专利名称：溃结安栓剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种由中草药没食子制备溃结安栓剂，用于主治慢性溃疡性结肠炎，腹泻，腹痛，脓便血的药。
背景技术：
慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎.UC)是直肠与结肠部位一种原因未明的与自身免疫有关的炎症性肠病，是以腹痛、腹泻、脓血便为主要症状，以结肠粘膜慢性炎症和溃疡形成为病理特点的消化道常见病和疑难病，严重者可有发热、关节炎、肛膜炎、皮肤结节性红斑等肠外症状及结肠大出血、穿孔、癌变等严重并发症。
该病急性暴发型死亡率高，慢性持续型易癌变，据报道癌变发生率比正常人高5-20倍，平均为3.5-7％，特别是病程长、病变范围广泛、年龄较轻者，被公认为结肠癌的癌前病变，而且以慢性非特异性溃疡性结肠炎(UC)发生癌，恶性度高，多在早期即发生转移，目前被世界卫生组织列为现代难治性疾病之一。
近年来大量报道显示溃疡性结肠炎的发病率有明显的上升趋势。据统计，在十万人人群中发病率为英国79.9、德国109、法国110、瑞士17.6、新西兰41.3、美国42。我国尚无精确统计，但近年来发病率有明显增高的趋势，因此寻找有效治疗方法是当务之急。
该病治疗药物的治疗目的应尽快促进症状和粘膜炎症消失、控制急性发作、延长缓解期、减少复发、防止严重并发症。治疗包括饮食调节，改善全身状况，解除精神因素及对症治疗等，目前氨基水杨酸、皮质类固醇仍为西医治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎(UC)的主药，中医和维医有很大的潜力。
慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎UC)在西医治疗中采用5-氨基水杨酸(5-ASA)是目前治疗的常用药物，适用于轻、中度或慢性患者，但副作用可达到37.5％，严重者可致贫血、骨髓抑制和生育能力丧失等。而且在消化道即被吸收，无足量药物到达结肠而难以奏效。
类固醇是治疗急性暴发型和重度慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎UC)患者的首选药物，但长期应用易产生副作用且不能防止复发。
免疫抑制剂对5-氨基水杨酸和激素治疗无效的慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎UC)有一定疗效，但停药后复发率高，而且长期使用对肝、肾及骨髓有一定的毒性，也有发生感染和癌症的危险。
中医药治疗近年来中医药治疗慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎UC)报道较多，方法多样，无明显副作用。其投药途径有内服法、灌肠法、内服合用灌肠法。这样可达到辩病与辩证相结合，局部与整体相结合，取得了较好的疗效。但仍没有疗效满意的治疗药物。
维吾尔医药治疗慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎UC)有其独特之处，即内服法、灌肠法、内服合用灌肠法等。其中维药灌肠有较好的抗炎、促进溃疡愈合的作用，是治疗该病的有效方法之一。国内外很多学者在慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎UC)的报道中，对灌肠给药的疗效给于较高的评价和充分的肯定，并报道因为慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎UC)的病变95％位于直肠和结肠下段，而绝大多数患者就诊于活动期，灌肠给药可使药物直达病变部位，提高病变部位的血药浓度，保护肠道溃疡面，改善局部的血流，较快促进炎症吸收和溃疡愈合，并可避免或减少消化液和消化酶对药物作用的影响和破坏，有利于药物作用的发挥。
