专利名称：利巴韦林眼凝胶眼药及其生产工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗病毒性眼病的利巴韦林眼凝胶眼药及其生产工艺，属于眼药制剂技术领域。
背景技术：
利巴韦林(英文名Ribavirin)又称为三氮唑核苷或病毒唑，是一种广谱的抗病毒药物。利巴韦林的化学名1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三氮唑-3-羧酰胺，分子式为C8H12N4O5，结构式 利巴韦林最早1970年人工合成，1974年在墨西哥上市，1981年国内研制成功。1985年以来，其原料药与制剂的研制，开发，应用迅速发展。已有片剂，胶囊剂，喷雾剂，滴眼剂，眼膏剂，口服液，口胶剂以及利巴韦林复方制剂问世。
利巴韦林滴眼液防治眼部感染疗效确切，临床常用于单纯疱疹病毒角膜炎，牛痘性和急性流行性结膜炎的治疗。但由于眨眼药物流失多，给药次数频繁，需每2h滴眼一次，使用不方便且临床疗效不佳。
发明内容
本发明所要解决的问题是提供一种使用方便、疗效好、使用舒适的治疗眼部病毒感染病症的利巴韦林眼凝胶眼药及其生产工艺。
本发明提供利巴韦林眼用凝胶眼药，它包含抗病毒有效量的主药利巴韦林和眼用凝胶基质。
所述眼用凝胶基质选自卡波姆(如卡波姆971、941、973、940、934等)、纤维素衍生物(如甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素等)、聚乙烯吡咯烷酮、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚乙二醇等中的一种或多种。眼用凝胶基质的用量为常规眼凝胶用量。优选为0.1-40wt％。
本发明的主药利巴韦林在利巴韦林眼用凝胶眼药中的含量优选为0.05-15％(重量百分比)，更优选0.1％。
本发明的利巴韦林眼用凝胶眼药中还可含有渗透压调节剂、防腐剂或抑菌剂。其中防腐剂或抑菌剂选自尼泊金乙酯、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯，三氯叔丁醇、硫柳汞、氧氰化汞、新洁尔灭或洁尔灭等。渗透压调节剂选自氯化钠或葡萄糖等。渗透压调节剂的含量优选为0-1wt％、防腐剂或抑菌剂的含量优选为0-5wt％。
本发明还提供了上述利巴韦林眼用凝胶眼药的制备方法将利巴韦林和眼用凝胶基质与水混合，搅拌，形成凝胶；调pH值至4-9，加水至足量，搅拌均匀后灭菌分装。
按上述制备方法，在本发明的实例中，优选之一为将眼用凝胶基质撒在水面上，使其充分溶胀，形成粗胶。用碱性溶液调pH值至4-9，利巴韦林和其它组分分别溶于水后加入粗胶中。加水至足量，搅拌均匀后灭菌分装。
优选之二为将眼用凝胶基质与利巴韦林共同分散在水中，形成粗胶。其它组分溶于水后加入粗胶中。用碱性溶液调pH值至4-9，加水至足量，搅拌均匀后灭菌分装。
优选之三为将眼用凝胶基质与利巴韦林及其它组分共同分散在水中，形成粗胶。用碱性溶液调pH值至4-9，加水至足量，搅拌均匀后灭菌分装。
优选之四为将眼用凝胶基质分散在水中，形成粗胶。用碱性溶液溶解利巴韦林及其它组分，然后加入粗胶中，搅拌均匀，加水至足量，搅拌均匀后灭菌分装。
优选之五为将眼用凝胶基质分散在水中，形成粗胶，加热或热压等手段灭菌，用碱性溶液溶解利巴韦林及其它组分，过滤或采用其它手段灭菌；将溶液加入粗胶中，搅拌均匀，加水至足量，搅拌均匀后分装。
