专利名称：一种从三七叶制备三七皂苷Fe和二醇组人参皂苷的方法
技术领域：
本发明涉及从三七叶中提取分离三七皂苷Fe，同时获得二醇组人参皂苷的方法，属于天然药物化学研究领域。
背景技术：
到目前为止人们从三七叶中分得多种人参皂苷，包括人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、三七皂苷Fe等二醇组人参皂苷以及人参皂苷Re、人参皂苷Rg1等三醇组人参皂苷。其中人参皂苷Re、人参皂苷Rg1在三七叶中含量很低，而三七皂苷Fe在三七叶中含量较高。
发明内容
本发明提供一种从三七叶中提取分离三七皂苷Fe(N-Fe)，同时获得二醇组人参皂苷的方法，具体是将三七叶总皂苷上氧化铝柱，先用水洗脱，然后用乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、异丙醇或它们的两种或两种以上混合物的有机溶剂的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂获得主要含有三七皂苷Fe的组分后进行柱层析分离获得三七皂苷Fe，或将三七叶总皂苷上氧化铝柱，用乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、异丙醇或它们的两种或两种以上混合物的有机溶剂的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂获得主要含有三七皂苷Fe的组分后进行柱层析分离获得三七皂苷Fe，然后用四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，获得主要由人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd组成的二醇组人参皂苷。具体如下。
目前从三七叶中提取分离总皂苷，主要采用大孔吸附树脂法。即三七叶加水煎煮提取，提取液过大孔吸附树脂吸附，乙醇洗脱，洗脱液回收溶剂，得三七叶总皂苷。当然还可以采用水提醇沉法、醇提水沉法等。本发明优先采用大孔吸附树脂法。
将大孔吸附树脂法获得的三七叶总皂苷上氧化铝柱，先用水洗脱，这时被洗脱下来的成分是人参皂苷Re和人参皂苷Rg1，其它人参皂苷仍然被吸附在氧化铝上。用水将人参皂苷Re和人参皂苷Rg1及一些杂质洗脱完全后用有机溶剂的水溶液洗脱，这时被洗脱下来的是三七皂苷Fe和人参皂苷Rd，洗脱液回收溶剂，获得主要含有三七皂苷Fe和人参皂苷Rd的三七叶分组皂苷A。然后将三七叶分组皂苷A进行柱层析分离获得三七皂苷Fe。柱层析首选硅胶柱层析，也可以采用ODS柱层析、氧化铝柱层析等其他柱层析方法，也可以几种柱层析方法联合应用。最后用四氢呋喃的水溶液洗脱，这时人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷被洗脱下来，洗脱液回收溶剂，获得主要含有人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2等的三七叶二醇组人参皂苷，简称二醇组人参皂苷。在上述氧化铝柱层析过程中，也可以先用低浓度的有机溶剂的水溶液洗脱人参皂苷Re、人参皂苷Rg1，但其浓度不能太高，以只洗脱下人参皂苷Re、人参皂苷Rg1而不至于洗脱下三七皂苷Fe的浓度为宜，其最高浓度最好低于30％，否则三七皂苷Fe将被一起洗脱下来，达不到将三七皂苷Fe和人参皂苷Re、人参皂苷Rg1分离的目的。本发明推荐的最佳方案是先用水洗脱，用水将人参皂苷Re、人参皂苷Rg1洗脱完全后改用较高浓度的有机溶剂的水溶液洗脱三七皂苷Fe。
用来洗脱三七皂苷Fe的有机溶剂的水溶液其体积百分比浓度可以在35％-90％之间，最好在45％-55％之间，以利于完全洗脱三七皂苷Fe的同时尽量减少人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷被洗脱下来。可以采用的有机溶剂有乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇以及异丙醇或它们的混合物。
本发明的最佳方案是三七叶总皂苷上氧化铝柱，先用水洗脱，然后用有机溶剂的水溶液洗脱，最后用四氢呋喃的水溶液洗脱。有机溶剂的水溶液洗脱部分进行硅胶柱层析获得三七皂苷Fe，四氢呋喃的水溶液洗脱部分回收溶剂获得二醇组人参皂苷具体实施方式
实施例1三七叶5公斤，加水煎煮提取三次，每次加水量分别是三七叶重量的18、12、10倍，煎煮时间分别是2、1.5、1小时，合并煎煮液，过D4020大孔吸附树脂吸附，用水冲净杂质，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到三七皂苷Fe和人参皂苷Rb3(硅胶薄层层析检测，正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5，上层，10％硫酸喷雾，105℃加热显色，以下相同)为止，回收乙醇，得三七叶总皂苷598克。
取三七叶总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，先用水洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg1为止。然后用55％的乙醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到三七皂苷Fe为止，55％的乙醇洗脱液减压回收溶剂，得三七叶分组皂苷A 2.9克。经TLC检查，其中主要成分是三七皂苷Fe和人参皂苷Rd。最后用50％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb1为止，洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷4.6克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。
取三七叶分组皂苷A 1.0克，以乙酸乙酯∶甲醇∶水＝7∶1∶0.3为洗脱液进行硅胶柱层析分离，TLC检测，收集三七皂苷Fe部分，得三七皂苷Fe306毫克。
实施例2取三七叶总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，先用10％的甲醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg1为止。然后用65％的甲醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到三七皂苷Fe，65％的甲醇洗脱液减压回收溶剂，得三七叶分组皂苷A 3.0克。经TLC检查，其中主要成分是三七皂苷Fe和人参皂苷Rd。最后用50％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb1为止，洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷5.2克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。
