一种牦牛肉源诱食剂、制备方法及其在宠物食品添加剂中的应用

1.本发明涉及宠物食品添加剂技术领域，尤其涉及一种牦牛肉源诱食剂、制备方法及其在宠物食品添加剂中的应用。


背景技术：

2.宠物诱食剂是根据宠物采食需要，特别设计的一种能够引诱宠物采食、增加宠物饲料的适口性、增进宠物食欲的营养性添加剂。宠物诱食剂是以刺激宠物嗅觉、味觉、神经性等器官为基础的营养物质。科学配制的宠物诱食剂完全按照饲料添加剂卫生标准执行，对宠物无任何其他副作用，仅对宠物的采食、适口性和增进食欲有明显的提高效果，但由于成分复杂，目前市面上的宠物诱食剂容易导致宠物产生依赖，对其他食物不感兴趣，进而出现营养不良的现象。针对上述情况，现有技术中开发了采用多种以鸡肉、鸡肝、鸡脚等禽类下脚料或牛肉及动物副产品，与蛋白酶水解，通过美拉德反应制备的诱食剂产品。
3.牦牛肉质细嫩，味道鲜美，具有较高的营养价值。富含蛋白质和氨基酸，以及胡萝卜素、钙、磷等微量元素，脂肪含量特别低，热量特别高，作为西藏特产受到消费者欢迎，然而产业屠宰加工过程中遗留了大量牦牛肉边角料，因为品相较差而失去其售卖价值，造成了资源浪费。以牦牛肉为原料制备宠物食品添加剂，对牦牛肉地方特色食品开发、牦牛资源充分利用具有重要意义。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种牦牛肉源诱食剂、制备方法及其在宠物食品添加剂中的应用，用以解决现有技术中宠物诱食剂种类匮乏的问题。
5.为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
6.本发明提供了一种牦牛肉源诱食剂的制备方法，包含如下步骤：
7.将牦牛肉原料进行发酵、酶解，得到酶解物；
8.将酶解物进行美拉德反应、干燥得到牦牛肉源诱食剂；
9.所述发酵采用包含酿酒酵母和保加利亚乳杆菌的复合菌剂。
10.优选的，所述酿酒酵母和保加利亚乳杆菌的浓度比为1:1～3。
11.优选的，所述牦牛肉原料在发酵前进行搅碎，制成肉糜，然后与水混合，进行匀浆；
12.所述肉糜与水的质量体积比为1kg～0.1～0.3l。
13.优选的，所述复合菌剂的接种量为每kg原料接种20～30ml复合菌剂；
14.所述复合菌剂的有效活菌数为2
×
107～9
×
108cfu/ml；
15.所述发酵的温度为30～50℃，发酵的时间为48～96h。
16.优选的，所述酶解采用复合酶，复合酶中无花果蛋白酶和风味蛋白酶的比例为1:0.8～1.2，所述复合酶的用量为400～600u/g；
17.所述酶解的时间为100～140min。
18.优选的，所述美拉德反应的温度为100～115℃，时间为30～50min；
19.所述美拉德反应中需要添加糖，所述糖的添加量为酶解物的3～8％。
20.优选的，所述糖为果糖和/或木糖。
21.优选的，所述干燥采用喷雾干燥；
22.所述喷雾干燥的条件为：进口温度120～180℃，出口温度100～120℃，进料流速4.0～6.0ml/min。
23.本发明还提供了一种由上述制备方法制成的牦牛肉源诱食剂。
24.本发明还提供了一种牦牛肉源诱食剂在宠物猫食品添加剂中的应用。
25.本发明的技术效果和优点：
26.本发明通过酿酒酵母-保加利亚乳杆菌复合菌种对牦牛肉进行发酵，赋予了牦牛肉原料特殊风味，在诱食剂制备过程中能够显著提升其诱食性。通过本发明制备的牦牛肉源诱食剂原料天然健康，在饲料适口性、增强宠物食欲、提高宠物采食量等方面呈现良好效果，为牦牛肉的有效利用开辟了新的途径。
具体实施方式
27.本发明提供了一种牦牛肉源诱食剂的制备方法，包含如下步骤：
28.将牦牛肉原料进行发酵、酶解，得到酶解物；
29.将酶解物进行美拉德反应、干燥得到牦牛肉源诱食剂；
30.所述发酵采用包含酿酒酵母和保加利亚乳杆菌的复合菌剂。
31.在本发明中，所述牦牛肉原料在发酵前还优选包括将其搅碎制成肉糜，所述搅碎采用的设备优选为绞肉机；制成肉糜后优选与水混合，肉糜与水的质量体积比优选为1kg～0.1～0.3l，所述水优选为无菌水，所述肉糜与水混合后优选进行匀浆，所述匀浆优选采用匀浆机进行。