本发明针对目前在药物治疗慢性溃疡性结肠炎(慢性非特异性溃疡性结肠炎UC)中存在的不足，结合中医药和民族医药理论两者之长，研制了一种用于治疗慢性溃疡性结肠炎(腹泻、腹痛和脓血症)溃结安栓剂。
发明内容
本发明目的在于，研制的溃结安栓剂是以没食子为原料，采用将没食子粉碎、用水浸泡，煎煮，过滤，将滤液合并、浓缩至相对密度为1.10-1.30的浸膏，其中有效部位鞣质和没食子酸含量为50％-80％；然后将浸膏经真空干燥，粉碎过筛，加入熔融后的混合脂肪酸甘油酯搅拌，采用常规方法制成缓释栓剂。该栓剂具有抗菌消炎，止痛止血，抗氧化，促进溃疡愈合等功效，用于治疗慢性溃疡性结肠炎(腹泻、腹痛和脓血症)。经动物试验及临床应用观察无毒副作用，对108例慢性溃疡性结肠炎的腹痛、腹泻和脓血症等采用溃结安栓剂治疗，其疗效显著，治疗总有效率为88.3％，其中结肠炎症的总有效率为89.6％，腹痛的总有效率为87.7％，脓血便的总有效率为87.7％。
本发明所述的溃结安栓剂是以没食子为原料，将没食子1份粉碎，加水5倍-25倍浸泡、煎煮、过滤、将滤液合并、浓缩至相对密度为1.10-1.30的浸膏，其中有效部位鞣质和没食子酸含量为50％-80％；然后将浸膏经真空干燥，粉碎过筛，加入熔融后的混合脂肪酸甘油酯搅拌，采用常规方法制成栓剂。
溃结安栓剂的制备方法按下例步骤进行a、首先将没食子1份粉碎成粉末，加水5倍-25倍浸泡，浸泡时间24小时，煎煮20分钟-60分钟，再加3倍-15倍水煎煮20分钟-60分钟，第三次加2倍-10倍水煎煮20分钟-60分钟，过滤，将滤液合并，浓缩至相对密度为1.10-1.30的浸膏，该浸膏的有效部位为鞣质和没食子，其含量为50％-80％；b、将浸膏真空干燥，温度为45℃-60℃，粉碎50-200目过筛备用；c、用半自动栓剂灌装机将混合脂肪酸甘油酯熔融，温度保持在45℃-60℃，将浸膏粉1-3份加入熔融后的基质混合脂肪酸甘油酯中搅拌20分钟-40分钟，待接近基质固化温度38-45℃时，采用常规方法制成缓释栓剂。
本发明所述的溃结安栓剂是以没食子为原料，其中没食子的药理性能为没食子[Quercus infectoria Oliv.]为壳豆科植物，幼枝上的干燥虫瘿，由没食子蜂科昆虫没食子蜂(Cynips gsllae-tinctoriaeOliv)幼虫寄生而形成。
呈类球形，直径1-2.5厘米，有短柄。表面灰绿色、灰黑色或或黄色，由多数小瘤状突起。质坚不易破碎，破碎面不平坦，呈黄白色或淡黄色，有光泽。中央有圆形空隙，常见有幼蜂的尸体，有的可见通往表面的小孔道。无臭，味涩而苦。含没食子鞣质，没食子酸及并没食子酸，树脂等。功能固涩，燥湿，止血，消炎，防腐。用于大肠虚滑、泻痢不止、习惯性肠炎、月经及白带过多、尿血、疔疮出血、蔓延性疮疥、斑秃、黄水疮、牙龈松弛、牙周炎、口臭、咽喉炎、中耳炎、泪囊炎。
没食子是维吾尔医常用药材，本发明分析了没食子有效成分，并在此基础上进行了没食子有效部位的药理学和毒理学作用研究，进一步阐明该药治疗慢性溃疡性结肠炎的效果。
本发明所述的溃结安栓剂小鼠经口急性毒性试验溃结安主要用于慢性溃疡性结肠炎。为了确定其毒性大小，本试验测定了溃结安的LD50。
试验目的观察溃结安一次灌胃给予动物后，所产生的毒性反应和死亡情况。
受试药物溃结安，本发明提供。
