专利名称：一种含三七三醇皂苷的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种含三七三醇皂苷的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
心脑血管病每年夺走1200万人的生命，接近世界人口死亡总数的1/4，成为人类健康的头号大敌，世界卫生组织(WHO)总干事中岛宏博士说“在今天的世界上，心脑血管疾病比其他任何疾病杀死更多的人，并使千百万人致残。”尽管近30年来心脑血管病死亡率除东欧各国外的大多数国家都有不同程度的下降，但其仍是多数国家45岁以上男性第一位的死亡原因，在女性则是仅次于肿瘤的第二位死因，严重影响着人类的期望寿命和生存质量。随着社会老龄化和生活水平的提高，心脑血管疾病的发病率和病死率日趋上升。根据最近的一项研究表明，在全球8个主要地区包括发达和发展中国家的调查显示，缺血性心脏病和脑血管疾病已成为主要的致死原因。如在美国，心血管疾病远超过癌症，占全部死亡的42％，成为主要死因。在我国，约有1.1亿人患有高血压、动脉硬化等心脑血管疾病，6000万人患有冠心病，7000万人患有脑梗塞或者脑溢血，40岁以上的人中，约有57％的人患有不同程度的心脑血管疾病。心脑血管疾病亦成为老年人常见多发病之一，尤其是脑血管疾病，患病率最高达491.8/10万人，明显高于西方国家。
三七是一种名贵中药，具有散瘀止血、消肿定痛的功效，用于止血、镇痛和跌打损伤；三七有效部位为三七总皂苷，三七总皂苷分为三七三醇皂苷、三七二醇皂苷；三七三醇皂苷主要为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、三七皂苷R1，属于中药有效部位，可以开发成中药创新药；经过大量的实验研究，我们采用比文献方法(文献方法采用55％-75％的乙醇洗脱大孔吸附树脂，得到三七总皂苷)洗脱液乙醇浓度为40％，采用高效液相色谱法控制终点，富集有效部位三七三醇皂苷，该方法得率较高、操作简单、易于工业化生产；传统应用三七植物的根，经过我们实验研究发现，三七茎叶中也含有大量的有效成分，为了充分利用现有资源，我们在选用原料药材时，用三七根、茎叶进行提取分离，得到的有效部位相同。
根据文献报道，三七三醇皂苷是一类治疗心脑血管疾病的有效部位，查阅文献和专利，多为利用三七粗提物或总皂苷用于心脑血管疾病的治疗，未有专利报道开发三七三醇皂苷的中药制剂进行治疗心脑血管疾病。
发明内容
基于上述原因，本发明采用乙醇提取，大孔吸附树脂纯化的方法，得到三七三醇皂苷，与药用辅料混合，制备成片剂、胶囊剂、水针剂、输液剂、粉针剂，用于治疗心脑血管疾病，药理实验表明，本发明的各组制剂具有更好的药理作用。
本发明通过以下技术方案实现的。
一.工艺制法
(1)取三七，粉碎，用4-8倍70％-80％乙醇提取3-5次，每次0.5-1小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上大孔吸附树脂柱，先用8-12倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用的40％乙醇进行洗脱，高效液相色谱法控制终点，富集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七三醇皂苷有效部位，其中三七三醇皂苷中人参皂苷Rg1的含量不低于65％，人参皂苷Re含量不低于6％，三七皂苷R1含量不低于11％，即为该药物组合物。
(2)本发明制剂处方为片剂组成为三七三醇皂苷80-120重量份，药用辅料80-120重量份，胶囊剂组成为三七三醇皂苷80-120重量份，药用辅料80-120重量份，水针剂组成为三七三醇皂苷10-20重量份，输液剂组成为三七三醇皂苷20-40重量份，药用辅料60-80重量份，粉针剂组成为三七三醇皂苷10-20重量份，药用辅料80-90重量份；(3)取三七有效部位三七三醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂、胶囊剂；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂；(5)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂；
(6))取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂。片剂、胶囊剂的药用辅料为淀粉、葡萄糖、硬脂酸镁的一种或几种的混合物。
输液剂的药用辅料为氯化钠、葡萄糖的一种。
粉针制剂的制备中赋形剂为甘露醇、蔗糖、乳糖中的一种或几种。
二.检测分析有效部位三七三醇皂苷中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、三七皂苷R1的含量检测照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；乙晴-水(20∶80)为流动相。
对照品溶液制备取经干燥24小时的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、三七皂苷R1对照品适量，精密称定，加流动相稀释成1ml中含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、三七皂苷R1分别为0.8、0.6、0.4的溶液，即得对照品溶液。
供试品溶液的制备取本品约100mg，精密称定，置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到供试品溶液。
测定方法精密量取对照品溶液和供试品溶液10ul，分别注入高效液相色谱仪中，按照外标法以峰面积计算含量，即得。(实验三次)实验结果见表1。
表1 三七三醇皂苷中有效成分的含量实验次 人参皂苷Rg1平均值 人参皂苷Re的 平均值 三七皂 平均数 的含量 (％)含量 (％)苷R1(％) 值(％)(％) (％)166.411.6 6.8267.166.811.7 11.66.96.9366.811.6 6.9结论通过检测分析实验表明，本发明的三七三醇皂苷中人参皂苷Rg1含量超过65％、人参皂苷Re含量超过11％、三七皂苷R1的含量超过6％，充分说明本发明工艺具有实际意义。
三.药理实施例实施例1对大鼠急性心肌缺血保护作用实验药物本发明各组制剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)血塞通片(云南特安呐制药股份有限公司)血塞通注射液(昆明制药集团股份有限公司)生理盐水(北京乾露春科技有限公司实验室提供)实验动物动物Wister大白鼠60只，雄性，体重(300±20)g。
