专利名称：治疗结肠炎的中药组合物及其制备方法、质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物及该组合物的制备方法和质量标准，特别涉及一种用于治疗结肠炎的中药组合物，同时涉及该组合物的制备方法和质量标准。
背景技术：
结肠炎是一种症状为腹泻、腹痛、里急后重，严重病例可有食欲减退，上腹饱胀不适，恶心呕吐等的疾病。结肠炎起病少数急骤，多数缓慢，病程可分持续性，或呈发作期与缓解期相交替的慢性经过。发作的诱因多为精神刺激、劳累、饮食失调。现代医学的治疗方法多采用激素，可以不同程度缓解，但是有副作用。本发明提供了一种治疗结肠炎的中成药，效果确切，且无明显毒副作用，特别对慢性非特异性溃疡性结肠炎效果更加明显。本发明是在根据中医药理论指导下，利用现代化制药技术制成的中成药制剂，适合工业化大生产。
发明内容
本发明的一个目的在于公开一种新的治疗结肠炎的中药组合物；本发明的另一个目的在于公开一种新的治疗结肠炎的中药组合物的制备方法；本发明的第三个目的在于公开一种新的治疗结肠炎的中药组合物的质量控制方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现本发明药物组合物的原料药组成及配比如下黄连100-400重量份补骨脂350-900重量份 黄芪450-1350重量份木香120-380重量份桃金娘根345-900重量份三七175-600重量份上述原料优选配比为黄连225重量份、补骨脂750重量份、黄芪900重量份、木香250重量份、桃金娘根750重量份、三七375重量份按药剂学方法，可以将上述原料药制备成各种临床可接受的剂型，包括但不限于如下剂型当中的一种如片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、软胶囊剂及栓剂等固体制剂，混悬剂、口服液、灌肠剂等液体制剂，优选胶囊剂型、片剂、颗粒剂型。
本药物组合物的制备方法以上六味原料药，取黄芪、木香、桃金娘根加2-12倍量的水，浸泡0-2小时，煎煮1-4次，每次0.5-4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05-1.45(40℃-80℃)，加60-95％乙醇至含醇量达40-80％，搅匀，静置6-48小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加4-12倍量30％-95％乙醇回流提取2-4次，每次0.5-4小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05～1.48(45-80℃)的浸膏，干燥，粉碎，加入淀粉和/或其他适宜的辅料，如玉米朊、糊精、β-环糊精等淀粉衍生物、纤维素及其衍生物、甘露糖醇、乳糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸镁、微粉硅胶、十二烷基硫酸钠等，其用量相当于浸膏粉重量的3％-30％，混匀，制粒，装胶囊或直接压片或制成颗粒等适宜的制剂。
本组合物制成药剂的质量控制方法包括鉴别和/或含量测定。
鉴别方法包括下列方法中的一种和/或几种(1)取单位制剂内容物1g，加入5％-99.5％的甲醇20ml，超声处理20～40分钟，滤过，滤液浓缩至8～12ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.5g～0.8g，同法制得对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加5％-99.5％的甲醇，制成每1ml含0.3～1.0mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为3-8∶2-6∶1-4∶1-4∶0.2-3的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡12～18分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取单位制剂内容物2.5g，加入5％-99.5％的醋酸乙酯20ml，超声处理10～60分钟，滤过，滤液浓缩至1.6～2.5ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加5％-99.5％的醋酸乙酯，制成每1ml各含1～3mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3～6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为5-12∶0.2-2的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～15％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土2～4g，混匀，置烧瓶中，加1～5％氢氧化钠甲醇溶液75～92ml，回流提取50～80分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水40～65ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取2～6次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.4～0.8％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先用30～70ml水洗脱，弃去水洗液，再用35～60ml40～50％的乙醇洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用80～150ml 70～80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加5％-99.5％的甲醇0.7～1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加5％-99.5％的甲醇制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml各含0.6～1.5mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4～7μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为3-9∶2-6∶0.2-3的氯仿-甲醇-水为展开剂，8～12℃下展开，取出，晾干，喷7～12％硫酸乙醇溶液，在90～110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定方法包括下列方法中的一种和/或几种色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为70-85∶25-35的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000。
磷酸三乙胺缓冲液的制备 精密量取磷酸1-5ml，三乙胺1-5ml，加水稀释至1000ml，即得。
对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品10～15mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取8～15ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，其中每1ml含盐酸小檗碱30～90μg。
供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入0.5～1.5％盐酸甲醇溶液40～60ml，称定重量，超声处理(功率250W，40kHz)20～40分钟，放冷，称定重量，用0.5～1.5％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8～12μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