受试动物昆明种小鼠，体重20.3±1.2g，雌雄各半，二级，新疆维吾尔自治区医学实验动物中心提供。
方法与结果a.预试验用寇氏法找出溃结安的最小全致死量(LD100)及最大全不死量(LD0)，结果LD0＝1.5g/kg×bid。LD100＝4.5g/kg×bid。
b.正式试验取小鼠50只，随机分5组，每组10只，按下表所示浓度及剂量连续两次灌胃给药，每次间隔2h，给药后连续观察7天，结果见表1。
表1溃结安栓剂小鼠经口急性毒性试验
用CAS10fx-180p计算器，程序按Bliss法计算LD50。表2 LD50Bliss法列表
|Yr-Y|＜0.2，，回归结果满意，计算结果为LD50＝7465.91mg/kgS50＝2.48×10-295％可信限(FL)＝6673.03～8352.97mg/kg结论小鼠经口LD507.4g/kg，成人每次45ml，每日2次，共90ml(相当于生药1800mg)。该药的LD50为成人用量的164.4倍。因此，可以认为溃结安安全无毒。
溃结安局部刺激试验试验目的观察溃结安多次大鼠口腔内喷入后所产生的刺激反应情况。
受试物溃结安，本发明提供。
受试物SD大鼠、体重200±20g，雌雄兼用，二级，购自自治区实验动物中心。
方法与结果取大鼠15只，随机分3组，每组5只，用喷雾瓶给两组动物口腔内喷入两个不同浓度的溃结安，每日3次，连续7天；对照组喷入生理盐水。末次给药后24h处死动物，取出口腔组织，观察有无充血、红肿、出血等现象，并将口腔粘膜组织送新疆医科大学病理教研室进行病理组织学检查。
结果，3组动物给药7天后，取出口腔组织，用肉眼观察无充血、红肿、出血等现象；病理组织学检查虽有鳞状皮增生，局部上皮角下突。血管内膜增厚等变化，但3组之间无差异。因此，溃结安对粘膜无刺激性。
溃结安的药理学研究摘要溃结安，10粒/板。体外试验，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、β-溶血性链球菌有抑制作用。动物试验，能显著抑制角叉菜胶所致小鼠足肿胀及小鼠腹腔白细胞游出；抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高；抑制大鼠棉球肉芽组织增生；抑制醋酸所致小鼠扭体反应；抑制酵母所致大鼠体温升高；延长小鼠游泳时间；并对DNCB诱导的小鼠迟发型超敏反应有抑制趋势；能使小鼠凝血时间明显缩短。同时采用发光法测定该药的抗氧化功能，结果，该制剂对人血PMNs受酵母多糖刺激时产生的化学发光有抑制作用，能对非细胞性自由基体系产生的O2-、OH·、H2O2等有很强的清除作用。
试验目的采用与该药功能主治相关的药效学试验方法，系统地观察溃结安的抗菌、消炎、解热、止痛、抗疲劳、抗氧化功能以及对免疫系统的影响。
试验动物昆明种小鼠，一级，体重19.5±1.5g，雌雄各半，监测符合标准；NIH小鼠，二级，体重20±1.4g，雌雄各半，监测符合标准；Wistar大鼠，二级，体重210±10g，雌雄各半，监测符合标准；均购自新疆维吾尔自治区医学试验动物中心。
试验菌种大肠杆菌、β-溶血性链球菌。金黄色葡萄球菌，均购自上海卫生防疫站。
受试药物溃结安，本发明提供，批号980827、981026、981217。
对照药地塞米松，无锡市第七制药厂，批号970712。
试验试剂角叉菜胶，辽宁药物研究所产品；DNCB(2.4-二硝基氯苯)，上海试剂一厂产品；鲁末诺、黄嘌呤氧化酶、次黄嘌呤等，美国sigma公司产品；CuSO4、VitC、H2O2等均为国产试剂。
