一种药食同源保肝组合物及应用的制作方法

本发明涉及医药，涉及一种保肝组合物，尤其涉及一种药食同源保肝组合物制剂及保肝茶。

背景技术：

1、肝脏是人体内脏中最大的实质性器官，是脂肪、蛋白质和糖等能量物质新陈代谢的重要场所，也是摄入体内的绝大多数物质代谢转化的场所，它还有解毒、免疫、造血和凝血等生理功能，在维持有机体的正常生命活动中发挥着十分重要的作用。临床数据表明，国内肝病的发生率逐渐升高，而且患者年龄呈现出低龄化的发展趋势。肝病的分类较多，包括非酒精性脂肪肝病(nafld)、酒精性肝病(ald)、病毒性肝病、自身免疫性肝病和药物性肝病(dili)等。肝病主要是由外部的诱因和自身机体的调节所致，不同的肝病类型其诱发因素及发病机制并不完全相同，但慢性肝病的发生发展往往具有相似的病理过程，一般会经过脂肪性病变、肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌。目前在世界范围内两类慢性肝病nafld和ald患者数量急剧增加，已逐步取代病毒性肝炎成为导致肝癌、肝硬化相关致死的主要原因。但在肝病发展的早期，脂肪肝、肝炎、肝纤维化等肝脏疾病往往可以通过治疗逆转，因此这加剧了我们对nafld和ald相关预防、保健的需求。

2、nafld发病的早期主要是源自肝细胞内脂肪的堆积所引起的肝脏脂肪变性，nafld除了导致以脂质堆积为特征的组织病理学改变外，它还能引起肝酶的升高和肝功能异常，非酒精性脂肪性肝炎(nash)是nafld的恶性化进展。到目前为止，nafld的发病机制尚不完全清楚，但nafld在流行病学上被认为与肥胖、2型糖尿病(t2dm)和代谢综合症(mets)等密切相关，t2dm和肥胖患者肝脏存在明显的脂肪病变。可以确认的是nafld的标志和根本是甘油三酯在肝细胞中的过度积累，这实际上取决于肝脏内脂质代谢过程。

3、ald发病机制复杂，目前对ald起始和进展尚无统一的定论。当前的研究表明，ald与氧化应激、线粒体损伤、细胞凋亡等密切相关。其中氧化应激被认为是ald发生发展过程中最重要的一环。过量的酒精摄入或者长期饮酒会干扰机体脂质稳态并促进酒精性脂肪肝疾病进展，新合成的游离脂肪酸(ffa)被转化为二酰基甘油(dag)和三酰基甘油(tag)，从而在肝细胞内产生脂滴，不受控制的脂滴积累和ros是肝细胞膨胀和细胞凋亡的主要原因。

4、大量研究发现中草药的应用对nafld、ald的治疗和改善是有利的。但中草药成分复杂，在成药方面难以解析及深度开发利用；与之相比，药食同源类的中草药更利于相关产品的开发及保肝方面的普及与应用，故从药食同源类的中草药中寻找安全、高效的、对nafld、ald的治疗和改善保肝药物，具有十分重要的应用前景，但是仍然需要将药食同源植物进行合理的组合，从中发现更加安全、高效的保肝组合药物。因此，开发一种药食同源的保肝组合物制剂，采用不同的药食同源的保肝植物，提取其中有效的活性成分，使其能够多方面、多靶点的发挥保肝作用，达到抗氧化，降脂的效果，是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对肝病，提供一种药食同源的纯天然、具有抗氧化、降脂效果的组合物，该组合物无毒副作用、易吸收，能够作为膳食补充剂或者保健食品原料，且具有良好的保肝功效。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、一种药食同源保肝组合物，由以下重量份原料制成：荷叶10-20份、葛根5-10份、紫苏10-15份、石斛5-10份、蒲公英5-15份，决明子10-15份，绞股蓝10-30份。

4、进一步，所述药食同源保肝组合物，由以下重量份原料制成：荷叶10-15份、葛根5-8份、紫苏10-15份、石斛5-8份、蒲公英5-12份，决明子10-13份，绞股蓝10-25份。

