烟草近交和杂种植物以及由其制得的烟草产品的制作方法

文档序号：11158782阅读：405来源：国知局

本申请依据35U.S.C.§119(e)要求2014年3月3日提交的美国临时申请号No.61/946,993，2014年3月3日提交的美国临时申请号No.61/947,004，2014年3月3日提交的美国临时申请号No.61/947,013，2014年4月11日提交的美国临时申请号No.61/978,244，2014年4月11日提交的美国临时申请号No.61/978,246，以及2014年4月11日提交的美国临时申请号No.61/978,326的优先权，上述申请的全文通过引用在此引入。

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技术领域

本公开提供了烟草近交植物NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC 1426-11 SRC和NC 1426-17 SRC以及杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC。本公开还提供了这样的植物的部分，以及从这些部分制造的调制的烟草和烟草产品。本公开还包括所提供的植物的后代，其中包括杂种。

背景技术：

烟草(Nicotiana tabacum L.)在美国以及其他国家是重要的经济作物。在烟草植物中，烟碱的N-脱甲基化作用形成去甲烟碱，它在调制的烟叶中是已知作为用于形成N-亚硝基去甲烟碱(“NNN”)的前体的次生生物碱。NNN是调制的烟叶中的不希望的成分。

商业烟草品种中发现的主要生物碱是烟碱，通常占总生物碱池的90-95％。剩余的生物碱部分主要由三种其他吡啶生物碱组成：去甲烟碱、假木贼碱(anabasine)和新烟草碱(anatabine)。去甲烟碱通过烟碱N-脱甲基酶的活性从烟碱直接产生。去甲烟碱通常占总吡啶生物碱池的低于5％，但通过称为“转化”的过程，最初产生非常低量的去甲烟碱的烟草植物产生了通过代谢将大比例的烟叶烟碱“转化”成去甲烟碱的后代。在遗传上发生转化的烟草植物(称为“转化体”)中，绝大部分的去甲烟碱的产生发生在成熟烟叶的衰老和调制的过程中(Wernsman和Matzinger(1968)Tob.Sci.12：226-228)。白肋(burley)烟特别容易发生遗传转化，其中在一些栽培品种中观察到每代高达20％的转化率。

在烟叶调制和加工过程中，一部分的去甲烟碱代谢成化合物NNN，这是已经宣称在实验室动物中致癌的烟草特异性亚硝胺(TSNA)(Hecht和Hoffmann(1990)Cancer Surveys 8：273-294；Hoffmann等(1994)J.Toxicol.Environ.Health 41：1-52；Hecht(1998)Chem.Res.Toxicol.11：559-603)。在烤干的烟草中，发现TSNA主要通过生物碱与传统烤房中存在的直接火焰加热系统形成的燃烧气体中存在的微量氮氧化物的反应来形成(Peele和Gentry(1999)“Formation of Tobacco-specific Nitrosamines in Flue-cured Tobacco(烤干的烟草中烟草特异性亚硝胺的形成)”，CORESTA Meeting，Agro-Phyto Groups，Suzhou，China)。用热交换器改装这些烤房实质性地消除了燃烧气体与风干空气的混合并且显著地降低了以这种方式调制的烟草中TSNA的形成(Boyette和Hamm(2001)Rec.Adv.Tob.Sci.27：17-22)。相反，在风干的白肋烟中，TSNA的形成主要通过烟草生物碱与亚硝酸盐的反应来进行，该过程是通过烟叶携带的微生物来催化的(Bush等，(2001)，Rec.Adv.Tob.Sci.27：23-46)。迄今为止，对于风干的烟草，通过改变调制条件来降低TSNA而同时保持可接受的顾量标准的尝试尚未成功。

技术实现要素：

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏在美国典型培养物保藏中心(ATCC)。

另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC。

在进一步的方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中所述烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中减少的。

在进一步的方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，并且其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，其中该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品包含降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物的部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在另一个方面，本公开包括从来自通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生顾体或细胞产生的组织培养物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生质体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生质体或细胞来自通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是由选自于叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生的，其中该再生植物拥有栽培品种NC1209-23 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1209-23 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1209-23 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中所述F₁植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括的F₁后代种子，其是通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中该烟草栽培品种NC1209-23 SRC的植物是父本。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代种子的容器，所述F₁后代种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括通过栽培种子而产生的F₁后代植物，所述种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，且其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代植物的采收烟叶，该F₁后代植物通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开还包括具有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其中该F₁后代植物通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代植物的采收烟叶，其中在从所述烟叶产生的烟气流中具有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该植物是通过栽培由杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括由F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分通过栽培F₁后代种子而产生，该种子通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育的，和其中该烟草产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分通过栽培F₁后代种子而产生，该种子通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育的，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分通过栽培F₁后代种子而产生，该种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1209-23 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育的，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，并且进一步其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子。

在一个方面，本公开包括烟草植物或其部分，其通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分的采收烟叶或其部分。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的采收烟叶或其部分，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低的。

在进一步的方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中该产品含有降低的量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，其中该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品包含降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物的部分，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在另一个方面，本公开包括从来自通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生顾体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生顾体或细胞来自通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是由选自于叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生的，其中该再生植物拥有栽培品种CMS NC1209-23 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的F₁后代植物。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的F₁后代植物，其中所述F₁植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的F₁后代种子，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的植物。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，其中该烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的植物是母本。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的植物。

在一个方面，本公开还包括F₁后代种子的容器，所述F₁后代种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS的)，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物。

在一个方面，本公开包括通过栽培种子而产生的F₁后代植物，所述种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物。

在一个方面，本公开还包括通过栽培种子而产生的F₁后代植物的采收烟叶，该种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物。

在另一个方面，本公开还包括含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，该F₁后代植物通过栽培由杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物。

在一个方面，本公开还包括在从烟叶产生的烟气流中含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其中该植物通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物。

在一个方面，本公开包括由F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23SRC的种子而产生的烟草植物，和其中该烟草产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，其中该F₁后代种子是通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的，其中该细胞质雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，其中该F₁后代种子是通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，并且进一步其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育的，其中该细胞顾雄性不育植物是烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的植物。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种DH19 SRC的种子，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括烟草植物或其部分，其通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中所述烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低的。

在进一步的方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，其中该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品包含降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物的部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在另一个方面，本公开包括从来自通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生顾体或细胞产生的组织培养物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生质体或细胞来自通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是由选自于叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生的，其中该再生植物拥有栽培品种DH19 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种DH19 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种DH19 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中所述F₁植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该烟草栽培品种DH19 SRC的植物是父本。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中该烟草栽培品种DH19 SRC的植物是母本。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的F₁后代种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代种子的容器，所述F₁后代种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括F₁后代植物，所述F₁后代植物通过栽培按如下获得的种子而产生：杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，并且其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括通过栽培种子而产生的F₁后代植物的采收烟叶，该种子通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开还包括通过栽培种子而产生的含有减少量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，该种子通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括在从烟叶产生的烟气流中含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其中该植物是通过栽培由杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括由F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，其中该种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育的，和其中该烟草产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，其中该种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育的，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育的，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，并且进一步其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在另一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 3 SRC(ATCC保藏号PTA-121055)的种子。该杂种栽培品种NC 3 SRC的种子可通过杂交栽培品种DH19 SRC和CMS NC1209-23 SRC的植物并收集种子获得。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分。

在进一步的方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的烟草植物的采收烟叶或其部分。

在另一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的采收烟叶或其部分，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低的。

在进一步的方面，本公开包括从烟草植物或其部分制备的烟草产品，该烟草植物或其部分是通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从烟草植物或其部分制备的烟草产品，该烟草植物或其部分是通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从烟草植物或其部分制备的烟草产品，该烟草植物或其部分是通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分制备的，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品包含降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的烟草植物的部分，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在进一步的方面，本公开包括从来自通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分的原生顾体或细胞产生的组织培养物，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生顾体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生顾体或细胞来自通过栽培杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分，其中该组织培养物的细胞或原生顾体可以由选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生，其中该再生植物拥有杂种栽培品种NC 3 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的F₁后代植物。

在一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的F₁后代植物，其中该烟草栽培品种NC 3 SRC的植物是母本。

在另一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 3 SRC的F₁后代植物，其中该F1植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 3 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 3 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 3 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物，和第二烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH19 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括无性繁殖烟草栽培品种的植物的方法，所述方法包括下列步骤：(a)从选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的植物收集能够繁殖的组织；(b)培养所述组织以获得增殖的芽；和(c)使所述增殖的芽生根以获得生根的幼苗。

在一个方面，本公开包括用于将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或者DH19 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交BC₁F₁后代植物；和(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次(例如，3、4、5、6、7、8、9、10等等)以产生选择的第四代或更高世代的回交后代，其包含所述所需性状。在另外的方面，步骤(c)和(d)可以连续地重复一次或多次(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10等等)以产生第二代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征的回交BC₁F₁后代植物；和(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞质雄性不育(CMS)。在另外的方面，步骤(c)和(d)可以连续地重复一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中，所述性状是CMS。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)和DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC或DH19 SRC的生理特征的和基本上所有形态特征的回交BC₁F₁后代植物；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞质雄性不育(CMS)并且所述CMS性状从香甜烟草(Nicotiana suaveolens)或粉蓝烟草(Nicotiana glauca)的细胞顾获得。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中，所述性状是CMS并且所述CMS性状从香甜烟草或粉蓝烟草的细胞质获得。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)和DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征的回交BC₁F₁后代植物；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞顾雄性不育(CMS)并且所述CMS性状从香甜烟草的细胞质获得，并且其中所述第二烟草植物选自CMS NC1209-23 SRC或CMS DH19 SRC。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含从香甜烟草的细胞质获得的CMS性状的回交后代，并且其中所述第二烟草植物选自CMS NC1209-23 SRC或CMS DH19 SRC。

在一个方面，本公开包括通过包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法产生的烟草植物，其中所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状及所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征的回交BC₁F₁后代植物；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所需性状的回交后代。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代。

在另一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草栽培品种的植物进行杂交以产生后代植物来产生F₁后代种子，其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制顾量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每株植物叶数、每株植物5-10叶、每株植物11-15叶、每株植物16-21叶及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的回交后代植物，其包含所述所需性状和第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征。

在另一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草栽培品种的植物进行杂交以产生后代植物来产生F₁后代种子，其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制质量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每株植物叶数、每株植物5-10叶、每株植物11-15叶、每株植物16-21叶及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的回交后代植物，其包含所述所需的性状和第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征。

在另一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草栽培品种的植物进行杂交以产生后代植物而产生F₁后代种子，其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制质量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每株植物叶数、每株植物5-10叶、每株植物11-15叶、每株植物16-21叶及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMSNC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的回交后代植物，其包含所述所需的性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH19 SRC的基本上所有生理和形态特征，其中所需性状是抗病性。

在另一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别第一烟草植物，其包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别第一烟草植物，其包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物，其中该第二烟草植物包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别第一烟草植物，其包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物，其中该第二烟草植物不具有选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列，以及该第三烟草植物是包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列的烟草植物。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物，其中该第一烟草植物包含如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中所示的序列。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物，其中，所述第三烟草植物是包含选自核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列的烟草植物。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物，其中该第一烟草植物是烟草栽培品种NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC或烟草栽培品种DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)，和杂种栽培品种NC 3 SRC的植物。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物，其中，所述第三烟草植物是烟草栽培品种NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC、烟草栽培品种DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)或杂种栽培品种NC 3 SRC的植物。

在另一个方面，本公开包括产生包含至少一种(例如，1、2、3、4、5、6、7、8种等等)另外的所需性状的选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC、烟草栽培品种DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的植物的方法，该方法包括以下步骤：(a)从选自于NC1209-23SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的植物收集能够繁殖的组织；和(b)将赋予至少一种所需性状的转基因(核酸构建体)引入该组织中。

在另一个方面，本公开包括产生除草剂抗性烟草植物的方法，所述方法包括用至少一种转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自于烟草栽培品种NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC 1209-23 SRC、烟草栽培品种DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物或其部分，其中该至少一种转基因(核酸构建体)赋予对选自咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵膦、苯氧基丙酸(phenoxy proprionic acid)、L-草丁膦、三嗪、苯甲腈和它们的任意组合的除草剂的抗性。

在另一个方面，本公开包括通过一种方法产生的除草剂抗性的烟草植物，所述方法包括用至少一种转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自于烟草栽培品种NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC、烟草栽培品种DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物或其部分，其中至少一种转基因(核酸构建体)赋予对选自咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵膦、苯氧基丙酸、L-草丁膦、三嗪、苯甲腈和它们的任意组合的除草剂的抗性。

在另一个方面，本公开包括产生抗害虫和/或抗昆虫的烟草植物的方法，其中该方法包括用至少一种赋予害虫和/或昆虫抗性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在进一步的方面，本公开包括通过一种方法产生的抗害虫和/或抗昆虫的烟草植物，所述方法包括用至少一种赋予害虫和/或昆虫抗性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在另一个方面，本公开包括产生抗病的烟草植物的方法，所述方法包括用至少一种赋予抗病性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在进一步的方面，本公开包括通过用至少一种赋予抗病性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 3 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物而产生的抗病性烟草植物。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低。

在进一步的方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，其中该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶和生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物的部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在另一个方面，本公开包括从来自通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生质体从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生。

在一个方面，本公开包括从由原生顾体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生顾体或细胞来自通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是从选自于叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生的，其中该再生植物拥有栽培品种DH98-325-5 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中所述F₁植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中该烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的植物是父本。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括F₁后代种子，其通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代种子的容器，所述F₁后代种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括F₁后代植物，所述F₁后代植物通过栽培由杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，并且其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括通过栽培种子而产生的F₁后代植物的采收烟叶，该种子通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开还包括含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代植物的采收烟叶，其在从所述烟叶产生的烟气流中具有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该植物是通过栽培由杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括由F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育的，和其中该烟草产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开还包括由F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育的，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育的，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，并且进一步其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在另一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 6 SRC(ATCC保藏号PTA-121042)的种子。杂种栽培品种NC 6 SRC的种子可通过杂交栽培品种DH98-325-5 SRC和CMS NC1209-23 SRC的植物并收集种子获得。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分。

在进一步的方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子而产生的烟草植物的采收烟叶或其部分。

在另一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子而产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子而产生的采收烟叶或其部分，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低。

在进一步的方面，本公开包括从通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，其中该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种NC 6 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分制备的，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品包含降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子产生的烟草植物的部分，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在进一步的方面，本公开包括从来自通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生顾体或细胞产生的组织培养物，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生顾体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生顾体或细胞来自通过栽培杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，其中该组织培养物的细胞或原生质体可以由选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生，其中该再生植物拥有杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的F1后代植物。

在一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的F₁后代植物，其中该烟草栽培品种NC 6 SRC的植物是母本。

在另一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 6 SRC的F₁后代植物，其中该F₁植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 6 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子而产生的烟草植物。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 6 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 6 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物和第二烟草植物是通过栽培烟草栽培品种DH98-325-5 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括无性繁殖烟草栽培品种的植物的方法，所述方法包括下列步骤：(a)从选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的植物收集能够繁殖的组织；(b)培养所述组织以获得增殖的芽；和(c)使所述增殖的芽生根以获得生根的幼苗。

