本发明主要涉及食品添加剂加工技术领域，尤其涉及一种从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法。
背景技术：
辣椒叶营养丰富，各种氨基酸、矿物质和维生素的含量比辣椒还高，并且辣椒叶还能起到抗菌杀虫的作用，可以药食两用，但是我国目前在种植辣椒时都是将绝大部分的辣椒叶直接扔掉，造成极大的浪费，而且还会污染环境。
目前为了延长食品的货架期，都会在食品中添加防腐剂或抑菌剂，常见的化学合成的防腐剂有苯甲酸钠、脱氢乙酸钠、山梨酸、丙酸钙、山梨酸钾等，添加量少，能够有效抑菌，但是会影响食品的风味，加之有些不法商家为了谋取利益往往将防腐剂超标加入，长期食用会对人体健康产生很大的危害；常见的天然发酵型防腐剂有溶菌酶、乳酸链球菌素、那他霉素、鱼精蛋白等，但是价格较贵，大多数企业都难以承受；还有一些植物提取防腐剂，如茶多酚、香精油、大蒜素等，能够起到一定的抑菌作用，但是添加量少时抑菌效果弱，不能明显延长食品的货架期，添加量多时又会对食品本身的口感产生影响，因此在食品中的应用较为困难；而从辣椒叶中提取的抑菌剂本身含有多种营养成分，色泽淡绿，不会对食品本身的风味和口感产生影响。
技术实现要素：
为了弥补已有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法。
一种从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法，包括以下步骤：
（1）原料选择：选择7~10月份的辣椒叶，使辣椒叶的产量高，营养丰富，提高辣椒叶的利用率，清洗干净，冷冻干燥至含水量为0~10%，备用，得干辣椒叶；
（2）一次提取：将干辣椒叶粉碎至1~3mm，向干辣椒叶中加入干辣椒叶重量70~80倍量的纯净水，于45~50℃、32~34khz超声20~30min，破坏辣椒叶的组织结构，快速提取辣椒叶中的水溶性成分，过滤，得一次滤液和一次滤渣；
（3）二次提取：向一次滤渣加入一次滤渣重量65~75倍量的体积分数为77~79%的酒精溶液，于6~10℃、30~32khz超声25~35min，充分提取原料中的醇溶性营养成分，提高原料利用率，过滤，得二次滤液和二次滤渣；
（4）发酵：向二次滤渣中接入活化后的乳酸菌，接入量为二次滤渣重量的2~3%，混合均匀，先于18~20℃发酵3~4d，充分分解辣椒叶的组织结构，促进辣椒叶中有效成分释放，增加香味和营养成分，过滤，得发酵液和发酵渣；
（5）萃取：将发酵渣置于超临界二氧化碳萃取釜中，固定分离釜ii压力为9~10mpa，温度为31~32℃，流量为23~24kg/h，动态循环3~4h，充分提取辣椒叶中的有效成分，提高原料利用率，节约大量生产成本，得萃取液；
（6）浓缩：将一次滤液、二次滤液、发酵液和萃取液混合，真空旋转蒸发至无酒精，再进行冷冻干燥至含水量为0~6%，得天然抑菌剂。
所述步骤（4）的乳酸菌，由以下重量份的菌株组成：德氏乳杆菌21~23、双歧杆菌14~16、保加利亚乳杆菌5~7。
所述步骤（6）的冷冻干燥，冷冻温度为-44~-46℃。
所述从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法制备得到的天然抑菌剂。
所述天然抑菌剂的使用方法，取食品重量0.5~0.7%的天然抑菌剂，加入100~120倍量的水，混合均匀，加入食品原料中，进行后续工艺的制备，也可直接喷雾于食品表面或冰箱内，使用方便。