单位制剂每粒含黄连以盐酸小檗碱(C20H17NO4.HCl)计，不得少于2.0mg。
其中在质量控制方法中，鉴别方法所用甲醇或醋酸乙酯浓度范围为10-35％、40-65％或70-95％；甲醇或醋酸乙酯浓度优选10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％。
本药物制剂主要用于治疗结肠炎的应用，特别对慢性非特异性溃疡性结肠炎疗效显著。下述实验例进一步说明本发明。
实验例1对乙酸致大鼠溃疡性结肠炎的保护作用由溃结康胶囊(本发明的技术方案所得胶囊剂)0.64g/kg、0.32g/kg和0.16g/kg对乙酸造模大鼠的体重降低无明显影响；对大鼠的肠重指数(全结肠重量/全结肠长度)有明显的改善；并明显减轻结肠粘膜损伤指数及降低结肠组织MPO水平。溃结康胶囊还可降低大鼠结肠炎肠组织MDA、NO含量，增加SOD和GSH-Px水平。
病理组织学结果显示，模型组大鼠结肠粘膜上皮脱落，缺损，充以大量的炎性白细胞及淋巴细胞，有溃疡、坏死组织形成。肠黏膜隐窝局部或弥漫性消失，黏蛋白分泌减少或缺如。溃疡周围见水肿、充血及出血。溃结康胶囊组大鼠结肠粘膜上皮脱落缺损减轻，溃疡区域明显缩小，溃疡周边肠粘膜被覆上皮增生修复，部分覆盖；炎细胞减少，肉芽组织显著增生，显示一定的治疗作用。阳性对照药柳氮磺胺吡啶也能促进溃疡的愈合，减轻炎性反应，促进肠上皮修复和肉芽组织增生。
实验例2对三硝基苯磺酸致大鼠溃疡性结肠炎的保护作用溃结康胶囊0.64g/kg、0.32g/kg和0.16g/kg对TNBS造模大鼠体重减轻无明显改善作用；对大鼠的肠重指数(全结肠重量/全结肠长度)增加有明显的改善作用；溃结康胶囊0.64g/kg和0.32g/kg对上述大体病理形态学变化有明显改善作用，能明显降低结肠粘膜损伤指数及降低结肠组织MPO水平。溃结康胶囊3个剂量组可对抗胸腺萎缩，溃结康胶囊0.64g/kg和0.32g/kg可明显抑制脾脏增大，降低脾脏指数。溃结康胶囊还可降低大鼠结肠炎肠组织MDA含量，增加SOD水平。
病理组织学结果显示，模型组大鼠结肠粘膜上皮脱落，缺损，溃疡形成，溃疡从上至下可见炎性渗出物、坏死组织、肉芽组织及瘢痕组织。镜下见大量淋巴细胞及中性白细胞浸及全层。肠黏膜隐窝局部或弥漫性消失，黏蛋白分泌减少或缺如。溃疡周围见水肿、充血及出血。溃结康胶囊组大鼠结肠粘膜上皮脱落缺损减轻，溃疡周边肠粘膜被覆上皮增生修复，部分覆盖，炎细胞减少，肉芽组织显著增生，显示一定的治疗作用。阳性对照药柳氮磺胺吡啶也能减轻炎性反应，促进肠上皮修复和肉芽组织增生。
实验例3抗炎作用实验1、溃结康胶囊对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响溃结康胶囊0.8g/kg能明显抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀程度，抑制率为20.7％；溃结康胶囊0.4g/kg及0.2g/kg对小鼠耳肿胀程度无明显影响。
2、溃结康胶囊对大鼠角叉菜胶足肿胀的影响溃结康胶囊0.64g/kg和0.32g/kg均能明显抑制角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀，在用药后3小时抑制率分别为40.5％和33.2％；溃结康胶囊0.16g/kg对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀无明显影响。
3、溃结康胶囊对大鼠棉球肉芽肿的影响溃结康胶囊0.64g/kg和0.32g/kg均能明显抑制大鼠肉芽组织的增生，抑制率分别为12.9％和12.1％；溃结康胶囊0.16g/kg对大鼠肉芽组织的增生无明显影响。
实验例4镇痛作用实验小鼠热板法实验结果表明，溃结康胶囊灌胃给药，0.8g/kg和0.4g/kg在给药后1小时均能明显提高小鼠的痛阈值，0.2g/kg无明显作用。小鼠扭体实验结果表明，溃结康胶囊0.8g/kg和0.4g/kg均能明显延长小鼠的扭体潜伏期及减少小鼠的扭体次数。
实验例5抗腹泻作用及对正常小鼠排便功能的实验1、溃结康胶囊对番泻叶致小鼠腹泻的影响溃结康胶囊灌胃给药，0.8g/kg、0.4g/kg和0.2g/kg均能使番泻叶引起的小鼠排湿便总数减少。
2、溃结康胶囊对新斯的明所致小鼠小肠推进亢进的影响溃结康胶囊灌胃给药，0.8g/kg和0.4g/kg能明显抑制新斯的明所致的小鼠小肠推进亢进，0.2g/kg无明显抑制作用。
3、溃结康胶囊对正常小鼠排便的影响溃结康胶囊灌胃给药，0.8g/kg、0.4g/kg和0.2g/kg在2h及6h内能明显抑制小鼠的排便运动；溃结康胶囊三个剂量可明显延长小鼠排便潜伏期。
4、溃结康胶囊对正常小鼠小肠推进的影响溃结康胶囊灌胃给药，0.8g/kg对正常小鼠的肠推进运动有明显的抑制作用，而0.4g/kg和0.2g/kg无明显影响。
实验例6对机体免疫功能的实验该药品胶囊剂型0.8g/kg和0.4g/kg对2，4-二硝基氟苯引起的炎症反应、淋巴细胞增殖以及细胞因子TNF-α增高均有明显的对抗作用，但对IL-1β增高无明显影响。
具体实施例方式
实施例1胶囊剂制备取黄连100g，补骨脂400g，黄芪550g，木香150g，桃金娘根400g，三七200g，按比例取六味原料药，将黄芪、木香、桃金娘根加4倍量的水，煎煮1次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至50℃时其相对密度为1.05，加65％乙醇至含醇量达50％，搅匀，静置10小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加6倍量40％乙醇回流提取2次，每次1小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至45℃-80℃时相对密度为1.1的浸膏，干燥，粉碎，加淀粉，其用量相当于浸膏粉重量的5％，混匀，制粒，装胶囊。
实施例2片剂制备取黄连200g，补骨脂500g，黄芪650g，木香250g，桃金娘根600g，三七300g，按比例取六味原料药，将黄芪、木香、桃金娘根加6倍量的水，浸泡0.5小时，煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至60℃时其相对密度为1.15，加75％乙醇至含醇量达60％，搅匀，静置20小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加8倍量50％乙醇回流提取3次，每次2小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至60℃时相对密度为1.2的浸膏，干燥，粉碎，加β-环糊精，其用量相当于浸膏粉重量的10％，混匀，制粒，直接压片。
实施例3颗粒剂制备取黄连300g，补骨脂700g，黄芪850g，木香300g，桃金娘根700g，三七400g，按比例取六味原料药，将黄芪、木香、桃金娘根加8倍量的水，浸泡1小时，煎煮3次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时其相对密度为1.25，加85％乙醇至含醇量达70％，搅匀，静置30小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加10倍量60％乙醇回流提取4次，每次3小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至70℃时相对密度为1.3的浸膏，干燥，粉碎，加甘露糖醇，其用量相当于浸膏粉重量的15％，混匀，制粒，制成颗粒制剂。
实施例4胶囊剂制备取黄连400g，补骨脂800g，黄芪1050g，木香350g，桃金娘根800g，三七500g，按比例取六味原料药，将黄芪、木香、桃金娘根加10倍量的水，浸泡1.5小时，煎煮4次，每次4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至80℃时其相对密度为1.35，加90％乙醇至含醇量达80％，搅匀，静置40小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加12倍量80％乙醇回流提取3次，每次4小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至80℃时相对密度为1.4的浸膏，干燥，粉碎，加乳糖，其用量相当于浸膏粉重量的25％，混匀，制粒，装胶囊。