在一个方面，本公开包括无性繁殖烟草栽培品种的植物的方法，所述方法包括下列步骤：(a)从选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的植物收集能够繁殖的组织；(b)培养所述组织以获得增殖的芽；(c)使所述增殖的芽生根以获得生根的幼苗；和(d)从所述生根的幼苗生长植物。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交BC₁F₁后代植物；和(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次(例如，3、4、5、6、7、8、9、10次等等)以产生选择的第四代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10次等等)以产生第二代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交BC₁F₁后代植物；和(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞质雄性不育(CMS)。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中，所述性状是CMS。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)和DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的生理特征和基本上所有的形态特征的回交BC₁F₁后代植物；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞顾雄性不育(CMS)并且所述CMS性状从香甜烟草或粉蓝烟草的细胞顾获得。在另外的方面，可以连续重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中，所述性状是CMS并且所述CMS性状从香甜烟草或粉蓝烟草的细胞顾获得。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)和DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交BC₁F₁后代植物，其中；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞顾雄性不育(CMS)并且所述CMS性状从香甜烟草的细胞顾中获得，并且其中所述第二烟草植物选自CMS NC1209-23 SRC或者CMS DH98-325-5 SRC。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含从香甜烟草的细胞质获得的CMS性状的回交后代，并且其中所述第二烟草植物选自CMS NC1209-23 SRC或者CMS DH98-325-5 SRC。

在一个方面，本公开包括通过包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法而产生的烟草植物，其中所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交BC₁F₁后代植物；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所需性状的回交后代。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代。

在另一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生后代植物来产生F₁后代种子；其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制顾量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每植物叶数、每植物5-10叶、每植物11-15叶、每植物16-21叶及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的包含所述所需性状和第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物。

在另一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草栽培品种的植物进行杂交以产生后代植物来产生F₁后代种子，其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制质量、机械采收性、保持能力、烟叶质量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每植物叶数、每植物5-10叶、每植物11-15叶、每植物16-21叶及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的回交后代植物，其包含所述所需的性状和第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征。

在另一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC和DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草栽培品种的植物进行杂交以产生后代植物而产生F₁后代种子，其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制顾量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每植物叶数、每植物5-10叶、每植物11-15叶、每植物16-21叶及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的回交后代植物，其包含所述所需的性状和所述第一烟草栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC或DH98-325-5 SRC的基本上所有的生理和形态特征，其中该所需的性状是抗病性。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物，其中该第一烟草植物是烟草栽培品种NC1209-23 SRC(该品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC或烟草栽培品种DH98-325-5 SRC(该品种的代表性样品种子已以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的植物。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从第二种子生长的植物，其中该第三烟草植物是烟草栽培品种NC1209-23 SRC的植物(该品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC、烟草栽培品种DH98-325-5 SRC(该品种的代表性样品种子已以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)或杂种栽培品种NC 6 SRC。

在另一个方面，本公开包括产生烟草栽培品种的植物的方法，其中该烟草栽培品种选自于NC1209-23 SRC(该品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC、烟草栽培品种DH98-325-5 SRC(该品种的代表性样品种子已以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC，其包含至少一种(例如，1、2、3、4、5、6、7、8种等等)另外的所需性状，该方法包括以下步骤：(a)从选自于NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的植物收集能够繁殖的组织；和(b)将赋予至少一种所需性状的转基因(核酸构建体)引入该组织中。

在另一个方面，本公开包括产生除草剂抗性烟草植物的方法，所述方法包括用至少一种转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自于烟草栽培品种NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC、烟草栽培品种DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物或其部分，其中该至少一种转基因(核酸构建体)赋予对选自咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵膦、苯氧基丙酸、L-草丁膦、三嗪、苯甲腈和它们的任意组合的除草剂的抗性。

在另一个方面，本公开包括通过一种方法产生的除草剂抗性烟草植物，所述方法包括用至少一种转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自于烟草栽培品种NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1209-23 SRC、烟草栽培品种DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物或其部分，其中至少一种转基因(核酸构建体)赋予对选自咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵膦、苯氧基丙酸、L-草丁膦、三嗪、苯甲腈和它们的任意组合的除草剂的抗性。

在另一个方面，本公开包括产生抗害虫和/或抗昆虫的烟草植物的方法，其中该方法包括用至少一种赋予害虫抗性和/或昆虫抗性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在进一步的方面，本公开包括通过一种方法产生的抗害虫和/或抗昆虫的烟草植物，所述方法包括用至少一种赋予害虫抗性和/或昆虫抗性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在另一个方面，本公开包括产生抗病的烟草植物的方法，其中所述方法包括用至少一种赋予抗病性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在进一步的方面，本公开包括一种抗病性的烟草植物，其通过用至少一种赋予抗病性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1209-23 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC)、CMS NC1209-23 SRC、DH98-325-5 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 6 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物而产生。

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC)。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC。

在进一步的方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低。

在进一步的方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，并且其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶和生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物的部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在另一个方面，本公开包括从来自通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生顾体或细胞产生的组织培养物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生质体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生顾体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生顾体或细胞来自通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是由选自于叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生的，其中该再生植物拥有栽培品种NC1426-11 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1426-11 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1426-11 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中所述F₁植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的F₁后代种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中烟草栽培品种NC1426-11 SRC的植物是父本。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代种子的容器，所述F₁后代种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括F₁后代植物，所述F₁后代植物通过栽培由杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，并且其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代植物的采收烟叶，该F₁后代植物通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开还包括含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括在从烟叶产生的烟气流中含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其中该植物是通过栽培通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育的，和其中该烟草产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-11 SRC的种子而产生的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育的，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低。

在进一步的方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，其中该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品包含降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物的部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在另一个方面，本公开包括从来自通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生质体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生质体或细胞来自通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是由选自于叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生的，其中该再生植物拥有栽培品种CMS NC1426-11 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中所述F₁植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的F₁后代种子，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，其中烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的植物是母本。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的，其中该细胞质雄性不育植物是烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在一个方面，本公开还包括F₁后代种子的容器，所述F₁后代种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括F₁后代植物，所述F₁后代植物通过栽培由杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在一个方面，本公开还包括F₁后代植物的采收烟叶，该F₁后代植物通过栽培通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开还包括含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其通过栽培通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在一个方面，本公开还包括在从所述烟叶产生的烟气流中含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其中该植物通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括由F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，和其中该烟草产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的，其中该细胞顾雄性不育植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，和其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育的，其中该细胞质雄性不育植物是烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在另一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的采收烟叶或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低。

在进一步的方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草产品，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，其中该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品包含降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物的部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在另一个方面，本公开包括从来自通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生顾体或细胞产生的组织培养物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生质体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生顾体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生顾体或细胞来自通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是由选自于叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生的，其中该再生植物拥有栽培品种NC1426-17 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1426-17 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1426-17 SRC的F₁后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中所述F₁植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中烟草栽培品种NC1426-17 SRC的植物是父本。

在另一个方面，本公开包括用于产生烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的F₁后代种子，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代种子的容器，其中该种子通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括通过栽培通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子产生的种子而产生的F₁后代植物，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，和其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括F₁后代植物的采收烟叶，该F₁后代植物通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开还包括含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其通过栽培通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开还包括在从烟叶产生的烟气流中含有减少量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)的F₁后代植物的采收烟叶，其中该植物通过栽培通过杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的种子来产生，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在一个方面，本公开包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育的，并且其中该烟草产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开还包括从F₁后代烟草植物或其部分制备的烟草产品，其中所述植物或其部分是通过栽培F₁后代种子而产生的，该F₁后代种子是通过包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子的方法而产生的，其中至少一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC，其中至少一种烟草植物是细胞顾雄性不育的，并且其中该烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 4 SRC(ATCC保藏号PTA-121040)的种子。该杂种栽培品种NC 4 SRC的种子可通过将栽培品种NC1426-17 SRC和CMS NC1426-11 SRC的植物杂交并收集种子而获得。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分。

在进一步的方面，本公开包括通过栽培杂种的烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的烟草植物的采收烟叶或其部分。

在另一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的烟草植物的采收烟叶或其部分，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC 的种子而产生的采收烟叶或其部分，其中该烟叶含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)，其中该降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)是在从所述烟叶产生的烟气流中降低。

在进一步的方面，本公开包括从烟草植物或其部分制备的烟草产品，该烟草植物或其部分是通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的，其中该产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合。

在一个方面，本公开包括从烟草植物或其部分制备的烟草产品，该烟草植物或其部分是通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。

在另一个方面，本公开包括从烟草植物或其部分制备的烟草产品，该烟草植物或其部分是通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的，其中该产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中该产品含有降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在进一步的方面，本公开包括从初级烟草产品制备或产生的次级烟草产品，其中该初级烟草产品是从通过栽培烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分制备的，其中该初级产品选自于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶、生切烟丝和它们的任意组合，和该次级烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。在一些方面，该初级和/或次级产品包含降低量的去甲烟碱和/或N′-亚硝基去甲烟碱(NNN)。

在一个方面，本公开进一步包括产生烟草产品的方法，包括：(a)从杂种、栽培品种或从所述栽培品种产生的杂种的烟草植物或其部分提供调制的烟草，其中所述杂种选自于NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC，其中所述栽培品种选自于NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC和NC1426-17 SRC；和(b)从所述调制的烟草制备烟草产品，其中所述的NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC、NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC的代表性样品种子已经以下列的ATCC保藏号保藏于ATCC：PTA-121049对于NC1209-23 SRC，PTA-121052对于DH19 SRC，PTA-121051对于DH98-325-5 SRC，PTA-121031对于NC1426-11 SRC，PTA-121070对于CMS NC1426-11 SRC，PTA-121032对于NC1426-17 SRC，PTA-121055 对于NC 3 SRC，PTA-121051对于NC 6 SRC和PTA-121040对于NC 4 SRC。

在一个方面，本公开包括通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的烟草植物的部分，其中该部分选自于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄。

在进一步的方面，本公开包括从来自通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分的原生顾体或细胞产生的组织培养物，其中该组织培养物的细胞或原生顾体是从选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生的。

在一个方面，本公开包括从由原生顾体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，该原生顾体或细胞来自通过栽培杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分，其中该组织培养物的细胞或原生顾体可以由选自于叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、茅、茎、荚和叶柄的植物部分产生，其中该再生植物拥有杂种栽培品种NC 4 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征。

在一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的F₁后代植物。

在一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的F₁后代植物，其中该烟草栽培品种NC 4 SRC的植物是母本。

在另一个方面，本公开包括杂种烟草栽培品种NC 4 SRC的F₁后代植物，其中该F₁后代植物是细胞质雄性不育(CMS)的。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 4 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 4 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。

在另一个方面，本公开包括用于产生NC 4 SRC的烟草种子的方法，包括杂交两种烟草植物并收获所得到的烟草种子，其中一种烟草植物是通过栽培烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC，和第二烟草植物是通过栽培烟草栽培品种NC1426-17 SRC的种子而产生的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。

在一个方面，本公开包括无性繁殖烟草栽培品种的植物的方法，所述方法包括下列步骤：(a)从选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的烟草栽培品种的植物收集能够繁殖的组织；(b)培养所述组织以获得增殖的芽；和(c)使所述增殖的芽生根以获得生根的幼苗。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)和NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择回交BC₁F₁后代植物，其包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征；和(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次(例如，3、4、5、6、7、8、9、10次，等等)以产生选择的第四代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10次，等等)以产生第二代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)和NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择回交BC₁F₁后代植物，其包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征；和(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞顾雄性不育(CMS)。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中，所述性状是CMS。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)和NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择回交BC₁F₁后代植物，其包含所需性状和该第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的生理特征和基本上所有的形态特征；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞顾雄性不育(CMS)并且所述CMS性状从香甜烟草或粉蓝烟草的细胞顾获得。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代，其中，所述性状是CMS并且所述CMS性状从香甜烟草或粉蓝烟草的细胞顾获得。

在一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)和NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择回交BC₁F₁后代植物，其包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所述所需性状的回交后代，其中所述性状是细胞顾雄性不育(CMS)并且所述CMS性状从香甜烟草的细胞顾获得，并且其中所述第二烟草植物选自CMS NC1426-11 SRC或CMS NC1426-17 SRC。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含从香甜烟草的细胞顾获得的CMS性状的回交后代，并且其中所述第二烟草植物选自CMS NC1426-11 SRC或CMS NC1426-17 SRC。

在一个方面，本公开包括通过包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法产生的烟草植物，其中所述方法包括：(a)将选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品的种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)和NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草植物进行杂交以产生F₁后代种子；(b)栽培所述F₁后代种子并选择包含所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交BC₁F₁后代种子；(d)栽培所述BC₁F₁后代种子并选择回交BC₁F₁后代植物，其包含所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征；及(e)连续地重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的第四代或更高世代的包含所需性状的回交后代。在另外的方面，可以连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生第二代或更高世代的包含所需性状的回交后代。

在另一个方面，本公开包括通过包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)和NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草栽培种的植物进行杂交以产生后代植物而产生F₁后代种子，其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制顾量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每植物叶数、每植物5-10叶、每植物11-15叶、每植物16-21叶，及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的回交后代植物，其包含所述所需性状和第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征。

在另一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)和NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草栽培种的植物进行杂交以产生后代植物而产生F₁后代种子，其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制顾量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每植物叶数、每植物5-10叶、每植物11-15叶、每植物16-21叶，及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和所述第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的回交后代植物，其包含所述所需的性状和第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征。

在另一个方面，本公开包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，包括：(a)将选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)和NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)的第一烟草栽培品种的植物与包含所需性状的第二烟草栽培种的植物进行杂交以产生后代植物而产生F₁后代种子，其中该所需性状选自于除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可调制性、调制顾量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟、小茎、中茎、大茎、每植物叶数、每植物5-10叶、每植物11-15叶、每植物16-21叶，及其任意组合；(b)将所述F₁后代种子栽培成F₁后代植物并选择具有所述所需性状的F₁后代植物；(c)将所选择的F₁后代植物与所述第一烟草栽培品种的植物进行杂交以产生回交后代植物种子；(d)将所述回交后代植物种子栽培成回交后代植物并选择包含所述所需性状和第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；以及(e)连续地重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的第二代、第三代、第四代或更高世代的回交后代植物，其包含所述所需的性状和所述第一烟草栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC或NC1426-17 SRC的基本上所有的生理和形态特征，其中该所需性状是抗病性。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别第一烟草植物，其包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从该第二种子生长的植物，其中该第一烟草植物是烟草栽培品种NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)或烟草栽培品种NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号ATCC-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的植物。

在一个方面，本公开包括用于产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，包括：识别第一烟草植物，其包含选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列；将第一烟草植物与第二烟草植物进行杂交并收集F₁种子；将从F₁种子生长的植物与第三烟草植物进行杂交并收集第二烟草种子；和识别对于选自于核苷酸序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEO ID NO：11和它们的任意组合的核苷酸序列来说纯合的第二烟草种子或从该第二种子生长的植物，其中该第三烟草植物是烟草栽培品种NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1426-11SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、烟草栽培品种NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号ATCC-121032保藏于ATCC)或杂种栽培品种NC 4 SRC的植物。

在另一个方面，本公开包括产生烟草栽培品种的植物的方法，该烟草栽培品种选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、烟草栽培品种NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子已以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC，其包含至少一种(例如，1、2、3、4、5、6、7、8种，等等)另外的所需性状，该方法包括以下步骤：(a)从选自于NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的烟草栽培品种的植物收集能够繁殖的组织；和(b)将赋予至少一种所需性状的转基因(核酸构建体)引入该组织中。

在另一个方面，本公开包括产生除草剂抗性烟草植物的方法，所述方法包括用至少一种转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自于烟草栽培品种NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、烟草栽培品种NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物或其部分，其中该至少一种转基因(核酸构建体)赋予对选自咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵膦、苯氧基丙酸、L-草丁膦、三嗪、苯甲腈和它们的任意组合的除草剂的抗性。

在另一个方面，本公开包括通过一种方法产生的除草剂抗性的烟草植物，所述方法包括用至少一种转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自于烟草栽培品种NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、烟草栽培品种CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、烟草栽培品种NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物或其部分，其中该至少一种转基因(核酸构建体)赋予对选自咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵膦、苯氧基丙酸、L-草丁膦、三嗪、苯甲腈和它们的任意组合的除草剂的抗性。

