一种鸭脚木提取物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然药物提取技术领域，具体涉及一种鸭脚木提取物及其制备方法和 应用。
【背景技术】
[0002] 现有的抗炎药物多为西药，其中最广泛使用的为地塞米松。地塞米松又名氟美松、 氟甲强地松龙、德沙美松，是糖皮质类激素。其衍生物有氢化可地松、泼尼松等，其药理作 用主要是抗炎、抗毒、抗过敏、抗风湿，但其为化学合成药物，长期使用不免引起以下毒副作 用：医源性库欣综合征面容和体态、体重增加、下肢浮肿、紫纹、易出血倾向、创口愈合不良、 痤疮、月经紊乱、肱或股骨头缺血性坏死、骨质疏松及骨折（包括脊椎压缩性骨折、长骨病 理性骨折）、肌无力、肌萎缩、低血钾综合征、胃肠道刺激（恶心、呕吐）、胰腺炎、消化性溃疡 或穿孔，儿童生长受到抑制、青光眼、白内障、良性颅内压升高综合征、糖耐量减退和糖尿病 加重。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种鸭脚木提取物。
[0004] 本发明的另一目的在于提供上述鸭脚木提取物的制备方法。
[0005] 本发明的再一目的在于提供上述鸭脚木提取物的应用。
[0006] 本发明的具体技术方案如下：
[0007] -种鸭脚木提取物，由第一化合物、第二化合物、第三化合物和第四化合物组成， 结构式分别依次如下所示：
[0010] -种上述鸭脚木提取物的制备方法，包括将干燥的鸭脚木茎皮用乙醇渗漉提取， 减压回收溶剂至无醇味，得流浸膏约；将上述流浸膏用适量水混悬，依次用等体积的石油 醚、乙酸乙酯萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，分别得石油醚部位、乙酸乙酯部位；取上述 乙酸乙酯部位，依次使用流动相为氯仿-甲醇系统的硅胶柱层析、流动相为氯仿-甲醇系统 的Sephadex LH-20柱层析和流动相为甲醇-水系统的高效液相色谱纯化，即得。
[0011] 在本发明的一个优选实施方案中，包括如下步骤：
[0012] (1)将干燥的鸭脚木茎皮粉碎后，在室温下用95~100%乙醇渗漉提取2~4次， 减压回收溶剂至无醇味，得流浸膏；
[0013] (2)将上述流浸膏用适量水混悬，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯，减压回收溶 剂，分别得石油醚部位、乙酸乙酯部位；
[0014] (3)将步骤⑵制得的乙酸乙酯部位经180~350目硅胶柱色谱分离，100:0~ 0:100的环己烷~乙酸乙酯梯度洗脱后，取抗炎活性测试中抑制率达到70%的馏分为第一 馏分，上述乙酸乙酯部位与硅胶柱的填料的质量比为〇. 2~0. 3:1. 5~1. 7 ;
[0015] (4)将上述第一馏分经180~350目硅胶柱色谱分离，100:1~50:50的环己烷~ 乙酸乙酯梯度洗脱后，取抗炎活性测试中抑制率达到70%的馏分为第二馏分，该步骤所用 的硅胶柱填料为步骤（3)所用的硅胶柱填料质量的5~6% ;
[0016] (5)将上述第二馏分经流动相为氯仿：甲醇=1:1的Sephadex LH-20凝胶柱层析 后，得到抗炎活性测试中抑制率达到70%的第三馏分和第四馏分；
[0017] (6)将上述第三馏分经HPLC分离纯化，得到所述第一化合物和所述第二化合物， 该步骤中HPLC的色谱柱为RP C18色谱柱，流动相为76%甲醇水；
[0018] (7)将上述第四馏分经HPLC分离纯化，得到所述第三化合物和所述第四化合物， 该步骤中HPLC的色谱柱为RP C18色谱柱，流动相为80%甲醇水；