实施例5片剂制备取黄连400g，补骨脂350g，黄芪450g，木香380g，桃金娘根345g，三七600g，按比例取六味原料药，将黄芪、木香、桃金娘根加4倍量的水，浸泡1.5小时，煎煮1次，每次4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至50℃时其相对密度为1.35，加65％乙醇至含醇量达80％，搅匀，静置10小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加12倍量40％乙醇回流提取4次，每次1小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至80℃时相对密度为1.1的浸膏，干燥，粉碎，加十二烷基硫酸钠，其用量相当于浸膏粉重量的25％，混匀，制粒，直接压片。
实施例6颗粒剂制备取黄连100g，补骨脂900g，黄芪1350g，木香120g，桃金娘根900g，三七175g，按比例取六味原料药，将黄芪、木香、桃金娘根加10倍量的水，煎煮4次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至80℃时其相对密度为1.05，加90％乙醇至含醇量达50％，搅匀，静置40小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加6倍量80％乙醇回流提取2次，每次4小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至50℃时相对密度为1.4的浸膏，干燥，粉碎，加聚乙烯吡咯烷酮，其用量相当于浸膏粉重量的5％，混匀，制粒，制成颗粒制剂。
实施例7胶囊剂制备取黄连225g，补骨脂750g，黄芪900g，木香250g，桃金娘根750g，三七375g，以上六味原料药，取黄芪、木香、桃金娘根加8倍量的水，浸泡0.5小时，煎煮2次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.25(60℃)，加85％乙醇至含醇量达60％，搅匀，静置12小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加8倍量60％乙醇回流提取3次，每次2小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25(65℃)的浸膏，干燥，粉碎，加淀粉和β-环糊精，其用量相当于浸膏粉重量的25％，混匀，制粒，装胶囊，即得。
实施例8鉴别试验A.取本品内容物1g，加入甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至10ml，作为供试品溶液。另取黄连对照药材0.8g，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为7∶5∶0.8∶1.5∶3的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡15分钟，展开，取出，晾开，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
B.取本品内容物2.5g，加入醋酸乙酯20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加醋酸乙酯制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为5∶0.3的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8％氢氧化钾甲醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
C.取本品内容物2.5g，加硅藻土3g，混匀，置烧瓶中，加1％氢氧化钠甲醇溶液65ml，回流提取45分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水50ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取3次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.5％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先以水50ml洗脱，弃去水液，再用60％乙醇50ml洗脱，弃去60％乙醇洗脱液，继用65％乙醇100ml洗脱，收集65％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为5∶3∶0.6的氯仿-甲醇-水为展开剂，10℃下展开，取出，晾干，喷5％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例9鉴别试验A.取单位制剂内容物1g，加入10％的甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至8ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.5g，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加10％的甲醇，制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为3∶2∶1∶1∶0.5的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡13分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.取单位制剂内容物2.5g，加入10％的醋酸乙酯20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液浓缩至1.6ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加10％的醋酸乙酯制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为5∶0.2的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土2g，混匀，置烧瓶中，加1％氢氧化钠甲醇溶液75ml，回流提取50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取2次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.4％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先以水30ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇35ml洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用70％乙醇80ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加10％甲醇0.7ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加10％的甲醇，制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加10％的甲醇制成每1ml各含0.6mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为4∶2∶0.2的氯仿-甲醇-水为展开剂8℃下展开，取出，晾干，喷7％硫酸乙醇溶液，在90℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例10鉴别试验A.