一种利用粪菌移植技术治疗竹鼠腹泻的方法与流程

文档序号:15628873发布日期:2018-10-12 20:05阅读:281来源:国知局

本发明涉及竹鼠疫病治疗技术领域,尤其是一种利用粪菌移植技术治疗竹鼠腹泻的方法。



背景技术:

粪菌移植是指将健康个体粪便中的功能菌群移植至患者的胃肠道内,重建具有正常功能的肠道菌群,治疗胃肠道内外疾病的方法。首次应用粪菌移植治疗疾病可追溯至1700年前的东晋时代,葛洪在我过第一本急症医学书籍《肘后急备方》中记载:治疗食物中毒、腹泻、发热濒临死亡的患者,“饮粪汁一升,即活”。目前科学研究表明,物种差异、生长发育、饮食习惯等因素都会影响动物体内肠道菌群的结构、数目,并且健康个体和患病个体之间的肠道菌群也不一样。于是,采用健康个体的肠道菌群重建病患个体的肠道菌群正逐渐成为现代医学、生物学的研究热点。

竹鼠(学名:rhizomyidae),又称竹馳、竹根鼠、芒狸等,因主要采食竹子而得名。目前全世界共发现有3属6种,其中在我国境内品种为中华竹鼠、大竹鼠和银星竹鼠,广泛分布于我国广西、贵州、云南。竹鼠具有很高的经济价值,其肉质细腻嫩滑、营养丰富,不仅具有低胆固醇、低脂肪、高蛋白等特点,还富含钙、铁、锌、磷、维生素e以及多种氨基酸。根据《本草纲目》记载:“竹鼠肉甘、平、无毒、补中益气、解读”,同时还具有“调经、护法、补血益气、滋阴壮阳”的特点。

在竹鼠人工养殖过程中,由于饲料、环境卫生、通风、温度等方面的原因,会造成竹鼠肠道感染,体内菌群失衡,进而发生腹泻、拉稀等症状,使得养殖过程成本增加,直接影响了竹鼠养殖的经济效益。在现代养殖中,通常采用恩诺沙星、头孢他啶、诺氟沙星对竹鼠腹泻进行治疗,但在使用过程中,因为竹鼠自身病状的程度不同而采用同等剂量的化学药物,容易导致治疗结束后的竹鼠自身消化系统能力减退,体重增长率下降。如cn201310632906.0公开的一种治疗竹鼠腹泻、拉痢的中药组合物,采用金樱子、番石榴、大青叶、大叶紫珠、白术、甘草,将各中药原料分别粉碎后混合或煎煮而得的药剂,在止泻止痢的同时,还具有消肿止痛、收涩止血、修复伤口和促进细胞免疫的作用。但在实际生产过程中,中药效果见效慢。



技术实现要素:

为了解决上述现有技术的问题,本发明提供了一种利用粪菌移植技术治疗竹鼠腹泻的方法。

具体是通过以下技术方案得以实现:

一种利用粪菌移植技术治疗竹鼠腹泻的方法,采用未患有腹泻症状的竹鼠粪便混入饲料中,喂食患有腹泻症状的竹鼠。

进一步,所述的未患有腹泻症状的竹鼠为成年雌竹鼠。

进一步,所述的竹鼠粪便,是竹鼠连续进食调理型饲料25~30天后所得的自然排泄物。

进一步,所述的调理型饲料,按质量份计包括以下成分:

玉米秸秆35~60份、皇竹草杆20~24份、竹根15~18份、西瓜皮8~10份、红薯5~9份、花生6~9份、黄豆3~6份。

进一步,所述的竹鼠粪便混入饲料,包括以下步骤:

(1)对离体后的竹鼠粪便喷洒0.3~0.7wt.%的柠檬酸钠溶液,竹鼠粪便与柠檬酸钠溶液的质量比为10:1,搅拌5min,在34~37℃的无菌条件下发酵3~5h,得到发酵粪便;

(2)用生理盐水将发酵粪菌稀释至5倍,进行超声处理,超声时间为1~3min,频率为100~150hz,再用800~1000目的筛网过滤,得到发酵粪菌液;

(3)将发酵粪菌液对饲料进行喷洒,搅拌1~3min,即可。

进一步,发酵粪菌液与饲料的配比为4~6ml:200g。

进一步,所述的饲料,包括以下制备步骤:

将20~25份胡萝卜、18~22份竹枝切碎成2~3cm,与8~10份玉米粒、7~9份绿豆、2~4份花生混合均匀。

进一步,所述的饲料,还添加有0.1~0.3份当归、0.2份棕榈、0.1份茉莉花。

与现有技术相比,本发明具有以下优点:

本发明采用成年雌竹鼠作为粪菌的来源,采用玉米秸秆、皇竹草杆、竹根、西瓜皮、红薯、花生、黄豆连续喂食25~30天,调理成年雌竹鼠肠道内的菌群结构及数目,为治疗腹泻竹鼠的粪菌提供稳定、良好的菌群,对离体的粪便采取及时收集,用柠檬酸钠以及短时间发酵的方式对粪便内的菌群进行筛选,提取分离粪便中的菌群得到粪菌液,将粪菌液与胡萝卜、竹枝、玉米粒、绿豆、花生、当归、棕榈、茉莉花进行混合,对患腹泻的竹鼠进行饲喂,所饲喂的饲料及其有效成分利于患病竹鼠消化、促进竹鼠肠道机体恢复,在痊愈后其肠道功能恢复正常,体重增加迅速,减少因竹鼠腹泻而带来的经济损失。

本发明相对于采用化学药物治疗竹鼠腹泻,所治愈的竹鼠在痊愈后,肠道系统受损程度小,能快速恢复体重增长,恢复效果良好;相对于传统中药治疗方式,平均见效时间及平均痊愈时间较短,对竹鼠腹泻具有较好的治疗效果,有效率可达到85%~90%。

具体实施方式

下面结合具体的实施例以及实验例来对本发明创造的技术方案做出进一步的解释和说明,以便于本领域技术人员对本发明创造的充分理解,但该解释和说明,并不是对本发明创造技术方案的进一步的限定,其在该发明创造的基础上,做出的简单数值的替换和常规调整的该改进的技术方案,均属于本发明创造的保护范围。

实施例1

选取未患有腹泻症状、生长健康的成年雌竹鼠,连续25天饲喂调理型饲料,调理型饲料为玉米秸秆35g、皇竹草杆20g、竹根15g、西瓜皮8g、红薯5g、花生6g、黄豆3g;在25天后,竹鼠自然排泄的粪便在离体后,立即进行收集;收集的粪便与0.3wt.%的柠檬酸钠溶液按质量比10:1混合,搅拌5min,在34℃的无菌条件下发酵5h,再用生理盐水将发酵粪菌稀释至5倍,进行超声处理,超声时间为1min,频率为100hz,再用800目的筛网过滤,得到发酵粪菌液;为患有腹泻症状的竹鼠准备饲料,将20g胡萝卜、18g竹枝切碎成2cm,与8g玉米粒、7g绿豆、2g花生、0.1g当归、0.2g棕榈、0.1g茉莉花混合均匀;将发酵粪菌液与病患竹鼠的饲料按4ml:200g的配比进行喷洒,搅拌1min,对患有腹泻症状的竹鼠进行饲喂。

实施例2

选取未患有腹泻症状、生长健康的成年雌竹鼠,连续28天饲喂调理型饲料,调理型饲料为玉米秸秆42g、皇竹草杆22g、竹根16g、西瓜皮9g、红薯7g、花生8g、黄豆4g;在28天后,竹鼠自然排泄的粪便在离体后,立即进行收集;收集的粪便与0.5wt.%的柠檬酸钠溶液按质量比10:1混合,搅拌5min,在36℃的无菌条件下发酵4h,再用生理盐水将发酵粪菌稀释至5倍,进行超声处理,超声时间为2min,频率为125hz,再用900目的筛网过滤,得到发酵粪菌液;为患有腹泻症状的竹鼠准备饲料,将23g胡萝卜、20g竹枝切碎成2cm,与9g玉米粒、8g绿豆、3g花生、0.2g当归、0.2g棕榈、0.1g茉莉花混合均匀;将发酵粪菌液与病患竹鼠的饲料按5ml:200g的配比进行喷洒,搅拌2min,对患有腹泻症状的竹鼠进行饲喂。

实施例3

选取未患有腹泻症状、生长健康的成年雌竹鼠,连续30天饲喂调理型饲料,调理型饲料为玉米秸秆60g、皇竹草杆24g、竹根18g、西瓜皮10g、红薯9g、花生9g、黄豆6g;在30天后,竹鼠自然排泄的粪便在离体后,立即进行收集;收集的粪便与0.7wt.%的柠檬酸钠溶液按质量比10:1混合,搅拌5min,在37℃的无菌条件下发酵5h,再用生理盐水将发酵粪菌稀释至5倍,进行超声处理,超声时间为3min,频率为150hz,再用1000目的筛网过滤,得到发酵粪菌液;为患有腹泻症状的竹鼠准备饲料,将25g胡萝卜、22g竹枝切碎成3cm,与10g玉米粒、9g绿豆、4g花生、0.3g当归、0.2g棕榈、0.1g茉莉花混合均匀;将发酵粪菌液与病患竹鼠的饲料按6ml:200g的配比进行喷洒,搅拌3min,对患有腹泻症状的竹鼠进行饲喂。

