本发明涉及畜牧饲料领域，具体涉及一种生长育肥猪低氮排放日粮及其应用。
背景技术
日粮蛋白质对畜体的健康和最佳生长、生产性能的获得非常重要，猪对蛋白质(crudeprotein，cp)的需要实际是对氨基酸的需要，随着合成氨基酸(crystallineaminoacid，caa)工业的发展、优质蛋白原料的紧缺、抗生素的禁用以及我国新环保法中对畜禽养殖环境污染问题的重视，低氮排放日粮一直以来是我国动物营养领域的研究热点。
目前对于低氮排放日粮的研究主要集中在猪的生产性能、肠道健康等方面，较少关注低氮排放平衡氨基酸日粮对日粮中氨基酸、蛋白等营养物质消化率的影响。而正确理解不同蛋白水平下营养物质在肠道中的消化吸收对于低氮排放日粮的科学配制及推广具有重要的指导作用。
日粮蛋白水平的降低同时会减少氨基酸和氮的摄入量，因此会影响体内一些氨基酸的从头合成以及肠道的消化功能。有研究表明低氮排放日粮中额外添加的合成氨基酸的吸收速率要远远高于植物蛋白中的氨基酸，因此对肠道的刺激小，所以一些蛋白消化酶的活性可能会降低，同时降低了日粮中植物蛋白质和氨基酸的消化率。此外，低氮排放日粮中谷物含量高，因此相应的淀粉含量会比较高，对肠道淀粉酶分泌的刺激作用相应会增大，理论来讲淀粉酶活性会因此升高。因为蛋白含量的不同导致日粮结构发生改变也会影响其他一些消化酶如脂肪酶、二糖酶等的活性。
n-氨甲酰谷氨酸是尿素循环中鸟氨酸生成瓜氨酸的中间体n-乙酰谷氨酸的结构类似物，它可以激活尿素氮循环中的第一个酶cps-i(也是在肠上皮细胞合成精氨酸过程中的一个关键酶)，促进尿素循环(精氨酸在体内的主要循环途径)，从而提高机体内源精氨酸合成。n-氨甲酰谷氨酸作为精氨酸内源合成激活剂，越来越受到人们的关注。
日粮中的谷物及其加工副产物中含有较高水平的非淀粉多糖(nsp)，而nsp作为主要的抗营养因子限制了这些饲料原料的使用，nsp酶因具有减少nsp的笼蔽效应、提高日粮养分消化和促进肠道健康等作用而越来越受到重视。
本发明的发明人意外发现，在低氮排放日粮中同时添加n-氨甲酰谷氨酸(ncg)和非淀粉多糖(nsp)酶可以起到协同作用，可以显著提高猪的生长性能、提高猪对营养物质消化率的影响、提高猪胴体品质和肉品质，还具有节氮减排、节省优质蛋白资源、降低饲料成本的优势。
技术实现要素：
本发明提供一种低氮排放日粮，可以显著提高提高猪的生长性能、提高猪对营养物质消化率的影响、提高猪胴体品质和肉品质。
一种低氮排放日粮，所述日粮包含如下重量百分比含量的组份：n-氨甲酰谷氨酸0.07％-0.09％，非淀粉多糖酶0.01％-0.03％。
进一步，所述非淀粉多糖酶包含纤维素酶、木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶和果胶酶。
所述非淀粉多糖酶中包含如下重量百分比含量的酶组份：纤维素酶8.00％-12.00％、木聚糖酶30.00％-42.00％、β-甘露聚糖酶6.00％-13.00％、α-半乳糖苷酶7.00％-15.00％、β-葡聚糖酶16.00％-25.00％、果胶酶10.00％-18.00％；
优选地，所述非淀粉多糖酶中包含如下重量百分比含量的酶组分：纤维素酶10.80％、木聚糖酶35.60％、β-甘露聚糖酶11.50％、α-半乳糖苷酶10.95％、β-葡聚糖酶19.15％、果胶酶12.00％。
所述非淀粉多糖酶中酶活性为：纤维素酶6556u/g、木聚糖酶31850u/g、β-甘露聚糖酶50170u/g、α-半乳糖苷酶2874u/g、β-葡聚糖酶12748u/g、果胶酶1050u/g。
进一步，所述日粮包含如下重量百分比含量的组份：n-氨甲酰谷氨酸0.08％，非淀粉多糖酶0.02％。
