本发明涉及一种促进蚂蟥生长的中草药添加剂,属于药用动物养殖领域。
二、
背景技术:
蚂蟥(whitmaniapigrawhitman)是中药材水蛭的基原动物之一,具有破血通经,逐瘀消癥的功效,主治血瘀经闭,癥瘕痞块,中风偏瘫,跌扑损伤等。近年来对蚂蟥生物学特性、生殖发育、消化生理和呼吸生理等方面做了大量的研究,在此基础上蚂蟥室外人工养殖获得成功。但随着相关中成药的开发,蚂蟥需求量快速增长,而野生资源却日益枯竭,致供需矛盾非常突出。因此如何在现有养殖基础上促进蚂蟥生长,增加经济效益显得极为迫切。
黄芪(astragaliradix)是一味常用中草药,同时也是一种传统的中兽药,具有补气升阳,固表止汗,利水消肿的功效,现代研究发现其具有提高日增重率、促进营养消化吸收、调节饲料利用率等药理作用。近年来黄芪被大量应用在动物生产上,但鲜见用于蚂蟥养殖上的研究报道。
三、
技术实现要素:
本发明目的是在现有蚂蟥养殖基础上,提供一种显著促进蚂蟥生长,增加经济效益的中草药添加剂。
本发明在蚂蟥养殖水体中添加1ml含1g黄芪原药材的黄芪水煎液,使养殖水体中黄芪浓度为0.1‰-0.9‰。养殖过程中3-5天换1次水同时清除残留物,换水时间固定。换水后投喂清洗后的新鲜螺蛳(梨形环棱螺),养殖过程中及时清理死亡蚂蟥。
通过实验统计和比较发现,添加浓度为0.3‰-0.7‰黄芪均能显著促进蚂蟥生长,其中添加0.5‰黄芪的蚂蟥生长性能最好,消化酶活性最高。与不添加黄芪相比,采用本发明蚂蟥干品亩产最高提高约68.75%。本发明在不扩大蚂蟥养殖面积的前提下,增加了蚂蟥养殖的经济效益。与现有室内高密度蚂蟥养殖技术相比(密度每亩50万,水温27±1℃,其他养殖条件相同),应用本发明养殖1月龄蚂蟥60天,每亩可增加蚂蟥干重约67.71公斤,按目前市场价1000元/kg计,每亩增加经济效益约6.77万元。
四、具体实施方式
1.材料
1.1实验材料及仪器:
蚂蟥由南京农业大学中药材研究所提供,经郭巧生教授鉴定为蚂蟥w.pigra。
alpha-1506紫外可见分光光度计(上海谱光仪器有限公司)、5810r离心机(eppendorf公司)、xhf-d匀浆机(宁波新芝生物科技股份有限公司)、fyl-ys-108l低温保存箱(北京福意电器有限公司)、zd-2型自动电位滴定仪(上海仪电科学仪器股份有限公司)、fa1104分析天平(上海精密科学仪器有限公司)、kq250b超声仪(苏州昆山市超声仪器有限公司)、gxz智能型光照培养箱(宁波江南仪器厂)等。
2方法
2.1蚂蟥生长实验的设计
本实验在室内进行,养殖容器为容积为2l的塑料瓶,实验蚂蟥体重为0.16±0.03g。设一个空白对照组和五个黄芪浓度组,在蚂蟥养殖水体中添加1ml含1g黄芪原药材的黄芪水煎液,使养殖水体中黄芪浓度为0‰,0.1‰,0.3‰,0.5‰,0.7‰,0.9‰。每个处理组设置10瓶,每瓶饲养10条蚂蟥,实验时间为60天,期间保持室温为27±1℃。实验开始前测量蚂蟥的体重,实验结束后测量蚂蟥的体重,计算出平均质量。实验结束后取样进行消化酶活性的测定。由公式计算存活率(sr)、增重率(wgr)和特定生长率(sgr)。式中w0为实验开始时蚂蟥的平均质量(g),实验天数为t(d),w1为实验结束时蚂蟥的平均质量(g)。
sr(%)=100×(总条数-死亡条数)/总条数。
sgr(%)=100×(lnw1-lnw0)/t;
wgr(%)=100×(w1-w0)/w0。
2.2消化酶活性的测定