本明制得的利巴韦林凝胶眼药为液态，当与泪液中的阳离子接触即形成凝胶而长时间在结膜囊内起效。因而具有较强的润滑感，粘附力强，可增加药物与眼的接触面积和时间，增加药物吸收，减少点药次数，从而更好地发挥药物的治疗作用。本发明采用广谱强效的抗病毒药物利巴韦林为活性成份，采用水溶性的凝胶为基质，形成了具有眼部缓释作用和良好的生物相容性的利巴韦林眼凝胶。与目前市场上的滴眼液和眼膏基质相比，具有缓释、舒适、刺激性小和易清除的优点。
附图为本发明利巴韦林眼凝胶眼药和利巴韦林滴眼液的释放曲线。
具体实施例方式
以下通过实施例的方式进一步说明本发明，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
实施例1将28g羟丙基甲基纤维素60(浙江上虞市海申化工有限公司生产)和13g利巴韦林与500ml蒸馏水混合，搅拌分散均匀，形成粗胶。取5g尼泊金乙酯溶于水后加入粗胶中。用三乙醇胺将pH调至8.5，加蒸馏水至1000g，搅拌均匀后115℃灭菌30分钟，制得利巴韦林眼凝胶眼药。
实施例2将3g卡波姆973撒于500ml注射用水中，分散均匀，过夜，使其自然溶胶，用10mol/l NaOH(约3ml)调pH至6.9。称取1.0g利巴韦林于200ml注射用水中，搅拌至完全溶解，0.22um微孔滤膜过滤，将滤液加入粗胶中，搅拌至均匀。称取0.5g对羟基苯甲酸乙酯于200ml注射用水中，水浴加热搅拌至完全溶解，加入胶中，搅拌均匀。补加注射用水至1000g，测得pH6.9。将配好的胶用牛皮纸封好，121℃高压湿热灭菌10min。在无菌实验室内紫外照射2h后，制得利巴韦林眼凝胶眼药。用20ml针筒将利巴韦林眼凝胶眼药灌注铝软管内，每支5g，封口。
实施例3将15g卡波姆934、5.0g利巴韦林、0.5g三氯叔丁醇和0.5g洁尔灭与500ml注射用水混合，分散均匀，形成粗胶。经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，用10％NaOH调pH至7，加注射用水至1000g，120℃灭菌20min，制得利巴韦林眼凝胶眼药。
实施例4将5g羧甲基纤维素钠、5g聚乙烯吡咯烷酮(K17、K30或K90，医药级，上海元吉化工有限公司生产)分散在水中，形成粗胶。将50g利巴韦林、5g尼泊金甲酯和15g氯化钠用4ml 10％NaOH溶解，然后加入粗胶中，搅拌均匀，加水至1000g，搅拌均匀后灭菌分装。
实施例5将5g卡波姆941、12g羟丙基甲基纤维素75(浙江上虞市海申化工有限公司生产)分散在水中，形成粗胶，121℃高压湿热灭菌10min。将50g利巴韦林、10g氧氰化汞和10g葡萄糖用5ml 10％NaOH溶解，经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，加入粗胶中，搅拌均匀，加水至1000g，搅拌均匀后分装。
实施例6将100g聚乙烯醇02、05或20(深圳市华苏化工有限公司生产)和90g利巴韦林与500ml蒸馏水混合，搅拌分散均匀，形成粗胶。取8g硫柳汞溶于水后加入粗胶中。调pH至8.5，加蒸馏水至1000g，搅拌均匀后115℃灭菌30分钟，制得利巴韦林眼凝胶眼药。
实施例7将20g聚乙烯醇05(深圳市华苏化工有限公司生产)、20g聚乙二醇-1000(成都市长征化学试剂公司提供)和120g利巴韦林与500ml蒸馏水混合，搅拌分散均匀，形成粗胶。取12g尼泊金丙酯溶于水后加入粗胶中。调pH至7.5，加蒸馏水至1000g，搅拌均匀后115℃灭菌30分钟，制得利巴韦林眼凝胶眼药。
通过释放性能试验和角膜停留时间试验可以说明本发明利巴韦林眼凝胶眼药具有缓释效果。