进一步，所述日粮还包含如下重量百分比含量的组份：赖氨酸0.58％-0.60％，蛋氨酸0.06％-0.16％，苏氨酸0.14％-0.20％，缬氨酸0.04％-0.07％，色氨酸0.02％-0.05％。
进一步，所述日粮包含如下重量百分比含量的组份：
赖氨酸0.60％，蛋氨酸0.16％，苏氨酸0.20％，缬氨酸0.06％，色氨酸0.05％，n-氨甲酰谷氨酸0.07％-0.09％，非淀粉多糖酶0.01％-0.03％；或，
赖氨酸0.60％，蛋氨酸0.12％，苏氨酸0.16％，缬氨酸0.07％，色氨酸0.03％，n-氨甲酰谷氨酸0.07％-0.09％，非淀粉多糖酶0.01％-0.03％；或，
赖氨酸0.58％％，蛋氨酸0.06％，苏氨酸0.14％，缬氨酸0.04％，色氨酸0.02％，n-氨甲酰谷氨酸0.07％-0.09％，非淀粉多糖酶0.01％-0.03％；
优选地，所述日粮包含如下重量百分比含量的组份：
赖氨酸0.60％，蛋氨酸0.16％，苏氨酸0.20％，缬氨酸0.06％，色氨酸0.05％，n-氨甲酰谷氨酸0.08％，非淀粉多糖酶0.02％；或，
赖氨酸0.60％，蛋氨酸0.12％，苏氨酸0.16％，缬氨酸0.07％，色氨酸0.03％，n-氨甲酰谷氨酸0.08％，非淀粉多糖酶0.02％；或，
赖氨酸0.58％％，蛋氨酸0.06％，苏氨酸0.14％，缬氨酸0.04％，色氨酸0.02％，n-氨甲酰谷氨酸0.08％，非淀粉多糖酶0.02％。
进一步，所述日粮由如下重量百分比含量的组份组成：
玉米50.53％，米糠粕17.56％，红高粱15％，豆粕13.00％，石粉1.11％，磷酸一二钙0.62％，氯化钠0.43％，防霉剂0.08％，预混料0.50％，赖氨酸0.60％，蛋氨酸0.16％，苏氨酸0.20％，缬氨酸0.06％，色氨酸0.05％，n-氨甲酰谷氨酸0.07％-0.09％，非淀粉多糖酶0.01％-0.03％；或，
玉米48.94％，大麦20.00％，豆粕11.65％，红高粱10.00％，米糠粕5.57％，石粉0.92％，磷酸一二钙0.81％，氯化钠0.45％，防霉剂0.08％，预混料0.50％，赖氨酸0.60％，蛋氨酸0.12％，苏氨酸0.16％，缬氨酸0.07％，色氨酸0.03％，n-氨甲酰谷氨酸0.07％-0.09％，非淀粉多糖酶0.01％-0.03％；或，
玉米52.85％，大麦17.00％，豆粕9.18％，红高粱10.00％，米糠粕7.56％，石粉0.97％，磷酸一二钙0.42％，氯化钠0.50％，防霉剂0.08％，预混料0.50％，赖氨酸0.58％％，蛋氨酸0.06％，苏氨酸0.14％，缬氨酸0.04％，色氨酸0.02％，n-氨甲酰谷氨酸0.07％-0.09％，非淀粉多糖酶0.01％-0.03％；
优选地，所述日粮由如下重量百分比含量的组份组成：
玉米50.53％，米糠粕17.56％，红高粱15％，豆粕13.00％，石粉1.11％，磷酸一二钙0.62％，氯化钠0.43％，防霉剂0.08％，预混料0.50％，赖氨酸0.60％，蛋氨酸0.16％，苏氨酸0.20％，缬氨酸0.06％，色氨酸0.05％，n-氨甲酰谷氨酸0.08％，非淀粉多糖酶0.02％；或，
玉米48.94％，大麦20.00％，豆粕11.65％，红高粱10.00％，米糠粕5.57％，石粉0.92％，磷酸一二钙0.81％，氯化钠0.45％，防霉剂0.08％，预混料0.50％，赖氨酸0.60％，蛋氨酸0.12％，苏氨酸0.16％，缬氨酸0.07％，色氨酸0.03％，n-氨甲酰谷氨酸0.08％，非淀粉多糖酶0.02％；或，
玉米52.85％，大麦17.00％，豆粕9.18％，红高粱10.00％，米糠粕7.56％，石粉0.97％，磷酸一二钙0.42％，氯化钠0.50％，防霉剂0.08％，预混料0.50％，赖氨酸0.58％％，蛋氨酸0.06％，苏氨酸0.14％，缬氨酸0.04％，色氨酸0.02％，n-氨甲酰谷氨酸0.08％，非淀粉多糖酶0.02％。
