专利名称：红景天和冬虫夏草组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种以红景天和冬虫夏草为原料的组合物配方，该组合物具有抗辐射、免疫增强功能。
红景天，属景天科，红景天属(Rhodiola L.)植物，是生长在海拔3500米-5000米极端环境下的一类天然药用植物，其主要药用部位为根及根茎。红景天的医药保健功效早在藏医经典《四部医典》和《本草纲目》就有记载，近年来国内外研究发现红景天苷为红景天提取物中的主要有效成份，实验和临床数据表明红景天提取物具有广泛的药理作用，主要有(1)使受辐射骨髓有核细胞数和存活率增加，具有明显的抗辐射作用(2)提高血液红细胞载氧量，缓解和消除各种疲劳症状，提高体力和脑力劳动的效率。
冬虫夏草，为麦角菌科真菌冬虫夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)寄生在蝙蝠科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，其菌丝体已被分离和人工培养。经过中外医学专家和生物学家的深入研究发现虫草是一座神奇的营养保健宝库，它含有人体所需的绝大部分营养成份，其主要功效成份为虫草素即腺嘌呤核苷。冬虫夏草的药理作用主要表现在(1)免疫调节和免疫增强功能显著激活单核巨噬细胞和巨噬细胞的作用，明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率，拮抗可的松所致小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制，通过对巨噬细胞表面Fc受体数目的增多增强巨噬细胞对抗原信息的识别、处理和传递能力，并通过Fc受体实现对靶细胞ADCC效应；促进脾淋巴细胞增殖，提高脾脏淋巴细胞E-玫瑰花形成率，并能明显拮抗强的松龙及环磷酰胺所致小鼠T淋巴细胞E-玫瑰花结形成的抑制；促进淋巴细胞有丝分裂，对T、B淋巴细胞的增殖有显著的诱导活性；显著增强小鼠脾脏NK活性，并能明显拮抗环磷酰胺所致NK活性的抑制。(2)促进造血功能冬虫夏草具有显著的促进生血作用。明显提高小鼠骨髓造血干细胞(CFU-S)的周期状态，促进CFU-S增殖。有效拮抗三尖杉酯碱所致小鼠骨髓红系祖细胞(CFU-E)的抑制；促进小鼠脾巨核细胞增殖分化成熟，升高血小板，并能显著保护60Coγ射线照射所致小鼠的血小板损伤，减少血小板数下降幅度，使血小板超微结构保持基本正常。
本发明的目的在于提供一种以红景天和冬虫夏草为原料的组合物配方，以提高红景天和冬虫夏草的抗辐射免疫增强的功效。
本发明根据中医药理论结合实验研究的结果，将红景天提取物和冬虫夏草提取物或冬虫夏草菌丝体纯粉按一定比例配制所得组合物，或将红景天和冬虫夏草按一定比例混合后再用水和乙醇提取所得组合物，突破了单方红景天和单方冬虫夏草的局限性，其显效更加迅速，作用更加强大持久(1)具有明显抗辐射作用(2)明显促进红细胞合成的作用(3)显著提高人体免疫球蛋白水平，增强人体免疫功能。
本发明的目的还在于提供所述红景天和冬虫夏草组合物的制备方法。
本发明所涉及的红景天和冬虫夏草组合物的制备方法包括红景天和冬虫夏草按一定比例混合后用水和乙醇提取制备本组合物；红景天提取物的制备、冬虫夏草提取物制备、红景天提取物和冬虫夏草提取物或冬虫夏草按一定的比例混合得本组合物；该组合物可制成胶囊、片剂、口服液或颗粒剂。
本发明的红景天和冬虫夏草组合物的制备工艺如下(1)红景天提取物的制备以红景天的根及根茎为原料切片干燥后粉碎成粗粉，粗粉用50-75％的乙醇回流提取，提取液过滤、浓缩、干燥即得红景天提取物，该提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，可以得到纯化的红景天提取物。
(2)冬虫夏草提取物的制备冬虫夏草或冬虫夏草菌丝体用水浸泡2-4小时后，煎提2-3次，每次2-3小时，提取液过滤后，减压浓缩，干燥即得冬虫夏草提取物。
(3)红景天和冬虫夏草组合物的制备将红景天和冬虫夏草按一定的比例混合后分别用水和乙醇提取、浓缩、干燥即可制得本组合物；或将红景天提取物和冬虫夏草提取物或冬虫夏菌丝体纯粉按一定比例混合得本组合物，该组合物可制成胶囊、片剂、口服液或颗粒剂；急性毒性实验昆明种小鼠，体重20-22g，；SD大鼠，体重182-220g，雌雄各10只，实验剂量为10g/kg.bw，灌胃量每只小鼠按0.02ml/10g.bw，大鼠按2.0ml/10g.bw，经口灌胃两次，两次间隔2小时，灌胃后，观察两周，记录动物的毒性反应和死亡情况。