本发明的优点是：本发明提供的从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法，方法简单，价格低廉，得到的天然抑菌剂稀释100倍后抑菌率达到87.4%，明显提高了辣椒叶的附加值，增加了市场上食品抑菌剂种类，提高食品安全性；选择特定时期的辣椒叶，使辣椒叶的产量高，营养丰富，提高辣椒叶的利用率；辣椒叶粉碎后向辣椒叶中加水进行高温超声提取，破坏辣椒叶的组织结构，快速提取辣椒叶中的水溶性成分；一次提取后向滤渣中加入酒精溶液，并进行低温超声，充分提取原料中的醇溶性营养成分，提高原料利用率；二次提取后向滤渣中接入乳酸菌，多种乳酸菌进行发酵，充分分解辣椒叶的组织结构，促进辣椒叶中有效成分释放，增加香味和营养成分；发酵后将发酵渣置于超临界二氧化碳萃取釜中，进行超临界二氧化碳萃取，充分提取辣椒叶中的有效成分，提高原料利用率，节约大量生产成本；使用时将天然抑菌剂稀释后可以加入食品原料中，也可以直接喷雾于食品表面和冰箱中，对冰箱内的食品进行进一步地抑菌，使用方便，延长食品货架期。
具体实施方式
下面用具体实施例说明本发明。
实施例1
一种从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法，包括以下步骤：
（1）原料选择：选择7~10月份的辣椒叶，使辣椒叶的产量高，营养丰富，提高辣椒叶的利用率，清洗干净，冷冻干燥至含水量为0~10%，备用，得干辣椒叶；
（2）一次提取：将干辣椒叶粉碎至1~3mm，向干辣椒叶中加入干辣椒叶重量70倍量的纯净水，于45℃、32khz超声20min，破坏辣椒叶的组织结构，快速提取辣椒叶中的水溶性成分，过滤，得一次滤液和一次滤渣；
（3）二次提取：向一次滤渣加入一次滤渣重量65倍量的体积分数为77%的酒精溶液，于6℃、30khz超声25min，充分提取原料中的醇溶性营养成分，提高原料利用率，过滤，得二次滤液和二次滤渣；
（4）发酵：向二次滤渣中接入活化后的乳酸菌，接入量为二次滤渣重量的2%，混合均匀，先于18℃发酵3d，充分分解辣椒叶的组织结构，促进辣椒叶中有效成分释放，增加香味和营养成分，过滤，得发酵液和发酵渣；所述的乳酸菌，由以下重量份的菌株组成：德氏乳杆菌21、双歧杆菌14、保加利亚乳杆菌5；
（5）萃取：将发酵渣置于超临界二氧化碳萃取釜中，固定分离釜ii压力为9mpa，温度为31℃，流量为23kg/h，动态循环3h，充分提取辣椒叶中的有效成分，提高原料利用率，节约大量生产成本，得萃取液；
（6）浓缩：将一次滤液、二次滤液、发酵液和萃取液混合，真空旋转蒸发至无酒精，再进行冷冻干燥至含水量为0~6%，冷冻温度为-44℃，得天然抑菌剂。
所述从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法制备得到的天然抑菌剂。
所述天然抑菌剂的使用方法，取食品重量0.5%的天然抑菌剂，加入100倍量的水，混合均匀，加入食品原料中，进行后续工艺的制备，也可直接喷雾于食品表面或冰箱内，使用方便。
实施例2
一种从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法，包括以下步骤：
（1）原料选择：选择7~10月份的辣椒叶，使辣椒叶的产量高，营养丰富，提高辣椒叶的利用率，清洗干净，冷冻干燥至含水量为0~10%，备用，得干辣椒叶；
（2）一次提取：将干辣椒叶粉碎至1~3mm，向干辣椒叶中加入干辣椒叶重量75倍量的纯净水，于48℃、33khz超声25min，破坏辣椒叶的组织结构，快速提取辣椒叶中的水溶性成分，过滤，得一次滤液和一次滤渣；
（3）二次提取：向一次滤渣加入一次滤渣重量70倍量的体积分数为78%的酒精溶液，于8℃、31khz超声30min，充分提取原料中的醇溶性营养成分，提高原料利用率，过滤，得二次滤液和二次滤渣；
（4）发酵：向二次滤渣中接入活化后的乳酸菌，接入量为二次滤渣重量的2.5%，混合均匀，先于19℃发酵4d，充分分解辣椒叶的组织结构，促进辣椒叶中有效成分释放，增加香味和营养成分，过滤，得发酵液和发酵渣；所述的乳酸菌，由以下重量份的菌株组成：德氏乳杆菌22、双歧杆菌15、保加利亚乳杆菌6；