取单位制剂内容物1g，加入20％的甲醇25ml，超声处理25分钟，滤过，滤液浓缩至9ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.6g，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加20％的甲醇，制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为4∶3∶2∶2∶1的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡14分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.取单位制剂内容物2.5g，加入20％的醋酸乙酯25ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至1.8ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加20％的醋酸乙酯制成每1ml各含2mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为7∶0.5的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以7％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土2.5g，混匀，置烧瓶中，加2％氢氧化钠甲醇溶液78ml，回流提取55分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水45ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取3次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.5％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先以水35ml洗脱，弃去水液，再用35％乙醇40ml洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用75％乙醇90ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加20％甲醇0.9ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加20％的甲醇，制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加20％的甲醇制成每1ml各含0.8mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为5∶3∶0.5的氯仿-甲醇-水为展开剂10℃下展开，取出，晾干，喷8％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例11鉴别试验A.取单位制剂内容物1g，加入40％的甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至10ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.7g，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加40％的甲醇，制成每1ml含0.6mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为5∶4∶3∶3∶1.5的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡15分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.取单位制剂内容物2.5g，加入40％的醋酸乙酯30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加40％的醋酸乙酯制成每1ml各含3mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为8∶0.8的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以9％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土3g，混匀，置烧瓶中，加3％氢氧化钠甲醇溶液82ml，回流提取60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水50ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取4次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.6％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先以水40ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇45ml洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用80％乙醇100ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加40％甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加40％的甲醇，制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加40％的甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为6∶4∶1的氯仿-甲醇-水为展开剂12℃下展开，取出，晾干，喷9％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例12鉴别试验A.取单位制剂内容物1g，加入60％的甲醇20ml，超声处理35分钟，滤过，滤液浓缩至11ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.8g，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加60％的甲醇，制成每1ml含0.7mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为6∶5∶4∶4∶2的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡16分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.取单位制剂内容物2.5g，加入60％的醋酸乙酯35ml，超声处理40分钟，滤过，滤液浓缩至2.2ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加60％的醋酸乙酯制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为9∶1.2的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土3.5g，混匀，置烧瓶中，加4％氢氧化钠甲醇溶液88ml，回流提取70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水60ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取5次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.7％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先以水50ml洗脱，弃去水液，再用45％乙醇50ml洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用70％乙醇120ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加60％甲醇1.1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加60％的甲醇，制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加60％的甲醇制成每1ml各含1.2mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为7∶5∶1.5的氯仿-甲醇-水为展开剂8℃下展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇溶液，在90℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例13鉴别试验