5、进一步，所述药食同源保肝组合物制剂，由以下重量份原料水提取物制成：荷叶10份、葛根6份、紫苏10份、石斛8份、蒲公英10份，决明子12份，绞股蓝22份。

6、进一步，所述药食同源保肝组合物，由以下重量份原料制成：荷叶10份、葛根5份、紫苏10份、石斛5份、蒲公英5份，决明子10份，绞股蓝10份。

7、进一步，所述药食同源保肝组合物，由以下重量份原料制成：荷叶20份、葛根10份、紫苏15份、石斛10份、蒲公英15份，决明子15份，绞股蓝30份。

8、本发明的另一目的是，提供一种药食同源保肝组合物制剂的制备方法，包括如下步骤：

9、步骤1，提取：

10、(1)第一次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡2～5h，其中料液比为1：10～20，浸提后抽滤收集滤液，滤渣进行二次提取；

11、(2)第二次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡2～5h，其中料液比为1：5～15，浸提后抽滤收集滤液；

12、步骤2，滤液：

13、(1)合并两次浸提后滤液，过滤去渣，煎煮1-2h，趁热过滤，静置，添加常规辅料，混匀，制得煎膏剂。

14、本发明的第三个目的是，将上述任一项所述的保药食同源的组合物用于制备保肝茶。

15、本发明的再一目的是，提供一种保肝茶的制备方法，包括如下步骤：

16、(1)按照以下重量份配比准备原料：荷叶10-20份、葛根5-10份、紫苏10-15份、石斛5-10份、蒲公英5-15份，决明子10-15份，绞股蓝10-30份

17、(2)原料清理：取荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝，用水洗净，于50℃-60℃烘干5-7h；

18、(3)粉碎：将(1)中干燥的荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝样品过筛粉碎，其中筛孔目数为30-50目；

19、(4)封装：将(2)中得到的荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝粉末按步骤(1)重量份配比混合均匀，装袋。

20、进一步，所述步骤(2)中烘干条件为：于55℃烘干6h。

21、进一步，所述步骤(3)中筛孔目数为40目。

22、进一步，所述步骤(4)中的保肝茶由以下重量份原料制成：荷叶10份、葛根6份、紫苏10份、石斛8份、蒲公英10份，决明子12份，绞股蓝22份。

23、本发明的有益效果是：

24、(1)本发明所述药食同源保肝组合物，由荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英、决明子、绞股蓝七种药食同源植物的功能成分组合而成。其中，蒲公英、决明子、紫苏、葛根均为药食两用的药材，荷叶、石斛、绞股蓝均为保健食品原料。原料上安全可靠，无毒副作用；荷叶荷叶味苦性平，归肝、脾、胃经，具有清暑化湿，升发清阳，凉血止血等作用，对于保护肝脏、降血脂有很好的疗效；葛根,味甘、辛,性平,归脾、胃、肺、膀胱经。解肌退热；发表透诊；生津止渴；升阳止泻；紫苏具有解表散寒,行气和胃的功效；石斛其味甘、淡、微咸，性寒，归胃、肾、肺经。它的功效非常的简单，有益胃生津、滋阴清热的作用；蒲公英性寒，味苦、甘，归胃、肝经，适用于痈肿疔疮、湿热淋症以及黄疸；决明子具有清热明目、润肠通便的功效。绞股蓝具有养心健脾,益气和血，除痰化瘀，降血脂之功效。本发明将这些药食同源中药材组合使用，使得各药材中的活性成分产生协同作用，相互增进保肝、护肝的功效，从而能够有效地抑制、阻止肝脏组织的损伤。

25、(2)本发明基于中医理论确定所述的组合物具有保肝的作用。将组合物制剂分别采用dpph法、abts法评估其抗氧化能力，具有良好的抗氧化效果；采用hepg2酒精性肝损伤细胞模型评估其对酒精性肝损伤的保肝效果，能够减少酒精诱导下细胞的死亡率，显示出了对酒精性肝损伤的保护效果。

