一种鱼松用膳食纤维的提取方法与流程

本发明涉及一种用膳食纤维的提取方法，特别是一种鱼松用膳食纤维的提取方法。

背景技术：

鱼松是一种将鱼类肌肉经一系列调味炒制而成的方便即食食品，由于其具有质地均匀，疏松可口，味道鲜美、富含蛋白质、维生素及矿物元素，易于消化等优点，常被儿童、老年人和病人作为作为营养补充剂，深受广大消费者的喜爱。

但目前的鱼松普遍存在功能性单一，营养不均衡的问题，而膳食纤维作为人类第七种营养素，对当前饮食结构有较好的促进作用，则能够作为鱼松的制备原料有效提升其膳食质量。但目前并没有一种能够有效应用于鱼松制备的膳食纤维提取方法，而常规的膳食纤维在添加后也无法针对鱼松的特性在各方面上有效提升其营养性和功能性，从而大大降低了鱼松在加工后的功能性和营养性。因此，需要一种能够用于鱼松加工的膳食纤维提取方法，并使膳食纤维在添加后能够有效提升鱼松的营养性和功能性。

技术实现要素：

本发明的目的在于，提供一种鱼松用膳食纤维的提取方法。它能够有效提取适用于鱼松加工的膳食纤维，并使其能够提升鱼松的营养性和功能性。

本发明的技术方案：一种鱼松用膳食纤维的提取方法，包括以下步骤：

①将绿豆皮去杂质后粉碎至100目，然后将粉末与无水乙醇按1:20的质量比混合搅拌，得a混合液；

②将a混合液超声清洗后抽滤除去色素，然后将混合液置于55℃环境下的干燥箱中干燥8小时，得b粉末；

③将b粉末与蒸馏水按1:10的质量比相互混合，然后加入0.1g/g的淀粉酶进行第一次酶解，得b1混合液；再向b1混合液中加入3.3μl/g的葡萄糖苷酶进行第二次酶解，得c混合液；

④将c混合液煮沸灭酶，然后冷却至常温并将ph调节至7.5，得c1混合液；再向c1混合液中加入75mg/g的碱性蛋白酶进行第三次酶解，得c2混合液；将c2混合液煮沸灭酶后，再加入20mg/g纤维素酶进行第四次酶解，得d混合液；

⑤对d混合液离心后，分别得到d1上清液和d2沉淀物，d2沉淀物经洗涤冻干后，得不溶性膳食纤维纯品；d1上清液再经提纯后，得可溶性膳食纤维纯品。

前述的一种鱼松用膳食纤维的提取方法中，所述步骤②中通过双频超声波清洗器对a混合液进行超声清洗，双频超声波清洗器的清洗频率为50khz，清洗时间为20分钟。

前述的一种鱼松用膳食纤维的提取方法中，所述步骤③中b粉末与蒸馏水混合后在5.5ph、95℃的水浴振荡环境下进行第一次酶解，酶解时间为30分钟；所述步骤③中b1混合液在5.5ph、60℃的水浴振荡环境下进行第二次酶解，酶解时间为30分钟。

前述的一种鱼松用膳食纤维的提取方法中，所述步骤④中c1混合液在55℃的水浴振荡环境下进行第三次酶解，酶解时间为30分钟；所述c2混合液在ph5、55℃的水浴振荡条件下进行第四次酶解，酶解时间为60分钟。

前述的一种鱼松用膳食纤维的提取方法中，所述步骤⑤中通过高速冷冻离心机对d混合液进行冷冻离心，高速冷冻离心机在离心时的转速为5000rpm，离心时间为10分钟。

前述的一种鱼松用膳食纤维的提取方法中，所述步骤⑤中d1上清液的具体提纯方法包括以下步骤：将d1上清液在55℃环境下旋转蒸发浓缩后，得d2浓缩液；然后向d2浓缩液中加入4倍于d2浓缩液体积的95％浓度乙醇，并在4℃环境下静置沉淀，得d3沉淀液；再对d3沉淀液以5000rpm的转速离心后，得到d4沉淀物；再对d4沉淀物中加水溶解，然后在70℃环境下蒸发去除残余乙醇后，冷冻干燥，即得到可溶性膳食纤维纯品。

