改善冷藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物及其制法
【专利摘要】本发明公开了一种改善冷藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物及其制备方法和用途，该甘草叶提取物的制备方法包括以下步骤：以干燥、粉碎后的光果甘草叶为原料，用80％乙醇回流提取3次，每次2小时；离心取上清液，合并3次提取的上清液，50℃下减压浓缩去除乙醇，经大孔树脂柱层析纯化后得到甘草叶提取物。本发明的甘草叶提取物是从光果甘草叶中提取的，其总黄酮含量大于15％，提高了目前用作畜牧饲料的甘草地上部分的利用率。本发明的甘草叶提取物无有害试剂残留，颜色浅，抗氧化活性强，无异味，适用于冷藏和冻藏猪肉及其制品。
【专利说明】
改善冷藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物及其制法
技术领域
[0001] 本发明属于食品添加剂领域，具体设及一种甘草叶提取物，特别设及一种改善冷 藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物及其制备方法和用途。
【背景技术】
[0002] 肉及肉制品是膳食中的重要组成之一，能为人类提供优质的蛋白质和氨基酸，对 人体健康起着重要作用。猪肉含有丰富的脂肪和蛋白质，在微生物、内源性酶W及环境影响 等作用下，猪肉及其制品容易在储存及运输过程中发生脂质氧化和蛋白氧化，从而降低猪 肉及其制品的食用品质和营养价值，并造成一定的经济损失。
[0003] 冷藏(0-4°C)能在一定程度上延缓肉及肉制品的变质，但由于溫度不够低，不能有 效抑制内源性酶酶活及微生物的生长，储存时间非常有限。冻藏(-24--15°C)过程中，肉组 织中冰晶的形成使肉中脂质失去水膜的保护而增大与氧的接触面，进而发生氧化酸败，同 时伴有蛋白变性反应发生。因此，在肉及其制品中通常会通过使用防腐剂、抗氧化剂、发色 剂和品质改良剂四大类与食品保鲜相关的食品添加剂。
[0004] 近年来，植物提取物如迷迭香提取物、竹叶提取物、生姜提取物等因富含多酪黄酬 类物质，具有良好的抗氧化功能和抑菌作用，且由于其来源天然，安全性相对较高，因而越 来越受到青睐。
[0005] 甘草，亦称"国老"，《本草纲目》将其列为"中草药之王"，在传统中医药中有着不可 或缺的地位，自古W来就有"十方九草"和"无草不成方"的说法。甘草是现代制药工业中的 一种重要原料，并在食品、保健品、烟草、化妆品、轻工、石油、消防等诸多行业中也起着非常 重要的作用，甘草也是荒漠半荒漠地区保持水±、改良±壤、防风固沙的重要植物。
[0006] 而在卫生部公布的《关于进一步规范保健食品原料管理的通知》中，甘草被归入药 食同源的一类，且已有的甘草黄酬(提取完甘草酸后的甘草根残渣的乙醇提取物）已作为天 然抗氧化剂被批准用于油脂、坚果、烟熏和烧烤类肉制品等食品加工中。
[0007] -直W来，甘草的地上部分作为一种优良的豆科牧草而成为了草原荒漠中优质的 饲用植物。但近年来的研究表示，甘草地上部分也含有大量的W黄酬类物质为主的一系列 活性成分，因而开始受到关注。
【发明内容】
[000引本发明的首要目的在于提供一种改善冷藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物 的制备方法。
[0009] 本发明的另一目的在于提供由上述方法制得的甘草叶提取物。