26、(3)本发明所述的包含药食同源组合物的保肝茶，具有良好的保肝功效，适合压力大、长期熬夜、饮酒、高脂饮食、老年人群体长期服用，改善肝功能，缓解肝损伤。

27、实施例

28、下面详细描述本发明的实施例，所举实例旨在用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

29、实施例1：

30、一种药食同源保肝组合物，由以下重量份原料水提取物制成：荷叶10份、葛根6份、紫苏10份、石斛8份、蒲公英10份，决明子12份，绞股蓝22份。

31、所述药食同源保肝组合物的制备方法，具体制备步骤如下：

32、步骤1，提取：

33、(1)第一次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：15，浸提后抽滤收集滤液，滤渣进行二次提取；

34、(2)第二次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：8，浸提后抽滤收集滤液；

35、步骤2，滤液：

36、(1)合并两次浸提后滤液，过滤去渣，煎煮2h，趁热过滤，静置，添加常规辅料，混匀，制得煎膏剂。

37、实施例2：

38、一种药食同源保肝组合物，由以下重量份原料水提取物制成：荷叶10份、葛根5份、紫苏10份、石斛5份、蒲公英5份，决明子10份，绞股蓝10份。

39、所述药食同源保肝组合物的制备方法，具体制备步骤如下：

40、步骤1，提取：

41、(1)第一次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：15，浸提后抽滤收集滤液，滤渣进行二次提取；

42、(2)第二次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：8，浸提后抽滤收集滤液；

43、步骤2，滤液：

44、(1)合并两次浸提后滤液，过滤去渣，煎煮1-2h，趁热过滤，静置，添加常规辅料，混匀，制得煎膏剂。

45、实施例3：

46、一种药食同源保肝组合物，由以下重量份原料水提取物制成：荷叶20份、葛根10份、紫苏15份、石斛10份、蒲公英15份，决明子15份，绞股蓝30份。

47、所述药食同源保肝组合物的制备方法，具体制备步骤如下：

48、步骤1，提取：

49、(1)第一次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：15，浸提后抽滤收集滤液，滤渣进行二次提取；

50、(2)第二次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：8，浸提后抽滤收集滤液；

51、步骤2，滤液：

52、(1)合并两次浸提后滤液，过滤去渣，煎煮1-2h，趁热过滤，静置，添加常规辅料，混匀，制得煎膏剂。

53、对比例1：

54、本对比例取葛根，具体制备步骤如下：

55、步骤1，提取：

56、(1)第一次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：15，浸提后抽滤收集滤液，滤渣进行二次提取；

57、(2)第二次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：8，浸提后抽滤收集滤液；

58、步骤2，滤液：

59、(1)合并两次浸提后滤液，过滤去渣，煎煮1-2h，浓缩制得浸膏。

60、对比例2：

61、本对比例取荷叶，具体制备步骤如下：

62、步骤1，提取：

63、(1)第一次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：15，浸提后抽滤收集滤液，滤渣进行二次提取；

64、(2)第二次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：8，浸提后抽滤收集滤液；

65、步骤2，滤液：

66、(1)合并两次浸提后滤液，过滤去渣，煎煮1-2h，浓缩制得浸膏。

67、对比例3：

68、本对比例取石斛，具体制备步骤如下：

69、步骤1，提取：

70、(1)第一次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：15，浸提后抽滤收集滤液，滤渣进行二次提取；

71、(2)第二次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：8，浸提后抽滤收集滤液；

72、步骤2，滤液：

73、(1)合并两次浸提后滤液，过滤去渣，煎煮1-2h，浓缩制得浸膏。

74、对比例4：

75、本对比例取决明子，具体制备步骤如下：

76、步骤1，提取：

77、(1)第一次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：15，浸提后抽滤收集滤液，滤渣进行二次提取；

