本发明涉及益生元在促进胃肠道中益生菌存活的应用，属于益生菌
技术领域：
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背景技术：
：低聚果糖又称寡果糖或蔗糖三糖族低聚糖。低聚果糖通常食用的很多水果、蔬菜中均存在。蔗糖分子以β-(1→2)糖苷键与1-3个果糖分子结合成的蔗果三糖，蔗果四糖和蔗果五糖，属于果糖和葡萄糖构成的直链杂低聚糖。分子式为g-f-fn(n＝1，2，3，g为葡萄糖，f为果糖)。低聚果糖拥有保健功能确切和食品配料优良的双重品格。以其低热值，无龋齿、促进双歧杆菌增殖、降血糖，改善血清脂质，促进微量元素吸收等优良生理功能。近年来在许多低聚糖类的食品中，低聚果糖被国际营养学者确认为“具有优良难消化性的水溶性膳食纤维”，可以双向调节人体微生态平衡，属典型的超强双歧因子，备受现代食品生产企业和消费者青睐，并被广泛应用于第三代保健食品之中。益生菌可以维持健康的胃肠道微生态，促进slga分泌，增强肠道免疫肠屏障功能，帮助机体清除致病微生物和潜在过敏性抗原。现有技术缺乏在胃肠道消化模型中，低聚果糖对益生菌存活的研究。本发明通过构建胃肠道消化模型，探究低聚果糖对益生菌存活的作用。技术实现要素：本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供益生元在促进胃肠道中益生菌存活的应用。为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：益生元促进胃肠道中益生菌存活的应用，所述益生菌为动物双歧杆菌(bifidobacteriumanimalisbb12)婴儿双歧杆菌(bifidobacteriuminfantisr33)、瑞士乳杆菌(lactobacillushelveticusr52)、两歧双歧杆菌(bifidobacteriumbifidumr71)、乳双歧杆菌(lactobacilluslactishn019,lactobacilluslactisbi-07)、鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosuslgg,lactobacillusrhamnosushn001)、短双歧杆菌(bifidobacteriumbrevem-16v)。作为本发明所述应用的优选实施方式，所述益生元为低聚果糖、低聚半乳糖、β-葡聚糖，人乳低聚糖--2’-岩藻糖基乳糖(2’-fl)、3’-岩藻糖基乳糖(3’-fl)、乳糖-二盐藻四糖(dfl/ldft)、乳糖-n-盐藻基戊糖i(lnfp-i)、乳糖-n-盐藻基戊糖ii(lnfp-ii)、乳糖-n-盐藻基戊糖iii(lnfp-iii)、乳糖-n-四糖(lnt)、乳酰-n-新四糖(lnnt)、3’-唾液乳糖(3sl)、6’-唾液乳糖(6sl)、唾液酸基乳糖基-n-四糖(lst)和/或二唾液酸基乳糖基-n-四糖(ds-lnt)。作为本发明所述应用的优选实施方式，所述益生元与益生菌的质量比为(0.5～1)：1。发明人通过试验研究发现，益生元与益生菌的质量比在上述范围内时，益生元能促进胃肠道中益生菌的存活。作为本发明所述应用的优选实施方式，所述益生元与益生菌的质量比为1:1。发明人通过试验研究发现，益生元与益生菌的质量比为1:1时，益生元促进胃肠道中益生菌的存活作用最强。作为本发明所述应用的优选实施方式，所述益生元在胃肠道中提高益生菌的耐胃酸能力和耐胆碱能力。第二方面，本发明提供了益生元在减轻胃肠道中乳铁蛋白对益生菌存活的抑制作用的应用，所述益生菌为动物双歧杆菌(bifidobacteriumanimalisbb12)、婴儿双歧杆菌(bifidobacteriuminfantisr33)、瑞士乳杆菌(lactobacillushelveticusr52)、两歧双歧杆菌(bifidobacteriumbifidumr71)、乳双歧杆菌(lactobacilluslactishn019,lactobacilluslactisbi-07)、鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosuslgg,lactobacillusrhamnosushn001)、短双歧杆菌(bifidobacteriumbrevem-16v)。作为本发明所述应用的优选实施方式，所述益生元为低聚果糖、低聚半乳糖、β-葡聚糖，人乳低聚糖--2’-岩藻糖基乳糖(2’-fl)、3’-岩藻糖基乳糖(3’-fl)、乳糖-二盐藻四糖(dfl/ldft)、乳糖-n-盐藻基戊糖i(lnfp-i)、乳糖-n-盐藻基戊糖ii(lnfp-ii)、乳糖-n-盐藻基戊糖iii(lnfp-iii)、乳糖-n-四糖(lnt)、乳酰-n-新四糖(lnnt)、3’-唾液乳糖(3sl)、6’-唾液乳糖(6sl)、唾液酸基乳糖基-n-四糖(lst)和/或二唾液酸基乳糖基-n-四糖(ds-lnt)。作为本发明所述应用的优选实施方式，所述益生元、乳铁蛋白、益生菌的质量比为1:1:1。发明人通过试验研究发现，益生元、乳铁蛋白、益生菌的质量比为1:1:1时，益生元能减轻胃肠道中乳铁蛋白对益生菌存活的抑制作用。与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明研究发现益生元能促进胃肠道中益生菌存活，所述益生菌为婴儿双歧杆菌、瑞士乳杆菌、两歧双歧杆菌、乳双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌、短双歧杆菌；并且，益生元能减轻胃肠道中乳铁蛋白对益生菌存活的抑制作用，益生元能保护乳铁蛋白益生菌免受胃酸和胆盐的消化，提高益生菌存活率。