方法与结果1、体外抗菌作用本试验采用的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、β-溶血性链球菌为试验菌株，用体外试验将三种细菌经24小时斜面培养后再转种液体培养基中，经16-18小时活化，稀释1倍后取0.1ml涂于营养琼脂的培养皿表面上，然后立即放入浸有不同试样和剂量的虑纸片(直径0.8cm)，37℃培养24小时后观察抑菌圈大小。结果，不同剂量的溃结安对被测试的三种菌有很强的抑制作用，其中对金黄色葡萄球菌和β-溶血性链球菌的抑菌作用大于对大肠杆菌的抑制作用。
2、消炎作用(1)对小鼠足跖角叉菜胶致肿的影响。取昆明种小鼠50只，随机分5组，每组10只，每日两次，ig给药9天，于末次给药后1h，用2％角叉菜胶0.06ml注入小鼠足跖中央皮下，致炎后1h、6h、24h，用千分尺测量足跖厚度，以致炎前后足跖厚度为肿胀度进行组间均数t检验(表1)。
表1 溃结安对小鼠足跖角叉菜胶致肿的影响(X±SD)
注对生理盐水对照组比较*p＞0.05，**p＜0.05，***p＜0.01。(下同)(2)醋酸所致的小白鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响取昆明种小鼠50只，雌雄兼用，随机分5组，每组10只动物，每日两次，连续ig5天，末次给药后30min，小鼠尾静脉注射伊文斯蓝(2g/100ml)0.15ml/只，同时ip0.6％醋酸0.2ml/只，20min后处死小鼠，剪开腹腔，用5ml蒸馏水冲洗腹腔数次，收集洗涤液5-6ml，2500rpm离心5min，用721-型分光光度计590nm处测定吸收度(OD值)(表2)。
表2溃结安对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响(X±SD)
(3)对大鼠腹腔白细胞游走的影响取SD大鼠48只，随机分6组，各组按剂量连续ig9天，末次给药后1h除对照组外各组小鼠ip角叉菜胶0.4ml/只(10mg/ml)，5h后处死动物，用3ml生理盐水冲洗腹腔，收集洗涤液1ml，置于小试管内，按白细胞计数方法计数白细胞数，以白细胞数均数为指标进行组间t检验(表3)。
表3 溃结安对角叉菜胶所致的腹腔白细胞游走的影响(X±SD)
注与模型组比较ΔΔΔp＜0.01。
(4)对大鼠棉球肉芽肿的影响，取大鼠40只，随机分5组，每组8只，在戊巴比妥纳麻醉下，将两个来菌棉球(20±0.2mg)分别植入两侧蹊部皮下。每日两次，连续ig7天，第8天处死动物，剥离并取出棉球肉芽组织，于60℃烘箱内干燥12h后称重，减去原棉球重，即为肉芽肿净重(表4)。
表4 溃结安对大鼠棉球肉芽肿形成的影响(X±SD)
3.对醋酸所致小鼠扭体反应的影响取昆明种小鼠50只，随机分5组，按下次剂量，每日两次，连续ig4天，末次给药后h每鼠ip5％醋酸0.2ml/只，观察每只小鼠15min内因疼痛引起的扭体次数，以扭体次数进行组间均数t检验(表5)。
表5 溃结安对小鼠醋酸致痛扭体反应的影响(X±SD)
4.对小鼠游泳时间的影响取小鼠60只，随机分6组，每组10只，每日两次，ig给药6天，末次给药后1小时将小鼠放入装有深12cm温度保持在20±0.5℃水缸内，开始计时，并把小鼠头部深入水中以不能浮出水面为体力耗竭时间，与对照组小鼠比较进行化学处理(表6)。
表6 溃结安对小鼠游泳时间的影响(X±SD)
5.对小鼠凝血时间的影响取小鼠40只，随机分4组，每日两次，连续ig7天。末次给药后用眼科全聂迅速摘取一测眼球，即有血液流出，将血滴于载玻片的两端各一滴，血滴直径为0.5cm，立即用秒表计时，每隔30秒用清洁大头针自血滴边缘向里轻轻拨动一次，并观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血丝止所历时间即凝血时间，与对照组进行检验(表7)。