78、(2)第二次提取：将所述配方原料清洗净，按配比混合粉碎后加入55℃水中浸泡3h，其中料液比为1：8，浸提后抽滤收集滤液；

79、步骤2，滤液：

80、(1)合并两次浸提后滤液，过滤去渣，煎煮1-2h，浓缩制得浸膏。

81、实施例5：

82、一种包含药食同源保肝组合物的保肝茶，由以下重量份原料制成：荷叶10份、葛根6份、紫苏10份、石斛8份、蒲公英10份，决明子12份，绞股蓝22份。

83、所述保肝茶的制备方法包括如下步骤：

84、(1)原料清理：将荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝洗净，于55℃烘干6h烘干；

85、(2)粉碎：将(1)中得到的干燥的荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝样品过分别40目筛粉碎；

86、(3)封装：将(2)中得到的荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝粉末按如上所述重量份比例混合均匀，装袋。

87、将(3)中所得茶粉袋，用开水进行冲泡5-15min，即可饮用。

88、实施案例5：

89、一种包含药食同源保肝组合物的保肝茶，由以下重量份原料制成：荷叶10份、葛根5份、紫苏10份、石斛5份、蒲公英5份，决明子10份，绞股蓝10份。

90、所述保肝茶的制备方法包括如下步骤：

91、(1)原料清理：将荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝洗净，于55℃烘干6h烘干；

92、(2)粉碎：将(1)中得到的干燥的荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝样品过分别40目筛粉碎；

93、(3)封装：将(2)中得到的荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝粉末按如上所述重量份比例混合均匀，装袋。

94、将(3)中所得茶粉袋，用开水进行冲泡5-15min，即可饮用。

95、实施案例6：

96、一种包含药食同源保肝组合物的保肝茶，由以下重量份原料制成：荷叶20份、葛根10份、紫苏15份、石斛10份、蒲公英15份，决明子15份，绞股蓝30份。

97、所述保肝茶的制备方法包括如下步骤：

98、(1)原料清理：将荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝洗净，于55℃烘干6h烘干；

99、(2)粉碎：将(1)中得到的干燥的荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝样品过分别40目筛粉碎；

100、(3)封装：将(2)中得到的荷叶、葛根、紫苏、石斛、蒲公英，决明子，绞股蓝粉末按如上所述重量份比例混合均匀，装袋。

101、将(3)中所得茶粉袋，用开水进行冲泡5-15min，即可饮用。

102、另外，为了进一步说明本发明申请公开制备的组合物制剂的药效，发明人进行如下试验用以评价：

103、实施例7：

104、按实施例1、2、3分别制备药食同源组合物保肝制剂1、2、3，按对比例1-5分别制备对比例制剂1-5，采用dpph法评估其抗氧化能力。

105、试验方法：分别取保肝制剂1、2、3，对比例制剂1-5，配制成不同浓度(10、50、100、200、400μg/ml)待测液，设置阳性对照vc(5、10、15、20、25μg/ml)，取2ml样品加入2ml0.1mmol/ldpph自由基溶液，摇匀，避光30min后，在517nm波长处测定吸光度ai；将dpph自由基溶液用等体积无水乙醇代替，其他同前，测吸光度aj；将样品用等体积无水乙醇代替，其他同前，测吸光度ae。dpph自由基清除率计算公式：k＝[1-(ai-aj)/ae]×100％。所得数据通过软件graphpadprism 6.0计算ic50值以评价样品抗氧化效果。

106、试验结果如表1所示，保肝制剂1、2、3均显示出良好的dpph自由基清除能力，其中保肝制剂1具有最好的dpph自由基清除效果，ic50值为55.81±2.33μg/ml，表明保肝制剂具有良好的抗氧化效果。

