冬虫夏草提取物的制备方法及应用的制作方法
【专利摘要】本申请涉及冬虫夏草提取液的制备方法及应用。具体而言，本申请涉及制备冬虫夏草提取物的方法，其中所述方法包括将冬虫夏草与磷酸盐缓冲液接触的步骤。本申请还涉及利用所述方法制备的冬虫夏草提取物，包含所述冬虫夏草提取物的组合物或试剂盒，以及所述的冬虫夏草提取物在制备化妆品中的应用。本申请提供的冬虫夏草提取物有较好的抗氧化活性，并且对皮肤有延缓衰老的作用，有护肤功效。
【专利说明】冬虫夏草提取物的制备方法及应用
【技术领域】
[0001] 本申请涉及冬虫夏草提取物的制备方法及应用。具体而言，本申请涉及通过磯酸 盐缓冲液制备冬虫夏草提取物的方法，W及所获得的冬虫夏草提取液在美容方面的应用。
【背景技术】
[0002] 冬虫夏草（Cordyceps sinensis)是一种特殊的虫和真菌共生的生物体，含有多种 生物活性物质和营养物质，主要包括核巧类物质（虫草素、腺巧等）、虫草多糖、D-甘露醇、 留醇、超氧化物歧化酶及氨基酸等，具有抗肿瘤、抗菌、调节也血管、增强免疫等功能。冬虫 夏草为冬虫夏草真菌（球壳目、麦角菌科、虫草属）的虫生真菌，寄生于骗幅蛾（鱗翅目骗 幅蛾科骗幅蛾属昆虫）的幼虫，W其体内的有机物质作为营养能量来源进行寄生生活，经 过不断生长发育和分化后，最终菌丝体扭结并形成子座伸出寄主外壳，从而形成的一种特 殊的虫菌共生的生物体，它的一端是骗幅蛾幼虫的遗骸，另一端是寄生虫体繁殖的外形似 草的真菌子座。
【发明内容】
[0003] 发明人研究发现磯酸盐缓冲液能够用于制备冬虫夏草（Cordyceps sinensis)提 取物，所述提取物有利地具有抗氧化、延缓衰老和/或保水作用。
[0004] 因此，本申请提供制备冬虫夏草提取物的方法，其中所述方法包括将冬虫夏草与 磯酸盐缓冲液接触的步骤。
[0005] 本申请还提供用于制备冬虫夏草提取物的试剂盒，所述试剂盒包含冬虫夏草和磯 酸盐缓冲液。在一些实施方案中，所述试剂盒还包含使用说明书。
[0006] 本申请还提供磯酸盐缓冲液用于制备冬虫夏草提取物的应用。
[0007] 本申请还提供利用所述方法制备的冬虫夏草提取物。
[0008] 本申请还提供包含所述冬虫夏草提取物的组合物或试剂盒。在一些实施方案中， 所述组合物或试剂盒是美容组合物或试剂盒，例如美容液，美容膏，美容套装等。在一些实 施方案中，所述美容组合物和/或试剂盒可W包括其它辅剂，如表面活性剂、醇类。在一些 实施方案中，所述美容组合物和/或试剂盒可W包括例如其它抗敏、保水和/或抑菌等成 分。在一些实施方案中，所述试剂盒可W包含其它美容工具。
[0009] 本申请还提供所述的冬虫夏草提取物在制备化妆品/美容剂中的应用。
[0010] 在本申请的各种实施方案中，使用的磯酸盐缓冲液的抑值可W在7. 0至8. 2的 范围内，包括例如 7. 1,7. 2,7. 3,7. 4,7. 5,7. 6,7. 7,7. 8,7. 9,8. 0,8. 1,8. 2 的范围。可 W通 过将冬虫夏草破碎，放入配制的磯酸盐缓冲液中浸提适当时间（例如IOmin至240min，例 女口 IOmin,20min,SOmin,40min,SOmin,60min,TOmin,SOmin,90min,IOOmin,IlOmin,120min, 150min, 160min, 180min，240min等），然后离也，即可容易地获得冬虫夏草提取物。在一些 实施方案中，所述磯酸盐缓冲液的抑值在7. 6至8. 0的范围内。在一些实施方案中，所述 磯酸盐缓冲液的抑值为7. 8。
