷、镁、铁、锌、锰、铜、钴、硼、碘、钠、钾、钼、硒、铬、氟和氯化物中的任意一种或多种。动物饲料组合物可以例如包含约0.001wt％至约5wt％的每种另外的动物饲料添加剂、或约0.01wt％至约5wt％、或约0.1wt％至约5wt％的每种另外的动物饲料添加剂。
动物饲料组合物可以除活性物质外还包含其他组分，例如调味剂、着色剂、稳定剂、缓冲剂、乳化剂、分散剂、增稠剂、增溶剂、微量营养素(例如硒)、维生素、饲料材料(例如碳水化合物)等。
用途
本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物(包括所有实施方案和实施方案的组合)可用于减少动物的甲烷产生和/或排放，增加营养素对动物的可用性和/或增加动物的奶和/或肉和/或毛生产和/或提高动物的奶和/或肉和/或毛生产效率。不希望受理论的束缚，据信动物饲料添加剂或动物饲料组合物可减少动物肠道中微生物的甲烷产生，从而减少这些微生物使用的营养物并增加营养物对动物的可用性。
在某些实施方案中，动物是反刍动物。反刍动物包括例如牛、山羊、绵羊、牦牛、鹿或羚羊。在某些实施方案中，动物是伪反刍动物。伪反刍动物包括例如骆驼和河马。在某些实施方案中，动物是单胃动物。单胃动物包括例如袋鼠、大鼠、狗、猪、猫、马和兔。在某些实施方案中，动物是单胃草食动物。单胃草食动物包括例如袋鼠、马和兔。
本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物可以口服给予动物。本文所述的动物饲料添加剂和动物饲料组合物可以例如每天向动物给予。
给予动物或由动物食用的动物饲料添加剂和/或动物饲料组合物的量可以根据动物的需求和动物产生甲烷的严重程度而变化。例如，给予动物或由动物食用的动物饲料添加剂和/或动物饲料组合物的量可以根据动物的类型、动物的大小、动物的年龄和/或对象的肠道微生物群而变化。确定特定对象的合适量在本领域技术范围内。如果需要，可以将每天的总量分开，并在一天中按份给予(例如每天两份或三份)。通常，合适的活性剂日剂量为作为有效产生期望效果的最低剂量的量。增加给予动物/由动物食用的活性剂(大蒜素和生物类黄酮(多种生物类黄酮))的量可以例如减少甲烷产生的量。
例如，每只动物每天可以食用多达约10克的总有机硫化合物和生物类黄酮(多种生物类黄酮)。例如，每只动物每天可食用多达约9克、或多达约8克、或多达约7克、或多达约6克、或多达约5克、或多达约4克、或多达约3克、或多达约2克的总有机硫化合物和生物类黄酮(多种生物类黄酮)。例如，每只动物每天可食用至少约0.5克的总有机硫化合物和生物类黄酮(多种生物类黄酮)。例如，每只动物每天可以食用至少约1克或至少约1.5克的总有机硫化合物和生物类黄酮(多种生物类黄酮)。
本文所述的动物饲料添加剂可以例如将甲烷的产生和/或排放降低至少约20％(相比如果不食用动物饲料添加剂的甲烷的产生和/或排放)。例如，动物饲料补充剂可以将甲烷的产生和/或排放减少至少约25％、或至少约30％、或至少约35％、或至少约40％、或至少约45％、或至少约50％。本文所述的动物饲料添加剂可以例如将甲烷的产生和/或排放减少多达100％。例如，动物饲料补充剂可将甲烷产生和/或排放减少多达约95％、或多达约90％、或多达约85％、或多达约80％、或多达约75％、或多达约70％。这可以例如通过以下实施例中描述的霍恩海姆(hohenheim)气体测试来测量。
例如，本文所述的动物饲料添加剂可以使奶和/或肉和/或毛生产增加至少约20％(相比如果不食用动物饲料添加剂的奶和/或肉和/或毛生产)。例如，动物饲料添加剂可以使奶和/或肉和/或毛生产增加至少约25％、或至少约30％、或至少约35％、或至少约40％、或至少约45％、或至少约50％。本文所述的动物饲料添加剂可以例如使奶和/或肉和/或毛生产增加多达100％。例如，动物饲料添加剂可以使奶和/或肉和/或毛生产增加多达约95％、或多达约90％、或多达约85％、或多达约80％、或多达约75％、或多达约70％。例如，这可以通过每天生产的奶的体积、动物重量或毛的重量来测量。
例如，本文所述的动物饲料添加剂可以使奶和/或肉和/或毛生产效率提高至少约20％(相比如果不食用动物饲料添加剂的奶和/或肉和/或毛生产)。例如，动物饲料添加剂可以使奶和/或肉和/或毛生产效率提高至少约25％、或至少约30％、或至少约35％、或至少约40％、或至少约45％、或至少约50％。本文所述的动物饲料添加剂可以例如将奶和/或肉和/或毛生产效率提高多达100％。例如，动物饲料添加剂可将奶和/或肉和/或毛生产效率提高多达约95％、或多达约90％、或多达约85％、或多达约80％、或多达约75％、或多达约70％。效率与每单位消耗的营养物发生的特定生物过程(例如奶、肉、毛生产)的程度有关。例如，这可以通过每天生产的奶的体积或动物重量或毛的重量的变化除以动物食用的总营养物来衡量。