实验方法固体制剂灌胃给药，注射制剂尾静脉给药，每天一次，按照成人给药剂量换算大鼠给药剂量，连续给药三天，按文献方法结扎大鼠的左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型。20％乌拉坦(1g/kg，ip)麻醉，分离颈总动脉，并行气管插术，连接动物呼吸机。左侧第四肋间开胸，剪开心包，分离左冠状动脉前降支，平右心耳作结扎部位。取出心脏称重，-10℃冰冻30～50min，在心脏结扎线下，平行冠状沟将心室横切成5片，生理盐水冲洗后，置于pH值8.0磷酸缓冲液配制的浓度为1％的氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液中，在38℃恒温水浴中染色10min，正常心肌染色成暗红色，梗死心肌染成灰黄色，剪去心肌片被染色的部分，把未被染色的缺血梗死区心肌称重，计算缺血范围(缺血梗死面积占全心重的百分比，结果见表2、表3。
表2 固体制剂对大鼠急性心肌缺血保护作用组别心脏重 心脏梗死重 心脏梗死百分率(g) (g) (％)生理盐水0.985 0.213 21.6血塞通片0.976 0.154 15.8[*]本发明片剂 0.981 0.141 14.3**本发明胶囊剂0.976 0.140 14.4**注[*]P＜0.05，**P＜0.01表3 注射制剂对大鼠急性心肌缺血保护作用心脏重 心脏梗死重 心脏梗死百分率组别(g) (g) (％)生理盐水0.986 0.216 21.9血塞通注射液0.981 0.113 11.5**[*]本发明水针剂0.943 0.066 7.0**[*]本发明输液剂0.952 0.062 6.5**[*]本发明粉针剂0.923 0.067 7.2**[*]注与生理盐水比较**P＜0.01，与阳性对照组比较[*]P＜0.05实施例2对大鼠血栓形成的影响实验药物本发明各组制剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)血塞通片(云南特安呐制药股份有限公司)
血塞通注射液(昆明制药集团股份有限公司)生理盐水(北京乾露春科技有限公司实验室提供)实验动物动物Wister大白鼠60只，雄性，体重(300±20)g。
实验方法将大白鼠麻醉(戊巴比妥钠30-40mg/kg，ip)，仰卧位固定，分离气管，插入一塑料套管，并分离右颈总动脉及左颈外静脉，在聚乙烯管的中段放入一根长6厘米的丝线，以肝素生理盐水溶液，充满聚乙烯管，当聚乙烯管的一端插入左颈外静脉后，由聚乙烯管准确的注入肝素抗凝，然后再将聚乙烯管的另一端插入右颈总动脉，打开动脉夹，血液从右颈总动脉流至聚乙烯管，返回左颈外静脉，开放血流15分钟后断血流，迅速取出丝线称重，总重量减去丝线重量即得血栓重量。将空白组与给药组的动物血栓湿重进行记录，进行计算，见表4、表5表4 固体制剂对对血栓形成的影响动物数血栓湿重组别(只) (mg)生理盐水 101.93血塞通片 101.61[*]本发明片剂 101.30**本发明胶囊剂 101.28**注[*]P＜0.05，**P＜0.01表5 注射制剂对对血栓形成的影响动物数血栓湿重组别(只) (mg)生理盐水 101.90血塞通注射液 101.01**
本发明水针剂10 0.75**[*]本发明输液剂10 0.74**[*]本发明粉针剂10 0.70**[*]注与生理盐水比较**P＜0.01，与阳性对照组比较[*]P＜0.05结论通过以上药理实验表明，本发明的各组制剂具有更好的药理作用。
四.制备实施例实施例1(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用4倍70％乙醇提取3次，每次0.5小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上D101型大孔吸附树脂柱，先用8倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用40％乙醇进行洗脱，高效液相色谱法控制终点，富集洗脱液，洗脱液回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七三醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂处方为片剂组成为三七三醇皂苷80g，药用辅料淀粉、葡萄糖120g，胶囊剂组成为三七三醇皂苷80g，药用辅料淀粉、葡萄糖120g，水针剂组成为三七三醇皂苷10g，输液剂组成为三七三醇皂苷20g，药用辅料氯化钠80g，粉针剂组成为三七三醇皂苷10g，药用辅料甘露醇90g；(3)取三七有效部位三七三醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；(5)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；(6))取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例2(1)取干燥三七茎叶10000克，粉碎，用8倍80％乙醇提取5次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用12倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用40％乙醇进行洗脱，高效液相色谱法控制终点，富集洗脱液，洗脱液回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七三醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂处方为片剂组成为三七三醇皂苷120克，药用辅料淀粉、葡萄糖、硬脂酸镁80克，胶囊剂组成为三七三醇皂苷120克，药用辅料淀粉、葡萄糖、硬脂酸镁80克，水针剂组成为三七三醇皂苷20克，输液剂组成为三七三醇皂苷40克，药用辅料葡萄糖60克，粉针剂组成为三七三醇皂苷20克，药用辅料蔗糖80克；(3)取三七有效部位三七三醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；(5)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；(6))取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例3(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用5倍75％乙醇提取4次，每次0.6小