A.取单位制剂内容物1g，加入80％的甲醇25ml，超声处理40分钟，滤过，滤液浓缩至12ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.7g，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加80％的甲醇，制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为7∶6∶4∶4∶2.5的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡17分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.取单位制剂内容物2.5g，加入80％的醋酸乙酯40ml，超声处理50分钟，滤过，滤液浓缩至2.5ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加80％的醋酸乙酯制成每1ml各含2mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为10∶1.5的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以12％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土4g，混匀，置烧瓶中，加5％氢氧化钠甲醇溶液90ml，回流提取75分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水65ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取6次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.8％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先以水60ml洗脱，弃去水液，再用50％乙醇55ml洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用75％乙醇140ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加80％甲醇1.2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加80％的甲醇，制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加80％的甲醇制成每1ml各含1.4mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为8∶6∶2的氯仿-甲醇-水为展开剂10℃下展开，取出，晾干，喷11％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例14鉴别试验A.取单位制剂内容物1g，加入99.5％的甲醇30ml，超声处理40分钟，滤过，滤液浓缩至12ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.8g，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加99.5％的甲醇，制成每1ml含0.9mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为6∶3∶1.5∶1.5∶0.5的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡18分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.取单位制剂内容物2.5g，加入99.5％的醋酸乙酯40ml，超声处理60分钟，滤过，滤液浓缩至2.5ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加99.5％的醋酸乙酯制成每1ml各含3mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为12∶2的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以15％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土4g，混匀，置烧瓶中，加5％氢氧化钠甲醇溶液92ml，回流提取80分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水65ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取6次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.8％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先以水70ml洗脱，弃去水液，再用50％乙醇60ml洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用80％乙醇150ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加99.5％甲醇1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加99.5％的甲醇，制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加99.5％的甲醇制成每1ml各含1.5mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为9∶6∶2.5的氯仿-甲醇-水为展开剂12℃下展开，取出，晾干，喷12％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例15盐酸小檗碱含量测定试验色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为72∶28的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000。
磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸1.7ml，三乙胺1.8ml，加水稀释至1000ml，即得。
对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品15mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每1ml含盐酸小檗碱45μg)。