所述预混料为每千克日粮提供：维生素a8250iu；维生素d3825iu；维生素e40iu；维生素k34mg；维生素b11mg；维生素b25mg；维生素b62mg；维生素b1225μg；泛酸15mg；烟酸35mg；叶酸2mg；生物素4mg；氯化胆碱600mg；铜50mg；铁80mg；锌100mg；锰25mg；硒0.15mg；碘0.5mg。
本发明还提供所述的日粮在生长育肥猪饲料中的应用，优选地，所述应用为：
1)提高猪的生长性能；
2)提高猪对营养物质消化率的影响；
3)提高猪胴体品质和肉品质。
低氮排放日粮具有节氮减排、节省优质蛋白资源的优势，本发明日粮中补充赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、蛋氨酸和缬氨酸，添加适量的n-氨甲酰谷氨酸和非淀粉多糖酶可以起到协同作用，不仅能够提高猪的生长性能、营养物质消化率、胴体品质和肉品质；还可在日粮中将蛋白水平降低2-3个点的基础上，使豆粕的用量会降低6-9个百分点，节约优质蛋白资源，提高日粮中蛋白的利用效率，同时降低饲料成本。
本发明具体的有益效果如下：
1、本发明低氮排放日粮显著降低生长育肥猪的料肉比，尤其在猪生长期使料肉比突破2.0以下，显著提高饲料的转化效率、提高猪的生长性能，，同时解决了传统低氮排放日粮会导致胴体变肥的缺点。
2、本发明低氮排放日粮显著提高了日粮中各营养物质的消化率。
3、本发明低氮排放日粮降低了日粮中的蛋白水平，显著降低尿氮排放，减少多余氮对环境的污染，同时提高日粮中氮的利用效率。
4、本发明低氮排放日粮会促进肌肉中蛋白的合成，有利于动物肌肉的生长。
5、本发明低氮排放日粮可以显著提高猪的胴体直长，有利于猪后期的进一步育肥，肌内脂肪含量的进一步升高也表明本发明低氮排放日粮有利于肌肉内脂肪的沉积。
6、本发明低氮排放日粮会显著提高日粮营养物质的消化率，特别是当日粮蛋白水平降低不超过3％时，额外补充n-氨甲酰谷氨酸和非淀粉多糖酶后会极显著的提高日粮营养物质的消化率至传统日粮的水平。
7、本发明低氮排放日粮提高血清中淀粉酶、脂肪酶以及胰蛋白酶的活性。可以提高猪肠道中消化酶的活性，从而提高了猪全肠道营养物质的消化率，此外日粮中氮的沉积效率也得到进一步提高。
具体实施方式
以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原料如无特别说明均能从公开商业途径获得。
实施例1.低氮排放日粮中添加ncg和nsp酶对猪生长性能、肉质性状和营养物质消化率的影响
1材料与方法
1.1试验动物及日粮
选择健康杜长大三元杂交商品猪360头(初始体重25kg左右)，公母各半，随机分为5个日粮处理，每个处理6栏猪，每栏猪为一个重复，每个重复12头猪。试验期分为生长期(25-60kg)、育肥前期(60-90kg)和育肥后期(90-110kg)三个阶段。
试验采用单因素完全随机设计，每阶段日粮分为5个处理，5种日粮分别为基础日粮组(cs)、低氮排放日粮组(lp)和低氮排放日粮+ncg+nsp酶组1(lpnn1)、低氮排放日粮+ncg+nsp酶组2(lpnn2)、低氮排放日粮+ncg+nsp酶组3(lpnn3)，lpnn1组为在各阶段lp组日粮基础上添加0.09％的ncg和0.01％的nsp酶复合物、lpnn2组为在各阶段lp组日粮基础上添加0.08％的ncg和0.02％的nsp酶复合物、lpnn3组为在各阶段lp组日粮基础上添加0.07％的ncg和0.03％的nsp酶复合物。
各阶段基础日粮参照nrc(2012)推荐值进行配制，lp组日粮根据本实验室前期研究成果采用净能体系和回肠末端可消化氨基酸模式配制，并根据需要依次补充赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、蛋氨酸和缬氨酸。各阶段日粮组成及营养成分见表1、2和3，lpnn1、lpnn2与lpnn3除ncg和nsp比例不同外，其他营养成分相同。