在另一个方面，本公开包括产生抗害虫和/或抗昆虫的烟草植物的方法，其中该方法包括用至少一种赋予害虫抗性和/或昆虫抗性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在进一步的方面，本公开包括通过一种方法产生的抗害虫和/或抗昆虫的烟草植物，所述方法包括用至少一种赋予害虫和/或昆虫抗性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在另一个方面，本公开包括产生抗病的烟草植物的方法，所述方法包括用至少一种赋予抗病性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。

在进一步的方面，本公开包括一种抗病性的烟草植物，其通过用至少一种赋予抗病性的转基因(核酸构建体)转化通过栽培选自NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC)、CMS NC1426-11 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC)、NC1426-17 SRC(该栽培品种的代表性样品种子以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC)和杂种栽培品种NC 4 SRC的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物而产生。

序列的简要说明

SEQ ID NO：1示出了cyp82e4 W329Stop核苷酸序列。

SEQ ID NO：2示出了cyp82e5v2 W422Stop核苷酸序列。

SEQ ID NO：3示出了cyp82e4 W329Stop氨基酸序列。

SEQ ID NO：4示出了cyp82e5v2 W422Stop氨基酸序列。

SEQ ID NO：5示出了CYP82E4野生型核苷酸序列。

SEQ ID NO：6示出了CYP82E5v2野生型核苷酸序列。

SEQ ID NO：7示出了CYP82E4野生型氨基酸序列。

SEQ ID NO：8示出了CYP82E5v2野生型氨基酸序列。

SEQ ID NO：9示出了CYP82E10野生型核苷酸序列。

SEQ ID NO：10示出了CYP82E10野生型氨基酸序列。

SEQ ID NO：11示出了CYP82E10 P381S核苷酸序列。

SEQ ID NO：12示出了CYP82E10 P381S氨基酸序列。

所有三种烟草烟碱去甲基酶基因(CYP82E4、CYP82E5v2、CYP82E10)共有公同的结构：被大的内含子分隔的939bp的外显子1和612bp的外显子2，该内含子的长度在三个基因之间不同。见Lewis等人，“Three nicotine demethylase genes mediate nornicotine biosynthesis in Nicotiana tabacum L.：Functional characterization of the CYP82E10 gene，”Phytochemistry，71(2010)，1988-1998。SEQ ID NO：1、2、5、6、9和11示出了CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10的编码序列的野生型或突变体形式。可以理解的是，本文所使用的，包含、具有选自SEQ ID NOs：1、2、5、6、9和11的序列或对于该序列纯合的植物是指在CYP82E4、CYP82E5v2或CYP82E10内源基因座处含有包含SEQ ID NO：1、2、5、6、9或11的编码序列的基因组序列的植物。

具体实施方式

本说明书并不意图是其中可以实施本公开的所有不同的方式或者可以加入到本公开中的全部特征的详细目录。例如，对于一个实施方式所阐明的特征可被合并到其它实施方式中，并且对于一个具体实施方式所阐明的特征可以从该实施方式中删除。因此，本公开考虑，在本公开的一些实施方式中，可排除或省略本文中所阐述的任何特征或特征的组合。此外，根据本公开，对本文所提出的各种实施方式的许多变化和增补对本领域的技术人员是显而易见的，这并不背离本公开。因此，以下描述意在说明本公开的一些具体实施方式，而并不是穷尽地指明其所有排列、组合及其变型。

除非另有定义，在本文中使用的所有技术和科学术语具有本公开所属领域的普通技术人员所通常理解的相同的意义。在本公开的描述中使用的术语仅仅是出于描述特定实施方式的目的，并非意图限制本公开。

本文中引用的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献将其全部内容通过引用并入本文以提供与所述引用出现的句子和/或段落相关的教导。对本文中所采用的技术的陈述旨在指本领域中通常理解的技术，其中包括对那些技术的变化或等同技术的替代，这将是本技术领域的技术人员显而易见的。

除非上下文另有指示，否则，其明确地意味着本文描述的本公开的各种特征可以以任何组合使用。此外，本发明还预期在本公开的一些实施方式中，本文中所阐述的任何特征或特征组合可被排除或省略。举例说明，如果本说明书指出组合物包含组分A、B和C，它明确地表明，A、B或C的任何一种或者它们的组合可以被单独或以任何组合方式省略和放弃。

当在本发明的描述和随附的权利要求书中使用时，单数形式“一”、“一个”和“该”意在包括其复数形式，除非上下文清楚地指明不是如此。

如本文中所使用的，“和/或”是指并涵盖一个或多个所列相关项的任何的和所有的可能组合，并且当以可选方式(“或”)解释时，不包含组合。

当在本文中用于指称可测量的值如剂量或时间段等时，术语“约”意味着涵盖所指定量的±20％、±10％、±5％、±1％、±0.5％或甚至±0.1％的变化。

如本文所用的，短语诸如“在X和Y之间”和“在大约X和Y之间”应被解释为包括X和Y。如本文所用的，短语诸如“在大约X和Y之间”表示“在大约X和大约Y之间”和短语诸如“从大约X至Y”的意思是“从大约X至大约Y”。

本文中使用的术语“包括”、“包含”和“含有”指明存在所陈述的特征、整数、步骤、操作、元件和/或组分，但不排除一种或多种其它的特征、整数、步骤、操作、元件、组分和/或它们的群组的存在或添加。

如本文中所使用的过渡性短语“基本上由......组成”表示权利要求的范围应被解释为包含该权利要求中所述的指定材料或步骤和不实质上影响所要求的公开的基本和新颖特征的那些材料或步骤。因此，当在本公开的权利要求中使用时，术语“基本上由......组成”并不意在被解释为等同于“包含”。

在多核苷酸序列的语境中(例如，本发明的重组多核苷酸和/或表达盒)的“引入”是指以该多核苷酸序列获得进入细胞内部的方式将多核苷酸序列呈现给植物、植物部分和/或植物细胞。当要引入超过一种多核苷酸序列时，这些多核苷酸序列可以作为单个多核苷酸或核酸构建体的部分，或作为单独的多核苷酸或核酸构建体组装，和可以位于相同的或不同的转化载体上。因此，这些多核苷酸可以在单一的转化事件中、在单独的转化事件中或例如，作为育种方案的部分被引入到植物细胞中。因此，如本文所用的术语“转化”指的是将异源核酸引入细胞中。细胞的转化可以是稳定的或瞬时的。因此，在一些实施方式中，本公开的植物细胞、植物部分或植物可以用本公开的重组多核苷酸稳定地转化。在其它的实施方式中，本公开的植物细胞、植物部分或植物可以用本公开的重组多核苷酸瞬时地转化。

“烟草产品”被定义为“供人类使用或消费的从烟草制成或衍生的任何产品，其中包括烟草产品的任何成分、部分或附件(除了制造烟草产品的成分、部分或附件中使用的烟草以外的原料)”(FD&C Act；21U.S.C.321的201节)。标签和包装是烟草产品的部分。

术语“烟碱转化率”、“烟碱转化百分比”和“烟碱转化百分率”可互换使用。样品中的烟碱去甲基化百分比是通过用去甲烟碱的水平除以在样品中测量的烟碱和去甲烟碱的综合水平，并乘以100来计算的。

NC1209-23 SRC

在一个方面，本公开提供了来自NC1209-23 SRC的烟草栽培品种和其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC。在另一个方面，本公开提供了通过栽培NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分。在进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种NC1209-23 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。

尽管不受方法的限制，NC1209-23 SRC是将三个突变的CYP82E基因引入白肋烟草栽培品种NC1209-23中的结果。这三个基因是在Lewis等(三个烟碱脱甲基酶基因介导烟草中的去甲烟碱生物合成：CYP82E10基因的功能性表征(Three nicotine demethylase genes mediate nornicotine biosynthesis in Nicotiana tabacum L.：Functional characterization of the CYP82E10 gene)，Phytochemistry 71(2010)1988-1998)中被称为325-6#775的突变CYP82E4基因(SEQ ID NO：1，其示出了cyp82e4 W329Stop，其全部内容通过引用并入本文)，在Lewis等(同上)中被称为325-6#1-13的突变CYP82E5v2(SEQ ID NO：2，其示出了cyp82e5v2 W422Stop，其全部内容通过引用并入本文)和在Lewis等(同上)中被称为325-6#1041的突变CYP82E10(SEQ ID NO：11，其示出了cyp82e10 P381S，其全部内容通过引用并入本文)。突变cyp82e4 W329Stop和cyp82c5v2 W422Stop产生截短的蛋白质而cyp82E10 P381S产生无功能的蛋白顾。将cyp82e4 W329Stop(“e4”)、cyp82c5v2 W422Stop(“e5”)和cyp82e10 P381S(“e10”)突变从Lewis等(同上)的表4中所列的强转化体白肋背景，DH98-325-6株系的e4e4|e5e5|e10e10三重突变体引入到白肋烟草栽培品种NC1209-23背景中。

NC1209-23 SRC是与作为轮回亲本的白肋栽培品种NC1209-23回交7次，然后进行两轮自交以针对cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变的纯合性进行选择而产生BC₇F₃植物(NC1209-23 SRC)的结果，其中NC1209-23的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的(例如，cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)等位基因替换。

NC1209-23 SRC后代植物具有与NC1209-23至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。NC1209-23 SRC植物表现出低的去甲烟碱水平和产生具有在调制、存储和吸烟过程中积累衍生的NNN的降低潜能的烟叶。

CMS NC1209-23 SRC

在其它的方面，本公开还提供了来自CMS NC1209-23 SRC的烟草栽培品种和其部分。在进一步的方面，本公开提供了通过栽培CMS NC1209-23 SRC的种子产生的烟草植物或其部分。在再进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种CMS NC1209-23 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。CMS NC1209-23 SRC是NC1209-23 SRC的雄性不育(CMS)形式(CMS NC1209-23 SRC)，其通过CMS NC1209-23植物作为母本与NC1209-23 SRC BC₆F₁的花粉杂交以产生对于所有三个突变杂合的雄性不育植物而产生。CMS NC1209-23 x NC1209-23 SRC BC₆F₁杂交的CMS后代植物是雄性不育的。对多个CMS NC1209-23 x NC1209-23 SRC BC₆F₁ x CMS植物(例如，CMS F₁后代植物)筛选cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变，以识别对于所有三个突变杂合的植物。从这一杂交产生的单一雄性不育植物作为母本与NC1209-23 SRC回交以制备BC₇F₁CMS后代。通过基因分型识别对于cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变纯合的BC₇F₁ CMS后代，并命名为CMS NC1209-23 SRC。由于CMS NC1209-23 SRC株系是雄性不育的，它通过用NC1209-23 SRC授粉维持。NC1209-23 SRC作为父本与CMS NC1209-23 SRC杂交以制备CMS NC1209-23 SRC F₁后代植物。

CMS NC1209-23 SRC和CMS NC1209-23 SRC F₁后代植物具有与NC1209-23至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。CMS NC1209-23 SRC和CMS NC1209-23 SRC F₁后代植物显示出低的去甲烟碱水平和产生具有在调制、存储和吸烟过程中积累衍生的NNN的降低潜能的烟叶。

DH19 SRC

在一些方面，本公开提供了来自DH19 SRC的烟草栽培品种和其部分，其中该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。在其它的方面，本公开提供了通过栽培DH19 SRC的种子产生的烟草植物或其部分。在再进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种DH19 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。尽管不受方法的限制，DH19 SRC是引入来自DH98-325-6的cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变的结果。然后将源自DH19和DH98-325-6之间的杂交且对于每个突变杂合的F₁个体与DH19回交七次以产生BC₇F₁后代。对于所有三个突变杂合的BC₇F₁个体自花授粉以产生对于识别的所有三种突变纯合的BC₇F₂种子和个体。单个BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃(DH19 SRC)，其中DH19的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(例如，cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替换。

DH19 SRC具有与DH19至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。DH19 SRC显示出低的去甲烟碱水平和产生具有在调制、存储和吸烟过程中积累衍生的NNN的降低潜能的烟叶。

NC 3 SRC

在其它方面，本公开提供了来自NC 3 SRC的烟草栽培品种和其部分。在另一个方面，本公开提供了通过栽培NC 3 SRC的种子产生的烟草植物或其部分。在进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种NC 3 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。

尽管不受方法的限制，NC 3 SRC通过用DH19 SRC的花粉给CMS NC1209-23 SRC的植物授粉而产生。再次，不受任何特定的科学理论的限制，cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变全部编码具有降低的将烟碱转化成去甲烟碱的能力或消除该能力的蛋白质。NC 3 SRC具有与白肋烟草栽培品种NC1209-23 x DH19(其是通过用可繁殖育种系DH19产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1209-23的植物授粉产生的杂种)至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。NC 3 SRC显示出低的去甲烟碱和不发生高的去甲烟碱转化。

DH98-325-5 SRC

在一些方面，本公开提供了来自DH98-325-5 SRC的烟草栽培品种和其部分，其中该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。在其它的方面，本公开提供了通过栽培DH98-325-5 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分。在再进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种DH98-325-5 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。尽管不受方法的限制，DH98-325-5 SRC是引入来自DH98-325-6的cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变的结果。然后将源自DH98-325-5和DH98-325-6之间的杂交且对于每个突变杂合的F₁个体与DH98-325-5回交七次以产生BC₇F₁后代。对于所有三个突变杂合的BC₇F₁个体自花授粉以产生对于识别的所有三种突变纯合的BC₇F₂种子和个体。单个BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃(DH98-325-5 SRC)，其中DH98-325-5的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(例如，cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替换。

DH98-325-5 SRC具有与DH98-325-5至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。DH98-325-5 SRC显示出低的去甲烟碱水平和产生具有在调制、存储和吸烟过程中积累衍生的NNN的降低潜能的烟叶。

NC 6 SRC

在其它方面，本公开提供了来自NC 6 SRC的烟草栽培品种和其部分。在另一个方面，本公开提供了通过栽培NC 6 SRC的种子产生的烟草植物或其部分。在进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种NC 6 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。

尽管不受方法的限制，NC 6 SRC通过用DH98-325-5 SRC的花粉给CMS NC1209-23 SRC的植物授粉而产生。再次，不受任何特定的科学理论的限制，cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变全部编码具有降低的烟碱转化成去甲烟碱的能力或消除该能力的蛋白顾。NC 6 SRC具有与白肋烟草栽培品种NC1209-23 x DH98-325-5(其是通过用可繁殖育种系DH98-325-5产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1209-23的植物授粉产生的杂种)至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。NC 6 SRC显示出低的去甲烟碱和不发生高的去甲烟碱转化。

NC1426-11 SRC

在一些方面，本公开提供了来自NC1426-11 SRC的烟草栽培品种和其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC。在另一个方面，本公开提供了通过栽培NC1426-11 SRC的种子而产生的烟草植物或其部分。在进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种NC1426-11 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。

尽管不受方法的限制，NC1426-11 SRC是将三种突变的CYP82E基因引入白肋烟草栽培品种NC1426-11中的结果。这三个基因是在Lewis等(三个烟碱脱甲基酶基因介导烟草中的去甲烟碱生物合成：CYP82E10基因的功能性表征(Three nicotine demethylase genes mediate nornicotine biosynthesis in Nicotiana tabacum L.：Functional characterization of the CYP82E10 gene)，Phytochemistry 71(2010)1988-1998)中被称为325-6#775的突变CYP82E4基因(SEQ ID NO：1，其示出了cyp82e4 W329Stop，其全部内容通过引用并入本文)、在Lewis等(同上)中被称为325-6#1-13的突变CYP82E5v2(SEQ ID NO：2，其示出了cyp82e5v2 W422Stop，其全部内容通过引用并入本文)和在Lewis等(同上)中被称为325-6#1041的突变CYP82E10(SEQ ID NO：11，其示出了cyp82e10 P381S，其全部内容通过引用并入本文)。突变cyp82e4 W329Stop和cyp82e5v2 W422Stop产生截短的蛋白顾而cyp82E10 P381S产生无功能的蛋白质。将cyp82e4 W329Stop(“e4”)、cyp82e5v2 W422Stop(“e5”)和cyp82e10 P381S(“e10”)突变从Lewis等(同上)的表4中所列的强转化体白肋背景，DH98-325-6株系的e4e4|e5e5|e10e10三重突变体引入到白肋烟草栽培品种NC1426-11背景中。