释放性能试验进行如下标准曲线绘制取利巴韦林对照品适量配成浓度为10ug/ml，30ug/ml，50ug/ml，70ug/ml，100ug/ml.HPLC测定，记录色谱图和峰面积。
分别称取滴眼液和利巴韦林眼凝胶眼药3ml置透析袋中，袋两头用尼龙线扎紧(袋内除去气泡)，固定于500ml烧杯中。释放介质为pH7.4磷酸盐缓冲液300ml，袋距液面约1cm。烧杯置电磁恒温搅拌器上，搅拌子长约3.5cm，转速调至75r/min。温度控制在37±1℃。间隔一段时间取样，HPLC测定利巴韦林含量，分别绘制滴眼液(溶液剂)和凝胶剂的释放曲线(见附图)。由附图可知本发明利巴韦林眼凝胶眼药(凝胶剂)具有较好的缓释效果。
眼凝胶基质在眼部滞留试验1.试验目的观察眼凝胶基质在家兔眼睛的停留时间情况。
2.试验动物成年健康新西兰兔4只，体重2.2～2.5kg，雌雄各半，由江宁县汤山青龙山动物繁殖场提供，许可证号SCXK(苏)2002-0027。受试动物眼睛无任何炎性反应和眼损伤。
3.受试物本发明含有荧光黄(0.1％)利巴韦林眼凝胶眼药，含有荧光黄(0.1％)利巴韦林眼水溶液，由南京大学提供；批号020915；试验时分别将凝胶和水溶液直接滴入兔的左右眼。
4.试验方法采用同体自身对照方法，选用家兔4只，用药前先观察并记录各兔角膜、虹膜及结膜等情况，已有病变或炎症者，剔除不用。试验时，将本发明利巴韦林眼凝胶眼药0.1ml滴入家兔左侧眼结膜囊内，右侧眼滴入0.1ml利巴韦林水溶液作对照。给受试物后，使家兔眼睛被动闭合10秒，记录给药后0.5、1、2、3、4、5、6睛中荧光黄消失的情况。
5.结果4只家兔中左眼中的荧光黄在4小时才缓慢消失，6小时完全消失。右眼中的荧光黄色在1小时开始消失，2小时已完全消失。
本发明利巴韦林眼凝胶过敏性、溶血性和局部刺激性等主要与局部、全身给药相关的特殊安全性试验，试验单位中国药科大学家兔单次给本发明利巴韦林眼凝胶眼药后6、24、48、72小时至7天，眼刺激反应积分与对照组相比无明显差异，各兔各时间点眼刺激反应均为0分，表明本发明利巴韦林眼凝胶眼药单次给药对兔眼无刺激性。
本发明利巴韦林眼凝胶眼药家兔连续给药7天，停药后继续观察7天，各观察点眼刺激反应积分均未超过1分，与对照组相比无明显差异。停药7天后取材进行病理检查，结果表明，利巴韦林眼凝胶用药后未引起家兔结膜上皮细胞变性、坏死、脱落、局部溃疡或糜烂，也未引起上皮下组织充血、水肿及明显的炎细胞浸润；也未引起角膜、虹膜、巩膜、晶状体表面上皮细胞变性、坏死、溃疡或糜烂，上皮下间质未见充血、水肿及炎细胞浸润。因此，本发明利巴韦林眼凝胶眼药多次给药对兔眼无刺激性。
一、单次用药眼刺激试验1.试验目的观察家兔眼睛单次接触本发明利巴韦林眼凝胶眼药后所产生的刺激反应情况。
2.试验动物成年健康新西兰兔4只，体重2.2～2.5kg，雌雄各半，由江宁县汤山青龙山动物繁殖场提供，许可证号SCXK(苏)2002-0027。受试动物眼睛无任何炎性反应和眼损伤。
3.受试物本发明利巴韦林眼凝胶及眼胶基质，由南京大学提供；利巴韦林眼凝胶规格5g5mg；批号020915；试验时利巴韦林眼凝胶和眼凝胶基质直接滴入。
4.试验方法
采用同体自身对照方法，选用家兔4只，用药前先观察并记录各兔角膜、虹膜及结膜等情况，已有病变或炎症者，剔除不用。试验时，将本发明利巴韦林眼凝胶眼药0.1ml滴入家兔左侧眼结膜囊内，右侧眼滴入0.1ml眼凝胶基质作为对照。给受试物后，使家兔眼睛被动闭合10秒，记录给药后6、24、48、72小时至7天眼睛局部反应情况。
5.判断标准根据表1，将每只家兔眼角膜、虹膜和结膜的刺激反应的分值相加，即得一只受试动物眼刺激反应的总积分，把每个受试动物的刺激反应积分的总和除以动物数，就是该受试动物对眼刺激的最后分值，按表2判定受试动物眼刺激程度。