nsp酶包括纤维素酶、木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶和果胶酶。nsp酶活性如下：纤维素酶6556u/g、木聚糖酶31850u/g、β-甘露聚糖酶50170u/g、α-半乳糖苷酶2874u/g、β-葡聚糖酶12748u/g、果胶酶1050u/g，6种非淀粉多糖酶均购自挑战生物集团。nsp酶中包含如下重量百分比含量的酶组份：纤维素酶10.80％、木聚糖酶35.60％、β-甘露聚糖酶11.50％、α-半乳糖苷酶10.95％、β-葡聚糖酶19.15％、果胶酶12.00％。
ncg纯度为≥97％，购自亚太兴牧集团。
防霉剂购自上海邦成生物工程有限公司，生产许可证号：沪饲添(2015)h05002，批准文号：沪饲(2015)115001，产品标准编号：q31/0116000090c001-2017-01,原料组成为苯甲酸、双乙酸钠，载体为二氧化硅。其中：双乙酸钠≥10％，苯甲酸≥3％，水分≤12％，铅(以pb计)≤30mg/kg，砷(以总as计)≤10mg/kg。
表1.第一阶段日粮配方及营养水平(饲喂基础)
1预混料为每千克日粮提供：维生素a8250iu；维生素d3825iu；维生素e40iu；维生素k34mg；维生素b11mg；维生素b25mg；维生素b62mg；维生素b1225μg；泛酸15mg；烟酸35mg；叶酸2mg；生物素4mg；氯化胆碱600mg；铜50mg；铁80mg；锌100mg；锰25mg；硒0.15mg；碘0.5mg。
表2.第二阶段日粮配方及营养水平(饲喂基础)
1预混料为每千克日粮提供：维生素a8250iu；维生素d3825iu；维生素e40iu；维生素k34mg；维生素b11mg；维生素b25mg；维生素b62mg；维生素b1225μg；泛酸15mg；烟酸35mg；叶酸2mg；生物素4mg；氯化胆碱600mg；铜50mg；铁80mg；锌100mg；锰25mg；硒0.15mg；碘0.5mg。
表3.第三阶段日粮配方及营养水平(饲喂基础)
1预混料为每千克日粮提供：维生素a8250iu；维生素d3825iu；维生素e40iu；维生素k34mg；维生素b11mg；维生素b25mg；维生素b62mg；维生素b1225μg；泛酸15mg；烟酸35mg；叶酸2mg；生物素4mg；氯化胆碱600mg；铜50mg；铁80mg；锌100mg；锰25mg；硒0.15mg；碘0.5mg。
1.2饲养管理
试验前对猪舍进行清扫消毒，保持猪舍的清洁卫生。试验期间自由采食和饮水，按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫，随时观察猪的精神状况和健康状况。
1.3检测指标与方法
(1)日粮成分测定
每阶段分前、中、后3个时间点采集日粮并混合，日粮粉碎过40目筛后测定常规养分，其中干物质、粗蛋白质、钙和总磷分别参照中华人民共和国国家标准gb/t6435-1986、gb/t6432-1994、gb/t6436-2002和gb/t6437-2002推荐的方法测定；日粮粉碎过18目筛后参照国标gb/t20806-2006和农业标准ny/t1459-2007测定中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量。
日粮氨基酸测定方法如下：1)15种氨基酸和含硫氨基酸，日粮样品粉碎后分别在110℃下6mol/l盐酸水解24h和0℃下过甲酸氧化16h后，用氨基酸自动分析仪(日立l-8800，tokyo，japan)测定；2)色氨酸，粉碎后的日粮样品用4mol/l氢氧化钠110℃下水解22h后，用反相高效液相色谱仪(waters2690，milford，ma)测定。