NC1426-11 SRC是与作为轮回亲本的白肋栽培品种NC1426-11回交7次，随后进行两轮自交以针对cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变的纯合性进行选择而产生BC₇F₃植物(NC1426-11 SRC)的结果，其中NC1426-11的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(例如，cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)等位基因替换。

NC1426-11 SRC后代植物具有与NC1426-11至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。NC1426-11 SRC植物表现出低的去甲烟碱水平和产生具有在调制、存储和吸烟过程中积累衍生的NNN的降低潜能的烟叶。

CMS NC1426-11 SRC

在其它的方面，本公开还提供了来自CMS NC1426-11 SRC的烟草栽培品种和其部分，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。在进一步的方面，本公开提供了通过栽培CMS NC1426-11 SRC的种子产生的烟草植物或其部分。在再进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种CMS NC1426-11 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。CMS NC1426-11 SRC是NC1426-11的雄性不育(CMS)形式(CMS NC1426-11 SRC)，其通过CMS NC1426-11植物作为母本用NC1426-11 SRC BC₆F₁的花粉杂交以产生对于所有三个突变杂合的雄性不育植物而产生。CMS NC1426-11 x NC1426-11 SRC BC₆F₁的CMS后代植物是雄性不育的。对多个CMS NC1426-11 x NC1426-11 SRC BC₆F₁ x CMS植物(例如，CMS F₁后代植物)筛选cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变，以识别对于所有三个突变杂合的植物。从这一杂交产生的单一雄性不育植物作为母本与NC1426-11 SRC回交以制备BC₇F₁ CMS后代。通过基因分型识别对于cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变纯合的BC₇F₁ CMS后代，并命名为CMS NC1426-11 SRC。由于CMS NC1426-11 SRC株系是雄性不育的，它通过用NC1426-11 SRC授粉维持。NC1426-11 SRC作为父本与CMS NC1426-11 SRC杂交以制备CMS NC1426-11 SRC F₁后代植物。

CMS NC1426-11 SRC和CMS NC1426-11 SRC的F₁后代植物具有与NC1426-11至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。CMS NC1426-11 SRC和CMS NC1426-11 SRC的F₁后代植物显示出低的去甲烟碱水平和产生具有在调制、存储和吸烟过程中积累衍生的NNN的降低潜能的烟叶。

NC1426-17 SRC

在一些方面，本公开提供了来自NC1426-17 SRC的烟草栽培品种和其部分，其中该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。在其它方面，本公开提供了通过栽培NC1426-17 SRC的种子产生的烟草植物或其部分。在再进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种NC1426-17 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。尽管不受方法的限制，NC1426-17 SRC是引入来自DH98-325-6的cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变的结果。然后将源自NC1426-17和DH98-325-6之间的杂交且对于每个突变杂合的F₁个体与NC1426-17回交七次以产生BC₇F₁后代。对于所有三个突变杂合的BC₇F₁个体自花授粉以产生对于识别的所有三种突变纯合的BC₇F₂种子和个体。单个BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃(NC1426-17 SRC)，其中NC1426-17的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(例如，cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替换。

NC1426-17 SRC具有与NC1426-17至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。NC1426-17 SRC显示出低的去甲烟碱水平和产生具有在调制、存储和吸烟过程中积累衍生的NNN的降低潜能的烟叶。

NC 4 SRC

在其它方面，本公开提供了来自NC 4 SRC的烟草栽培品种和其部分。在另一个方面，本公开提供了通过栽培NC 4 SRC的种子产生的烟草植物或其部分。在进一步的方面，本公开的植物可以包括具有栽培品种NC 4 SRC的所有的或基本上所有的形态和生理特征的植物。

尽管不受方法的限制，NC 4 SRC是通过用NC1426-17 SRC的花粉给CMS NC1426-11 SRC的植物授粉而产生的。再次，不受任何特定的科学理论的限制，cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变全部编码具有降低的烟碱转化去甲烟碱的能力或消除的能力的蛋白质。NC 4 SRC具有与白肋烟草栽培品种NC 4LC(其是通过用可繁殖育种系NC1426-17产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1426-11的植物授粉产生的杂种)至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。NC 4 SRC显示出低的去甲烟碱和不发生高的去甲烟碱转化。

其他植物

在一些方面，本公开提供了通过杂交两种亲本烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的烟草种子，其中至少一种亲本烟草植物是NC1209-23 SRC。在一个方面，NC1209-23 SRC是父本植物。在另一个方面，CMS NC1209-23 SRC是母本植物。本公开的一个方面提供在cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10基因座分别对于SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：11纯合的烟草植物，并且其与NC1209-23或CMS NC1209-23共有大于约75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％相似的遗传背景。在一个方面，本公开的植物提供了大约或大于约50％、75％或者100％的后代的遗传学在cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10基因座处分别对于SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：11是纯合的。在一个方面，本公开的植物具有与NC1209-23或CMS NC1209-23至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。在另一个方面，本公开的植物显示出低的去甲烟碱并且不发生高的去甲烟碱转化。在一个方面，本发明的植物是抗镰刀菌枯萎病的母本或父本植物的后代植物。在另一个方面，NC1209-23 SRC的植物具有对黑胫病的低抗性和对细菌性萎蔫病的适度抗性。

本公开包括通过杂交两种亲本烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的烟草种子，其中至少一种亲本烟草植物是NC1209-23 SRC。在一个方面，NC1209-23 SRC是父本植物。在另一个方面，CMS NC1209-23 SRC是母本植物。本公开的一个方面提供了在cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10基因座处分别对于SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：11纯合的烟草植物，并且其共有与NC1209-23或CMS NC1209-23大于约75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％相似的遗传背景。在一个方面，本公开的植物提供的大约或大于约50％、75％或者100％的后代的遗传学在cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10基因座处分别对于SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：11是纯合的。在一个方面，本公开的植物与NC1209-23 SRC和CMS NC1209-23 SRC具有至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。在另一个方面，本公开的植物显示出低的去甲烟碱并且不发生高的去甲烟碱转化。在一个方面，本发明的植物是抗镰刀菌枯萎病的母本或父本植物的后代植物。在另一个方面，NC 3 SRC的植物具有对黑胫病的适度抗性和对细菌性萎蔫病的适度抗性。在另一个方面，NC 6 SRC的植物具有对黑胫病的适度抗性和对细菌性萎蔫病的适度抗性。

在一些方面，本公开提供了通过杂交两种亲本烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的烟草种子，其中至少一种亲本烟草植物是NC1426-11 SRC。在一个方面，NC1426-11 SRC是父本植物。在另一个方面，CMS NC1426-11 SRC是母本植物。本公开的一个方面提供了在cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10基因座处分别对于SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：11纯合的烟草植物，并且其共有与NC1426-11或CMS NC1426-11大于约75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％相似的遗传背景。在一个方面，本公开的植物提供的大约或大于约50％、75％或者100％的后代的遗传学在cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10基因座处分别对于SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：11是纯合的。在一个方面，本公开的植物具有与NC1426-11或CMS NC1426-11至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。在另一个方面，本公开的植物显示出低的去甲烟碱并且不发生高的去甲烟碱转化。在一个方面，本发明的植物是抗镰刀菌枯萎病的母本或父本植物的后代植物。在另一个方面，NC1426-11 SRC的植物具有对黑胫病的低抗性和对细菌性萎蔫病的适度抗性。

本公开包括通过杂交两种亲本烟草植物并收获所得到的烟草种子而产生的烟草种子，其中至少一种亲本烟草植物是NC1426-11 SRC。在一个方面，NC1426-11 SRC是父本植物。在另一个方面，CMS NC1426-11 SRC是母本植物。本公开的一个方面提供了在cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10基因座处分别对于SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：11纯合的烟草植物，并且其共有与NC1426-11或CMS NC1426-11大于约75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％相似的遗传背景。在一个方面，本公开的植物提供的大约或大于约50％、75％或者1O0％的后代的遗传学在cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10基因座处分别对于SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：11是纯合的。在一个方面，本公开的植物具有与NC1426-11 SRC和CMS NC1426-11 SRC至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似的遗传背景。在另一个方面，本公开的植物显示出低的去甲烟碱并且不发生高的去甲烟碱转化。在一个方面，本发明的植物是抗镰刀菌枯萎病的母本或父本植物的后代植物。在另一个方面，NC 4 SRC的植物具有对黑胫病的适度抗性和对细菌性萎蔫病的适度抗性。

在一个方面，本公开的植物是具有适度高产潜力的中-晚熟品种。在另一个方面，本公开的植物提供了广范的重要农艺学特征。在进一步的方面中，本公开的植物具有1、2、3、4或更多种性状，包括对黑胫病的适度抗性、对青霉病的一定耐受性、黑根腐病抗性和对常见病毒疾病的抗性。在另一个方面，本公开的植物具有青霉病耐受性和对两类黑胫病的4级抗性以及高的根腐病抗性。在一个方面，本公开的植物例如NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC及杂种栽培品种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC缺乏镰刀菌枯萎病抗性。在另一个方面，本公开的植物抗镰刀菌枯萎病。在另一个方面，本公开的植物具有对黑胫病的低抗性和对细菌性萎蔫病的适度抗性。

在一个方面，本公开的植物具有降低的或消除的将烟碱转化变成去甲烟碱的能力。在一个方面，烟碱转化百分率低于NC1209-23、DH19、DH98-325-5或杂种栽培品种NC 3 LC或NC 6 LC中所发现的转化百分率的约75％、70％、60％、50％或25％。在本公开的植物(包括NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC及杂种栽培品种NC 3 SRC和NC 6 SRC)中的烟碱转化率可以低于约4％、约3.5％、约3％、约2.5％、约2％、约1.5％或约1％或者其中的任何范围。而在其它方面，本公开的植物(包括NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC及杂种栽培品种NC 3 SRC和NC 6 SRC)中的烟碱转化率可以在从约3％至约1％、约3％至约0.5％或约2％至约0.5％的范围内。在一个优选的方面，烟碱转化百分率低于没有cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82c10 P381S突变的NC1209-23、DH19、DH98-325-5或者杂种栽培品种NC 3 LC或NC 6 LC中所发现的转化百分率的约25％、10％、5％或2％。

在一个方面，本公开的植物具有降低的或消除的将烟碱转化成去甲烟碱的能力。在一个方面，烟碱转化百分率低于CMS NC1426-11、NC1426-17或杂种栽培品种NC 4 LC中所发现的转化百分率的约75％、70％、60％、50％或25％。在本公开的植物(包括NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种栽培品种NC 4 SRC4)中的烟碱转化率可以低于约4％、约3.5％、约3％、约2.5％、约2％、约1.5％或约1％或者其中的任何范围。而在其它方面，本公开的植物(其中包括NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种栽培品种NC 4 SRC4)中的烟碱转化率可以在从约3％至约1％、约3％至约0.5％或约2％至约0.5％的范围内。在一个优选的方面，烟碱转化百分率低于没有cyp82e4 W329Stop、cypp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变的NC1426-11、NC1426-17或杂种栽培品种NC 4 LC中所发现的转化百分率的约25％、10％、5％或2％。

在一个方面，本公开的烟草植物可以具有约3.5、3.25、3.0或2.75％或者更低的烟碱转化率。在另一个方面，本公开的烟草植物的烟碱转化率可以为约4.0、3.9、3.8、3.7、3.6、3.5、3.4、3.3、3.2、3.1、3.0、2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5％或更低或者其中的任何范围。在另一个方面，本公开的烟草植物的烟碱转化率可以为约2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6％或更低或者其中的任何范围。在另一个方面，该烟碱转化率可以在从约0.5％至约0.9％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2.0％、约0.5％至约2.5％、约0.5％至约2.75％和约0.5％至约3.0％的范围内。在另一个方面，烟碱转化率可以在从约1.0％至约1.5％、约1.0％至约1.75％、约1.0％至约2.0％、约1.0％至约2.5％、约1.0％至约2.75％或约1.0％至约3.0％的范围内。在另一个方面，在本公开的植物中的烟碱转化率可以低于约2.9、2.75、2.5、2.25、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1或1.0％或者其中的任何范围。

在另一个方面，本公开的烟草植物通常具有小于约0.10％干重的降低量的去甲烟碱。例如，在这样的植物中的去甲烟碱含量可以是约1.2、1.0、0.7、0.5、0.4、0.2、0.1、0.09、0.085、0.08、0.075、0.07、0.065、0.06、0.055、0.05、0.045、0.04、0.035、0.025、0.01、0.009、0.0075、0.005、0.0025、0.001、0.0009、0.00075、0.0005、0.00025或0.0001％干重或者不可检测的或者其中的任何范围。在另一个方面，去甲烟碱含量可以小于约1.2、1.0、0.9、0.8、0.7、0.5、0.4、0.2、0.1、0.075、0.05、0.025、0.01、0.009、0.0075、0.005、0.0025、0.001、0.0009、0.00075、0.0005、0.00025或0.0001％干重或者其中的任何范围。在另一个方面，在这样的植物中的去甲烟碱含量可以在从约1.2％至约1.0％、约0.7％至约0.5％、约0.4％至约0.2％、约0.1％至约0.075％、约0.05％至约0.025％、约0.01％至约0.0075％、约0.005％至约0.0025％、约0.001％至约0.00075％、约0.0005％至约0.00025％或者约0.0005％至约0.0001％干重的范围内。在一些方面，与NC1209-23、DH19、DH98-325-5、NC1426-11、NC1426-17或者杂种栽培品种NC 3 LC、NC 6 LC或NC 4 LC的商业种源(seedlot)相比，在本公开的植物中去甲烟碱在植物的总生物碱中的百分比相对较低。在一些方面，在本公开的植物中的去甲烟碱可以是总生物碱的约2％至约1％、低于总生物碱的3％、约2％、约1.5％、约1％或0.75％。可以使用来自本公开的植物和植物部分的烟草植物材料来制造具有降低的亚硝胺含量的烟草产品。因此，在一些实施方式中，使用来自本公开的植物和植物部分的烟草植物材料制造的烟草产品可以含有少于约3mg/g的降低量的去甲烟碱。例如，在这样的产品中的去甲烟碱含量可以是3.0mg/g、2.5mg/g、2.0mg/g、1.5mg/g、1.0mg/g、750μg/g、500μg/g、250μg/g、100μg/g、75μg/g、50μg/g、25μg/g、10μg/g、5μg/g、1μg/g、750ng/g、500ng/g、250ng/g、100ng/g、75ng/g、50ng/g、25ng/g、10ng/g、5ng/g、1ng/g、750pg/g、500pg/g、250pg/g、100pg/g、75pg/g、50pg/g、25pg/g、10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g等等或者不可检测的或者其中的任何范围。该烟草产品通常具有小于约10Pg/g的降低量的NNN。例如，在这样的产品中NNN含量可以为约10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g等等或者不可检测的或者其中的任何范围。在本公开的植物中包含的次生生物碱相对于总生物碱含量的百分比与来自于NC1209-23、DH19、DH98-325-5、NC1426-11、NC1426-17或者杂种栽培品种NC 3 LC、NC 6 LC或NC 4 LC的商业种源相比可能没有统计学差异。