实施例4

选取未患有腹泻症状、生长健康的成年雄竹鼠,连续27天饲喂调理型饲料,调理型饲料为玉米秸秆48g、皇竹草杆21g、竹根16g、西瓜皮8g、红薯6g、花生9g、黄豆4g;在27天后,竹鼠自然排泄的粪便在离体后,立即进行收集;收集的粪便与0.4wt.%的柠檬酸钠溶液按质量比10:1混合,搅拌5min,在35℃的无菌条件下发酵3h,再用生理盐水将发酵粪菌稀释至5倍,进行超声处理,超声时间为1~3min,频率为100hz,再用850目的筛网过滤,得到发酵粪菌液;为患有腹泻症状的竹鼠准备饲料,将24g胡萝卜、20g竹枝切碎成2cm,与9g玉米粒、7g绿豆、2g花生、0.3g当归、0.2g棕榈、0.1g茉莉花混合均匀;将发酵粪菌液与病患竹鼠的饲料按4ml:200g的配比进行喷洒,搅拌1~3min,对患有腹泻症状的竹鼠进行饲喂。

实施例5

选取未患有腹泻症状、生长健康的成年雄竹鼠,连续27天饲喂调理型饲料,调理型饲料为玉米秸秆49g、皇竹草杆21g、竹根18g、西瓜皮9g、红薯5g、花生8g、黄豆3g;在27天后,竹鼠自然排泄的粪便在离体后,立即进行收集;收集的粪便与0.7wt.%的柠檬酸钠溶液按质量比10:1混合,搅拌5min,在37℃的无菌条件下发酵4h,再用生理盐水将发酵粪菌稀释至5倍,进行超声处理,超声时间为2min,频率为120hz,再用950目的筛网过滤,得到发酵粪菌液;为患有腹泻症状的竹鼠准备饲料,将34g胡萝卜、21g竹枝切碎成4cm,与9g玉米粒、8g绿豆、3g花生、0.3g当归、0.2g棕榈、0.1g茉莉花混合均匀;将发酵粪菌液与病患竹鼠的饲料按6ml:200g的配比进行喷洒,搅拌2min,对患有腹泻症状的竹鼠进行饲喂。

实施例6

选取未患有腹泻症状、生长健康的幼年雌竹鼠,连续28天饲喂调理型饲料,调理型饲料为玉米秸秆53g、皇竹草杆21g、竹根16g、西瓜皮9g、红薯7g、花生6g、黄豆3g;在28天后,竹鼠自然排泄的粪便在离体后,立即进行收集;收集的粪便与0.5wt.%的柠檬酸钠溶液按质量比10:1混合,搅拌5min,在35℃的无菌条件下发酵5h,再用生理盐水将发酵粪菌稀释至5倍,进行超声处理,超声时间为2min,频率为135hz,再用850目的筛网过滤,得到发酵粪菌液;为患有腹泻症状的竹鼠准备饲料,将23g胡萝卜、19g竹枝切碎成2cm,与9g玉米粒、7g绿豆、4g花生、0.3g当归、0.2g棕榈、0.1g茉莉花混合均匀;将发酵粪菌液与病患竹鼠的饲料按6ml:200g的配比进行喷洒,搅拌3min,对患有腹泻症状的竹鼠进行饲喂。

实施例7

选取未患有腹泻症状、生长健康的幼年雄竹鼠,连续28天饲喂调理型饲料,调理型饲料为玉米秸秆40g、皇竹草杆21g、竹根15g、西瓜皮10g、红薯9g、花生6g、黄豆5g;在28天后,竹鼠自然排泄的粪便在离体后,立即进行收集;收集的粪便与0.6wt.%的柠檬酸钠溶液按质量比10:1混合,搅拌5min,在36℃的无菌条件下发酵5h,再用生理盐水将发酵粪菌稀释至5倍,进行超声处理,超声时间为1~3min,频率为130hz,再用900目的筛网过滤,得到发酵粪菌液;为患有腹泻症状的竹鼠准备饲料,将25g胡萝卜、19g竹枝切碎成2cm,与10g玉米粒、7g绿豆、3g花生、0.1g当归、0.2g棕榈、0.1g茉莉花混合均匀;将发酵粪菌液与病患竹鼠的饲料按6ml:200g的配比进行喷洒,搅拌1min,对患有腹泻症状的竹鼠进行饲喂。

试验例

选取200只患有腹泻症状的竹鼠,随机分为10组,每组雌雄各半,第1~7组依次采用实施例1-7的粪菌移植方法对患病竹鼠进行治疗,第8组采用诺氟沙星以0.02mg/kg/日的剂量对患病竹鼠进行治疗,第9组采用cn201310632906.0公开的方法对患病竹鼠进行治疗,第10组不采用任何治疗方式。

观察治疗效果,统计治疗结果,以无效、显效、痊愈三级标准来判断,计算有效率,同时记录各组患病竹鼠平均显效时间、平均痊愈时间以及痊愈10天后的体重增加量。结果见表1。

有效率=(显效数+痊愈数)/总例数×100%

表1竹鼠的治疗效果

从上表可以看出,实施例1-3采用的治疗方法,具有较好的治疗效果,有效率可达到85%~90%,并且平均见效时间及平均痊愈时间较短,竹鼠痊愈后的体重增长率较高,恢复效果好。

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