(2)生长性能测定
每个试验阶段开始和结束时早晨空腹以栏为单位称重，并在试验期间以栏为单位每天记录耗料量，计算平均日增重(adg)、平均日采食量(adfi)和料肉比(fcr)。
(3)营养物质消化率的测定
各阶段试验结束前3-4d，收集每个猪舍(处理)各栏(重复)相同位点的新鲜粪便，并添加适量盐酸固氮，-20℃保存，最后将3d粪样混合，于65℃烘箱中烘72h，然后用万能粉碎机粉碎过40目，装袋待测，采用酸不溶灰分法测定营养物质全肠道表观消化率。
(4)血样采集
各阶段试验结束并换料前1天早晨，每个猪舍(处理)每个栏位选择1头猪进行前腔静脉空腹采血15ml，常温静置30min后，3500r/min离心10min，然后分离血清分装入1ml离心管中。-20℃保存备用。
(5)胴体品质的测定
在育肥后期试验结束后，每个处理选择6头肥育猪进行屠宰(每个重复(栏)选择1头)按国家标准《生猪屠宰操作规程》进行屠宰取样，去除头、蹄、尾及内脏并保留板油和肾脏后测量胴体品质：热胴体重、第十根肋骨处背最长肌的高和宽、背膘厚、胴体直长和胴体斜长。计算屠宰率和眼肌面积等。
(6)肉品质的测定
参照《猪肌肉品质测定技术规范》测定背最长肌的ph45min和ph24h，采用色差计测定眼肌色差，宰后2h测定背最长肌的滴水损失和熟肉率。
背最长肌的干物质、肌内脂肪和粗蛋白含量参照国标法进行测定。
1.4统计分析
试验数据以重复为单位，采用sas9.3软件mixed模块进行单因素方差分析，采用lsmeans计算平均值，p<0.05表示差异显著，p<0.01表示差异极显著。
2.试验结果
2.1低氮排放日粮对猪生长性能的影响
表4.低氮排放日粮对猪生长性能的影响
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表4可以看出，同cs组相比，各阶段日粮蛋白水平降低2-3个百分点并不会显著影响猪的生长性能，但在日粮中额外补充0.1％的ncg+nsp酶复合物后，lpnn组猪的平均日增重(adg)和各阶段末体重显著高于cs和lp组(p＜0.05)，在采食量几乎无差异的条件下，lpnn组猪的料肉比(fcr)要显著低于cs和lp组(p＜0.05)，说明低氮排放日粮中额外添加ncg+nsp复合酶后显著提高了饲料的转化效率。从全阶段统计数据看，经过各阶段的累积效应，lpnn组的生长性能极显著高于cs和lp组(p＜0.05)。此外，0.08％ncg+0.02％nsp酶组猪的生长性能最好，说明此比例为ncg和nsp酶复合物在低氮排放日粮中的最优配比方案。
2.2低氮排放日粮对猪全肠道营养物质消化率的影响
表5.低氮排放日粮对猪全肠道营养物质消化率的影响
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表5可以看出，降低日粮蛋白水平后，除阶段3的粗蛋白质和能量消化率外各阶段营养物质的消化率均会显著降低(p＜0.05)，但在日粮中额外补充,ncg+nsp酶后，会显著提高低氮排放日粮中各营养物质的消化率(p＜0.05)，其中以0.08％ncg+0.02％nsp酶组效果最好。
2.3低氮排放日粮对猪血清生化指标的影响
表6.第一阶段血清生化指标
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
表7.第二阶段血清生化指标
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
表8.第三阶段血清生化指标