（5）萃取：将发酵渣置于超临界二氧化碳萃取釜中，固定分离釜ii压力为9mpa，温度为32℃，流量为23kg/h，动态循环4h，充分提取辣椒叶中的有效成分，提高原料利用率，节约大量生产成本，得萃取液；
（6）浓缩：将一次滤液、二次滤液、发酵液和萃取液混合，真空旋转蒸发至无酒精，再进行冷冻干燥至含水量为0~6%，冷冻温度为-45℃，得天然抑菌剂。
所述从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法制备得到的天然抑菌剂。
所述天然抑菌剂的使用方法，取食品重量0.6%的天然抑菌剂，加入110倍量的水，混合均匀，加入食品原料中，进行后续工艺的制备，也可直接喷雾于食品表面或冰箱内，使用方便。
实施例3
一种从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法，包括以下步骤：
（1）原料选择：选择7~10月份的辣椒叶，使辣椒叶的产量高，营养丰富，提高辣椒叶的利用率，清洗干净，冷冻干燥至含水量为0~10%，备用，得干辣椒叶；
（2）一次提取：将干辣椒叶粉碎至1~3mm，向干辣椒叶中加入干辣椒叶重量80倍量的纯净水，于50℃、34khz超声30min，破坏辣椒叶的组织结构，快速提取辣椒叶中的水溶性成分，过滤，得一次滤液和一次滤渣；
（3）二次提取：向一次滤渣加入一次滤渣重量75倍量的体积分数为79%的酒精溶液，于10℃、32khz超声35min，充分提取原料中的醇溶性营养成分，提高原料利用率，过滤，得二次滤液和二次滤渣；
（4）发酵：向二次滤渣中接入活化后的乳酸菌，接入量为二次滤渣重量的3%，混合均匀，先于20℃发酵4d，充分分解辣椒叶的组织结构，促进辣椒叶中有效成分释放，增加香味和营养成分，过滤，得发酵液和发酵渣；所述的乳酸菌，由以下重量份的菌株组成：德氏乳杆菌23、双歧杆菌16、保加利亚乳杆菌7；
（5）萃取：将发酵渣置于超临界二氧化碳萃取釜中，固定分离釜ii压力为10mpa，温度为32℃，流量为24kg/h，动态循环4h，充分提取辣椒叶中的有效成分，提高原料利用率，节约大量生产成本，得萃取液；
（6）浓缩：将一次滤液、二次滤液、发酵液和萃取液混合，真空旋转蒸发至无酒精，再进行冷冻干燥至含水量为0~6%，冷冻温度为-46℃，得天然抑菌剂。
所述从辣椒叶中提取天然抑菌剂的方法制备得到的天然抑菌剂。
所述天然抑菌剂的使用方法，取食品重量0.7%的天然抑菌剂，加入120倍量的水，混合均匀，加入食品原料中，进行后续工艺的制备，也可直接喷雾于食品表面或冰箱内，使用方便。
对比例1
步骤（1）中选择6月份的辣椒叶，其余方法，同实施例1。
对比例2
去除步骤（2），相应延长步骤（3）的时间，其余方法，同实施例1。
对比例3
去除步骤（3），相应延长步骤（2）的时间，其余方法，同实施例1。
对比例4
步骤（4）中的乳酸菌改为酵母菌，其余方法，同实施例1。
对比例5
去除步骤（5），相应延长步骤（3）的时间，其余方法，同实施例1。
对比例6
现有市售防腐剂山梨酸钾。
对比例6
现有市售抑菌剂大蒜素。
实施例和对比例中抑菌剂的抑菌效果：
分别选择实施例和对比例的抑菌剂5g，用蒸馏水稀释100倍，将各组稀释后的抑菌剂制备成培养品，向各组培养皿中涂布霉菌，检测各组抑菌剂的抑菌率，每个试验重复3次，结果取平均值，并请10位专业人员对各组稀释后的抑菌剂进行感官评定，通过嗅觉评定各组抑菌剂是否有刺激性气味，并进行记录，实施例和对比例中抑菌剂的抑菌效果表1。
表1：实施例和对比例中抑菌剂的抑菌效果
注：“—”表示无，“+”表示有，并且数量越多，程度越严重。
从表1能够看出，实施例的抑菌剂，抑菌率明显较对比例1~5高，与对比例6中的山梨酸钾效果相当，并且本申请中的抑菌剂没有刺激性气味，不会影响食品本身的风味，口感好，说明本发明的抑菌剂具有较好的应用效果。