专利名称：核酪口服溶液中核酸水解物的制备方法
技术领域：
本发明涉及药学领域，具体而言，涉及核酪口服溶液中核酸水解物的制备方法。
背景技术：
核酪口服溶液是免疫调节药，主用于治疗慢性支气管炎，能使症状减轻、改善过敏体质、改善睡眠、少患感冒等。
核酪口服溶液中的核酸水解物为酵母核糖核酸的水解产物。目前酵母核糖核酸的水解工艺为酸解工艺，其工艺为酵母核糖核酸在硫酸(约2％)条件下，回流酸解1小时左右，再用氢氧化钡直接中和，静置，过滤(一般需1-2天)而得。
然而，目前的工艺的有以下主要缺点(一)用硫酸进行水解，作用程度难以控制，水解产物主要为硷基、戊糖和磷酸，而非具有生物活性的核苷酸。
(二)用氢氧化钡粉末直接中和，中和反应不够均匀。
(三)遗留的少量钡对人体无益。
(四)中和后的过滤十分困难，过滤时间长，所以整个水解的操作周期也较长。
(五)因过滤时间长，产品所污染的机会增多，有时会出现浑浊现象。
因此，本领域迫切需要开发新的快速、简便、效率高的核酸水解物的制备方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种核酸水解物的制备方法，与现有的工艺相比，该方法具有有机磷成分多、过滤方便、周期短、产品遭污染的机会少等优点。
在本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种核酸水解物的制备方法，包括步骤
(a)将核糖核酸原料与浓度为0.1-10％的碱溶液混合，形成混合物；(b)将所述混合物回流30-120分钟；(c)用酸调节混合物的pH至6.0-7.0；(d)放置2-24小时；(e)过滤得到滤液，即为核酸水解物。
在另一优选例中，步骤(a)中的所述碱选自氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化钠或其混合物。
在另一优选例中，步骤(c)中所述的酸选自盐酸液、醋酸液、高氯酸液、或其混合物。
在另一优选例中，步骤(c)中所述的酸的重量百分比浓度为5％-30％。
在另一优选例中，步骤(d)中是在0-5℃放置过夜。
在另一优选例中，步骤(a)中的核糖核酸原料是酵母的核糖核酸。
具体实施例方式
本发明人对核酪口服溶液中核酸水解物的制备方法进行了深入研究，根据核糖核酸在碱性条件下作用比较温和的原理，首次采用碱解法制备用于核酪口服溶液的核酸水解物，从而开发出了新的快速、简便、和高效的核酸水解物的制备方法。
具体而言，本发明方法包括以下步骤(a)将核糖核酸原料与浓度为0.1-10％的碱溶液混合，形成混合物；(b)将所述混合物回流30-120分钟；(c)用酸调节混合物的pH至6.0-7.0；(d)放置2-24小时；(e)过滤得到滤液，即为核酸水解物。
在一具体优选例中，本发明方法包括酵母核糖核酸与稀碱溶液(0.1％-10％的氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化钠、或其混合物)形成混合物→回流(30分钟-120分钟)→用酸溶液中和(5％-30％盐酸液、醋酸液、高氯酸液、或其混合物)pH值至6.0-7.0→置冷库过夜→过滤即得核酸水解物。
本发明发明点主要在于方法中碱、碱浓度、碱解参数以及中和用酸、酸浓度的等各技术特征的组合。至于其他原料和参数可以采用本领域常规技术。例如，可用于本发明的核糖核酸原料没有特别限制，可以采用本领域采用的各种原料。一种优选的原料是酵母的核糖核酸。
依本发明的核酸水解物的制备方法所制得的核酸水解物可按本领域常规的各种技术指标进行检验。常用的指标包括品名核酸水解物形状微黄色溶液。
鉴别核酸水解物，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV A)测定，在260nm的波长处有最大吸收。
吸收度精密量取核酸水解物5ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，照分光光度法照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV A)，在260nm的波长处测定吸收度，应不得少于0.5。