供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入0.8％盐酸甲醇溶液50ml，称定重量，超声处理(功率250W，40kHz)30分钟，放冷，称定重量，用0.8％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒含黄连以盐酸小檗碱(C20H17NO4.HCl)计，不得少于2.0mg。
实施例16盐酸小檗碱含量测定试验色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为70∶25的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000；磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸2ml，三乙胺2ml，加水稀释至1000ml，即得；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品10mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取8ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，其中每1ml含盐酸小檗碱32μg；供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入0.5％盐酸甲醇溶液40ml，称定重量，在功率250W，40kHz下超声处理20分钟，放冷，称定重量，用0.5％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8μl，注入液相色谱仪，测定，即得；单位制剂每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4.HCl计，不得少于2.0mg。
实施例17盐酸小檗碱含量测定试验色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为75∶30的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000；磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸3ml，三乙胺3ml，加水稀释至1000ml，即得；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品12mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，其中每1ml含盐酸小檗碱48μg；供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入1％盐酸甲醇溶液50ml，称定重量，在功率250W，40kHz下超声处理30分钟，放冷，称定重量，用1％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；单位制剂每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4.HCl计，不得少于2.0mg。
实施例18盐酸小檗碱含量测定试验色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为80∶35的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000；
磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸4ml，三乙胺4ml，加水稀释至1000ml，即得；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品15mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取12ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，其中每1ml含盐酸小檗碱72μg；供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入1.5％盐酸甲醇溶液60ml，称定重量，在功率250W，40kHz下超声处理40分钟，放冷，称定重量，用1.5％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各12μl，注入液相色谱仪，测定，即得；单位制剂每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4.HCl计，不得少于2.0mg。
实施例19盐酸小檗碱含量测定试验色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为80∶25的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000；磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸4ml，三乙胺2ml，加水稀释至1000ml，即得；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品15mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取8ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，其中每1ml含盐酸小檗碱48μg；供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入0.5％盐酸甲醇溶液60ml，称定重量，在功率250W，40kHz下超声处理20分钟，放冷，称定重量，用1.5％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8μl，注入液相色谱仪，测定，即得；单位制剂每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4.HCl计，不得少于2.0mg。
实施例20盐酸小檗碱含量测定试验色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为70∶35的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000；磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸2ml，三乙胺4ml，加水稀释至1000ml，即得；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品10mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取12ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，其中每1ml含盐酸小檗碱48μg；供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入1.5％盐酸甲醇溶液40ml，称定重量，在功率250W，40kHz下超声处理40分钟，放冷，称定重量，用0.5％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各12μl，注入液相色谱仪，测定，即得；单位制剂每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4.HCl计，不得少于2.0mg。
实施例21胶囊剂的制备取黄连225g，补骨脂750g，黄芪900g，木香250g，桃金娘根750g，三七375g，按上述胶囊剂的制备方法制得的胶囊1000粒，每粒重0.5g，结肠炎患者口服，一日3次，一次2粒。
实施例22胶囊剂的制备取黄连225g，补骨脂750g，黄芪900g，木香250g，桃金娘根750g，三七375g，按上述胶囊剂的制备方法制得胶囊1000粒，每粒重0.5g，慢性结肠炎患者口服，一日3次，一次2粒。