两种近交烟草品种或两种杂种烟草品种之间的差异可以使用统计学方法来评估。统计学分析包括计算平均值、确定变异源的统计学显著性以及计算适当的方差分量。用于确定统计学显著性的方法在本领域中是已知的。统计软件是可以获得的，例如SAS的PROC GLM函数。显著性一般表现为“p-值”。统计学显著的p-值低于0.10。在优选的方面，p-值低于或等于0.05。在另一个方面，p-值为0.04或更低、0.03或更低或者0.02或更低。而在另一个方面，统计学显著的值低于0.01。而在另一个方面，它可以低于0.009、低于0.008、低于0.007、低于0.006、低于0.005、低于0.004、低于0.003、低于0.002或低于0.001。

cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因纯合的本公开的烟草植物与具有野生型烟碱去甲基酶CYP82E4、E5和E10基因的相应对照低转化体植物相比具有统计学显著更低的回复率。此外，纯合的CYP82E4、CYP82E5和CYP82E10三重突变体烟草植物具有低于约2.0％，例如不可检测至约2.0％、1.9％、1.8％、1.7％、1.6％、1.5％、1.4％、1.3％、1.2％、1.1％、1.0％、0.9％、0.8％或其中的任何范围的去甲烟碱转化百分率。在一些方面，三重突变体烟草植物具有从例如，约1.0％至2.0％、0.8％至1.8％、0.8％至2.0％或1.0％至2.0％的范围内的去甲烟碱转化百分率。

可以使用本领域中已知的方法(例如气相色谱)在乙烯处理的叶中测量烟碱和去甲烟碱。通过用样品中测量的去甲烟碱水平除以烟碱和去甲烟碱的总水平并乘以100来计算样品中烟碱去甲基化的百分比。在来自于本公开植物的样品中，烟碱去甲基化百分比为来自于从NC1209-23、DH19、DH98-325-5、NC1426-11、NC1426-17或杂种栽培品种NC 3 LC、NC 6 LC或NC 4 LC的商业种源生长的个体植物的样品的约50、40、30、20或10％。

在一个方面，本公开的烟草植物具有约73、约72、约71、约70、约69、约68、约67或约66或者其中的任何范围的USDA顾量指数。在一个方面，本公开的烟草植物具有约65的USDA顾量指数。在另一个方面，质量指数可以为至少约55、60、62.5或更高或者其中的任何范围。在另一个方面，本公开的烟草植物可以具有约60至约65、约60至约70、约62.5至约65、约62.5至约70或约65至约70的范围内的质量指数。

本公开的植物(包括NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种栽培品种NC 3 SRC、NC 6 SRC或NC 4 SRC)可以具有任何产量潜力，包括高产(例如高于3000lbs/A)、中等高产(例如2200-3000lbs/A)和中产(例如低于2000lbs/A)的产量潜力。

在另一个方面，本公开还提供了从NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC或杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC植物的种子生长的植物，其中从由所述种子生长的烟草植物获得的生物碱具有降低的去甲烟碱，还提供了来自于这样的植物的植物部分和组织培养物，这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如NC1209-23 SRC的ATCC保藏号为PTA 121049，DH19 SRC的ATCC保藏号为PTA 121052，和DH98-325-5 SRC的ATCC保藏号为PTA 121051。杂种栽培品种NC 3 SRC的种子可通过杂交栽培品种DH19 SRC和CMS NC1209-23 SRC的植物并收集种子而获得。杂种栽培品种NC 6 SRC的种子可通过杂交栽培品种DH98-325-5 SRC和CMS NC1209-23 SRC的植物和收集种子而获得。

本公开的一个方面提供了栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC及杂种栽培品种NC 3 SRC和NC 6 SRC的部分。栽培品种的部分可以包含任何的植物部分，并包括但不限于栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC及杂种栽培品种NC 3 SRC和NC 6 SRC的叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、根、根尖、花药、花、胚珠、芽、茎、秆、木髓和蒴果、包含组织的组织培养物、愈伤组织、细胞或原生质体。在另一个方面，本公开提供了来自于栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC及杂种栽培品种NC 3 SRC和NC 6 SRC衍生烟草植物的杂种的部分。而在另一个方面，本公开提供了来自于上述植物和组织培养物的遗传修饰(例如通过常规育种或遗传工程技术)的形式的部分。

在另一方面，本公开还提供了从NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 4 SRC植物的种子生长的植物(其中获自从所述种子生长的烟草植物的生物碱具有降低的去甲烟碱)以及来自于这样的植物的植物部分和组织培养物，这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如NC1426-11 SRC的ATCC保藏号为PTA 121031，CMS NC1426-11 SRC的ATCC保藏号为PTA 121070，NC1426-17 SRC的ATCC保藏号为PTA 121032。杂种栽培品种NC 4 SRC的种子可通过杂交栽培品种NC1426-17 SRC和CMS NC1426-11 SRC的植物和收集种子获得。

本公开的一个方面提供了栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种栽培品种NC 4 SRC的部分。栽培品种的部分可以包括任何植物部分，且包括但不限栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种栽培品种NC 4 SRC的叶、花粉、胚茅、子叶、胚轴、根、根尖、花药、花、胚珠、芽、茎、秆、木髓和蒴果、包含组织的组织培养物、愈伤组织、细胞或原生顾体。在另一个方面，本公开提供了来自栽培品种NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种栽培品种NC 4 SRC衍生烟草植物的杂种的部分。而在另一个方面，本公开提供了来自上述植物和组织培养物的遗传修饰(例如通过常规育种或遗传工程技术)的形式的部分。

本公开的另外的方面提供了包含来自本发明的植物及其部分的烟草的产品。本公开的其他方面提供了调制的植物部分，其包括，但不限于叶、花粉、胚珠、胚茅、子叶、胚轴、分生细胞、原生顾体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚、叶柄等，以及它们的组合。

因此，在一些方面，本公开提供了包含被称为NC1209-23 SRC的烟草植物的叶的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC。在另一个方面中，本公开提供了包含被称为CMS NC1209-23 SRC的烟草植物的叶的调制烟草。在另一个方面，本公开提供了包含被称为DH19 SRC的烟草植物的叶的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。在再另一个方面，本公开提供了包含被称为NC 3 SRC的杂种烟草植物的叶的调制烟草。杂种栽培品种NC 3 SRC的种子可通过杂交栽培品种DH19 SRC和CMS NC1209-23 SRC的植物和收集种子获得。

在另一个方面，本公开提供了包含被称为DH98-325-5 SRC的烟草植物的叶的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。而在另一方面，本公开提供了包含被称为NC 6 SRC的杂种烟草植物的叶的调制烟草。杂种栽培品种NC 6 SRC的种子可通过杂交栽培品种DH98-325-5 SRC和CMS NC1209-23 SRC的植物和收集种子获得。

在一个方面，本公开提供了包含被称为NC1209-23 SRC的烟草植物的茎的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC。在另一个方面，本公开提供了包含被称为CMS NC1209-23 SRC的烟草植物的茎的调制烟草。在一个方面，本公开提供了包含被称为DH19 SRC的烟草植物的茎的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATCC。在再另一个方面，本公开提供了包含被称为NC 3 SRC的杂种烟草植物的茎的调制烟草。

在一个方面，本公开提供了包含被称为DH98-325-5 SRC的烟草植物的茎的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。而在另一方面，本公开提供了包含被称为NC 6 SRC的杂种烟草植物的茎的调制烟草。

在一个方面，本公开提供了包含被称为NC1209-23 SRC的烟草植物的叶和茎的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121049保藏于ATCC。在另一个方面，本公开提供了包含被称为CMS NC1209-23 SRC的烟草植物的叶和茎的调制烟草。在一个方面，本公开提供了包含被称为DH19 SRC的烟草植物的叶和茎的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121052保藏于ATC。而在另一个方面，本公开提供了包含被称为NC 3 SRC的杂种烟草植物的叶和茎的调制烟草。

在一个方面，本公开提供了包含被称为DH98-325-5 SRC的烟草植物的叶和茎的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121051保藏于ATCC。而在另一方面，本公开提供了包含被称为NC 6 SRC的杂种烟草植物的叶和茎的调制烟草。

在一些方面，本公开提供了包含被称为NC1426-11 SRC的烟草植物的叶的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC。在另一个方面，本公开提供了包含被称为CMS NC1426-11 SRC的烟草植物的叶的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。在另一个方面，本公开提供了包含被称为NC1426-17 SRC的烟草植物的叶的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。而在另一个方面，本公开提供了包含被称为NC 4 SRC的杂种烟草植物的叶的调制烟草。杂种栽培品种SRC NC 4 SRC的种子可通过杂交栽培品种NC1426-17 SRC和CMS NC1426-11 SRC的植物和收集种子获得。

在一个方面，本公开提供了包含被称为NC1426-11 SRC的烟草植物的茎的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA 121031保藏于ATCC。在另一个方面，本公开提供了包含被称为CMS NC1426-11 SRC的烟草植物的茎的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。在一个方面，本公开提供了包含被称为NC1426-17 SRC的烟草植物的茎的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。而在另一个方面，本公开提供了包含被称为NC 4 SRC的杂种烟草植物的茎的调制烟草。

在一个方面，本公开提供了包含被称为NC1426-11 SRC的烟草植物的叶和茎的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121031保藏于ATCC。在另一个方面，本公开提供了包含被称为CMS NC1426-11 SRC的烟草植物的叶和茎的调制烟草，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121070保藏于ATCC。在一个方面，本公开提供了一种包含被称为NC1426-17 SRC的烟草植物的叶和茎的调制烟草，其中所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-121032保藏于ATCC。而在另一个方面，本公开提供了一种包含被称为NC 4 SRC的杂种烟草植物的叶和茎的调制烟草。

本公开还提供了本公开的NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC或者杂种NC 3 SRC或NC 6 SRC种子或其他种子的容器，其中获自从超过约50％的种子生长的烟草植物的生物碱具有降低的去甲烟碱。在另一个方面，从容器中超过约55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的种子生长的NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC或杂种NC 3 SRC或NC 6 SRC植物或本公开的其他植物获得的生物碱具有降低的去甲烟碱，这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如，NC1209-23 SRC的ATCC保藏号为PTA-121049，DH98-325-5 SRC的ATCC保藏号为PTA-121051和/或DH19 SRC的ATCC保藏号为PTA-121052。

NC1209-23 SRC、CMSNC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC或杂种NC 3 SRC或NC 6 SRC种子或本公开的其他种子的容器可以含有任何数量、重量或体积的种子。例如，该容器可以包含至少或超过约100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000或更多粒种子。或者，容器可以包含至少或超过约1盎司、5盎司、10盎司、1磅、2磅、3磅、4磅、5磅或更多种子。这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如，NC1209-23 SRC的ATCC保藏号为PTA-121049，DH98-325-5 SRC的ATCC保藏号为PTA-121051或DH19 SRC的ATCC保藏号为PTA-121052。

NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC或杂种NC 3 SRC或NC 6 SRC种子或本公开的其他种子的容器可以是在本领域中可以获得的任何容器。作为非限制性实例，容器可以是盒、袋、包、小袋、带卷(tape roll)、桶、箔或管。这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如，NC1209-23 SRC的ATCC保藏号为PTA-121049，DH98-325-5 SRC的ATCC保藏号为PTA-121051或DH19 SRC的ATCC保藏号为PTA-121052。

在另一个方面，本公开还提供了NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC或杂种栽培品种NC 3 SRC或NC 6 SRC的容器，其中超过约50％的NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC或杂种NC 3 SRC的种子或本公开的其他种子具有降低的去甲烟碱。这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如，NC1209-23 SRC的ATCC保藏号为PTA-121049，DH98-325-5 SRC的ATCC保藏号为PTA-121051和/或DH19 SRC的ATCC保藏号为PTA-121052。

在一个方面，本公开提供了NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC或杂种NC 3 SRC或NC 6 SRC植物或本公开的其它植物的种子，其中从种子生长的植物是雄性不育的。这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如，NC1209-23 SRC的ATCC保藏号为PTA-121049，DH98-325-5 SRC的ATCC保藏号为PTA-121051，DH19 SRC的ATCC保藏号为PTA-121052。

本公开还提供了NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 4 SRC种子或者本公开的其他种子的容器，其中获自从超过约50％的种子生长的烟草植物的生物碱具有降低的去甲烟碱。在另一个方面，获自从容器中超过约55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的种子生长的NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 4 SRC植物或本公开的其他植物的生物碱具有降低的去甲烟碱，这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如，NC1426-11 SRC的ATCC保藏号为PTA-121031，CMS NC1426-11 SRC的ATCC保藏号为PTA-121070和/或NC1426-17 SRC的ATCC保藏号为PTA-121032。杂种栽培品种NC 4 SRC的种子可通过杂交栽培品种NC1426-17 SRC和CMS NC1426-11 SRC的植物并收集种子而获得。

NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 4 SRC种子或者本公开的其他种子的容器可以包含任何数量、重量或体积的种子。例如，容器可以包含至少或超过约100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000或更多粒种子。或者，容器可以包含至少或超过约1盎司、5盎司、10盎司、1磅、2磅、3磅、4磅、5磅或更多种子。

NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 4 SRC种子或者本公开的其他种子的容器可以是在本领域中可以获得的任何容器。作为非限制性实例，容器可以是盒、袋、包、小袋、带卷、桶、箔或管。这些栽培品种的代表性样品种子已保藏于ATCC，例如，NC1426-11 SRC的ATCC保藏号为PTA-121031，CMS NC1426-11 SRC的ATCC保藏号为PTA-121070和/或NC1426-17 SRC的ATCC保藏号为PTA-121032。杂种栽培品种NC 4 SRC的种子可通过杂交栽培品种NC1426-17 SRC和CMS NC1426-11 SRC的植物并收集种子而获得。

在另一个方面，本公开还提供了NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种栽培品种NC 4 SRC的容器，其中超过约50％的NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 4 SRC种子或本公开的其他种子具有降低的去甲烟碱。

在一个方面，本公开提供了NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 4 SRC植物或本公开的其它植物的种子，其中从种子生长的植物是雄性不育的。

从本公开的烟草株系、品种或杂种获得的烟草材料可用于制造烟草产品，其中包括但不限于香烟产品(例如香烟和比迪(bidi)烟)、雪茄产品(例如雪茄卷烟和小雪茄)、烟斗烟产品、无烟香烟产品、无烟烟草产品(例如湿鼻烟、干鼻烟和嚼烟)、薄膜、可咀嚼物、片、成型部件、凝胶、可食用单元、不溶性基质、空心形状等。参见例如美国专利公开号US 2006/0191548，将其全部内容通过引用并入本文。

源自于本公开的植物的烟草产品还包括香烟以及其它吸烟制品，特别是包括过滤元件的吸烟制品，其中可抽吸材料的条杆包括烟草掺混物内的调制烟草。在一个方面，烟草产品可以包括但不限于烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟叶和/或生切烟丝或者其任何组合。

在一个方面，本公开的烟草产品选自于小雪茄、不通气隐藏式过滤嘴香烟、通气隐藏式过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟、烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、水袋烟烟草、切碎烟叶和生切烟丝。在另一个方面，本公开的烟草产品是无烟烟草产品。在进一步的方面，本公开的烟草产品选自于散装嚼烟、烟饼型嚼烟、湿鼻烟和鼻烟。而在另一方面，本公开的烟草产品选自于电子加热香烟、电子香烟、电子蒸发装置。

在一个方面，本公开的烟草产品可以是掺混的烟草产品。在本公开的其它方面中，本公开的烟草产品可以是低烟碱烟草产品。在再其他的方面，本公开的烟草产品可以是具有低烟碱含量的掺混烟草产品。因此，本公开的烟草产品可以是掺混的低烟碱烟草产品。烟草产品材料包括来自于本公开的烟草材料的掺混物，其中所述掺混物以烟草材料的干重计包含至少约5、10、20、30、40、50、60、70、80、90或95重量百分比的调制烟草或其中的任何范围。US 2008/0245377以其关于掺混混合物的全部内容通过引用并入本文。