对小鼠和大鼠的经口急性毒性实验结果动物品种性别 数量 途径剂量 死亡LD50结论(g/kg.bw) 动物数 (g/kg.bw)昆明种小鼠 雄10 经口10.0 0 ＞10.0实际无毒雌10 经口10.0 0 ＞10.0实际无毒SD大鼠 雄10 经口10.0 0 ＞10.0实际无毒雌10 经口10.0 0 ＞10.0实际无毒结果表明各实验剂量组经口灌胃后，无特殊中毒表现，两周内无动物死亡。昆明种小鼠和SD大鼠经口急性毒性均大于10g/kg.bw，属于实际无毒类，所以本发明的红景天和冬虫夏草组合物是安全无毒的。
抗辐射功效学试验选雌性昆明种小鼠，随机分为对照组、辐射对照组和本组合物试验组。试验组动物分别按推荐剂量1.0g/人/日(16.66mg/kg.bw)的10、20、30倍剂量(166.6、333、500mg/kg.bw)每天灌胃一次，共30天。空白对照组和辐射对照组每天用蒸馏水灌胃。于灌胃后第三周将辐射对照组和三个试验组动物用60Coγ射线进行照射，每天一次，1.0Gy/次，共10次。辐射距离80cm。吸收剂量0.01cGy/min。末次辐射后5天取血并处死一批动物测定外周血白细胞数(WBC)，取股骨骨髓测定有核细胞数、取胸骨骨髓按《食品安全性毒理学评价程序和方法》中，“微核实验‘规定的方法制片、染色、镜检；另一批动物留作观察第一次辐射后30天存活率及平均存活时间。
本组合物对小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数的影响组别 剂量 动物数白细胞数 有核细胞数(mg/kg.bw)(只) ×109/L ×106/L空白对照 0.0 12 7.88±1.28 18.51±5.72辐射对照 0.0 12 0.53±0.25*1.14±0.41*组合物 166.66 12 0.25±0.10*▲ 1.34±.38*333.3 12 0.20±0.07*▲ 1.88±0.66*▲500.0 12 0.21±0.09*▲ 2.43±1.05*▲*P＜0.01(与空白组对照比较)；▲P＜0.01(与辐射对照组比较)
对小鼠骨髓细胞微核率的影响组别 剂量 动物数 嗜多红细胞数 微核数 微核率(mg/kg.bw) (只) (个/只) (个) ‰空白对照 0.00 101000 1.91±1.1 1.9辐射对照 0.00 101000 23.1±3.8*23.1组合物 166.6 101000 12.7±3.8*▲ 12.7333.3 101000 13.0±3.6*▲ 13.0500.0 1010007.8±2.1*▲ 7.8*P＜0.01(与空白组对照比较)；▲P＜0.01(与辐射对照组比较)对小鼠受辐射后30天存活率的影响组别 剂量 观察动物数 30天存活动物数 存活率(mg/kg.bw) (只) (只) (％)空白对照0.0 15 15 100.0辐射对照0.0 15 00.0*组合物166.6 15 2 13.3*333.3 15 00.0*500.0 15 4 26.7*▲*P＜0.001(与空白组对照比较)；▲P＜0.05(与辐射对照组比较)结果表明红景天提取物和冬虫夏草菌丝体纯粉组合物能使受辐射小鼠骨髓有核细胞数增加(P＜0.01)，30天存活率增加(P＜0.05)骨髓嗜多染红细胞微核率降低(P＜0.01)，具有明显抗辐射作用。
人体实验实验对象中长跑运动员20名，均为男性，根据身高和体重随机分为两组(1)实验组10人，每天服用由本发明组合物制成的胶囊六粒(每粒含红景天提取物180mg，冬虫夏草菌丝体纯粉120mg)，连续服用4个星期。(2)对照组10人，服用等量空白对照品。实验期间两组受试者均进行正常训练。
血细胞分析于实验开始和结束时进行运动测试的当天进行早晨抽取空腹静脉血，置于肝素锂抗凝试管中。用ADVIA-120型全血细胞分析仪(美国拜尔公司)测定红细胞记数(RBC)、血红蛋白浓度(KBG)和红细胞比积(HCT)。
血清免疫球蛋白测定用透射比浊法测定G型免疫球蛋白(IgG)、A型免疫球蛋白(IgA)和M型免疫球蛋白(IgM)含量。测定仪器为KEYSYS，试剂罗氏试剂。