[0010] 本发明的再一目的在于提供上述的甘草叶提取物的用途。
[0011] 本发明的目的通过下述技术方案实现：
[0012] -种改善冷藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物的制备方法，包括W下步骤： W干燥、粉碎后的光果甘草(Gly巧rrhiza glabra L.)叶为原料，用80%乙醇(v/v)回流提 取3次，每次2小时；离屯、取上清液，合并3次提取的上清液，50°C下减压浓缩去除乙醇，经 XAD-16大孔树脂柱层析纯化后得到甘草叶提取物；
[0013] 上述制备方法具体包括W下步骤：
[0014] (1)光果甘草叶清洗干燥后，粉碎过60目筛，加入10-20倍重量的80%乙醇(v/v)加 热回流提取化，滤渣重复提取两次后，合并提取液，40(K)rpm离屯、后过滤得上清液，于50°C下 减压浓缩至成无乙醇的浸膏；
[0015] (2)将预处理好的大孔树脂XAD-16填入玻璃层析柱中，W蒸馈水循环平衡4h后静 置过夜（或静置12h);将步骤（1)得到的浸膏用蒸馈水稀释，使其总黄酬浓度达到5-20mg/ mL，过XAD-16大孔树脂层析柱，采用0-50% (v/v)乙醇-水溶液梯度洗脱，收集50%乙醇(v/ V)洗脱液(前期实验证明50%乙醇洗脱组分颜色较浅，抗氧化效果最佳），减压浓缩，冷冻干 燥得甘草叶提取物；
[0016] 步骤(2)中，大孔树脂预处理的步骤是，将大孔树脂XAD-16按质量体积比为1:10加 入98%乙醇(v/v)溶胀12h，蒸馈水清洗树脂至无乙醇，加入1M的化0H浸泡化后W蒸馈水清 洗树脂至中性，再W1M的HC1浸泡化后W蒸馈水清洗树脂至中性；
[0017] 步骤(2)所述的梯度洗脱依次为:2-5个柱体积蒸馈水洗脱，3-5个柱体积10%乙醇 (v/v)洗脱，3-5个柱体积30%乙醇(v/v)洗脱，3-5个柱体积50%乙醇(v/v)洗脱。
[0018] 由上述方法所制得的甘草叶提取物为栋黄色粉末，带有香甜味，总黄酬含量> 15%，具有良好的抗氧化作用和热稳定性。
[0019] 上述的甘草叶提取物能有效抑制冷藏及冻藏猪肉制品中油脂氧化和蛋白氧化，改 善冷藏及冻藏猪肉制品的品质。
[0020] 本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0021] 1、本发明的甘草叶提取物是从光果甘草叶中提取的，其总黄酬含量大于15%，提 高了目前用作畜牧饲料的甘草地上部分的利用率。
[0022] 2、本发明的甘草叶提取物无有害试剂残留，颜色浅，抗氧化活性强，无异味，适用 于冷藏和冻藏猪肉及其制品。
【附图说明】
[0023] 图1是甘草叶提取物(添加量为0.05%)对猪油油脂氧化的抑制作用结果图。
[0024] 图2是空白与添加甘草叶提取物(添加量为0.05%)实验组猪油20°C条件下货架期 预测结果图。
[0025] 图3是不同添加量的甘草叶提取物对猪油油脂氧化的抑制作用结果图。
[0026] 图4是甘草叶提取物对冷藏猪肉糜肌原纤维蛋白琉基值的影响结果图。
[0027] 图5是甘草叶提取物对冻藏猪肉糜肌原纤维蛋白琉基值的影响结果图。
[0028] 图6是甘草叶提取物对冷藏猪肉糜肌原纤维蛋白幾基值的影响结果图。
[0029] 图7是甘草叶提取物对冻藏猪肉饼(生)肌原纤维蛋白幾基值的影响结果图。
【具体实施方式】
[0030] 下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限 于此。
[0031] 实施例1