107、表1保肝制剂对dpph自由基清除能力测定

108、

109、实施案例8：

110、通过实施案例1、2、3制备药食同源保肝制剂1、2、3，按对比例1-5分别制备对比例制剂1-5，采用abts法评估其抗氧化能力。

111、试验方法：分别取保肝制剂1、2、3，对比例制剂1-5，配制成不同浓度(10、50、100、200、400μg/ml)待测液，设置阳性对照vc(5、10、15、20、25μg/ml)，取7.9mgabts溶于10ml蒸馏水中，另取1.3mg过硫酸钾溶于10ml蒸馏水中，混合两种溶液即得abts储备液，室温条件下避光储存过夜，使用时稀释4倍。分别取2ml样品液和等量abts稀释液混合，在734nm处测吸光度；将样品液用等体积水代替，其他同前，测吸光度。abts自由基清除率计算公式：k′＝[1-(ai′-ae′)/(aj′-ae′)]×100％，k′为清除率；ai′为加试样反应后abts溶液的吸光度；aj′为不加试样溶液的吸光度；ae′为不加abts溶液的吸光度。所得数据通过软件graphpadprism 6.0计算ic50值以评价样品抗氧化效果。

112、试验结果如表2所示，保肝制剂1、2、3均显示出良好的abts自由基清除能力，其中保肝制剂1具有最好的自由基清除效果，表明保肝制剂具有良好的抗氧化效果。

113、表2保肝制剂对abts自由基清除能力测定

114、

115、

116、实施案例9：

117、按实施案例1、2、3制备药食同源保肝制剂1、2、3，按对比例1-5分别制备对比例制剂1-5，采用hepg2酒精性肝损伤细胞模型评估其对酒精性肝损伤的保肝效果。

118、试验方法：取对数生长期hepg2细胞，按5×103/孔接种于96孔板中，37℃恒温培养箱培养24h后吸弃旧的培养基，加入100μl含800mmol/l酒精不同浓度(6.25、12.5、25、50μg/ml)保肝制剂药液的dmem培养基，设置不加酒精不加药物的空白组与加酒精不加药物的模型组(eth)，恒温培养箱培养24h后，每孔加入20μl 5mg/ml的mtt(滤菌)溶液，将96孔板继续置于恒温培养箱中静置4h，取出后吸弃各组上清，在每孔中加入100μldmso溶液，放置于微孔板快速振荡器振荡15分钟，在酶标仪上选取待检测区域，测定各孔在570nm处的吸光度，记录数据计算细胞活力及细胞存活率提高率，每个药物均设有3组平行实验。

119、试验结果如表3所示，所有的保肝制剂都显示出了对酒精性肝损伤的保护效果，能够减少酒精诱导下细胞的死亡率。与其它保肝制剂相比保肝制剂1对酒精性肝损伤显示出最好的保肝效果，在50μg/ml的剂量浓度下能提高25.14％的细胞存活率。

120、表3保肝制剂对酒精性肝损伤细胞存活率的影响

121、

122、实施案例10：

123、按实施案例1、2、3制备药食同源保肝制剂1、2、3，按对比例1-5分别制备对比例制剂1-5，采用油酸诱导hepg2脂肪堆积细胞模型评估其对脂肪肝的保肝效果。

124、试验方法：取对数生长期hepg2细胞，按1.5×105/孔接种于6孔板中，37℃恒温培养箱培养24h后吸弃旧的培养基，加入含50μmol/l油酸纳及6.25、12.5、25、50μmol/l保肝制剂药液的无血清培养基，另设置含油酸钠不含药物组作为模型组，不含油酸钠不含药物组作为空白组，干预24h。吸弃旧液，pbs清洗3次，每孔加入200μl细胞裂解液冰浴裂解细胞30min，4℃冷冻离心机6000r/min离心15min，取上清液按照bca试剂盒、tg试剂盒说明方法检测蛋白浓度和tg含量，计算hepg2细胞内tg含量和各组药物对tg的抑制率。

125、试验结果如表4所示，所有的保肝制剂都显示出了对脂肪肝的降脂作用，能够减少油酸诱导下细胞内tg的蓄积，与其它保肝制剂相比保肝制剂1对脂肪肝肝脏内tg的累积显示出最好清除效果，在50μg/ml的剂量浓度下tg清除率达到28.22％。

126、表4保肝制剂对tg的抑制作用

127、

128、尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

129、以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点，对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明；因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内，不应将权利要求中的任何标记视为限制所涉及的权利要求。

130、此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。