取三七叶分组皂苷A 1.0克，以氯仿∶甲醇∶水＝3∶1∶0.1为洗脱液进行硅胶柱层析分离，TLC检测，收集三七皂苷Fe部分，得三七皂苷Fe298毫克。
实施例3取三七叶总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，用10％的丙酮水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg1为止。然后用60％的丙酮水溶液洗脱至洗脱液中检测不到三七皂苷Fe，60％的丙酮洗脱液减压回收溶剂，得三七叶分组皂苷A 2.9克。经TLC检查，其中主要成分是三七皂苷Fe和人参皂苷Rd。最后用50％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb1为止。洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷5.3克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。
取三七叶分组皂苷A1.0克，以乙酸乙酯∶乙醇∶水＝8∶1∶0.3为洗脱液进行硅胶柱层析分离，TLC检测，收集三七皂苷Fe部分，得三七皂苷Fe312毫克。
实施例4
取三七叶总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，用水洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg1为止。然后用55％正丙醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到三七皂苷Fe，55％正丙醇水溶液洗脱液减压回收溶剂，得三七叶分组皂苷A 2.4克。经TLC检查，其中主要成分是三七皂苷Fe和人参皂苷Rd。最后用65％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb1为止，洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷4.7克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。
取三七叶分组皂苷A 1.0克，以乙酸乙酯∶甲醇∶水＝6∶1∶0.2为洗脱液进行硅胶柱层析分离，TLC检测，收集三七皂苷Fe部分，得三七皂苷Fe336毫克。
实施例5取三七叶总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，用10％的异丙醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg1为止。然后用65％的异丙醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到三七皂苷Fe，65％的异丙醇洗脱液减压回收溶剂，得三七叶分组皂苷A 3.3克。经TLC检查，其中主要成分是三七皂苷Fe和人参皂苷Rd。最后用60％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb1为止，洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷5.3克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。
取三七叶分组皂苷A 1.0克，湿法装柱，干法上样，以乙酸乙酯∶甲醇＝8∶1为洗脱液进行硅胶柱层析，TLC检测，分别收集三七皂苷Fe部分和人参皂苷Rd部分，回收溶剂得三七皂苷Fe253毫克和人参皂苷Rd302毫克。
实施例6取二醇组人参皂苷1.0克，湿法装柱，干法上样，以乙酸乙酯∶甲醇＝3∶1至1∶1为洗脱液进行硅胶柱层析梯度洗脱，TLC检测分别收集人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd部分，回收溶剂，得人参皂苷Rb116毫克、人参皂苷Rb226毫克、人参皂苷Rb3210毫克、人参皂苷Rc265毫克、人参皂苷Rd23毫克。
本发明的方法利用氧化铝先将三七叶中的三七皂苷Fe同其他人参皂苷分开，然后用柱层析方法获得三七皂苷Fe，降低了分离难度及生产成本，同时还获得二醇组人参皂苷，具有方法简便，生产成本低、操作简单等优点。
权利要求
1.一种从三七叶制备三七皂苷Fe单体的方法，其特征在于将三七叶总皂苷上氧化铝柱，先用水洗脱，然后有机溶剂的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂后进行柱层析分离。
2.一种从三七叶制备三七皂苷Fe单体的方法，其特征在于将三七叶总皂苷上氧化铝柱，用有机溶剂的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂后进行柱层析分离。
3.一种从三七叶制备二醇组人参皂苷的方法，其特征在于将三七叶总皂苷上氧化铝柱，用有机溶剂的水溶液将三七皂苷Fe洗脱完全后用四氢呋喃的水溶液洗脱。
4.权利要求1、2、3所述的任何一项制备方法，其特征在于所述的有机溶剂选自乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、异丙醇或它们的两种或两种以上混合物。
5.权利要求1、2、3所述的任何一项制备方法，其特征在于所述的氧化铝是中性氧化铝。
6.权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的二醇组人参皂苷其主要成分是人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd。
7.权利要求1、2、3所述的任何一项制备方法获得的三七皂苷Fe和二醇组人参皂苷在制备药物组合物、保健食品及人参皂苷单体中的应用。
全文摘要
本发明公开了从三七叶中提取分离三七皂苷Fe，同时获得二醇组人参皂苷的新方法。将三七叶总皂苷上氧化铝柱，先用有机溶剂的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂后进行柱层析分离，获得三七皂苷Fe单体；然后用四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，获得二醇组人参皂苷。
文档编号A61K31/7028GK1869050SQ20061009360
公开日2006年11月29日 申请日期2006年6月21日 优先权日2006年6月21日
发明者桂明玉, 金永日, 李绪文 申请人:海南亚洲制药有限公司