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表6、7和8均可看出，当降低日粮粗蛋白水平及无论是否补充ncg+nsp酶，血清尿素氮的水平均会极显著下降(p＜0.05)，说明降低日粮蛋白水平会显著降低尿氮排放，减少多余氮对环境的污染，同时提高日粮中氮的利用效率。其他与脂肪代谢相关指标的水平均不会受到蛋白水平的影响，说明采用净能体系配制低氮排放日粮后蛋白水平不会影响机体脂肪代谢。
2.4低氮排放日粮对猪血清游离氨基酸的影响
表9.第一阶段血清游离氨基酸结果(mmol/l)
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
表10.第二阶段血清游离氨基酸结果(mmol/l)
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
表11.第三阶段血清游离氨基酸结果(mmol/l)
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表9、10和11均可看出，当降低日粮粗蛋白水平后，血清中如天冬酰胺、组氨酸等一些非必需氨基酸的水平会显著降低(p＜0.05)，但额外补充的5种必需氨基酸的水平显著升高(p＜0.05)。此外，当日粮中额外补充ncg+nsp酶后，β-丙氨酸的水平会极显著的升高(p＜0.05)，β-丙氨酸与肌肉生长过程中的关键物质肌肽的合成密切相关，表明低氮排放日粮补充ncg+nsp酶后会促进肌肉中蛋白的合成，有利于动物肌肉的生长。
2.5低氮排放日粮对猪胴体品质和肉品质的影响
表12.低氮排放日粮对猪胴体品质和肉品质的影响
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表12可看出，降低日粮蛋白水平并未显著影响猪的胴体品质、肉色、ph、滴水损失和熟肉率(p＞0.05)，但显著提高了肌内脂肪的含量(p＜0.05)，提高了肉的适口性。此外，低氮排放日粮中额外补充0.1％ncg+nsp酶后可以显著提高猪的胴体直长(p＜0.05)，有利于猪后期的进一步育肥，肌内脂肪含量的进一步升高也表明日粮补充ncg+nsp酶有利于肌肉内脂肪的沉积。
实施例2.低氮排放日粮对生长猪肠道营养物质消化率及消化酶活性的影响
1试验设计及日粮
10头(48.5±2.9)kg左右的生长猪随机分为5组，每组2个重复，代谢笼单笼饲养。试验采用5×3尧敦方设计，总计5种日粮和3个试验期，每个日粮总计6个重复。其中每个试验期包括5天预饲期和5天粪尿收集期。
12头(49.8±3.5)kg左右装有回肠t型瘘管的生长猪随机分为6组，每组2个重复，代谢笼单笼饲养。试验采用6×3尧敦方设计，总计6种日粮和3个试验期，每个日粮总计6个重复。其中每个试验期包括5天预饲期和2天回肠食糜收集期。
基于实施例1结果，复合配方中ncg与nsp酶的重量份数分别为4份和1份时的配比效果最好，本例中低氮排放日粮中ncg与nsp酶在低氮日粮中分别添加0.08％和0.02％，添加剂量总计0.1％。生长猪代谢试验日粮总计5种：12％cp(vlp)、12％cp+0.1％(ncg+nsp酶)(vlpnn)、15％cp(lp)、15％cp+0.1％(ncg+nsp酶)(lpnn)及18％cp(np)日粮。其中0.1％(ncg+nsp酶)复合物的配方同试验一。
回肠瘘管试验日粮总计6种：生长猪代谢试验所用5种日粮额外添加0.25％三氧化二铬及添加三氧化二铬的无氮日粮。
2饲养管理
所有试验猪正式期的饲喂量为自然体重的4％，每日08:00和16:00饲喂，拌湿喂料，自由饮水。代谢室温度通过空调和自然通风控制在25℃左右。
3样品采集
3.1生长猪代谢试验