与现有技术相比，本发明利用绿豆皮作为原料提取得到idf和sdf，能够有效提高对idf和sdf的提取效率，并使提取得到的idf和sdf具有更加积极的功能性；通过对idf和sdf提取工艺和相应参数的优化，能够进一步提高对idf和sdf的提取稳定性和提纯效果，从而保证idf和sdf在添加后对本发明的提升效果；通过将idf和sdf作为原料加入鱼松，还能够使鱼松具有抗氧化和抑制脂质消化的效果，使鱼松在添加后能够具有良好的调节代谢和肠道健康的效果，提高了鱼松的营养性和功能性。所以，本发明能够有效提取适用于鱼松加工的膳食纤维，并使其能够提升鱼松的营养性和功能性。

附图说明

图1是不同鱼松在消化后的磷脂含量图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。

实施例。一种鱼松用膳食纤维的提取方法，包括以下步骤：

①将绿豆皮去杂质后粉碎至100目，然后将粉末与无水乙醇按1:20的质量比混合搅拌，得a混合液；

②将a混合液超声清洗后抽滤除去色素，然后将混合液置于55℃环境下的干燥箱中干燥8小时，得b粉末；

③将b粉末与蒸馏水按1:10的质量比相互混合，然后加入0.1g/g的淀粉酶进行第一次酶解，得b1混合液；再向b1混合液中加入3.3μl/g的葡萄糖苷酶进行第二次酶解，得c混合液；

④将c混合液煮沸灭酶，然后冷却至常温并将ph调节至7.5，得c1混合液；再向c1混合液中加入75mg/g的碱性蛋白酶进行第三次酶解，得c2混合液；将c2混合液煮沸灭酶后，再加入20mg/g纤维素酶进行第四次酶解，得d混合液；

⑤对d混合液离心后，分别得到d1上清液和d2沉淀物，d2沉淀物经洗涤冻干后，得不溶性膳食纤维纯品；d1上清液再经提纯后，得可溶性膳食纤维纯品。

所述步骤②中通过双频超声波清洗器对a混合液进行超声清洗，双频超声波清洗器的清洗频率为50khz，清洗时间为20分钟。

所述步骤③中b粉末与蒸馏水混合后放入dk-s12型电热恒温水浴锅中，在5.5ph、95℃的水浴振荡环境下进行第一次酶解，酶解时间为30分钟；所述步骤③中b1混合液在5.5ph、60℃的水浴振荡环境下进行第二次酶解，酶解时间为30分钟。

所述步骤④中c1混合液在55℃的水浴振荡环境下进行第三次酶解，酶解时间为30分钟；所述c2混合液在ph5、55℃的水浴振荡条件下进行第四次酶解，酶解时间为60分钟。

所述步骤⑤中通过高速冷冻离心机对d混合液进行冷冻离心，高速冷冻离心机在离心时的转速为5000rpm，离心时间为10分钟。

所述步骤⑤中d1上清液的具体提纯方法包括以下步骤：将d1上清液在55℃环境下旋转蒸发浓缩后，得d2浓缩液；然后向d2浓缩液中加入4倍于d2浓缩液体积的95％浓度乙醇，并在4℃环境下静置沉淀，得d3沉淀液；再对d3沉淀液以5000rpm的转速离心后，得到d4沉淀物；再对d4沉淀物中加水溶解，然后在70℃环境下蒸发去除残余乙醇后，冷冻干燥，即得到可溶性膳食纤维纯品。