[0011] 发明人研究发现冬虫夏草在不同抑磯酸盐缓冲液的提取物具有皮肤保水、延缓 衰老等作用。发明人通过邻苯H酷自氧化法测定虫草磯酸盐提取液的自氧化抑制率；小鼠 注射D-半乳糖建立衰老模型，鉴定衰老模型和使用虫草磯酸盐提取液皮肤涂布小鼠含水 量的变化及SOD和MDA的变化。结果发现加入不同抑磯酸盐提取液后，邻苯H酷自氧化反 应均有明显抑制作用，pH7. 8时效果最好；衰老模型实验中，实验组与模型对照组含水量、 SOD及MDA均有显著性差异（P < 0. 01)，而抑7. 2, 7. 4磯酸盐提取液的实验组与正常对照 组之间没有显著性差异（P> 0.05)，pH7. 6,7. 8,8. 0与正常对照组相比有显著性差异（P < 0. 01)，显著提高SOD活性，降低MDA含量，其中抑7. 8提取液效果最佳。因此，冬虫夏草 磯酸盐提取液有较好的抗氧化活性，并且对皮肤有延缓衰老的作用，有护肤功效。
【专利附图】
【附图说明】
[001引图1 ;不同抑的磯酸盐提取物对邻苯；酷自氧化的抑制率。
【具体实施方式】
[001引 1材料和方法
[0014] 1.1 材料
[00巧]0. 05mol/L 磯酸盐缓冲液，pH7. 2, 7. 4, 7. 6, 7. 8,8. 0
[0016] 冬虫夏草（Cordyceps sinensis)发酵液由中国农业科学院原子能利用所提供；
[0017] 动物；3月龄雌性昆明小鼠，体重20-25，SPF级
[0018] 1.2试验方法
[0019] 1. 2. 1磯酸盐提取物制备：
[0020] 1. 2. 1. 1菌体细胞的制备：
[0021] 将适量发酵液置于离也管中，200化pm离也lOmin，出去上清液，得到菌体细胞沉 淀。
[0022] 1. 2. 1. 2提取物制备：
[002引沉淀按每克10血磯酸盐缓冲液的比例，加入不同抑(7. 2,7. 4,7. 6,7. 8,8. 0)的 0. 05mol/L磯酸盐缓冲液浸泡后冰浴中超声破碎（10曲Z，15min)，浸提90min，于高速冷冻 离也机中1000化pm离也20min，得上清液即为冬虫夏草提取液。
[0024] 1. 2. 2提取物抗氧化活性检测：
[00巧]利用邻苯H酷在碱性条件下能迅速自氧化，释放出（V，生成带色的中间产物，有 色中间产物的累积时间有线性关系，一般维持在4min。加入酶液则抑制其自氧化速度，在 325nm处测定溶液的吸光度。
[0026] 在试管中按表1加入缓冲液和双蒸水，25C恒温20min后加入25C预热过的邻苯 H酷（对照管用lOmmol/L盐酸代替），迅速摇匀，立即倒入比色杯中，在波长325皿处每30s 测定一次吸光度值。
[0027] 表1邻苯H酷自氧化速率测定加样表
[0028]
【权利要求】
1. 制备冬虫夏草（Cordyceps sinensis)提取物的方法，其中所述方法包括将冬虫夏 草与磷酸盐缓冲液接触的步骤。
2. 权利要求1所述的方法，其中所述磷酸盐缓冲液的pH值在7. 0至8. 2的范围内。
3. 权利要求1或2所述的方法，其中所述磷酸盐缓冲液的pH值在7. 6至8. 0的范围 内。
4. 权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述磷酸盐缓冲液的pH值为7. 8。
5. 用于制备冬虫夏草提取物的试剂盒，所述试剂盒包含冬虫夏草和磷酸盐缓冲液，优 选所述磷酸盐缓冲液的pH范围为权利要求2-4中任一项定义的范围。
6. 磷酸盐缓冲液用于制备冬虫夏草提取物的应用，优选所述磷酸盐缓冲液的pH范围 为权利要求2-4中任一项定义的范围。
7. 权利要求1-4中任一项的方法制备的冬虫夏草提取物。
8. 包含权利要求7所述冬虫夏草提取物的组合物或试剂盒。
9. 权利要求8所述的组合物或试剂盒，其中所述组合物或试剂盒是美容组合物或试剂 盒，例如美容液，美容膏，美容套装等。
10. 权利要求7所述的冬虫夏草提取物在制备化妆品中的应用。
【文档编号】A61Q19/08GK104224686SQ201410549351
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】张伟 申请人:张伟