实施例23胶囊剂的制备取黄连225g，补骨脂750g，黄芪900g，木香250g，桃金娘根750g，三七375g，按上述胶囊剂的制备方法制得胶囊1000粒，每粒重0.5g，慢性非特异性溃疡性结肠炎患者口服，一日3次，一次2粒。
权利要求
1.一种治疗结肠炎的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药组成黄 连 100-400重量份 补骨脂 350-900重量份黄 芪 450-1350重量份 木 香 120-380重量份桃金娘根345-900重量份 三 七 175-600重量份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药组成黄连 225重量份 补骨脂 750重量份黄芪 900重量份木香 250重量份 桃金娘根750重量份三七 375重量份。
3.如权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于该组合物可以制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型，如片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、软胶囊剂、栓剂、混悬剂、口服液、灌肠剂。
4.如权利要求1或2所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤按比例取六味原料药，将黄芪、木香、桃金娘根加2-12倍量的水，浸泡0-2小时，煎煮1-4次，每次0.5-4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至40℃-80℃时其相对密度为1.05-1.45，加60-95％乙醇至含醇量达40-80％，搅匀，静置6-48小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加4-12倍量30％-95％乙醇回流提取2-4次，每次0.5-4小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至45℃-80℃时相对密度为1.05～1.48的浸膏，干燥，粉碎，加淀粉和/或其他淀粉衍生物玉米朊、糊精、β-环糊精，纤维素及其衍生物、甘露糖醇、乳糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸镁、微粉硅胶、十二烷基硫酸钠，其用量相当于浸膏粉重量的3％-30％，混匀，制粒，装胶囊或直接压片或制成颗粒制剂。
5.如权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤按比例取六味原料药，将黄芪、木香、桃金娘根加8倍量的水，浸泡0.5小时，煎煮2次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至60℃时其相对密度为1.20，加85％乙醇至含醇量达60％，搅匀，静置12小时，取上清液；黄连、补骨脂、三七加8倍量60％乙醇回流提取3次，每次2小时，滤过，与上述上清液合并，回收乙醇，浓缩至60℃时相对密度为1.20～1.30的浸膏，干燥，粉碎，加淀粉和/其他淀粉衍生物玉米朊、糊精、β-环糊精，纤维素及其衍生物、甘露糖醇、乳糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸镁、微粉硅胶、十二烷基硫酸钠，其用量相当于浸膏粉重量的25％，混匀，制粒，装胶囊或直接压片或制成颗粒制剂。
6.权利要求1或2所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种A.取单位制剂内容物1g，加入5％-99.5％的甲醇20ml，超声处理20～40分钟，滤过，滤液浓缩至8～12ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.5g～0.8g，同法制得对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加5％-99.5％的甲醇，制成每1ml含0.3～1.0mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～3μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为3-8∶2-6∶1-4∶1-4∶0.2-3的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡12～18分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.取单位制剂内容物2.5g，加入5％-99.5％的醋酸乙酯20ml，超声处理10～60分钟，滤过，滤液浓缩至1.6～2.5ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加5％-99.5％的醋酸乙酯，制成每1ml各含1～3mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3～6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为5-12∶0.2-2的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～15％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土2～4g，混匀，置烧瓶中，加1～5％氢氧化钠甲醇溶液75～92ml，回流提取50～80分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水40～65ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取2～6次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.4～0.8％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先用30～70ml水洗脱，弃去水洗液，再用35～60ml、30～50％的乙醇洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用80～150ml 70～80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加5％-99.5％的甲醇0.7～1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加5％-99.5％的甲醇制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加5％-99.5％的甲醇制成每lml各含0.6～1.5mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4～7μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为3-9∶2-6∶0.2-3的氯仿-甲醇-水为展开剂，8～12℃下展开，取出，晾干，喷7～12％硫酸乙醇溶液，在90～110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.如利要求6所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种A.