所述不溶性膳食纤维纯品和可溶性膳食纤维纯品的使用方法，包括以下步骤：

①将单辛酸甘油酯和司盘80按7:3的质量比混合搅拌，得e油相；

②将每1ml的茶多酚缓慢滴加至9ml的e油相中，并在室温下以900rpm的转速搅拌20分钟，该茶多酚的含量为25mg/ml，得f混合液；

③配置含0.07％海藻酸钠、3％吐温80和0.06％sdf的混合溶液60ml，然后将该溶液以600rpm的转速混合搅拌，并在搅拌过程中以1ml/min的速度滴加f混合液，得g混合液；

④将明胶和蒸馏水在室温环境下水合1小时，然后在65℃环境下连续搅拌后得到5％浓度的明胶溶液，得h溶液；

⑤将每25ml的h溶液中加入75ml的g混合液，均匀搅拌1小时后，得i纳米乳成膜液；

⑥将i纳米乳成膜液浇铸到圆形培养皿中，在40℃环境的干燥箱中烘干16～18小时，得j薄膜；

⑦将g薄膜放入干燥器中，在25℃、60％相对湿度环境下放置2天后，得k纳米乳包覆膜；

⑧将k纳米乳包覆膜包覆在按常规加工工艺制得后的鱼松表面，得成品鱼松。

本发明的工作原理：本发明利用绿豆皮作为原料提取得到idf(不溶性膳食纤维纯品)和sdf(可溶性膳食纤维纯品)，能够有效提高对idf和sdf的提取效率，并使提取得到的idf和sdf具有更加积极的功能性；通过对idf和sdf提取工艺和相应参数的优化，能够进一步提高对sdf的提取稳定性和提纯效果，从而保证sdf在添加后对本发明的提升效果；通过将idf和sdf作为原料加入鱼松，还能够使鱼松具有抗氧化和抑制脂质消化的效果，从而提高了鱼松的营养性和功能性；本实施例还根据鱼松的加工工艺设置idf和sdf的使用方法，从而使idf和sdf能够稳定应用于鱼松的加工，并提高了idf和sdf在鱼松加工后的提升效果。所以，本发明能够有效提取适用于鱼松加工的膳食纤维，并将制备得到的膳食纤维应用于鱼松的加工工艺。

实验例1：将麦麸原料按1：10的质量比浸泡在水中15分钟后，将其重复离心脱水三次，并在每次离心后去除上层淀粉和蛋白质，得到沉淀物；然后将沉淀物与水按1：10的质量比混合，并用1mol/l的柠檬酸调ph至5.5，再将其置于55℃的恒湿培养箱内分解植酸5小时后水洗至中性；然后置于55℃的恒温干燥箱内干燥8小时；得到100目的麦麸粉末。然后将该麦麸粉末和本发明步骤制得的h粉末分别按sdf纯品的提取方法中的步骤③-⑥对其进行加工，分别得到麦麸的idf、sdf纯品以及绿豆皮的idf、sdf纯品。然后对4份纯品进行组分分析鉴定，结果如表1所示：

表1膳食纤维组分分析

绿豆皮中的idf由34.37％的纤维素、15.29％的木质素、8.96％的不溶性半纤维素和其他不溶性纤维组成，绿豆皮中的sdf由1.12％的果胶、3.93％的可溶性半纤维素和其他可溶性纤维组成；麦麸中的idf由13.96％的纤维素、12.59％的木质素、13.56％的不溶性半纤维素和其他不溶性纤维组成，麦麸中的sdf由3.84％的果胶、3.51％的可溶性半纤维素和他不溶成分组成。由于sdf在许多健康方面的功效比idf更重要，且在人体的消化过程中，果胶能够与胃肠道中的胆固醇结合，并通过捕获碳水化合物减缓葡萄糖的吸收；在大肠和结肠中的微生物可以通过降解果胶释放出对健康有积极影响的短链脂肪酸。因此，将绿豆皮作为制备原料能够得到更多的idf及sdf，具有积极的功能性。