32.在本发明中，所述发酵采用复合菌剂，所述复合菌剂包含酿酒酵母和保加利亚乳杆菌，所述酿酒酵母和保加利亚乳杆菌优选以菌液形式添加，所述酿酒酵母和保加利亚乳杆菌的浓度比优选为1:1～3，进一步优选为1:1.5～2.5；所述复合菌剂的接种量优选为每kg原料接种20～30ml复合菌剂，进一步优选为23～27ml复合菌剂，所述复合菌剂的有效活菌数优选为2
×
107～9
×
108cfu/ml，进一步优选为8
×
107～1
×
108cfu/ml；所述发酵的温度优选为30～50℃，进一步优选为35～45℃，所述发酵的时间优选为48～96h，进一步优选为60～84h。
33.在本发明中，所述酶解优选采用复合酶，复合酶优选为无花果蛋白酶和风味蛋白酶，二者的比例优选为1:0.8～1.2，所述复合酶的用量为400～600u/g，进一步优选为450～550u/g；所述酶解优选在室温下进行，所述酶解的时间优选为100～140min，进一步优选为110～130min。
34.在本发明中，所述美拉德反应的温度优选为100～115℃，进一步优选为105～110℃，所述美拉德反应的时间优选为30～50min，进一步优选为35～45min；本发明所述的美拉德反应中需要添加糖，所述糖优选为果糖和/或木糖，当所述糖为果糖时，所述糖的添加量优选为酶解物的3～8％，进一步优选为4～6％，当所述糖为木糖时，所述糖的添加量优选为酶解物的3～8％，进一步优选为5～7％，本发明中，所述添加糖后优选将物料混合均匀。
35.在本发明中，所述干燥优选采用喷雾干燥，所述喷雾干燥的进口温度优选为120～180℃，进一步优选为130～160℃，所述喷雾干燥的出口温度优选为100～120℃，进一步优选为110～115℃，所述喷雾干燥的料流速优选为4.0～6.0ml/min，进一步优选为4.5～5.5ml/min。
36.本发明还提供了一种牦牛肉源诱食剂在宠物食品添加剂中的应用，当本发明中的牦牛肉源诱食剂与宠物食品配合使用时，所述牦牛肉源诱食剂的添加量优选为宠物食品的1～5％，进一步优选为2～4％。在本发明中，所述宠物包括但不限于猫。
37.下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
38.实施例中涉及的原料来源如下：
39.牦牛肉边角料、果糖、木糖购自市场；
40.酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)、保加利亚乳杆菌(lactobacillus bulgaricus)、植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)、干酪乳杆菌(lactobacillus casei)购自中国普通微生物菌种保藏管理中心；
41.风味蛋白酶、无花果蛋白酶购自上海邦成化工有限公司。
42.喷雾干燥设备为：小型喷雾干燥机cy-10ly。
43.实施例1
44.取5kg牦牛肉边角料，用绞肉机搅碎成肉糜，加入1l无菌水，用匀浆机混合匀浆，接种125ml酿酒酵母-保加利亚乳杆菌复合菌剂(其中酿酒酵母、保加利亚乳杆菌的浓度比为1:2)，复合菌剂中的有效活菌数为8
×
107cfu/ml。在38℃条件下发酵3天，在发酵产物中以500u/g加入复合酶(其中无花果蛋白酶和风味蛋白酶的比例为1:1)，室温酶解2h，得到酶解物，取200ml酶解物，加入果糖10g，在温度110℃条件下进行美拉德反应40min，得到具有浓郁香味的美拉德反应产物。设置条件：进口温度160℃，出口温度110℃，进料流速5.2ml/min进行喷雾干燥，得到牦牛肉源诱食剂。
45.实施例2
46.取10kg牦牛肉边角料，用绞肉机搅碎成肉糜，加入2l无菌水，用匀浆机混合匀浆，接种200ml酿酒酵母-保加利亚乳杆菌复合菌剂(其中酿酒酵母、保加利亚乳杆菌的浓度比为1:1)，复合菌剂中的有效活菌数为2