取单位制剂内容物1g，加入99.5％的甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至10ml，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.5g，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加99.5％的甲醇，制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为6∶3∶1.5∶1.5∶0.5的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，槽另侧加入等体积的浓氨试液，预平衡15分钟，展开，取出，晾开，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.取单位制剂内容物2.5g，加入99.5％的醋酸乙酯20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加99.5％的醋酸乙酯制成每1ml各含2mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为9.5∶0.5的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取单位制剂内容物2.5g，加硅藻土3g，混匀，置烧瓶中，加2％氢氧化钠甲醇溶液80ml，回流提取60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水50ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取3次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，加0.5％NaOH溶液20ml使溶解，溶液通大孔吸附树脂柱，先以水50ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇50ml洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加99.5％甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加99.5％的甲醇，制成每1ml含1mg的溶液，再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品，加99.5％的甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为7∶3∶0.5的氯仿-甲醇-水为展开剂10℃下展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
8.如利要求1或2所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法包括如下测定方法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为70-85∶25-35的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000；磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸1-5ml，三乙胺1-5ml，加水稀释至1000ml，即得；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品10～15mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取8～15ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，其中每1ml含盐酸小檗碱30～90μg；供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入0.5～1.5％盐酸甲醇溶液40～60ml，称定重量，在功率250W，40kHz下超声处理20～40分钟，放冷，称定重量，用0.5～1.5％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8～12μl，注入液相色谱仪，测定，即得；单位制剂每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4.HCl计，不得少于2.0mg。
9.如利要求8所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定包括如下测定方法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为70-80∶26-32的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000；磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸1-2.5ml，三乙胺1-2.5ml，加水稀释至1000ml，即得；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品11～14mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取9～11ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，其中每1ml含盐酸小檗碱35～72μg；供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入0.6～1.2％盐酸甲醇溶液40～60ml，称定重量，功率250W，40kHz条件下超声处理20～40分钟，放冷，称定重量，用0.5～1.5％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8～12μl，注入液相色谱仪，测定，即得；单位制剂每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4.HCl计，不得少于2.0mg。
10.如利要求8所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定包括如下测定方法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为72∶28的磷酸三乙胺缓冲液-乙腈为流动相；检测波长264±5nm；理论板数按盐酸小檗碱计算应不得低于3000；磷酸三乙胺缓冲液的制备精密量取磷酸1.7ml，三乙胺1.8ml，加水稀释至1000ml，即得；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品15mg，置100ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，其中每1ml含盐酸小檗碱60μg；供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.25g，置锥形瓶中，精密称定，精密加入0.8％盐酸甲醇溶液50ml，称定重量，功率250W，40kHz条件下超声处理30分钟，放冷，称定重量，用0.8％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4.HCl计，不得少于2.0mg；
11.如权利要求1或2所述的药物组合物在制备治疗结肠炎的药物中的应用。
12.如权利要求1或2所述的药物组合物在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种治疗结肠炎的中药组合物及其制备方法、质量控制方法。该中药组合物主要由黄连、补骨脂、黄芪、木香、桃金娘根、三七组成。取黄芪、木香、桃金娘根三味浸泡、煎煮、浓缩、取上清液；取黄连、补骨脂、三七三味醇提、滤过，与上述上清液合并，加入适宜辅料，混匀，制粒，制成适宜剂型。同时本发明还提供了对该组合物采用成分鉴别、含量测定的质量控制方法。本药物制剂主要用于治疗结肠炎的应用，特别对慢性非特异性溃疡性结肠炎疗效显著。
文档编号A61P1/00GK1579518SQ200410038268
公开日2005年2月16日 申请日期2004年5月19日 优先权日2004年5月19日
发明者邹节明, 孟杰 申请人:桂林三金药业股份有限公司