实验例2：将实验例1中得到的麦麸sdf纯品和绿豆皮sdf纯品作为实验品，分别测定2组实验品对2,2'-二苯基-1-苦基肼基(dpph)，2,2-连氮双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸盐(abts·+)和羟基自由基(·oh)的清除能力。其中dpph自由基的测定方式为：分别取1mg/ml的sdf提取物与dpph乙醇溶液(6×10-5m)以1:4比例混合，室温下避光反应20分钟后于517nm处测定吸光度。使用维生素c(vc)作为对比来构建校准曲线，结果表示为vc当量。

abts·+自由基的测定方式为：将每7.0mmabts·+溶液和4.95mm过硫酸钾溶液以1:2的体积比混合，室温下避光反应12h得abts·+贮藏液。然后用80％乙醇稀释abts·+贮藏液，使其在734nm处吸光度为0.70±0.02，得稀释液；再分别将1mg/ml的sdf溶液各1ml与4ml稀释液混合反应6分钟后读取734nm处吸光度。使用vc作为对比来构建校准曲线，结果表示为vc当量。

羟基自由基的测定方式为：取两组1mg/ml的sdf溶液各1ml，依次与9mm的水杨酸乙醇溶液0.5ml、9mm硫酸亚铁溶液0.5ml和过氧化氢溶液5ml进行混合，室温下反应20分钟后于510nm处测定吸光度。使用vc作为对比来构建校准曲线，结果表示为vc当量。实验结果如表2所示：

表2sdf的抗氧化能力

绿豆皮sdf的dpph自由基清除能力为436.83±6.12mg/100g，高于麦麸sdf对dpph的清除能力(406.56±6.55mg/100g)；绿豆皮sdf的abts·+自由基清除能力为233.16±4.06mg/100g，远高于麦麸sdf(36.99±3.56mg/100g)；绿豆皮羟基自由基清除能力为329.23±6.13mg/100g，略低于麦麸sdf的清除能力。实验结果可知，绿豆皮sdf的抗氧化能力总体高于麦麸sdf，绿豆皮相比麦麸具有更加良好的清除自由基的能力，从而使本发明将绿豆皮sdf作为原料能够有效提升自身的抗氧化能力。

实验例3：通过人工模拟的体外多阶段消化来评估绿豆皮idf和sdf对鱼松磷脂消化的影响。其方法为分别制备含有2％idf和2％sdf的鱼松样品，并以未添加的鱼松作为参照。使用kcl，kh2po4，nahco3，nacl，mgcl2(h2o)6和(nh4)2co3以相同的摩尔浓度制备储备液和模拟消化液，并通过顺序添加相应的储备液及消化酶来模拟口腔，胃和小肠中的消化过程。

在模拟口腔消化阶段，将唾液α-淀粉酶溶解至终浓度75u/ml来制备模拟唾液；然后将模拟唾液分别与各鱼松样品以1:1的质量体积比混合，适当均化后在37℃下搅拌2分钟，得到口服消化液。在模拟胃消化阶段，通过将胃蛋白酶和胃脂肪酶溶解至终浓度分别为2000u/ml和120u/ml来制备模拟胃液；将模拟胃液与口服消化液以1:1的体积比混合，并在37℃下保持2小时，同时以50rpm速率连续摇动，得到胃消化液。在模拟肠道消化阶段，用100u/ml胰酶和10mm胆汁盐制备模拟肠液，并与胃消化液以1:1的体积比混合；然后将混合物在37℃下以50rpm速率摇动2小时，得到肠道消化液。在每个阶段结束时，立即将各消化液样品放入沸水浴中6分钟以使酶失活然后采用bligh和dyer方法从样品中提取磷脂并称重。

实验结果如图1可知，未经消化处理的鱼松样品中提取的磷脂含量为2.3％，依次经口服、胃和肠连续消化后，其磷脂含量下降至0.3％；而带有sdf的鱼松样品在多次消化后其磷脂含量降至1.0％，带有idf的鱼松样品在多次消化后其磷脂含量降至0.6％。实验结果可知，sdf或idf在添加后能够有效降低磷脂的消化率，而抑制脂质消化的功能能够有效减弱餐后脂血症和空腹血脂水平。