[0032] 甘草叶提取物的制备方法，包括W下步骤：
[0033] 光果甘草叶洗净干燥后粉碎过60目筛，按10倍重量比例加入80%乙醇(v/v)，加热 保持微沸状态回流提取化，重复提取两次，合并提取液，400化pm离屯、，过滤得上清液，上清 液于50°C下减压浓缩至膏状;蒸馈水稀释浓缩浸膏，使溶液总黄酬浓度达到5mg/mL，过预处 理好的XAD-16大孔树脂柱层析柱，采用0-50 % (v/v)乙醇-蒸馈水溶液梯度洗脱，收集50 % 乙醇(v/v)洗脱液，减压浓缩除去乙醇，冷冻干燥得甘草叶提取物。
[0034] 得到的甘草叶提取物为栋黄色粉末，带有香甜味，且具有良好的热稳定性。W AICI3-CH4O法测定其总黄酬含量为15.68%，抗氧化能力（0RAC值)为7973.37(皿〇1 Trolox equivalent/g)。
[0035] 实施例2
[0036] 猪板油，购于广州南沙农贸市场，熬制滤去残渣得实验用猪油，每个反应管中准确 称取3g猪油。
[0037] 将实施例1的甘草叶提取物W无水乙醇溶解(分散），按0.05%的质量分数添加于 各反应管中，超声辅助处理lOmin使其混匀，采用油脂氧化酸败仪(Rancimat)比较120°C下 添加甘草叶提取物和空白组猪油的油脂氧化诱导时间，空气流速为20LA，实验结果如图1 所示。
[003引同时考察在100°C、110°C、120°C和130°C条件下添加量为0.05%的甘草叶提取物 对猪油油脂氧化的抑制效果，通过外推法计算货架期(20°C条件下储存）。
[0039] 实验结果：
[0040] 如图1所示，与空白组相比，添加了甘草叶提取物(添加量为0.05%)的猪油在120 °C高溫下的氧化诱导时间从1.69h提高到2.4比，结果表明甘草叶提取物将能显著延长猪油 氧化的诱导时间，对猪油油脂的氧化抑制作用明显。
[0041 ] 使用743Rancimat中软件通过溫度外推法计算得到不添加和添加0.05%(w/w)的 甘草叶提取物的猪油货架期计算结果如图2所示。在模型实验中得到的两组模型的稳定因 子值均接近理论值2,且相关系数均大于0.99,表明该预测模型结果可靠。结果表明，添加甘 草叶提取物能显著提高猪油的货架期，添加量为〇.〇5%(w/w)即能提高近15天的货架期，由 此表明甘草叶提取物也具有作为油脂抗氧化剂的潜在优势。
[0042] 实施例3
[0043] 猪板油购于广州南沙农贸市场，熬制滤去残渣得实验用猪油，每个反应管中准确 称取3g猪油，按实施例2的方法研究不同添加量的甘草叶提取物对猪油油脂氧化的抑制作 用。W无水乙醇溶解(分散)甘草叶提取物，按0.025%，0.05%，0.075%，0.100%和0.15% 的质量分数添加于各反应管中，超声辅助处理lOmin使其混匀，采用油脂氧化酸败仪 (Rancimat)比较120°C下甘草叶提取物的五个不同添加量组，和空白组猪油的油脂氧化诱 导时间，空气流速为20LA，实验结果如图3所示。
[0044] 图3表明，随着添加量的增加，猪油氧化的诱导时间不断延长，甘草叶提取物对猪 油油脂的氧化抑制作用明显，且添加量越大，抑制效果越显著。
[0045] 实施例4
[0046] 猪里脊肉，购于广州南沙农贸市场，洗净渐干水分，除去筋膜，绞肉机(3mm孔径的 筛板)绞碎，准确称取lOOg肉糜，按质量分数为ο.05%、0.1 %、0.25%的添加量添加甘草叶 提取物，添加2 % N a C1，充分混合均匀后，4 °C冷藏，同时设置T B Η Q (特下基对苯二酪） (0.02% )和空白对照组，分别在第0、2、4、7、10、15天测定肉糜中油脂氧化TBARS值，实验结 果如表1所不。