在一个方面，可以使用来自于本公开的植物和植物部分的烟草植物材料来制造具有降低量的亚硝基胺含量的烟草产品。因此，在一些方面，使用来自于本公开的植物和植物部分的烟草植物材料制造的烟草产品可以含有低于约3mg/g的降低量的去甲烟碱。例如，在这样的产品中，去甲烟碱含量可以为3.0mg/g、2.5mg/g、2.0mg/g、1.5mg/g、1.0mg/g、750μg/g、500μg/g、250μg/g、100μg/g、75μg/g、50μg/g、25μg/g、10μg/g、5μg/g、1μg/g、750ng/g、500ng/g、250ng/g、100ng/g、75ng/g、50ng/g、25ng/g、10ng/g、5ng/g、1ng/g、750pg/g、500pg/g、250pg/g、100pg/g、75pg/g、50pg/g、25pg/g、10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g或不可检测的或者其中的任何范围。该烟草产品通常具有低于约10pg/g的降低量的NNN。例如，在这样的产品中，NNN含量可以为约10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g或不可检测的或者其中的任何范围。在本发明的植物中包含的次生生物碱相对于总生物碱含量的百分比可以与NC1209-23、DH19、DH98-325-5、NC1426-11、NC1426-17或杂种栽培品种NC 3 LC、NC 6 LC、NC 4 LC的商业种源没有统计学差异。

被称为NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种栽培品种NC 3 SRC、NC 6 SRC或NC 4 SRC的本公开的烟草植物(携带cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因可以在植物育种计划中用于产生有用的株系、栽培品种、品种、后代、近交系和杂种。因此，在一些方面，将含有cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因的F₁、F₂、F₃或更晚世代的烟草植物与第二烟草属(Nicotiana)植物杂交，并鉴定其中存在cyp82e4 W329Stop、cyp82eSv2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因的杂交后代。应该认识到，所述第二烟草属植物可以是任选地具有其他所需性状如除草剂抗性的NC1209-23、CMS NC1209-23、DH19、DH98-325-5、NC1426-11、CMS NC1426-11、NC1426-17或任何其他烟草属物种或株系。

而在其它方面，本公开的方法进一步包括自花授粉，或用能够用于产生本公开的后代植物(例如本公开的雄性不育杂种)的花粉供体对雄性不育花粉受体进行授粉。雄性不育花粉受体植物或花粉供体植物在烟碱去甲基酶基因座处具有至少一个突变的等位基因、两个或甚至三个突变的等位基因，例如cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因。在一个方面，在各个烟碱去甲基酶基因座处的所有三个等位基因是突变的等位基因，使得该植物对于cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S是纯合的。

育种可以通过任何已知程序来进行。DNA指纹、SNP或相似技术可以用于标记辅助选择(MAS)育种程序中，以将烟碱脱甲基酶基因的突变等位基因转移或繁殖至其他烟草中。例如，育种者可以从含有cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因的基因型与农艺学所需的基因型的杂交来形成隔离群。可以使用从cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop或cyp82e10 P381S等位基因或其片段发展的标志物，利用本领域已知的或本文中所公开的技术之一筛选F₂或回交世代的植物。可以将鉴定为具有cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因的植物回交或自花授粉以产生待筛选的第二群体。根据预期的遗传模式或所用的MAS技术，在每轮回交之前可能需要将选定的植物自花授粉以帮助鉴定所需的单株植物。可以重复回交或其他育种程序直至恢复回交亲本的所需表型。本公开中的轮回亲本可以是NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC、NC 3 SRC、NC 6 SRC或NC 4 SRC。其他育种技术可以在例如Wersman，E.A.和Ruffy，R.C.1987，第17章，Tobacco，第669-698页，见：Cultivar Development.Crop Species.W.H.Fehr(编辑)，MacMillan Publishing Go.，Inc.，New York，N.Y.中找到，其通过引用将其全部并入本文中。

与烟草(Nicotiana tabacum)表现出育种相容性的烟草属物种包括Nicotiana amplexicaulis，PI 271989、本塞姆氏烟草(Nicotiana benthamiana)PI 555478、印度烟草(Nicotiana bigelovii)PI 555485、迪勃纳氏烟草(Nicotiana debneyi)、Nicotiana excelsior PI 224063、粘毛烟草(Nicotiana glutinosa)PI 555507、古德斯比氏烟草(Nicotiana goodspeedii)PI 241012、Nicotiana gossei PI 230953、香草花烟草(Nicotiana hesperis)PI 271991、奈特氏烟草(Nicotiana knightiana)PI 555527、Nicotiana maritima PI 555535、麦格隆熄丰烟草(Nicotiana megalosiphon)PI 555536、Nicotiana nudicaulis PI 555540、圆锥烟草(Nicotiana paniculata)PI 555545、皱叶烟草(Nicotiana plutmbaginifolia)PI 555548、波缘烟草(Nicotiana repanda)PI 555552、黄花烟草(Nicotiana rustica)、香甜烟草PI 230960、林烟草(Nicotiana sylvestris)PI 555569、Nicotiana tomentosa PI 266379、绒毛烟草(Nicotiana tomentosiformis)和Nicotiana trigonophylla PI 555572。也参见由美国植物病理学会(American Phytopathology Society)出版的《烟草疾病纲要》(Compendium of Tobacco Diseases)或由Japan Tobacco Inc出版的《烟草属图解》(The Genus Nicotiana Illustrated)，其全部内容通过引用并入本文。

使用本文描述的突变烟草植物的植物育种程序的结果包括有用的株系、栽培品种、品种、后代、近交系和杂种。当在本文中使用时，术语“栽培品种”或“品种”是指共有将它们与同一物种的其他植物区分开的恒定特征的植物群体。栽培品种或品种通常是(尽管并不总是)商业销售的。尽管具有一种或多种独特性状，但栽培品种或品种的进一步特征在于该栽培品种或品种内的个体之间非常小的总体变异。通过几代的自花授粉和选择或ftj使用组织或细胞培养技术从单一亲本进行无性繁殖，可以产生“纯系”品种。栽培品种或品种可以基本上源自另一个栽培品种、株系或品种。正如由《国际植物新品种保护公约》(International Convention for the Protection of New Varieties of Plants)(1961年12月2日，并在1972年11月10日、1978年10月23日和1991年3月19日在日内瓦修订)所定义的，如果满足下述条件，则栽培品种或品种“基本上源自于”初始栽培品种或品种：a)它主要源自初始栽培品种或品种或源自主要从初始栽培品种或品种衍生的栽培品种或品种，同时保持由初始栽培品种或品种的基因型或基因型组合获得的本顾特征的表现；b)它可以与初始栽培品种或品种明显区分开；以及c)除了由衍生作用所产生的差异之外，它在由初始栽培品种或品种的基因型或基因型组合所产生的本质特征的表现方面与初始栽培品种或品种相符。实顾衍生的品种可以例如通过天然或诱导突变体的选择、体细胞无性系变体、来自于初始栽培品种或品种的植物的变体个体、回交或转化来获得。区别于栽培品种或品种的“株系”最通常表示一组非商业化(例如在植物研究中)使用的植物。对于一种或多种目标性状来说，株系通常在个体之间几乎不表现出总体变异，尽管对其他性状来说在个体之间可能存在一些变异。

可以通过防止第一品种的母本植物(即，种子亲本)的自花授粉，允许来自第二品种的父本植物的花粉使母本植物受精，并且允许在母本植物上形成F₁杂体种子来产生杂种烟草品种。可以通过在花发育早期阶段对花去雄来防止母本植物的自花授粉。或者，可以使用雄性不育形式防止母本植物上的花粉形成。例如，可以通过细胞质雄性不育(CMS)或其中转基因抑制小孢子发生和/或花粉形成的转基因雄性不育或自交不亲和来产生雄性不育。含有CMS的母本植物特别有用。在其中母本植物是CMS的方面中，可以从雄性不育植物收集花粉并人工施用至CMS母本植物的柱头，并收集所得到的F₁种子。

植物可用于形成单交烟草F₁杂种。在这样的情形中，亲本品种的植物可以作为基本上同源的邻接群来种植以便于从父本植物至母本植物的自然异花授粉。通过常规手段选择性地收获母本植物上形成的F₁种子。也可以将两种亲本植物品种成片种植，并收获在母本上形成的F₁杂种种子和作为自花授粉的结果在父本上形成的种子的掺混物。或者，可以进行三元杂交，其中使用单交F₁杂种作为母本并将其与不同的父本杂交。作为另一种可选方案，可以产生双交杂种，其中将两个不同单交的F₁后代进行自交。自交不亲和性可以特别有利地在形成双交杂种时用于防止母本的自花授粉。

必要时，成功的杂交产生可育的、具有cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因并且可以与亲本例如NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC、NC 3 SRC、NC 6 SRC或NC 4 SRC之一回交的F₁植物。在某些方面，在F₂代的植物群体中筛选cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S等位基因。可以将选择的植物与亲本之一杂交，并对第一代回交(BC1)植物自花授粉以产生BC1 F₂群体，再一次对其进行变体烟碱去甲基酶基因表达(例如烟碱去甲基酶基因的无效形式)的筛选。将回交、自花授粉和筛选的过程重复例如至少4次，直至最终的筛选产生可育的并且与轮回亲本相当相似的植物。如果需要，将该植物自花授粉，并随后对后代再一次进行筛选以确认植物表现出与NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC、NC 3 SRC、NC 6 SRC或NC 4 SRC相同的低烟碱转化表型。使用标准方法来产生选择的植物的原原种，其中所述方法包括例如田间试验、烟碱去甲基酶的无效状况的证实、调制烟叶的化学分析以确定生物碱水平和/或调制烟叶的化学分析以确定去甲烟碱与烟碱+去甲烟碱的比率。

在一个方面，F₁后代是NC1209-23 SRC与CMS NC1209-23 SRC之间杂交的结果以产生雄性不育的F₁后代。在另一个方面，F₁后代是DH19 SRC与CMS NC1209-23 SRC之间杂交的结果以产生雄性不育的F₁后代。在另一个方面，F₁后代是DH98-325-5 SRC与CMS NC1209-23 SRC之间杂交的结果以产生雄性不育的F₁后代。在一个方面，F₁后代是NC1426-11 SRC与CMS NC1426-11 SRC之间杂交的结果以产生雄性不育的F₁后代。在另一个方面，F₁后代是NC1426-17 SRC与CMS NC1426-11 SRC之间杂交的结果以产生雄性不育的F₁后代。雄性不育的烟草植物可以通过本领域中已知的任何方法来产生。产生雄性不育烟草的方法被描述在Wernsman，E.A.和Rufty，R.C.1987.《栽培品种开发，作物物种》(Cultivar Development.Crop Species.)第17章，烟草，第669-698页，W.H.Fehr(主编)，MacMillan Publishing Go.，Inc.，New York，N.Y.761pp中。

本公开还提供了通过将栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC之一与自身或不同烟草株系进行杂交来产生烟草植物的方法。本公开还涉及用于产生源自于栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC的其他烟草栽培品种或育种系的方法，其是通过将栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC的植物与第二烟草植物进行杂交并栽培后代种子以产生源自于NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC或NC 4 SRC的烟草植物。本公开的另外的方面提供了用于产生在其遗传材料中含有一个或多个转基因的烟草植物的方法，所述方法包括将本公开的栽培品种与含有一个或多个转基因的第二栽培品种杂交，其中产生后代，使得使从该杂交产生的后代的遗传材料包含任选地可操作地与一个或多个调控元件连接的转基因。在一个方面，第二栽培品种可以是源自于用一个或多个转基因转化的栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC或NC 4 SRC的植物。

本公开还提供了栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC及其杂种和后代的植物的无性繁殖。在一个方面，本公开提供了无性繁殖烟草栽培品种的植物的方法，包括从栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC的植物收集能够繁殖的组织，对该组织进行培育以获得增殖的芽，和使所述增殖芽生根以获得生根的幼苗。在另一个方面，可以从栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC的植物的F₁杂种收集植物组织。在一个方面，可以从通过繁育栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC的植物而获得的F₂、F₃、F₄或更高世代的后代植物收集植物组织。

包含烟碱去甲基酶基因的突变的植物可以通过选择或筛选诱变的植物材料或其后代来鉴定。这样的筛选和选择方法对于本领域普通技术人员来说是已知的。筛选和选择方法的实例包括，但不限于Southern分析、用于检测多核苷酸的PCR扩增、Northern印迹、RNase保护、引物延伸、用于检测RNA转录本的RT-PCR扩增、用于检测多肽和多核苷酸的酶或核酶活性的酶学测定法及蛋白顾凝胶电泳、Western印迹、免疫沉淀和用于检测多肽的酶联免疫测定法。其他技术例如原位杂交、酶染色和免疫染色也可用于检测多肽和/或多核苷酸的存在或表达。用于执行所有所称技术的方法是已知的。

应该理解，可以使用本领域已知的任何技术，用基因构建体(核酸构建体)或转基因转化本公开的烟草植物，包括但不限于NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC和杂种栽培品种NC 3 SRC、NC 6 SRC和NC 4 SRC。非限制性地，所需性状的实例可以包括除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指标、可调制性、调制顾量、机械采收性、保持能力、烟叶顾量、高度、植物成熟(例如，早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟或晚熟)、茎大小(例如，小茎、中茎或大茎)或每植物叶数(例如，小(例如，5-10叶)、中(例如，11-15叶)或大(例如，16-21叶)叶数)，或其任意组合。本公开的任何植物可以用作组织培养、再生、转化或其任何组合的基础。在一个方面，通过组织培养、转化或两者得到的本公开的植物具有栽培品种NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC、CMS NC1426-11 SRC、NC1426-17 SRC或杂种NC 3 SRC、NC 6 SRC或NC 4 SRC的所有的或者基本上所有的形态和生理特征。

现已对本发明进行了一般性描述，但通过参考下面的实施例将会更容易地理解本发明，除非指明，提供这些实施例是出于说明的目的，而不打算限制本发明。

实施例

实施例1：纯合cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变体植物繁育成NC1209-23白肋烟栽培品种

NC1209-23 SRC是白肋烟草栽培品种NC1209-23的回交衍生形式，其携带引入的先前被证实编码烟碱去甲基酶的三个基因(CYP82E4(SEQ ID NO：5)、CYP82E5(SEQ ID NO：8)和CYP82E10(SEQ ID NO：9))中的突变(Lewis等，2010)。引入的CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2 W422Stop(SEQ ID NO：2))中的突变编码提前终止密码子，其使基因无功能。引入的CYP82E10(cyp82e10 P381S(SEQ ID NO：11))中的突变不编码提前终止密码子，但对于将烟碱转化为去甲烟碱来说使基因产物无功能(Lewis等，2010年)。当在纯合的条件下，该三个突变导致烟草植物具有(1)降低的将烟碱去甲基化以形成去甲烟碱的遗传能力，和(2)相应减弱的积累N-亚硝基去甲烟碱(NNN)(在许多烟草产品中发现的一种强力致癌物顾)的潜力。在CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))中的突变也提供了“烟碱转化”性状的表型稳定性，并消除了利用麻烦的“LC”方法来降低烟草栽培品种中的去甲烟碱水平的需要。