具体实施方式为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。本发明实施例中益生菌活菌数测定方法为gb4789.35食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验。实施例1模拟胃肠道消化模型，研究低聚果糖(fos)、低聚半乳糖(gos)、人乳低聚糖--2’-岩藻糖基乳糖(2’-fl)和乳铁蛋白(lf)对瑞士乳杆菌r52、婴儿双歧杆菌r33、两歧双歧杆菌r71、动物双歧杆菌bb12在消化过程中的耐胃酸和耐胆盐作用。1.实验方法如下：(1)实验前期准备溶液配制：nacl2m、kcl0.5m、nahco31m、cacl2(h2o)20.3m。模拟胃液(sgf)2.5x(400ml)：加200ml的水到烧杯中，加47mlnacl，加26mlkcl，混合，调ph至3.3，定容至400ml，混匀。模拟肠液(sif)2.5x(400ml)：加200ml的水到烧杯中，加入82mlnacl，加入20mlkcl，加入85mlnahco3，混合，调ph至6.6，定容至400ml，混匀。(2)胃阶段(食物：sgf＝63:37)称1g益生菌+1g乳铁蛋白到50ml的离心管里，加入10.6ml的超纯水，混匀，构成消化样品；加入2.46ml的sgf并记下此时50ml离心管的重量w1；用盐酸将ph调至3.3；称量50ml离心管的重量w2并计算加入的盐酸的体积w3；在管内加入(4.44-w3)ml的水；用加热搅拌器水浴加热离心管内溶液；加0.5ml胃蛋白酶溶液(通过测定酶活力，使得最终胃蛋白酶活力为269u/ml)；在37℃下加热1小时。(3)小肠阶段(食物:sgf:sif＝39:23:38)加3.403ml的sif到胃阶段消化产物，计下50ml离心管重量w4；用naoh调整ph至6.6；称量50ml离心管重量w5，计算加入的naoh的体积w6；加入(7.232-w6)ml水；加入1ml胆盐溶液(通过试剂盒测试后，使得最终浓度为3.1mm)；加入0.5ml胰蛋白酶溶液(通过测定酶活力，使得最终胰蛋白酶活力为16u/ml)；加入0.123mlcacl2,溶液；在37℃下加热一个小时。(4)实验结束后，马上对实验样品进行益生菌活菌总数实验。通过公式计算：存活率(％)＝消化后菌数(cfu/g)÷消化前菌数(cfu/g)×100％。实验结果如表1所示。2.实验设计如下：益生菌为动物双歧杆菌bb12时，实验组及对照组的质量比如表1所示，试验结果如表1所示。益生菌为瑞士乳杆菌r52时，实验组及对照组的质量比如表2所示，试验结果如表2所示。益生菌为婴儿双歧杆菌r33时，实验组及对照组的质量比如表3所示，试验结果如表3所示。益生菌为两歧双歧杆菌r71时，实验组及对照组的质量比如表4所示，试验结果如表5所示。空白对照：不加菌。表1消化后活菌数(cfu/g)消化前活菌数(cfu/g)存活率(％)bb121.91e+119.80e+10193.070bb12:lf＝1:11.28e+119.80e+10127.063bb12:fos＝1:12.11e+119.80e+10204.620bb12:fos＝1:0.51.96e+119.80e+10193.729bb12:lf:fos＝1:1:11.56e+119.80e+10156.106bb12:gos＝1:12.23e+119.80e+10217.162bb12:gos＝1:0.52.04e+119.80e+10200.660bb12:lf:gos＝1:1:11.78e+119.80e+10172.277bb12:2fl＝1:12.16e+119.80e+10209.901bb12:2fl＝1:0.52.08e+119.80e+10204.290bb12:lf:2fl＝1:1:12.08e+119.80e+10201.980表2消化后活菌数(cfu/g)消化前活菌数(cfu/g)存活率(％)r521.02e+115.97e+10171.308r52:lf＝1:16.81e+105.97e+10114.103r52:fos＝1:11.21e+115.97e+10202.793r52:lf:fos＝1:1:11.07e+115.97e+10179.108r52:gos＝1:11.43e+115.97e+10240.215r52:lf:gos＝1:1:11.16e+115.97e+10194.972r52:2fl＝1:11.15e+115.97e+10192.329r52:lf:2fl＝1:1:19.88e+105.97e+10165.651表3表4消化后活菌数(cfu/g)消化前活菌数(cfu/g)存活率(％)r711.91e+073.30e+100.058r71:lf＝1:11.16e+073.30e+100.035r71:fos＝1:12.81e+073.30e+100.085r71:lf:fos＝1:1:11.51e+073.30e+100.046r71:gos＝1:14.10e+073.30e+100.124r71:lf:gos＝1:1:13.64e+073.30e+100.110r71:2fl＝1:14.93e+073.30e+100.149r71:lf:2fl＝1:1:13.81e+073.30e+100.115由表1～4可知，益生元能促进消化道中益生菌的存活；而乳铁蛋白会降低益生菌在模拟的消化模型后的存活率，加入益生元可以减轻乳铁蛋白对益生菌存活率的降低作用，可以提高模拟消化后益生菌的活菌数，提高益生菌的耐胃酸和耐胆盐能力。本发明的研究为实现益生菌与乳铁蛋白一起组合提高免疫力提供了可能。最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。当前第1页12