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上NKA型大孔吸附树脂柱，先用9倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用40％乙醇进行洗脱，高效液相色谱法控制终点，富集洗脱液，洗脱液回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七三醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂处方为片剂组成为三七三醇皂苷90克，药用辅料淀粉、硬脂酸镁110克，胶囊剂组成为三七三醇皂苷90克，药用辅料淀粉、硬脂酸镁110克，水针剂组成为三七三醇皂苷12克，输液剂组成为三七三醇皂苷24克，药用辅料氯化钠76克，粉针剂组成为三七三醇皂苷12克，药用辅料乳糖88克；(3)取三七有效部位三七三醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；(5)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；(6)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例4(1)取干燥三七茎叶10000克，粉碎，用6倍75％乙醇提取4次，每次0.8小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上D101型大孔吸附树脂柱，先用10倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用40％乙醇进行洗脱，高效液相色谱法控制终点，富集洗脱液，洗脱液回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七三醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂处方为片剂组成为三七三醇皂苷100克，药用辅料葡萄糖、硬脂酸镁100克，胶囊剂组成为三七三醇皂苷100克，药用辅料葡萄糖、硬脂酸镁100克，水针剂组成为三七三醇皂苷15克，输液剂组成为三七三醇皂苷30克，药用辅料葡萄糖70克，粉针剂组成为三七三醇皂苷15克，药用辅料蔗糖、乳糖85克；
(3)取三七有效部位三七三醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；(5)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；(6)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例5(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用7倍75％乙醇提取4次，每次0.9小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用11倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用40％乙醇进行洗脱，高效液相色谱法控制终点，富集洗脱液，洗脱液回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七三醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂处方为片剂组成为三七三醇皂苷110克，药用辅料淀粉、硬脂酸镁90克，胶囊剂组成为三七三醇皂苷110克，药用辅料淀粉、硬脂酸镁90克，水针剂组成为三七三醇皂苷18克，输液剂组成为三七三醇皂苷36克，药用辅料氯化钠64克，粉针剂组成为三七三醇皂苷18克，药用辅料甘露醇、蔗糖、乳糖82克；(3)取三七有效部位三七三醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；(5)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；(6)取三七有效部位三七三醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
权利要求
1.一种含三七三醇皂苷的药物组合物，其特征在于它是由下述方法制备而成的(1)取三七饮片，粉碎，用4-8倍70％-80％乙醇提取3-5次，每次0.5-1小时，合并提取液，回收乙醇至尽；(2)浓缩液上大孔吸附树脂柱，先用8-12倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用的40％乙醇进行洗脱，高效液相色谱法控制终点，富集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七三醇皂苷有效部位，其中三七三醇皂苷中人参皂苷Rg1的含量不低于65％，人参皂苷Re含量不低于6％，三七皂苷R1含量不低于11％，即为该药物组合物。
2.根据权利要求1所述含三七二醇皂苷的药物组合物，其中三七原料是指三七的茎叶和三七根。
3.根据权利要求1所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂。
4.一种治疗心脑血管疾病的药物，其特征在于是将上述三七三醇皂苷与药用辅料混合，制成片剂、胶囊剂、水针剂、输液剂或粉针剂(1)取三七三醇皂苷80-120重量份，药用辅料80-120重量份，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂、胶囊剂；(2)取三七三醇皂苷10-20重量份，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂；(3)取三七三醇皂苷20-40重量份，药用辅料60-80重量份，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂；(4)取三七三醇皂苷10-20重量份，药用辅料赋形剂80-90重量份，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂。
全文摘要
本发明公开了一种含三七三醇皂苷的药物组合物及其制备方法，其特征在于从中药三七中得到的有效部位三七三醇皂苷与药用辅料混合，制备成固体制剂、注射制剂；其特征还在于三七三醇皂苷中人参皂苷Rg
文档编号A61K31/7028GK1628685SQ20041007388
公开日2005年6月22日 申请日期2004年9月7日 优先权日2004年9月7日
发明者张平 申请人:张平