表7 溃结安对小鼠凝血时间的影响(X±SD)
6.对DNCB诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响取小鼠60只，随机分5组，每日两次连续ig给药11天，于给药第5天，每鼠腹部剪毛(2×2cm2)，将1％DNCB溶液50 l均匀涂抹于小鼠右耳两面进行抗原攻击，攻击后24小时处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm的耳片，称重；以左右耳片重量为肿胀度观察各组的差异(表8)。
表8 溃结安对NCB诱导的迟发型超每反应的影响(X±SD)
7.溃结安的清除自由基功能测定PMNS呼吸爆发产生的自由基的清除作用，采用PMNS-酵母多糖-鲁米诺化学发光体系；(2)对超氧阴离子O2-的清除作用，采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-鲁米诺化学发光体系；(3)对羟自由基OH·的清除作用，采用CuSO4-VitC-酵母-H2O2化学发光体系；(4)H2O2的分解作用，采用血红蛋白(Hb)-鲁米诺-ddH 2-OH-化学发光体系。结果，溃结安对
；OH·、H2O2及PMNS呼吸爆发产生的多种活性氧有明显的清除作用(表9)。
表9 溃结安的清除自由基作用
注*IC50系抑制发光50％时的药物浓度。
小结本项研究结果表明，溃结安对金黄色葡萄球菌、β-溶血性链球菌、大肠杆菌等常见致病菌有很强的抑制作用，其中对前两个菌种的抑制作用大于大肠杆菌的抑制作用。明显抑制角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀及大鼠腹腔白细胞游出；抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增加；抑制棉球肉芽肿；抑制醋酸所致小鼠扭体反应延长小鼠游泳时间；并能抑制DNCB诱导的小鼠迟发型超敏反应，能使小鼠凝血时间明显缩短，证明其对急、慢性炎症反应均有显著抑制作用，并能有效抑制炎症阶段毛细血管的通透性，减轻渗出反应，同时有较强的解热止痛及抗疲劳功能。体外试验，溃结安对人血PMNs受酵母多糖刺激时产生的化学发光有抑制作用，非细胞性自由基体系产生的
OH·、H2O2等有很强的清除作用，这提示该药具有抗氧化功能。以上结果为溃结安治疗溃疡性结肠炎提供了较好的药效学基础。
本发明所述的溃结安栓剂，使用时对患有慢性溃疡性肠炎(腹泻、腹痛、脓便血)较重者，每天使用2次，每次1粒，总有效率86.6％，对患有慢性溃疡性肠炎(腹泻、腹痛、脓便血)较轻者，每次1粒，总有效率88.3％。
实施例1a、首先将没食子1份粉碎成粉末，加水5倍-25倍浸泡，浸泡时间24小时，煎煮20分钟，再加水3倍-15倍克煎煮20分钟，第三次加水，2倍-10倍煎煮20分钟，过滤，将滤液合并，浓缩至相对密度为1.10的浸膏，该浸膏的有效部位为鞣质和没食子酸，其含量为50％；b、将浸膏真空干燥，温度为45℃，粉碎200目过筛备用；c、用半自动栓剂灌装机将混合脂肪酸甘油酯熔融，温度保持在45℃，将浸膏粉1份加入熔融后的混合脂肪酸甘油酯中搅拌30分钟，待接近基质固化温度38℃时，采用常规方法制成缓释栓剂。