[0047] 表1不同储藏时间冷藏肉糜TBARS值(ygMDA/g)
[004引
[0049] 由表1可知，在整个冷藏期间，未添加抗氧化剂的空白组猪肉糜中的油脂发生了明 显的氧化，而TB册和甘草叶提取物能显著抑制猪肉糜冷藏过程中发生的油脂氧化。
[0050] 添加甘草叶提取物（添加量分别为0.05% ,0.1% ,0.25%)的实验组猪肉糜中 TBARS值在整个冷藏期间并无明显增加，且在冷藏末期（15天）与标准油脂抗氧化剂TBHQ (0.02 % )实验组的猪肉糜中TBARS值在同一个数量级。添加0.05 %的甘草叶提取物不会改 变猪肉糜的外观颜色，而添加0.1%和0.25%的甘草叶提取物会逐渐影响猪肉糜的外观品 质。在整个冷藏期间，添加量为0.05%的甘草叶提取物实验组猪肉糜中TBARS值均低于两个 高添加量组(0.1% ,0.25%)，可能是增大添加量除了影响猪肉糜的外观品质(颜色），也因 为更深的颜色会对TBARS值产生一定程度的影响；添加0.05%的甘草叶提取物即能将猪肉 糜在冷藏期间的TBARS值控制在一个较小的范围，结果表明0.05%的甘草叶提取物即能有 效抑制猪肉糜冷藏过程中的油脂氧化作用。
[0化1] 实施例5
[00对猪里脊肉，购于广州南沙农贸市场，洗净渐干水分，除去筋膜，绞肉机(3mm孔径的 筛板)绞碎，准确称取500g肉糜，按质量分数为0.05%，0.1 %的添加量添加甘草叶提取物， 充分混合均匀后，制成直径为40mm，厚度为5mm猪肉饼，一半于-20°C储存，一半于水沸后蒸 煮5min制成熟肉饼，冷却后于-20°C储存。同时设置TB册(0.02% )和空白对照组分别在第0、 20、40、60天测定肉糜中油脂氧化TBARS值，实验结果如表2所示。
[0化3 ] 表2不同储藏时间冷冻猪肉饼TBARS值(ygMDA/g)
[0化4]
[0055] 在整个冻藏期间，对于生猪肉饼，未添加抗氧化剂的空白组猪肉饼中的油脂发生 了明显的氧化，而TBHQ和甘草叶提取物能显著抑制猪肉饼在冻藏过程中发生的油脂氧化。 添加0.05%和0.1%的甘草叶提取物实验组猪肉饼中TBARS值在整个冻藏期间没有明显升 高，且与标准油脂抗氧化剂TBHQ(0.02%)实验组的数值在同一个数量级，数值之间差异不 大，结果表明0.05%的甘草叶提取物即能有效抑制生猪肉饼冻藏过程中的油脂氧化作用。
[0056] 对于熟猪肉饼，未添加抗氧化剂的生猪肉饼在蒸煮过程中发生了油脂氧化，而添 加 TBHQ和甘草叶提取物的熟猪肉饼则无明显的油脂氧化现象发生。添加量为0.1%的甘草 叶提取物能达到与标准油脂抗氧化剂TB册(0.02%)相当的效果。
[0057] 因此，甘草叶提取物不仅能有效抑制生猪肉饼冻藏过程中的油脂氧化，还能有效 抑制生猪肉饼在蒸煮过程中的油脂氧化，改善产品品质。
[0化引实施例6
[0059] 分别取实施例4中冷藏时间为0天和15天的猪肉糜，实施例5中冻藏时间为0天和60 天的生猪肉饼，提取猪肉糜(饼）中肌原纤维蛋白，测定其幾基值和琉基值，结果如图4-图7 所示。
[0060] 由图4-图7可知，添加了甘草叶提取物的猪肉糜/饼(生)在冷/冻藏过程中，猪肉肌 原纤维蛋白琉基值的减少量和幾基值的增加量均明显小于空白组猪肉糜/饼(生），运表明 添加甘草叶提取物能在一定程度上抑制猪肉制品在储藏过程中蛋白的氧化作用，有利于改 善猪肉及其制品的品质。