表1 眼刺激反应评分眼刺激反应分值角膜混浊(以最致密部位为准)无混浊0散在或弥漫性混浊，虹膜清晰可见1半透明区易分辨，虹膜模糊不清 2出现灰白色半透明区，虹膜细节不清，瞳孔大小勉强看清3角膜不透明，由于混浊，虹膜无法辨认4虹膜正常 0皱褶明显加深，充血、肿胀、角膜周围有轻度充血，瞳孔对光仍有反应 1出血、肉眼可见坏死、对光无反应(或出现其中一种反应)2结膜A.充血(指睑结膜、球结膜部位)血管正常 0血管充血呈鲜红色 1血管充血呈深红色，血管不易分辨2弥漫性充血呈紫红色3B.水肿无水肿0轻微水肿(包括瞬膜)1明显水肿，伴有部分眼睑外翻2水肿至眼睑近半闭合3水肿至眼睑超过半闭合 4C.分泌物无分泌物 0少量分泌物1分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着 2分泌物使整个眼区潮湿或粘着3总积分16
表2 眼刺激性评价标准刺激程度 积分无刺激性 0-3轻度刺激性 4-8中度刺激性 9-12重度刺激性 13-166.试验结果利巴韦林眼凝胶单次用药眼刺激试验结果见表3。
表3 利巴韦林眼凝胶单次用药眼刺激反应积分(n＝4)家兔编号 积分6h24h48h72h4-7天1左眼0 0 0 0 0右眼0 0 0 0 02左眼0 0 0 0 0右眼0 0 0 0 03左眼0 0 0 0 0右眼0 0 0 0 04左眼0 0 0 0 0右眼0 0 0 0 0左眼积分 0 0 0 0 0右眼积分 0 0 0 0 0注各兔左眼给利巴韦林眼凝胶0.1ml，右眼给眼凝胶基质0.1ml作为对照。
表3结果表明，本发明利巴韦林眼凝胶眼药单次用药后6、24、48、72小时至7天，眼刺激反应积分与对照眼相比无明显差异，各观察点眼刺激反应积分均为0分。
二、多次用药眼刺激试验1.试验目的观察家兔眼睛多次接触本发明利巴韦林眼凝胶眼药后所产生的刺激反应情况。
2.试验动物成年健康新西兰兔4只，体重2.3～2.6kg，雌雄各半，由江宁县汤山青龙山动物繁殖场提供，许可证号SCXK(苏)2002-0027。受试动物眼睛无任何炎性反应和眼损伤。
3.受试物本发明利巴韦林眼凝胶及眼胶基质，由南京大学提供；利巴韦林眼凝胶规格5g5mg；批号020915；试验时利巴韦林眼凝胶和眼凝胶基质直接滴入。
4.试验方法采用同体自身对照方法，选用家兔4只，用药前先观察并记录各兔角膜、虹膜及结膜等情况，已有病变或炎症者，剔除不用。试验时，将利巴韦林眼凝胶0.1ml滴入家兔左侧眼结膜囊内，右侧眼滴入0.1ml眼凝胶基质作为对照。给受试物后，使家兔眼睛被动闭合10秒，每日给受试物两次，连续7天，给药期间每日观察两次局部反应情况，将两次分值平均，作为该日分值。停药后，继续观察6、24、48、72小时至7天眼睛局部反应情况。停药后7天肉眼观察后，取材进行病理组织学检查。
5.判断标准同单次用药眼刺激试验之判断标准，见表1、表2。
6.试验结果(1)利巴韦林眼凝胶多次用药眼刺激试验肉眼观察结果见表4。
表4 利巴韦林眼凝胶多次用药眼刺激反应积分(n＝4) 注各兔左眼给利巴韦林眼凝胶0.1ml，右眼给眼凝胶基质0.1ml作为对照，连续给药7天，每天2次。停药后继续观察7天。
表4结果表明，利巴韦林眼凝胶多次用药后有三例出现睑结膜充血，呈鲜红色，计1分，眼凝胶基质多次用药后亦有三例出现睑结膜充血，呈鲜红色，计1分，另有1例出现少量分泌物，计1分；给药7天停药后逐渐好转，至停药后4天已无明显刺激性。利巴韦林眼凝胶多次用药后各观察点眼刺激反应积分均不超过1分，眼刺激反应积分与对照眼相比无明显差异。