×
108cfu/ml。在38℃条件下发酵2天，得到发酵产物。在发酵产物中以500u/g加入复合酶(其中无花果蛋白酶和风味蛋白酶的比例为1:1)，室温酶解100min，得到酶解物，取100ml酶解物，加入木糖5g，在温度108℃条件下进行美拉德反应35min，得到具有浓郁香味的美拉德反应产物。设置条件：进口温度158℃，出口温度104℃，进料流速4.8ml/min进行喷雾干燥，得到牦牛肉源诱食剂。
47.实施例3
48.取1kg牦牛肉边角料，用绞肉机搅碎成肉糜，加入200ml无菌水，用匀浆机混合匀浆，接种30ml酿酒酵母-保加利亚乳杆菌复合菌剂(其中酿酒酵母、保加利亚乳杆菌的浓度比为2:1)，复合菌剂中的有效活菌数为4
×
107cfu/ml。在38℃条件下发酵84h，得到发酵产物。在发酵产物中以800u/g加入复合酶(其中无花果蛋白酶和风味蛋白酶的比例为1:1)，室温酶解60min，得到酶解物，取400ml酶解物，加入果糖22g，在温度105℃条件下进行美拉德反应35min，得到具有浓郁香味的美拉德反应产物。设置条件：进口温度160℃，出口温度105
℃，进料流速5.0ml/min进行喷雾干燥，得到牦牛肉源诱食剂。
49.对比例1
50.取5kg牦牛肉边角料，用绞肉机搅碎成肉糜，加入1l无菌水，用匀浆机混合匀浆，以500u/g加入复合酶(其中无花果蛋白酶和风味蛋白酶的比例为1:1)，室温酶解2h，得到酶解物，取200ml酶解物，加入果糖10g，在温度110℃条件下进行美拉德反应40min，得到美拉德反应产物。设置条件：进口温度160℃，出口温度110℃，进料流速5.2ml/min进行喷雾干燥，得到牦牛肉源诱食剂。
51.对比例2
52.取5kg牦牛肉边角料，用绞肉机搅碎成肉糜，加入1l无菌水，用匀浆机混合匀浆，接种125ml酿酒酵母菌剂，菌剂中的有效活菌数为8
×
107cfu/ml。在38℃条件下发酵3天，得到发酵产物。在发酵产物中以500u/g加入复合酶(其中无花果蛋白酶和风味蛋白酶的比例为1:1)，室温酶解2h，得到酶解物，取200ml酶解物，加入果糖10g，在温度110℃条件下进行美拉德反应40min，得到美拉德反应产物。设置条件：进口温度160℃，出口温度110℃，进料流速5.2ml/min进行喷雾干燥，得到牦牛肉源诱食剂。
53.对比例3
54.取5kg牦牛肉边角料，用绞肉机搅碎成肉糜，加入1l无菌水，用匀浆机混合匀浆，接种125ml保加利亚乳杆菌菌剂，菌剂中的有效活菌数为8
×
107cfu/ml。在38℃条件下发酵3天，得到发酵产物。在发酵产物中以500u/g加入复合酶(其中无花果蛋白酶和风味蛋白酶的比例为1:1)，室温酶解2h，得到酶解物，取200ml酶解物，加入果糖10g，在温度110℃条件下进行美拉德反应40min，得到美拉德反应产物。设置条件：进口温度160℃，出口温度110℃，进料流速5.2ml/min进行喷雾干燥，得到牦牛肉源诱食剂。
55.对比例4
56.取5kg牦牛肉边角料，用绞肉机搅碎成肉糜，加入1l无菌水，用匀浆机混合匀浆，接种125ml植物乳杆菌-干酪乳杆菌复合菌剂(植物乳杆菌、干酪乳杆菌的浓度比为1:1)，复合菌剂中的有效活菌数为8
×
107cfu/ml。在38℃条件下发酵3天，得到发酵产物。在发酵产物中以500u/g加入复合酶(其中无花果蛋白酶和风味蛋白酶的比例为1:1)，室温酶解2h，得到酶解物，取200ml酶解物，加入果糖10g，在温度110℃条件下进行美拉德反应40min，得到美拉德反应产物。设置条件：进口温度160℃，出口温度110℃，进料流速5.2ml/min进行喷雾干燥，得到牦牛肉源诱食剂。
57.对比例5
58.取5kg牦牛肉边角料，用绞肉机搅碎成肉糜，加入1l无菌水，用匀浆机混合匀浆，接种125ml酿酒酵母-保加利亚乳杆菌复合菌剂(其中酿酒酵母、保加利亚乳杆菌的浓度比为1:2)，复合菌剂中的有效活菌数为8
×