氯化物取核酸水解物1ml，用水稀释至1000ml，取2.5ml，依法检查(中国药典2000年版二部附录VIII A)，与标准氯化物溶液5ml制成的对照液比较，不得更浓(2％)。
硫酸盐取核酸水解物0.2ml，依法检查(中国药典2000年版二部附录VIIIB)，与标准硫酸钾溶液2ml制得的对照液比较，不得更浓(0.1％)。
重金属取核酸水解物15ml，小火蒸干，依法检查(中国药典2000年版二部附录VIII H第二法)，含重金属不得过百万分之十。
有机磷1ml核酸水解物含有机磷不得少于0.8mg。
对本发明方法所制得的核酸水解物进行的各种检测表明，其产品质量完全符合各种技术指标的要求。
本发明的主要优点在于(一)水解产物主要为核苷酸，而非硷基、戊糖和磷酸的完全水解产物。
(二)酸碱溶液进行中和，反应较均匀。
(三)中和后的过滤方便。
(四)操作周期较短。
(五)有机磷得率较高。
下面结合实施例进一步阐述本发明。应理解，这些实施例不对本发明起限定作用。
实施例115g酵母核糖核酸在0.1％氢氧化钾溶液(1000ml)条件下回流30分钟，用5％高氯酸液溶液中和pH值至6.0，置冷库过夜，过滤即得1000ml核酸水解物。
检测结果表明，每1ml核酸水解物含1.023mg有机磷，形状、分光光度最大吸收值对应的波长、吸收度、氯化物、硫酸盐、重金属等指标均符合要求。
实施例215g酵母核糖核酸在0.2％氢氧化钠溶液(1000ml)条件下回流50分钟，用15％盐酸液中和pH值至6.5，置冷库过夜，过滤即得1000ml核酸水解物。
检测结果表明，每1ml核酸水解物含0.830mg有机磷，形状、分光光度最大吸收值对应的波长、吸收度、氯化物、硫酸盐、重金属等指标均符合要求。
实施例315g酵母核糖核酸在10％的氢氧化钙溶液(1000ml)条件下回流120分钟，用30％醋酸液中和pH值至7.0，置冷库过夜，过滤即得1000ml核酸水解物、检测结果表明，每1ml核酸水解物含0.916mg有机磷，形状、分光光度最大吸收值对应的波长、吸收度、氯化物、硫酸盐、重金属等指标均符合要求。
应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
权利要求
1.一种核酸水解物的制备方法，其特征在于，包括步骤(a)将核糖核酸原料与浓度为0.1-10％的碱溶液混合，形成混合物；(b)将所述混合物回流30-120分钟；(c)用酸调节混合物的pH至6.0-7.0；(d)放置2-24小时；(e)过滤得到滤液，即为核酸水解物。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中的所述碱选自氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化钠或其混合物。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(c)中所述的酸选自盐酸液、醋酸液、高氯酸液、或其混合物。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(c)中所述的酸的重量百分比浓度为5％-30％。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(d)中是在0-5℃放置过夜。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中的核糖核酸原料是酵母的核糖核酸。
全文摘要
本发明提供了一种核酪口服溶液中核酸水解物的制备方法，它包括步骤(a)将核糖核酸原料与浓度为0.1－10％的碱溶液混合，形成混合物；(b)将所述混合物回流30－120分钟；(c)用酸调节混合物的pH至6.0－7.0；(d)放置2－24小时；(e)过滤得到滤液，即为核酸水解物。本发明方法具有制备的有机磷成分多、过滤方便、周期短、产品遭污染的机会少等优点。制得的核酸水解物可作为配制核酪口服溶液的主要成分。
文档编号A61P11/00GK1537537SQ0311647
公开日2004年10月20日 申请日期2003年4月18日 优先权日2003年4月18日
发明者陈伟, 陈 伟 申请人:上海通用药业股份有限公司