[0019] (8)合并上述第一化合物、第二化合物、第三化合物和第四化合物，即得所述鸭脚 木提取物。
[0020] 进一步优选的，所述步骤（1)为：将干燥的鸭脚木茎皮粉碎后，在室温下用95%乙 醇渗漉提取3次，减压回收溶剂至无醇味，得流浸膏。
[0021] 进一步优选的，所述步骤（2)为：将上述流浸膏用适量水混悬，依次用等体积的石 油醚、乙酸乙酯各萃取3~4次，合并萃取液，减压回收溶剂，分别得石油醚部位、乙酸乙酯 部位。
[0022] 再进一步优选的，所述步骤（2)为：将上述流浸膏用适量水混悬，依次用等体积的 石油醚、乙酸乙酯各萃取3次，合并萃取液，减压回收溶剂，分别得石油醚部位、乙酸乙酯部 位，上述乙酸乙酯部位与硅胶柱的填料的质量比为0. 2:1. 5。
[0023] 进一步优选的，所述步骤（3)为：将步骤（2)制得的乙酸乙酯部位经200~300目 硅胶柱色谱分离，100:0~0:100的环己烷~乙酸乙酯梯度洗脱后，取抗炎活性测试中抑制 率达到70%的馏分为第一馏分。
[0024] 进一步优选的，所述步骤（4)为：将上述第一馏分经200~300目硅胶柱色谱分 离，100:1~50:50的环己烷~乙酸乙酯梯度洗脱后，取抗炎活性测试中抑制率达到70%的 馏分为第二馏分。
[0025] -种上述鸭脚木提取物在制备抗炎药物中的应用。
[0026] 本发明的有益效果是：
[0027] 1、本发明的提取物取自鸭脚木的茎皮，来源天然，其中鸭脚木为五加科 (Araliaceae)鹅掌柴属（Schefflera)植物，亦名鹅掌柴，鸭脚木以茎、皮、叶等入药，性苦 味甘，民间常作为祛风镇痛药，有镇静、镇痛和催眠作用，长期使用无毒副作用；
[0028] 2、本发明的鸭脚木提取物由第一至第四化合物组成，上述化合物均具有良好的抗 炎活性，且无明显毒副作用。
【具体实施方式】
[0029] 以下通过【具体实施方式】对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
[0030] 实施例1
[0031] (1)将干燥的鸭脚木茎皮20kg粉碎后，在室温下用120L 95%乙醇渗漉提取3次， 减压回收溶剂至无醇味，得流浸膏2. 5kg。
[0032] (2)将上述流浸膏用适量水混悬，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯各萃取3次， 合并萃取液，减压回收溶剂，分别得石油醚部位、乙酸乙酯部位。
[0033] (3)将步骤⑵制得的乙酸乙酯部位200g经200~300目硅胶柱（1. 5kg装柱） 色谱分离，100:0~0:100的环己烷~乙酸乙酯梯度洗脱后，分离得到14个馏分，取其中唯 一抗炎活性测试中抑制率达到70%的馏分为第一馏分（7. 8g)。
[0034] (4)将上述第一馏分经200~300目硅胶柱（80g装柱）色谱分离，100:1~50:50 的环己烷~乙酸乙酯梯度洗脱后，分离得到8个馏分，取其中唯一抗炎活性测试中抑制率 达到70%的馏分为第二馏分。
[0035] (5)将上述第二馏分经流动相为氯仿：甲醇=1:1的Sephadex LH-20凝胶柱层析 后，分离得到4个馏分，取抗炎活性测试中抑制率达到70 %的两个馏分分别为第三馏分和 第四馏分；
[0036] (6)将上述第三馏分经HPLC分离纯化，得到第一化合物和所述第二化合物，结构 式分别如下：
[0038] 该步骤中HPLC的色谱柱为RP C18色谱柱（5ym，20_X250mm;Cosmosil, Kyoto, Japan)，流动相为 76% 甲醇水；
[0039] (7)将上述第四馏分经HPLC分离纯化，得到第三化合物和所述第四化合物，结构 式分别如下：
[0041] 该步骤中HPLC的色谱柱