血细胞分析结果组别RBC计数HB HCT(×1012cells/l)(g/l) (l/l)对照组 实验前4.61±0.196148.7±7.07 0.41±0.03(n＝10) 实验后4.66±0.175151.1±5.38 0.42±0.02实验组 实验前4.59±0.208139.2±9.37 0.40±0.02(n＝10) 实验后4.81±0.178*165.4±6.00*0.48±0.03服用前后有显著性差异，P＜0.05对照组受试者的红细胞计数、血红蛋白和红细胞比积，实验后和实验前相比，均无明显差异。实验组受使者的红细胞计数、血红蛋白和红细胞比积，实验后与实验前相比，均有明显差异(P＜0.05)。结果表明服用本组合物对受试者具有显著的促进红细胞合成的作用。
血清免疫球蛋白测试结果组别 IgA IgG IgM(g/l) (g/l) (g/l)对照组 实验前 1.08±0.21 1.72±0.38 1.33±0.21(n＝10) 实验后 1.06±0.18 1.64±0.19 1.38±0.38实验组 实验前 0.96±0.16 1.05±0.18 1.39±0.21(n＝10) 实验后 1.65±0.25*1.80±0.45*1.46±0.56服用前后有显著性差异，P＜0.05实验组和对照组受试者的血清IgM水平，实验后与实验前相比，没有显著性差异。实验组受试者的IgA，IgG水平，实验后与实验前相比，均有显著性提高(P＜0.05)。结果表明服用本组合物能显著提高受试者免疫球蛋白水平。
实施例红景天根及根茎干燥、切片、粉碎成粗粉，取1KG粗粉，用75％乙醇分四次，每次4000ml，30分钟浸取，减压浓缩回收乙醇，得浓缩液约1200g，再用等量的蒸馏水搅匀，静置，过滤处理多次，减压浓缩得浓缩水液，浓缩水液干燥可直接得红景天提取物。该提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取可得到进一步纯化。利用高效液相色谱确定红景天提取物和冬虫夏草菌丝体纯粉中主要功效成份红景天苷和腺苷的含量。最后将红景天提取物180mg(含红景天苷4.2mg)，冬虫夏草菌丝体纯粉120mg(含腺苷0.18mg)混合制成胶囊。即得本发明所述的组合物中的一种。
权利要求
1.本发明提供一种以红景天和冬虫夏草为原料的组合物配方。
2.如权利要求1所述该组合物是由红景天提取物和冬虫夏草提取物或冬虫夏草菌丝体纯粉按一定的比例混合而成。
3.如权利要求1所述该组合物是由红景天和冬虫夏草按一定比例混合后用水和乙醇提取制备而成。
4.如权利要求1所述的组合物中各组份的重量百分比为红景天提取物10-90％，冬虫夏草提取物或冬虫夏草菌丝体纯粉为10-90％。
5.如权利要求1所述的红景天和冬虫夏草组合物是胶囊、片剂、口服液和颗粒剂中的一种。
6.如权利要求2所述的红景天提取物的制备方法，其特征包括将红景天根及根茎干燥粉碎成粗粉；粗粉用50-75％乙醇提取，提取液经浓缩、干燥，得红景天提取物，该提取物用有机溶剂萃取可进一步纯化。
7.如权利要求6所述的有机溶剂为石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇。
8.如权利要求2所述的红景天提取物，包括从50-75％乙醇提取液浓缩干燥得到的红景天提取物；或将该提取物用有机溶剂萃取纯化得到的红景天提取物。
9.如权利要求2所述的冬虫夏草提取物制备方法，其特征为将冬虫夏草和冬虫夏草菌丝体用水浸泡、煎提、过滤、减压浓缩干燥即得冬虫夏草提取物。
全文摘要
本发明提供红景天和冬虫夏草组合物及其制备方法。本发明以红景天根及根茎为原料制备红景天提取物，以冬虫夏草和冬虫夏草菌丝体为原料制备冬虫夏草提取物，最后将红景天提取物与冬虫夏草提取物或冬虫夏草菌丝体纯粉按一定比例混合制备该组合物；或将红景天和冬虫夏草按一定比例混合后再用水和乙醇提取制备该组合物，该组合物可制成胶囊、片剂、口服液、颗粒剂等。实验表明该组合物具有明显抗辐射、增强人体免疫的功能。
文档编号A61P43/00GK1480206SQ0213368
公开日2004年3月10日 申请日期2002年9月2日 优先权日2002年9月2日
发明者刘宏璧 申请人:成都浦泓生物科技开发有限公司