与2.1的实验设计相同,取各黄芪浓度下蚂蟥组织匀浆,采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定淀粉酶活力,规定在37℃条件下,单位体积的酶量1min水解淀粉生成1mg还原糖的产量为1个淀粉酶活力单位;采用对-棕榈酸硝基苯酯(ρ-npp)比色法测定脂肪酶活力,规定在37℃条件下,1min催化释放1μmol对硝基酚的酶量定义为1个酶活力单位;采用福林-酚法测定蛋白酶活力,规定每分钟水解干酪素产生1μg酪氨酸定义为1个蛋白酶活力单位。组织匀浆液蛋白含量采用考马斯亮蓝g-250比色法测定。
2.3统计方法
试验所得数据先用microsoftexcel作初步处理,然后采用spss20.0软件包(one-wayanove,lsd)进行分析,p<0.05为差异显著。数据以
3结果与分析
3.1黄芪对蚂蟥生长性能的影响
不同浓度黄芪对蚂蟥体重、特定生长率、存活率等生长性能的影响见表1。由表1可知,各黄芪浓度组最终体重、增重率和特定生长率均高于空白组,且随浓度的增加呈先升高后降低趋势,0.5‰组最高;0.3‰、0.5‰、0.7‰组之间无显著性差异,但显著高于其他组别(p<0.05);存活率与上述趋势相同,0.5‰组最高,但各组间均无显著差异(p>0.05)。
表1黄芪对蚂蟥生长性能的影响(
tab1theeffectsofastragalusongrowthstatusofwhitmaniapigrawhitman(
注:同一列中不同字母表示组间存在显著性差异(p<0.05)。下表同。
note:differentlettersinthesamecolumnmeansignificantdifferenceat5%level.sameasbelow.
3.2黄芪对蚂蟥消化酶的影响
不同浓度黄芪对蚂蟥消化酶活性的影响见表2。如表2所示,各黄芪浓度组淀粉酶、脂肪酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶活性均高于空白组,且随浓度的增加呈先升高后降低趋势,0.5‰组显著高于其他组别(p<0.05)。
表2黄芪对蚂蟥消化酶活性的影响(
tab2theeffectsofastragalusondigestiveenzymeofwhitmaniapigrawhitman(
3.4综合评判
本实验结果显示,添加浓度为0.1‰-0.9‰黄芪均能促进蚂蟥生长,其中添加0.5‰黄芪的蚂蟥生长性能最好,体重增加最多,消化酶活性最高。与不添加黄芪相比,采用本发明蚂蟥产量最高可增加约68.75%。与现有室内高密度养殖技术相比,养殖1月龄蚂蟥60天每亩最多可增加蚂蟥干重约67.71公斤,按目前市场价1000元/kg计,每亩增加经济效益约6.77万元。
具体实施例1:
选取体重为0.16±0.03g的蚂蟥放置在容积为2l的塑料瓶中养殖60天,每瓶10条,保持室温为27±1℃。实施地点在南京农业大学中药材研究所。添加为1ml含1g黄芪原药材的黄芪水煎液,使养殖水体中黄芪浓度为0.5‰。3天换1次水,使用曝气24h的自来水,换水时间为上午9:00左右,每次换水100%并清除残留螺蛳。换水后投喂清洗后在自来水中暂养3天的新鲜梨形环棱螺。养殖过程中发现有死亡蚂蟥及时清理。最终60天收获蚂蟥干品亩产约达146.57千克。
本发明阐述的实施例及权利要求并不是对本发明的限定,任何本领域技术人员根据常规手段可以预见或者微调的变化均落入本发明保护范围内。