107cfu/ml。在38℃条件下发酵3天，得到发酵产物。在发酵产物中以500u/g加入木瓜蛋白酶，室温酶解2h，得到酶解物，取200ml酶解物，加入葡萄糖10g，在温度120℃条件下进行美拉德反应60min，得到美拉德反应产物。设置条件：进口温度160℃，出口温度110℃，进料流速5.2ml/min进行喷雾干燥，得到牦牛肉源诱食剂。
59.实验例1双盆法测试
60.将实施例1～3、对比例1～5中制得的牦牛肉源诱食剂按质量比2％喷涂于基础猫粮表面(基础猫粮不含任何诱食剂产品)，待干燥后得到实验组1～8猫粮，以基础猫粮为对
照组。
61.实验动物选用来自西南大学实验动物中心的10只猫(品种包括临清狮猫、英国短毛猫)，以及来自瑞鹏宠物医院的20只猫(品种包括东方短毛猫、波斯猫、英国短毛猫)，动物使用过程严格按照《t/calas 29-2017实验动物教学用动物使用指南》相关标准进行。
62.采用国际通用测试方法“双盆法”进行实验，随机选取24只猫，每8只一组，为每单只猫提供两个食盆，一个食盆放置对照组猫粮100g，另一个放置实验组猫粮100g，分别对应实验组1～8。于首日下午16点供食，次日10点取出剩余猫粮进行记录，并计算实验组猫粮采食率，计算公式：猫粮采食率＝(实验组猫粮供应量100g-实验组猫粮剩余量)/猫粮供应总量200g，进行3组重复实验，结果取平均值。采食率越高，说明其适口性越好，结果如下表1所示：
63.表1双盆法测试结果
[0064][0065]
由表1可知，实施例1～3制得的牦牛肉源诱食剂能够显著增加猫粮适口性，且效果优于对比例。说明本发明制备方法中通过特定菌种发酵的步骤能够显著改善牦牛肉作为诱食剂原料的风味，增进诱食效果。
[0066]
实验例2单独测试
[0067]
实验分组同实验例1；
[0068]
随机选取18只猫，9只一批次进行2次重复试验，为每单只猫提供一个食盆，分别放置对照组和实验组1～8猫粮100g，于首日下午16点供食，次日10点取出剩余猫粮进行记录，计算采食率，计算公式：采食率＝(猫粮供应量100g-猫粮剩余量)/猫粮供应量100g，两次结果取平均值，结果如下表2所示：
[0069]
表2单独测试结果
[0070] 平均猫粮剩余量平均猫粮采食率对照组68.73g31.27％实验组113.98g86.02％实验组218.11g81.89％实验组311.85g88.15％
实验组453.70g46.30％实验组548.44g51.56％实验组642.95g57.05％实验组784.63g15.37％实验组850.56g49.44％
[0071]
由表2可知，通过本发明实施例1～3制得的牦牛肉源诱食剂能够显著提高诱食效果，且效果优于对比例，与双盆法测试结果配合考虑，能够说明本发明发酵步骤中采用的两种菌剂存在协同作用，酿酒酵母和保加利亚乳杆菌共同发酵能够使牦牛肉原料呈现特殊香气；实验组7(对比例4中诱食剂)采食情况与对照组相比较差，可能是由于植物乳杆菌和干酪乳杆菌发酵后，生成了一些使猫抵触的的风味物质；上述结果还能够说明，制备过程中的酶种类，美拉德反应中的糖种类、温度和时间同样影响诱食剂的适口性，本发明中技术方案采用了最优的参数。
[0072]
实验例3“第一口”偏好测试
[0073]
实验分组、喂食情况同实验例1，记录猫“首次嗅”和“首次采食”的选择情况，结果如下表3所示：
[0074]
表3“第一口”偏好测试结果
[0075][0076][0077]
由表3可知，通过本发明制得的牦牛肉源诱食剂对猫的吸引力较强，说明本发明提供的牦牛肉源诱食剂在气味和外观等方面能够给猫提供优良的第一印象，进而更好的实现诱食效果。
[0078]
由以上实施例可知，本发明提供了一种牦牛肉源诱食剂的制备方法，通过特定菌种发酵的步骤能够显著改善牦牛肉作为诱食剂原料的风味，增进诱食效果，在气味和外观等方面能够给猫提供优良的第一印象，对猫的吸引力较强。
[0079]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。