生长猪5天预饲期结束后，连续5天全收粪尿：1)全收粪样：粪样随排随收，每天鲜粪样混合均匀后-20℃保存，待5天收集期结束后，每头猪所有粪样常温解冻并混合均匀称鲜样重，然后取总粪样的20％于65℃烘箱烘干，回潮24h，恒重，然后粉碎过40目筛；2)全收尿样：每个代谢笼下方放置1个装有纱布的尿液收集盆，收集期间每1000ml尿样加入10％hcl20ml，每天测量收集的尿样体积，充分混匀后取10％保存于-20℃冰箱，5d收集期结束后将每头猪尿样混合均匀取样保存备用；3)血样采集：待正式期结束后第二天上午空腹采血，常温静置后离心取上清液在-20℃保存待测。
3.2回肠瘘管试验
回肠t型瘘管猪5天预饲期结束后，连续收集2天食糜，每天从09:00—17:00连续收集至少9h，每次收集后的食糜样品立即置于4℃保存，待两天收集结束后将每头猪两天样品混合均匀，然后在真空冷冻干燥机中冻干，再粉碎通过60目筛，保存待测。
4指标测定及方法
4.1回肠瘘管试验
试验日粮、回肠食糜分别测定干物质、粗蛋白质、18种氨基酸和铬含量。
4.2生长猪代谢试验
试验日粮、粪样分别测定干物质、粗蛋白质和总能含量，尿样测定粗蛋白质和总能含量。
血清：测定血清中蛋白代谢相关酶以及消化酶活性。
表13.试验日粮配方及营养水平
1预混料为每千克日粮提供：维生素a8250iu；维生素d3825iu；维生素e40iu；维生素k34mg；维生素b11mg；维生素b25mg；维生素b62mg；维生素b1225μg；泛酸15mg；烟酸35mg；叶酸2mg；生物素4mg；氯化胆碱600mg；铜50mg；铁80mg；锌100mg；锰25mg；硒0.15mg；碘0.5mg。
5试验结果
5.1低氮排放日粮对猪全肠道营养物质消化率的影响
表14.日粮蛋白水平及ncg+nsp酶对猪全肠道营养物质消化率的影响
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表14可看出，降低日粮蛋白水平会极显著降低日粮营养物质的消化率(p＜0.01)。当日粮蛋白水平降低3％时，在低氮排放日粮中额外补充ncg+nsp酶后，会显著提高日粮营养物质的消化率(p＜0.05)，并与np组无显著性差异(p＞0.05)；但当日粮蛋白水平降低6％时，虽然额外补充ncg+nsp酶后会极显著的提高日粮营养物质的消化率(p＜0.05)，但仍显著低于np组(p＜0.05)。
5.2低氮排放日粮对猪回肠末端氨基酸消化率的影响
表15.日粮蛋白水平及ncg+nsp酶对猪回肠末端氨基酸消化率的影响
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表15可看出，降低日粮蛋白水平以及是否补充ncg+nsp酶并不会影响猪回肠末端各氨基酸的消化率(p＞0.05)。
5.3低氮排放日粮对猪氮代谢的影响
表16.日粮蛋白水平及ncg+nsp酶对猪氮代谢的影响
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表16可看出，降低日粮蛋白水平会显著降低尿氮和总氮的排放量(p＜0.05)，并显著提高日粮中氮的沉积效率(p＜0.05)，此外在低氮排放日粮中额外补充ncg+nsp酶后，这一效果更加显著。
5.4低氮排放日粮对生长猪血清生化指标的影响
表17.日粮蛋白水平及ncg+nsp酶对生长猪血清生化指标的影响
同行同一指标的数据右上标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
从表17可看出，降低日粮蛋白水平会显著降低血清尿素氮的水平(p＜0.05)，进一步证明了低氮排放日粮可以降低尿氮的排放。但降低日粮蛋白水平的同时也降低了血清中淀粉酶、脂肪酶以及胰蛋白酶的活性(p＜0.05)，但在补充ncg+nsp酶后，这些消化酶的活性均得到不同程度的提高。