[0061] 而TB册在猪肉制品冷藏过程中表现出一定的促进蛋白氧化作用，在猪肉制品冻藏 过程中表现出抑制蛋白氧化作用。与TBHQ相比，甘草叶提取物能有效抑制猪肉制品在冷藏 和冻藏过程中蛋白氧化，改善了猪肉制品品质。
[0062] 实施例7
[0063] 采用SPME-GC-MS的方法分析实施例5中猪肉饼在冻藏期间12种风味物质相对含量 的变化，结果如表3-表6所示。
[0064] 与空白组相比，TOHQ(0.02% ; w/w)和甘草叶提取物(0.05 %，0.1 % ; w/w)均能有效 降低生猪肉饼在冻藏期间醒类物质(戊醒、己醒、庚醒、辛醒和壬醒及其他可能由油脂氧 化产生的风味物质（正戊醇、1-辛締-3-醇、乳酸乙醋、己酸甲醋、己酸乙醋和2，3-辛二酬）的 含量;而TB册(0.02%)和甘草叶提取物(0.05% ,0.1%)能降低生猪肉饼在蒸煮过程中醒类 物质W及其他可能由油脂氧化产生的风味物质的含量，且在整个冻藏期间各风味物质相对 含量变化不大。
[0005]综上可知，甘草叶提取物能有效抑制猪肉及其制品在储臧期间的不良风味物质的 产生，显著改善了冷藏与冷冻猪肉制品品质，具有应用于肉制品保藏的潜在优势。
[0066]上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
[0067]
[006引
[0069]
[0070]
[0071]
【主权项】
1. 一种改善冷藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物的制备方法，其特征在于包括以 下步骤：以干燥、粉碎后的光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)叶为原料，用80%乙醇(v/v) 回流提取3次，每次2小时；离心取上清液，合并3次提取的上清液，50°C下减压浓缩去除乙 醇，经XAD-16大孔树脂柱层析纯化后得到甘草叶提取物。2. 根据权利要求1所述的改善冷藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物的制备方法， 其特征在于包括以下步骤： (1) 光果甘草叶清洗干燥后，粉碎过60目筛，加入10-20倍重量的80%乙醇(v/v)加热回 流提取2h，滤渣重复提取两次后，合并提取液，4000rpm离心后过滤得上清液，于50°C下减压 浓缩至成无乙醇的浸膏； (2) 将预处理好的大孔树脂XAD-16填入玻璃层析柱中，以蒸馏水循环平衡4h后静置过 夜;将步骤(1)得到的浸膏用蒸馏水稀释，使其总黄酮浓度达到5-20mg/mL，过XAD-16大孔树 脂层析柱，采用0-50%(v/v)乙醇-水溶液梯度洗脱，收集50%乙醇(v/v)洗脱液，减压浓缩， 冷冻干燥得甘草叶提取物。3. 根据权利要求2所述的改善冷藏和冻藏猪肉制品品质的甘草叶提取物的制备方法， 其特征在于:步骤(2)所述的梯度洗脱依次为:2-5个柱体积蒸馏水洗脱，3-5个柱体积10 % 乙醇(v/v)洗脱，3-5个柱体积30 %乙醇(v/v)洗脱，3-5个柱体积50 %乙醇(v/v)洗脱。4. 甘草叶提取物，其特征在于:是由权利要求1-3任一项所述的方法制备得到。5. 权利要求4所述的甘草叶提取物在改善冷藏和冻藏猪肉制品品质中的应用。
【文档编号】A23B4/09GK105918422SQ201610254791
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月22日
【发明人】赵谋明, 董怡, 林恋竹, 苏国万
【申请人】华南理工大学