原始烟草栽培品种NC1209-23是可繁殖的近交系。CMS NC1209-23是NC1209-23的细胞顾雄性不育形式。为了培育NC1209-23 SRC，用具有携带三个烟碱去甲基化酶基因每一个中的突变的遗传背景DH98-325-6的植物给NC1209-23的单个植物授粉。将源自该杂交的并且对于各个突变杂合的F₁个体与轮回亲本NC1209-23回交以产生BC₁F₁后代。使用基因分型方法来筛选BC₁F₁后代以识别对于所有三个突变杂合的个体。将单一的三重杂合的BC₁F₁植物与NC1209-23回交以产生BC₂F₁后代。通过BC₃F₁、BC₄F₁、BC₅F₁、BC₆F₁和BC₇F₁阶段重复对于所有三个突变杂合的个体的回交和鉴定的过程。在BC₇F₁阶段，来自各个谱系的对于所有三个突变杂合的个体自花授粉以产生BC₇F₂种子。对来自各个谱系的大量的BC₇F₂后代进行基因分型以鉴定对于所有三个突变纯合的个体。所有三种突变纯合的单一BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃家族(NC1209-23 SRC)，其中NC1209-23的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的等位基因(cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替代。

NC1209-23 SRC的雄性不育(CMS)形式(CMS NC1209-23 SRC)是通过CMS NC1209-23植物作为母本用NC1209-23 SRC的花粉杂交以产生对于所有三种突变杂合的雄性不育植株而产生的。随后将从该杂交产生的单个雄性不育植物作为母本与NC1209-23 SRC回交以产生对于所有三种突变纯合的个体分离的后代。通过DNA基因分型鉴定三重纯合个体以产生CMS NC1209-23 SRC系。由于该株系是雄性不育的，它是通过用NC1209-23 SRC授粉维持的。

商业的NC1209-23 SRC是通过用NC1209-23 SRC的花粉对CMS NC1209-23 SRC的植物授粉产生的。

实施例2：纯合cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变体植物繁育成DH19白肋烟草栽培品种

DH19 SRC是携带引入的三个基因(CYP82E4(SEQ ID NO：5)、CYP82E5(SEQ ID NO：8)和CYP82E10(SEQ ID NO：9))中的无效突变的白肋烟草栽培品种DH19的回交衍生的形式，这些基因先前被证实编码烟碱去甲基酶(Lewis等，Phytochemistry，71(2010)，1988-1998)。引入的CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2 W422Stop(SEQ ID NO：2))中的突变编码提前终止密码子，其使基因无功能。引入的CYP82E10(cyp82e10 P381S(SEQ ID NO：11))中的突变不编码提前终止密码子，但对于将烟碱转化至去甲烟碱来说使基因产物无功能(同上)。当在纯合的条件下，该三个突变导致烟草植物具有(1)将烟碱去甲基化以形成去甲烟碱的降低的遗传能力，和(2)相应降低的积累N-亚硝基去甲烟碱(NNN)(在许多烟草产品中发现的一种强力的致癌物顾)的潜力。CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))中的突变也提供了“烟碱转化”性状的表型稳定性，并消除了利用麻烦的“LC”方法降低烟草栽培品种中的去甲烟碱水平的需要(见例如Jack等，2007，Implications of reducing nornicotine accumulation in burley tobacco：appendix A-the LC protocol.Rec.Adv.Tob.Sci.33：58-79)。

原始烟草栽培品种DH19是可繁殖的近交系。为了培育DH19 SRC，最初用携带三个烟碱去甲基化酶基因每一个中的突变的遗传背景DH98-325-6的植物给DH19的单个植物授粉。将源自该杂交的且对于每个突变杂合的F₁个体与轮回亲本DH19回交以产生BC₁F₁后代。使用基因分型方法来筛选BC₁F₁后代以识别对于所有三个突变杂合的个体。将单一的三重杂合的BC₁F₁植物与DH19回交以产生BC₂F₁后代。通过BC₃F₁、BC₄F₁、BC₅F₁、BC₆F₁和BC₇F₁阶段重复对于所有三个突变杂合的个体的回交和鉴定过程。在BC₇F₁阶段，来自各个谱系的所有三个突变杂合的个体自花授粉以产生BC₇F₂种子。对来自各个谱系的大量的BC₇F₂后代进行基因分型以鉴定对于所有三个突变纯合的个体。对于所有三个突变纯合的单一BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃家族(DH19 SRC)，其中DH19的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的等位基因(cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替代。

实施例3：DH19 SRC的测试

在2013年，在两个北卡罗莱纳州(North Carolina)的田间研究地点(Reidsville和Waynesville)对于DH19 SRC的调制烟叶化学、产量和物理质量进行评估。DH19被包括在内用于比较。在每个地点的实验设计是随机完全区块设计，4次重复。实验单元是单个20-植株的地块。地块被收获并晾制。使用地块体量来确定每英亩产量。调制的烟叶由前USDA烟草分级员进行评估。从每个地块收集50克复合烟叶样品，并通过气相色谱设备分析烟碱、去甲烟碱、新烟草碱、假木贼碱的百分比及烟碱转化百分率。

使用最小显著差异(LSD)检验进行的比较表明，DH19 SRC相对于DH19具有显著较低的去甲烟碱水平和烟碱转化百分率(P＜0.05)(表1)。DH19和DH19 SRC在烟碱百分比、产量或调制烟叶质量指数上彼此间没有显著差异。

实施例4：纯合cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变体植物繁育成NC 3白肋烟草栽培品种

原始烟草栽培品种NC 3 LC是通过用可繁殖育种系DH19产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1209-23的植物授粉而产生的杂种。杂种栽培品种NC 3 SRC是通过用可繁殖育种系DH19 SRC产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1209-23 SRC的植物授粉而产生的杂种，其中每个育种系携带引入的三个基因(CYP82E4(SEQ ID NO：5)、CYP82E5(SEQ ID NO：8)和CYP82E10(SEQ ID NO：9))中的有害突变，这些基因先前被证实编码烟碱去甲基酶(Lewis等，Phytochemistry，71(2010)，1988-1998)。引入的CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2 W422Stop(SEQ ID NO：2))中的突变编码提前终止密码子，其使基因无功能。引入的CYP82E10(cyp82e10 P381S(SEQ ID NO：11))中的突变不编码提前终止密码子，但对于将烟碱转化至去甲烟碱来说使基因产物无功能(同上)。当在纯合条件下，这三个突变导致烟草植物具有(1)将烟碱去甲基化以形成去甲烟碱的降低的遗传能力，和(2)相应降低的积累N-亚硝基去甲烟碱(NNN)(在许多烟草产品中发现的一种强力的致癌物顾)的潜力。在CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))中的突变也提供了“烟碱转化”性状的表型稳定性，并消除了利用麻烦的“LC”方法来降低烟草栽培品种中的去甲烟碱水平的需要(见例如Jack等，2007，Implications of reducing nornicotine accumulation in burley tobacco：appendix A-the LC protocol.Rec.Adv.Tob.Sci.33：58-79)。

原始烟草栽培品种NC 3 LC是通过用可繁殖育种系DH19产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1209-23的植物授粉而产生的杂种。为了培育杂种的栽培品种NC 3 SRC，首先用携带三个烟碱去甲基化酶基因每一个中的突变的遗传背景DH98-325-6的植物给可繁殖NC1209-23的个体植物授粉。将源自各杂交且对每个突变杂合的F₁个体与轮回亲本(NC1209-23)回交以产生BC₁F₁后代。

使用基因分型方法来筛选BC₁F₁后代以识别对于所有三个突变杂合的个体。将来自各谱系的单一BC₁F₁植物与NC1209-23回交以产生BC₂F₁后代。通过BC₃F₁、BC₄F₁、BC₅F₁、BC₆F₁和BC₇F₁阶段重复对于所有三个突变杂合的个体的回交和鉴定过程。在BC₇F₁阶段，来自各谱系的所有三个突变杂合的个体自花授粉以产生BC₇F₂种子。对来自各谱系的大量BC₇F₂后代进行基因分型以鉴定对于所有三个突变纯合的个体。所有三个突变纯合的BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃家族(NC1209-23 SRC)，其中NC1209-23的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的等位基因(cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替代。

NC1209-23的母本系，CMS NC1209-23，是细胞顾雄性不育的，其导致无法产生花粉。为了培育CMS NC1209-23 SRC，将CMS NC1209-23的植物与NC1209-23 SRC杂交以产生对于所有三个突变杂合的雄性不育植物。从该杂交产生的单一雄性不育植物作为母本与NC1209-23 SRC回交以产生对所有三个突变纯合个体分离的后代。通过DNA基因分型鉴定三重纯合个体以产生CMS NC1209-23 SRC系。因为该株系是雄性不育的，它通过用NC1209-23 SRC授粉维持(见上文)。

杂种栽培品种NC 3 SRC通过用DH19 SRC的花粉给CMS NC1209-23 SRC的植物授粉产生。

实施例5：杂种栽培品种NC 3 SRC的测试

在2013年，在北卡罗莱纳州的两个田间研究地点(Reidsville 和Waynesville)对于杂种栽培品种NC 3 SRC的调制烟叶化学、产量和物理质量进行评估。杂种栽培品种NC 3 LC被包括在内用于比较。在每个地点的实验设计是随机完全区块设计，4次重复。实验单元是单个20-植株的地块。地块被收获并晾制。使用地块体量来确定每英亩产量。调制的烟叶由前USDA烟草分级员进行评估。从每个地块收集50克复合烟叶样品，并通过气相色谱设备分析烟碱、去甲烟碱、新烟草碱、假木贼碱的百分比及烟碱转化百分率。

使用最小显著差异(LSD)检验进行的比较表明，杂种栽培品种NC 3 SRC相对于NC 3 LC具有显著更低的去甲烟碱水平和烟碱转化百分率(P＜0.05)(表1)。NC 3 LC和杂种栽培品种NC 3 SRC在烟碱百分比、产量或调制烟叶顾量指数上彼此间没有显著差异。

实施例6：纯合cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变体植物繁育成DH98-325-5白肋烟草栽培品种

DH98-325-5 SRC是携带引入的三个基因(CYP82E4(SEQ ID NO：5)、CYP82E5(SEQ ID NO：8)和CYP82E10(SEQ ID NO：9))中的无效突变的白肋烟草栽培品种DH98-325-5的回交衍生形式，这些基因先前被证实编码烟碱去甲基酶(Lewis等，Phytochemistry，71(2010)，1988-1998)。引入的CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2 W422Stop(SEQ ID NO：2))的突变编码提前终止密码子，其使基因无功能。引入的CYP82E10(cyp82e10 P381S(SEQ ID NO：11))的突变不编码提前终止密码子，但对于将烟碱转化至去甲烟碱来说使基因产物无功能(同上)。当在纯合的条件下，该三个突变导致烟草植物具有(1)将烟碱去甲基化以形成去甲烟碱的降低的遗传能力，和(2)相应降低的积累N-亚硝基去甲烟碱(NNN)(在许多烟草产品中发现的一种强力致癌物顾)的潜力。在CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))中的突变也提供了“烟碱转化”性状的表型稳定性，并消除了利用麻烦的“LC”方法来降低烟草栽培品种中的去甲烟碱水平的需要(见例如Jack等，2007，Implications of reducing nornicotine accumulation in burley tobacco：appendix A-the LC protocol.Rec.Adv.Tob.Sci.33：58-79)。

原始烟草栽培品种DH98-325-5是可繁殖的近交系。为了培育DH98-325-5 SRC，最初用携带三个烟碱去甲基化酶基因每一个的突变的遗传背景DH98-325-6的植物给DH98-325-5的单个植物授粉。将源自该杂交且对于每个突变杂合的F₁个体与轮回亲本DH98-325-5回交以产生BC₁F₁后代。使用基因分型方法来筛选BC₁F₁后代以识别对于所有三个突变杂合的个体。将单一的三重杂合的BC₁F₁植物与DH98-325-5回交以产生BC₂F₁后代。通过BC₃F₁、BC₄F₁、BC₅F₁、BC₆F₁和BC₇F₁阶段重复对于所有三个突变杂合的个体的回交和鉴定过程。在BC₇F₁阶段，来自各个谱系所有三个突变杂合的个体自花授粉以产生BC₇F₂种子。对来自各个谱系的大量BC₇F₂后代进行基因分型以鉴定对于所有三个突变纯合的个体。所有三个突变纯合的单一BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃家族(DH98-325-5 SRC)，其中DH98-325-5的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的等位基因(cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替代。

实施例7：DH98-325-5 SRC的测试

在2013年，在北卡罗莱纳州的两个田间研究地点(Reidsville和Waynesville)对于DH98-325-5 SRC的调制烟叶化学、产量和物理顾量进行评估。DH98-325-5被包括在内用于比较。在每个地点的实验设计是随机完全区块设计，4次重复。实验单元是单一20-植株的地块。地块被收获并晾制。使用地块体量来确定每英亩产量。调制的烟叶由前USDA烟草分级员进行评估。从每个地块收集50克复合烟叶样品，并使用气相色谱设备分析烟碱、去甲烟碱、新烟草碱、假木贼碱的百分比及烟碱转化百分率。

使用最小显著差异(LSD)检验进行的比较表明，DH98-325-5 SRC相对于DH98-325-5具有显著较低的去甲烟碱水平和烟碱转化百分率(P＜0.05)(表1)。DH98-325-5和DH98-325-5 SRC在烟碱百分比、产量或调制烟叶顾量指数上彼此间没有显著差异。

实施例8：纯合cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变体植物繁育成NC 6LC白肋烟草栽培品种

原始烟草栽培品种NC 6 LC是通过用可繁殖育种系DH98-325-5产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1209-23的植物授粉而产生的杂种。杂种栽培品种NC 6 SRC是通过用可繁殖育种系DH98-325-5 SRC产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1209-23 SRC的植物授粉而产生的杂种，其中各育种系携带引入的三个基因(CYP82E4(SEQ ID NO：5)、CYP82E5(SEQ ID NO：8)和CYP82E10(SEQ ID NO：9))中的有害突变，这些基因先前被证实编码烟碱去甲基酶(Lewis等，Phytochemistry，71(2010)，1988-1998)。引入的CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2 W422Stop(SEQ ID NO：2))中的突变编码提前终止密码子，其使基因无功能。引入的CYP82E10(cyp82e10 P381S(SEQ ID NO：11))中的突变不编码提前终止密码子，但对于将烟碱转化至去甲烟碱来说使基因产物无功能(同上)。当在纯合条件下，该三个突变导致烟草植物具有(1)将烟碱去甲基化以形成去甲烟碱的降低的遗传能力，和(2)相应降低的积累N-亚硝基去甲烟碱(NNN)(在许多烟草产品中发现的一种强力的致癌物顾)的潜力。CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))的突变也提供了“烟碱转化”性状的表型稳定性，并消除了利用麻烦的“LC”方法来降低烟草栽培品种中的去甲烟碱水平的需要(见例如Jack等，2007，Implications of reducing nornicotine accumulation in burley tobacco：appendix A-the LC protocol.Rec.Adv.Tob.Sci.33：58-79)。

原始烟草栽培品种NC 6 LC是通过用可繁殖育种系DH98-325-5产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1209-23的植物授粉而产生的杂种。为了培育杂种栽培品种NC 6 SRC，首先用携带三个烟碱去甲基化酶基因每一个的突变的遗传背景DH98-325-6的植物给可繁殖的NC1209-23的个体植物授粉。将源自各杂交且对于每个突变杂合的F₁个体与轮回亲本(NC1209-23)回交以产生BC₁F₁后代。

使用基因分型方法来筛选BC₁F₁后代以识别对于所有三个突变杂合的个体。将来自各个谱系的单一BC₁F₁植物与NC1209-23回交以产生BC₂F₁后代。通过BC₃F₁、BC₄F₁、BC₅F₁、BC₆F₁和BC₇F₁阶段重复对于所有三个突变杂合的个体的回交和鉴定过程。在BC₇F₁阶段，来自各个谱系所有三个突变杂合的个体自花授粉以产生BC₇F₂种子。对来自各个谱系的大量BC₇F₂后代进行基因分型以鉴定所有三个突变纯合的个体。所有三个突变纯合的BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃家族(NC1209-23 SRC)，其中NC1209-23的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的等位基因(cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替代。