(2)本发明利巴韦林眼凝胶眼药多次用药眼刺激试验病理检查结果病理检查结果表明利巴韦林眼凝胶用药后未引起家兔结膜上皮细胞变性、坏死、脱落、局部溃疡或糜烂，也未引起上皮下组织充血、水肿及明显的炎细胞浸润；也未引起角膜、虹膜、巩膜、晶状体表面上皮细胞变性、坏死、溃疡或糜烂，上皮下间质未见充血、水肿及炎细胞浸润。因此，利巴韦林眼凝胶多次给药对兔眼的影响与对照组相比无显著性差别。
三、结论本发明利巴韦林眼凝胶眼药单次给药后6、24、48、72小时至7天，眼刺激反应积分与对照眼相比无明显差异，且各兔各时间点眼刺激反应积分均为0分。结果表明，本发明利巴韦林眼凝胶眼药单次用药对眼无刺激性。
利巴韦林眼凝胶家兔多次用药后有三例出现睑结膜充血，呈鲜红色，眼凝胶基质多次用药后亦有三例出现睑结膜充血，呈鲜红色，其中有1例还出现少量分泌物，给药7天停药后逐渐好转，眼刺激反应积分与对照眼相比无明显差异。
本发明利巴韦林眼凝胶眼药多次用药眼刺激试验病理检查结果表明利巴韦林眼凝胶用药后未引起家兔结膜上皮细胞变性、坏死、脱落、局部溃疡或糜烂，也未引起上皮下组织充血、水肿及明显的炎细胞浸润；也未引起角膜、虹膜、巩膜、晶状体表面上皮细胞变性、坏死、溃疡或糜烂，上皮下间质未见充血、水肿及炎细胞浸润。因此，利巴韦林眼凝胶多次给药对兔眼的影响与对照组相比无显著性差别。
综上，本发明利巴韦林眼凝胶眼药单次用药及多次用药对家兔眼无明显刺激性。
权利要求
1.利巴韦林眼凝胶眼药，它包含抗病毒有效量的主药利巴韦林和眼用凝胶基质。
2.根据权利要求1所述的眼凝胶眼药，其特征是所述眼用凝胶基质选自卡波姆、纤维素衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚乙二醇中的一种或多种。
3.根据权利要求1或2所述的眼凝胶眼药，其特征是利巴韦林的含量为0.05-15wt％。
4.根据权利要求3所述的眼凝胶眼药，其特征是利巴韦林的含量为0.1wt％。
5.根据权利要求1或2所述的眼凝胶眼药，其特征是含有渗透压调节剂、防腐剂或抑菌剂。
6.根据权利要求5所述的眼凝胶眼药，其特征是渗透压调节剂的含量为0-1wt％、防腐剂或抑菌剂的含量为0-5wt％。
7.根据权利要求6所述的眼凝胶眼药，其特征是防腐剂或抑菌剂选自尼泊金乙酯、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯，三氯叔丁醇、硫柳汞、氧氰化汞、新洁尔灭或洁尔灭，渗透压调节剂选自氯化钠或葡萄糖。
8.权利要求1所述眼凝胶眼药的制备方法，其特征是将利巴韦林和眼用凝胶基质与水混合，搅拌，形成凝胶；调pH值至4-9，加水至足量，搅拌均匀后灭菌分装。
全文摘要
本发明涉及利巴韦林眼凝胶眼药，它包含抗病毒有效量的主药利巴韦林和眼用凝胶基质。其制备方法将利巴韦林和眼用凝胶基质与水混合，搅拌，形成凝胶；调pH值至4－9，加水至足量，搅拌均匀后灭菌分装。本发明制得的利巴韦林凝胶眼药为液态，当与泪液中的阳离子接触即形成凝胶而长时间在结膜囊内起效。因而具有较强的润滑感，粘附力强，可增加药物与眼的接触面积和时间，增加药物吸收，减少点药次数，从而更好地发挥药物的治疗作用。本发明采用广谱强效的抗病毒药物利巴韦林为活性成分，采用水溶性的凝胶为基质，形成了具有眼部缓释作用和良好的生物相容性的眼凝胶。与市售的滴眼液和眼膏基质相比，具有缓释、舒适、刺激性小和易清除的优点。
文档编号A61K31/7042GK1615902SQ20041007905
公开日2005年5月18日 申请日期2004年9月5日 优先权日2003年9月23日
发明者胡一桥, 曹维, 陶敏 申请人:南京大学