使用时对患有慢性溃疡性肠炎(腹泻、腹痛、脓便血)较重者，每天使用2次，每次1粒，总有效率86.6％。对患有慢性溃疡性肠炎(腹泻、腹痛、脓便血)较轻者，每天使用1次，每次1粒，总有效率88.3％实施例2a、首先将没食子1份粉碎成粉末，加水浸5倍-25倍泡，浸泡时间24小时，煎煮40分钟，再加水3倍-15倍煎煮40分钟，第三次加水2倍-10倍煎煮40分钟，过滤，将滤液合并，浓缩至相对密度为1.25的浸膏，该浸膏的有效部位为鞣质和没食子酸，其含量为60％；b、将浸膏真空干燥，温度为50℃，粉碎200目过筛备用；c、用半自动栓剂灌装机将混合脂肪酸甘油酯熔融，温度保持在55℃，将浸膏粉2份加入熔融后的混合脂肪酸甘油酯中搅拌40分钟，待接近基质固化温度40℃时，采用常规方法制成缓释栓剂。
使用时对患有慢性溃疡性肠炎(腹泻、腹痛、脓便血)较重者，每天使用2次，每次1粒，总有效率86.6％。对患有慢性溃疡性肠炎(腹泻、腹痛、脓便血)较轻者，每天使用1次，每次1粒，总有效率88.3％。
实施例3a、首先将没食子1份粉碎成粉末，加水5倍-25倍浸泡，浸泡时间24小时，煎煮60分钟，再加水3倍-15倍煎煮60分钟，第三次加水2倍-10倍煎煮60分钟，过滤，将滤液合并，浓缩至相对密度为1.50的浸膏，该浸膏的有效部位为鞣质和没食子酸，其含量为80％；b、将浸膏真空干燥，温度为60℃，粉碎200目过筛备用；c、用半自动栓剂灌装机将混合脂肪酸甘油酯熔融，温度保持在60℃，将浸膏粉3份加入熔融后的混合脂肪酸甘油酯中搅拌20分钟，待接近基质固化温度45℃时，采用常规方法制成缓释栓剂。
使用时对患有慢性溃疡性肠炎(腹泻、腹痛、脓便血)较重者，每天使用2次，每次1粒，总有效率86.6％。对患有慢性溃疡性肠炎(腹泻、腹痛、脓便血)较轻者，每天使用1次，每次1粒，总有效率88.3％。
权利要求
1.一种溃结安栓剂，其特征在于以没食子为原料，将没食子1份粉碎，加水5倍-25倍浸泡、煎煮，过滤、将滤液合并、浓缩至相对密度为1.10-1.30的浸膏，其中有效部位鞣质和没食子酸含量为50％-80％；然后将浸膏经真空干燥，粉碎过筛，加入熔融后的混合脂肪酸甘油酯，搅拌，采用常规方法制成栓剂。
2.一种溃结安栓剂的制备方法，其特征在于按下例步骤进行a、首先将没食子1份粉碎成粉末，加水5倍-25倍浸泡，浸泡时间24小时，煎煮20分钟-60分钟，再加3倍-15倍水煎煮20分钟-60分钟，第三次加2倍-10倍水煎煮20分钟-60分钟，过滤，将滤液合并，浓缩至相对密度为1.10-1.30的浸膏，该浸膏的有效部位为鞣质和没食子酸，其含量为50％-80％；b、将浸膏真空干燥，温度为45℃-60℃，粉碎50-200目过筛备用；c、用半自动栓剂灌装机将混合脂肪酸甘油酯熔融，温度保持在45℃-60℃，将浸膏粉1-3份加入熔融后的混合脂肪酸甘油酯中搅拌20分钟-40分钟，待接近基质固化温度38℃-45℃时，采用常规方法制成缓释栓剂。
全文摘要
本发明涉及一种溃结安栓剂是以没食子为原料,采用将没食子粉碎、用水浸泡,煎煮,过滤,将滤液合并、浓缩成浸膏,其中有效部位鞣质和没食子酸含量为50%－80%;然后将浸膏经真空干燥,粉碎过筛,加入熔融后的混合脂肪酸甘油酯搅拌,采用常规方法制成缓释栓剂。该栓剂具有抗菌消炎,止痛止血,抗氧化,促进溃疡愈合等功效,用于治疗慢性溃疡性结肠炎(腹泻、腹痛和脓血症)。经动物试验及临床应用观察无毒副作用,对108例慢性溃疡性结肠炎的腹痛、腹泻和脓血症等采用溃结安栓剂治疗,其疗效显著,治疗总有效率为88.3%。
文档编号A61P1/00GK1382487SQ0212052
公开日2002年12月4日 申请日期2002年5月23日 优先权日2002年5月23日
发明者哈木拉提·吾甫尔, 斯拉甫·艾白, 阿不都热衣木·玉苏甫 申请人:哈木拉提·吾甫尔, 斯拉甫·艾白