例如，本文所述的动物饲料补充剂可以使营养物可用性提高至少约20％(相比如果不食用动物饲料添加剂的奶和/或肉和/或毛生产)。例如，动物饲料添加剂可以使营养物可用性提高至少约25％、或至少约30％、或至少约35％、或至少约40％、或至少约45％、或至少约50％。本文所述的动物饲料添加剂可以例如将营养物可用性提高多达100％。例如，动物饲料添加剂可将营养物可用性提高多达约95％、或多达约90％、或多达约85％、或多达约80％、或多达约75％、或多达约70％。营养物的可用性指可用于动物以用于生物/代谢功能的营养物的量。
在某些实施方案中，动物饲料添加剂或组合物中存在的有机硫化合物(多种有机硫化合物)(例如大蒜素)和生物类黄酮(多种生物类黄酮)可以协同作用以减少甲烷产生，增加营养物可用性和/或增加肉和/或奶和/或毛生产。有机硫化合物(多种有机硫化合物)(例如大蒜素)和至少一种生物类黄酮的协同组合所产生的作用大于单独的有机硫化合物(多种有机硫化合物)和生物类黄酮组分各自的作用之和，因此可以提供改善的性能。
制备方法
本文所述的动物饲料添加剂可以通过将一种或多种有机硫化合物和一种或多种生物类黄酮组合来制备。本文所述的动物饲料组合物可以通过将动物饲料与一种或多种有机硫化合物和一种或多种生物类黄酮组合来制备。将组分以合适的量组合以获得具有期望量的每种组分的组合物。每种组分可以以适于获得期望的产品的任意顺序和组合与一种或多种其他组分组合。例如，可以通过混合或共混来组合每种组分。例如，可通过将一种或多种有机硫化合物和一种或多种生物类黄酮置于动物饲料的顶部(顶装)，将一种或多种有机硫化合物和一种或多种生物类黄酮与动物饲料组合。这样的方法是本领域众所周知的。所述组合物可以制备成干燥固体形式，例如粉末形式，并根据预期最终产物的制剂类型而经受进一步的加工步骤。所述方法可以进一步包括成型步骤，其中将混合物模制、压制、喷雾干燥或以其他方式成形(例如，条、球、丸粒、团簇、片)，优选具有适合本文所述类型的动物食用的尺寸和/或质地。该方法可以包括将动物饲料或动物饲料添加剂容纳在特定的输送装置例如注射器中。该方法可以包括将动物饲料添加剂或动物饲料制成大丸片，其预期可以留在动物的胃(例如反刍动物的瘤胃)中。
现在仅通过参考以下非限制性实施例来详细描述本发明。
实施例
包括所有缓冲液和试剂的制备在内的体外霍恩海姆气体试验(hgt)是根据menke和steingass(1988)，“menkek.h.,steingassh.,estimationoftheenergeticfeedvalueobtainedfromchemicalanalysisandgasproductionusingrumenfluid,anim.res.dev.28,7-55”的方案进行的，其内容通过引用并入本文。
简而言之，将瘤胃液滤过四层纱布(孔径为1mm，类型17medpro，novamedag，flawil，瑞士)，然后将其与预热的还原menke缓冲液混合(menke和steingass，1988)。然后将瘤胃液/缓冲液混合物分配到包含各种测试添加剂的预温热的孵育单元中。每个气密的注射器单元包含25ml瘤胃液/缓冲液混合物(1：3；v/v)，300mg干燥和研磨的全混合日粮(tmr)和50ml制备的测试底物，以得到期望的浓度ml-1。每种测试底物和对照进行六次重复测试，每轮均包括底物对照(瘤胃液加300mg干燥和研磨的全混合日粮(tmr)底物，饲喂给从其获得瘤胃液的有瘘管的绵羊)。还在不同的日期测试每种底物，以允许微生物群落变化。将该混合物在39℃的恒温下孵育8小时。8小时后，从孵育单元上印刷的校准刻度记录总的气体和液体体积，并通过仅从孵育单元倾析孵育液而将发酵气体留在内部来终止发酵。然后用汉密尔顿注射器(hamilton，ag，bonaduz，瑞士)通过气密隔膜从孵育单元抽出150ml气体，该气密隔膜覆盖改进的单元的第二出口。类黄酮混合物的主要成分是柚皮苷和新橙皮苷，其比例为2.10：0.92。莫能菌素，一种从肉桂地链霉菌分离出来的聚醚抗生素，被用作阳性对照。
在hewlettpackard气相色谱仪(5890系列ii型，avondale,pa,usa)上分析发酵气体的甲烷浓度。为了分析挥发性脂肪酸(vfa)，根据doane等人(1998)的方法制备了样品，并按照ehrlich等人(1981)的方法通过hplc(lachrom，l-7000系列，hitachiltd.，tokyo，japan)确定。甲烷排放的减少导致h2的积累，导致乙酸酯：丙酸酯比例和乙酸酯：丁酸酯比例的降低。该降低的比率表明丙酸酯和丁酸酯的增加(因为丙酸酯和丁酸酯的形成消耗h2)。丙酸酯的增加然后将导致反刍动物的产肉率提高，而丁酸酯的增加导致反刍动物的产奶率提高。
结果显示在下表1和2中。
表1
表2