NC1209-23的母本系，CMS NC1209-23，是细胞质雄性不育的，这导致无法产生花粉。为了培育CMS NC1209-23 SRC，将CMS NC1209-23的植物与NC1209-23 SRC杂交以产生所有三个突变杂合的雄性不育植物。从该杂交产生的单一雄性不育植物作为母本与NC1209-23 SRC回交以产生对于所有三个突变纯合个体分离的后代。通过DNA基因分型鉴定三重纯合个体以产生CMS NC1209-23 SRC系。因为该株系是雄性不育的，它是通过用NC1209-23 SRC授粉维持的(见上文)。

杂种栽培品种NC 6 SRC是通过用DH98-325-5 SRC的花粉给CMS NC1209-23 SRC的植物授粉产生的。

实施例9：杂种栽培品种NC 6 SRC的测试

在2013年，在北卡罗莱纳州的两个田间研究地点(Reidsville和Waynesville)对于杂种栽培品种NC 6 SRC的调制烟叶化学、产量和物理质量进行评估。杂种栽培品种NC 6 LC被包括在内用于比较。在每个地点的实验设计是随机完全区块设计，4次重复。实验单元是单一20-植株的地块。地块被收获并晾制。使用地块体量来确定每英亩产量。调制的烟叶由前USDA烟草分级员进行评估。从每个地块收集50克复合烟叶样品，并使用气相色谱设备分析烟碱、去甲烟碱、新烟草碱、假木贼碱的百分比及烟碱转化百分率。

使用最小显著差异(LSD)检验进行的比较表明，杂种栽培品种NC 6 SRC相对于NC 6 LC具有显著更低的去甲烟碱水平和烟碱转化百分率(P＜0.05)(表1)。NC 6 LC和杂种栽培品种NC 6 SRC在烟碱百分比、产量或调制烟叶顾量指数上彼此间没有显著差异。

实施例10：纯合cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变体植物繁育成NC1426-11白肋烟草栽培品种

NC1426-11 SRC是携带引入的三个基因(CYP82E4(SEQ ID NO：5)、CYP82E5(SEQ ID NO：8)和CYP82E10(SEQ ID NO：9))中的突变的白肋烟草栽培品种NC1426-11的回交衍生形式，这些基因先前被证实编码烟碱去甲基酶(Lewis等，2010)。引入的CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2 W422Stop(SEQ ID NO：2))的突变编码提前终止密码子，其使基因无功能。引入的CYP82E10(cyp82e10 P381S(SEQ ID NO：11))的突变不编码提前终止密码子，但对于将烟碱转化至去甲烟碱来说使基因产物无功能(Lewis等，2010年)。当在纯合的条件下，该三个突变导致烟草植物具有(1)对于将烟碱去甲基化以形成去甲烟碱的降低的遗传能力，和(2)相应降低的积累N-亚硝基去甲烟碱(NNN)(在许多烟草产品中发现的一种强力的致癌物质)的潜力。CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))的突变也提供了“烟碱转化”性状的表型稳定性，并消除了利用麻烦的“LC”方法来降低烟草栽培品种中的去甲烟碱水平的需要。

原始烟草栽培品种NC1426-11是可繁殖的近交系。CMS NC1426-11是NC1426-11的细胞质雄性不育形式。为了培育NC1426-11 SRC，用携带三个烟碱去甲基化酶基因每一个的突变的遗传背景DH98-325-6的植物给NC1426-11的单个植物授粉。将源自该杂交且对于每个突变杂合的F₁个体与轮回亲本NC1426-11回交以产生BC₁F₁后代。使用基因分型方法来筛选BC₁F₁后代以识别对于所有三个突变杂合的个体。将单一的三重杂合BC₁F₁植物与NC1426-11回交以产生BC₂F₁后代。通过BC₃F₁、BC₄F₁、BC₅F₁、BC₆F₁和BC₇F₁阶段重复所有三个突变杂合的个体的回交和鉴定过程。在BC₇F₁阶段，来自各个谱系所有三个突变杂合的个体自花授粉以产生BC₇F₂种子。对来自各个谱系的大量BC₇F₂后代进行基因分型以鉴定所有三个突变纯合的个体。所有三个突变纯合的单一BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃家族(NC1426-11 SRC)，其中NC1426-11的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的等位基因(cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替代。

NC1426-11 SRC的雄性不育(CMS)形式(CMS NC1426-11 SRC)通过CMS NC1426-11植物作为母本用NC1426-11 SRC的花粉杂交以产生对于所有三个突变杂合的雄性不育植物而产生。随后将从该杂交产生的单一雄性不育植物作为母本与NC1426-11 SRC回交以产生对于三种突变纯合的个体分离的后代。通过DNA基因分型鉴定三重纯合个体以产生CMS NC1426-11 SRC系。由于该株系是雄性不育的，它通过用NC1426-11 SRC授粉维持。

商业的NC1426-11 SRC是通过用NC1426-11 SRC的花粉对CMS NC1426-11 SRC的植物授粉产生的。

实施例11：NC1426-11 SRC的测试

在2013年，在北卡罗莱纳州的两个田间研究地点(Reidsville和Waynesville)对于NC1426-11 SRC的调制烟叶化学、产量和物理顾量进行评估。NC1426-11被包括在内用于比较。在每个地点的实验设计是随机完全区块设计，4次重复。实验单元是单一20-植株的地块。地块被收获并晾制。使用地块体量来确定每英亩产量。调制的烟叶由前USDA烟草分级员进行评估。从每个地块收集50克复合烟叶样品，并通过气相色谱设备分析烟碱、去甲烟碱、新烟草碱、假木贼碱的百分比及烟碱转化百分率。

使用最小显著差异(LSD)检验进行的比较表明，NC1426-11 SRC相对于NC1426-11具有显著较低的去甲烟碱水平和烟碱转化百分率(P＜0.05)(表1)。NC1426-11和NC1426-11 SRC在烟碱百分比、产量或调制烟叶质量指数上彼此间没有显著差异。

实施例12：纯合cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变体植物繁育成NC1426-17白肋烟草栽培品种

NC1426-17 SRC是携带引入的三个基因(CYP82E4(SEQ ID NO：5)、CYP82E5(SEQ ID NO：8)和CYP82E10(SEQ ID NO：9))中的无效突变的白肋烟草栽培品种NC1426-17的回交衍生形式，这些基因先前被证实编码烟碱去甲基酶(Lewis等，Phytochemistry，71(2010)，1988-1998)。引入的CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2 W422Stop(SEQ ID NO：2))的突变编码提前终止密码子，其使基因无功能。引入的CYP82E10(cyp82e10 P381S(SEQ ID NO：11))的突变不编码提前终止密码子，但对于将烟碱转化至去甲烟碱来说使基因产物无功能(同上)。当在纯合的条件下，该三个突变导致烟草植物具有(1)将烟碱去甲基化以形成去甲烟碱的降低的遗传能力，和(2)相应降低的积累N-亚硝基去甲烟碱(NNN)(在许多烟草产品中发现的一种强力的致癌物顾)的潜力。CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))的突变也提供了“烟碱转化”性状的表型稳定性，并消除了利用麻烦的“LC”方法来降低烟草栽培品种中的去甲烟碱水平的需要(见例如Jack等，2007，Implications of reducing nornicotine accumulation in burley tobacco：appendix A-the LC protocol.Rec.Adv.Tob.Sci.33：58-79)。

原始烟草栽培品种NC1426-17是可繁殖的近交系。为了培育NC1426-17 SRC，初始用携带三个烟碱去甲基化酶基因每一个的突变的遗传背景DH98-325-6的植物给NC1426-17的单个植物授粉。将源自该杂交且对于每个突变杂合的F₁个体与轮回亲本NC1426-17回交以产生BC₁F₁后代。使用基因分型方法来筛选BC₁F₁后代以识别对于所有三个突变杂合的个体。将单一的三重杂合的BC₁F₁植物与NC1426-17回交以产生BC₂F₁后代。通过BC₃F₁、BC₄F₁、BC₅F₁、BC₆F₁和BC₇F₁阶段重复对于所有三个突变杂合的个体的回交和鉴定过程。在BC₇F₁阶段，来自各个谱系所有三个突变杂合的个体自花授粉以产生BC₇F₂种子。对来自各个谱系的大量BC₇F₂后代进行基因分型以鉴定所有三个突变纯合的个体。所有三个突变纯合的单一BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃家族(NC1426-17 SRC)，其中NC1426-17的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的等位基因(cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替代。

实施例13：NC1426-17 SRC的测试

在2013年，在北卡罗莱纳州的两个田间研究地点(Reidsville和Waynesville)对于NC1426-17 SRC的调制烟叶化学、产量和物理顾量进行评估。NC1426-17被包括在内用于比较。在每个地点的实验设计是随机完全区块设计，4次重复。实验单元是单一20-植株的地块。地块被收获并晾制。使用地块体量来确定每英亩产量。调制的烟叶由前USDA烟草分级员进行评估。从每个地块收集50克复合烟叶样品，并通过气相色谱设备分析烟碱、去甲烟碱、新烟草碱、假木贼碱的百分比及烟碱转化百分率。

使用最小显著差异(LSD)检验进行的比较表明，NC1426-17 SRC相对于NC1426-17具有显著较低的去甲烟碱水平和烟碱转化百分率(P＜0.05)(表1)。NC1426-17和NC1426-17 SRC在烟碱百分比、产量或调制烟叶顾量指数上彼此间没有显著差异。

实施例14：纯合cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S突变体植物繁育成NC 4LC白肋烟草栽培品种

原始烟草栽培品种NC 4LC是通过用可繁殖育种系NC1426-17产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1426-11的植物授粉而产生的杂种。杂种栽培品种NC 4 SRC是通过用可繁殖育种系NC1426-17 SRC产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1426-11 SRC的植物授粉而产生的杂种，其中每个育种系携带引入的三个基因(CYP82E4(SEQ ID NO：5)、CYP82E5(SEQ ID NO：8)和CYP82E10(SEQ ID NO：9))的有害突变，这些基因先前被证实编码烟碱去甲基酶(Lewis等，Phytochemistry，71(2010)，1988-1998)。引入的CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2 W422Stop(SEQ ID NO：2))的突变编码提前终止密码子，其使基因无功能。引入的CYP82E10(cyp82e10 P381S(SEQ ID NO：11))的突变不编码提前终止密码子，但对于将烟碱转化至去甲烟碱来说使基因产物无功能(同上)。当在纯合条件下，该三个突变导致烟草植物具有(1)将烟碱去甲基化以形成去甲烟碱的降低的遗传能力，和(2)相应降低的积累N-亚硝基去甲烟碱(NNN)(在许多烟草产品中发现的一种强力的致癌物顾)的潜力。CYP82E4(cyp82e4 W329Stop(SEQ ID NO：1))的突变也提供了“烟碱转化”性状的表型稳定性，并消除了利用麻烦的“LC”方法来降低烟草栽培品种中的去甲烟碱水平的需要(见例如Jack等，2007，Implications of reducing nornicotine accumulation in burley tobacco：appendix A-the LC protocol.Rec.Adv.Tob.Sci.33：58-79)。

原始烟草栽培品种NC 4LC是通过用可繁殖育种系NC1426-17产生的花粉给雄性不育育种系CMS NC1426-11的植物授粉而产生的杂种。为了培育杂种栽培品种NC 4 SRC，首先用携带三个烟碱去甲基化酶基因每一个的突变的遗传背景DH98-325-6的植物给可繁殖的NC1426-11的个体植物授粉。将源自各杂交且对于每个突变杂合的F₁个体与轮回亲本(NC1426-11)回交以产生BC₁F₁后代。

使用基因分型方法来筛选BC₁F₁后代以识别对于所有三个突变杂合的个体。将来自各个谱系的单一BC₁F₁植物与NC1426-11回交以产生BC₂F₁后代。通过BC₃F₁、BC₄F₁、BC₅F₁、BC₆F₁和BC₇F₁阶段重复对于所有三个突变杂合的个体的回交和鉴定过程。在BC₇F_l阶段，来自各个谱系所有三个突变杂合的个体自花授粉以产生BC₇F₂种子。对来自各个谱系的大量BC₇F₂后代进行基因分型以鉴定所有三个突变纯合的个体。所有三个突变纯合的BC₇F₂植物自花授粉以产生BC₇F₃家族(NC1426-11 SRC)，其中NC1426-11的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变的等位基因(cyp82e4 W329Stop、cyp82e5v2 W422Stop和cyp82e10 P381S)替代。

NC1426-11的母本系，CMS NC1426-11，是细胞顾雄性不育的，这导致无法产生花粉。为了培育CMS NC1426-11 SRC，将CMS NC1426-11的植物与NC1426-11 SRC杂交以产生对所有三个突变杂合的雄性不育植物。将从该杂交产生的单一雄性不育植物作为母本与NC1426-11 SRC回交以产生对于所有三种突变纯合的个体分离的后代。通过DNA基因分型鉴定三重纯合个体以产生CMS NC1426-11 SRC系。因为该株系是雄性不育的，它通过用NC1426-11 SRC授粉而维持(见上文)。

杂种栽培品种NC 4 SRC是通过用NC1426-17 SRC的花粉给CMS NC1426-11 SRC的植物授粉产生的。

实施例15：杂种栽培品种NC 4 SRC的测试

在2013年，在北卡罗莱纳州的两个田间研究地点(Reidsville和Waynesville)对于NC 4 SRC的调制烟叶化学、产量和物理顾量进行评估。在每个地点的实验设计是随机完全区块设计，4次重复。实验单元是单一20-植株的地块。地块被收获并晾制。使用地块体量来确定每英亩产量。调制的烟叶由前USDA烟草分级员进行评估。从每个地块收集50克复合烟叶样品，并利用气相色谱设备分析烟碱、去甲烟碱、新烟草碱、假木贼碱的百分比和烟碱转化百分率。结果列于表1中。

保藏信息

上述所公开的并在随附的权利要求书中叙述的专有近交植物系已在美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection(ATCC)，10801 University Boulevard，Manassas，VA 20110)进行保藏。NC1209-23 SRC、CMS NC1209-23 SRC、DH19 SRC、DH98-325-5 SRC、NC1426-11 SRC和NC1426-17 SRC的保藏日期为2014年2月26日。CMS NC1426-11 SRC的保藏日期为2014年3月7日。每一品种的2500粒种子的保藏物从本申请的提交日期之前维持的相同保藏物获取。在专利授权后，对保藏物的所有限制将被取消，并且所述保藏物打算满足37C.F.R.§1.801-1.809的所有要求。ATCC已经发布了以下的保藏号：PTA-121049用于NC1209-23 SRC、PTA-121052用于DH19 SRC、PTA-121051用于DH98-325-5 SRC、PTA-121031用于NC1426-11 SRC、PTA-121070用于CMS NC1426-11 SRC、PTA-121032用于NC1426-17 SRC、PTA-121055用于NC 3 SRC、PTA-121042用于NC 6 SRC和PTA-121040用于NC 4 SRC。这些保藏物将在保藏机构维持30年时间，或最后一次请求后5年，或专利的有效期限，以其中最长者为准，并且在此期间如果需要，将进行更换。本申请人不豁免对在本专利下或植物品种保护法案(Plant Variety Protection Act(7U.S.C.2321 et seq.))下被授予其的权利的任何侵犯。

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该技术已申请专利。仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
技术研发人员：R·S·刘易斯;R·E·杜威
技术所有人：北卡罗莱纳州立大学
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